学术投稿

bcl-w、bcl-x基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系

徐宏勇;李开宗;窦科峰;付由池;阎庆国;王映梅;李景梦

关键词:基因表达, 肝细胞癌, 临床分期, 公司产品, 细胞凋亡调控, 阳性细胞, 免疫组织化学方法, 空白对照, 单克隆抗体, 细胞浆, 第四军医大学, 癌细胞, 统计学处理, 生物学特性, 抗凋亡作用, 肿瘤, 阴性对照, 研究文献, 手术切除, 试剂
摘要:肿瘤的生物学特性与癌细胞的过度增殖有关,更与癌细胞的凋亡减少有关。bcl-w和bcl-x是bcl-2家族的重要成员,前者编码产物具有抗细胞凋亡功能〔1〕,迄今有关bcl-w基因对肿瘤细胞凋亡调控的研究文献报道甚少;后者存在两种片段,bcl-xL有抗凋亡作用,bcl-xS具促凋亡活性〔2〕。本研究采用免疫组织化学方法检测bcl-w和bcl-x在肝细胞癌(HCC)的表达及意义。  1.材料与方法:(1)标本:来自第四军医大学西京医院手术切除并经病理检查证实的组织。40例HCC高、低分化型分别为23例和17例;临床分期Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ 期为 13例、27例。取14例肝硬化对照。(2)主要试剂:羊抗人Bcl-w抗体、兔抗人Bcl-x抗体为美国Santa Cruz公司产品;桥抗兔抗羊抗体为美国Sigma公司产品; EnvisionTM试剂盒为丹麦Dako公司产品。(3)方法:采用免疫组化LDP法(Labelled Dextran Polymer法)〔3〕。阴性对照设PBS替代一抗的空白对照和鼠抗人乙脑单克隆抗体替代一抗对照。细胞浆呈黄色或阳性细胞率大于20%为阳性,细胞浆无黄色或阳性细胞反应率小于20%或背景同空白对照者为阴性。统计学处理采用χ2和配对计数资料的χ2检验。
中华肝胆外科杂志相关文献
  • 为繁荣新世纪我国肝胆外科学术服务

    《中华肝胆外科杂志》随着国家发展、科技进步的步伐迈入了新世纪。值此,谨向指导、关心、支持我们的中华医学会、中华医学杂志社领导、解放军总医院领导、各地专家、学者、编委和热心的作者、读者表示衷心的敬意和谢意。  从今年起改出月刊,扩展容量、增强时效、丰富栏目、活跃争鸣是我们以饱满的热情和巨大的努力为适应学术发展、满足形势需要、更好地为读者和作者服务的有力举措。以求努力反映我国肝胆胰脾外科临床防治研究和临床实验研究新进展、新技术、新趋势、新动态的信息,它无疑也是中华外科分会各相关学组等基本的学术阵地。  不断提高刊物质量是努力实现办刊宗旨的中心的任务。改出月刊,加大了我们的责任,提出了更高的要求。我们将围绕编辑出版计划在审、编、排、校、印的各个环节,更加严谨、细致地做好工作。  科学性、先进性是期刊质量的核心,要强化稿件审、编全过程,把尊重作者和保证质量结合起来,在执行各项规范的同时,还要强调医学统计学的要求和处理,坚持敬业、求实、严谨的学风和严肃的负责精神。  我们将更好地学习和遵照有关政策、法规,管理好杂志各方面的工作,继续执行“提高为主、兼顾普及;面向临床、重视科研”的原则,进一步密切同各位专家,各地编委的联系和沟通,依靠众多的力量和智慧,更好地为读者服务。

    作者: 刊期: 2001年第01期

  • 肝脏隐球菌性肝囊肿一例报告

    病人男性,61岁,因右上腹疼痛1个月以“右肝占位性病变”收住我院肝胆外科。病人1个月前出现右上腹疼痛,间断性隐痛,向腰背部放散,疼痛持续1~2 h可自行缓解,无发热、黄疸,既往无类似腹痛史。外院CT检查发现右肝3 cm×3 cm高密度病灶,考虑“出血”性病变。查体:体温36.5℃,脉搏84次/min,呼吸20次/min,血压120/82.5 mmHg。发育营养正常,神志情楚。皮肤巩膜无黄染,浅表淋巴结不肿大,心肺未见异常。腹平坦,剑突下轻压痛,无反跳痛及肌紧张,肝脾不大,腹部未扪及肿块,肝区无叩痛。化验:血色素129.81 g/L, 红细胞4.04×1012/L,白细胞4.0×109/L,中性72%,淋巴28%,血小板104×1012/L。白蛋白43.38 g/L,球蛋白28.39 g/L,GPT 21 U/L,总胆红素8.50 umol/L,乳酸脱氢酶128 U/L,总胆汁酸 27 umol/L。HBsAg(+),HBeAg(-),抗-HBe(+),抗-HBc(+),抗-HBs(-)。AFP<25 μg/L,CEA 8.5 μg/L,铁蛋白92.1 μg/L。B超:肝右后见3.3 cm×3 cm实质性回声块影,有包膜伴声影,胆囊息肉(0.3~0.5cm)。CT:肝大小形态正常,肝右后叶3.1 cm×2.5 cm不规则高密度影,其边界清楚,密度欠均匀,疑为“肝癌”。临床诊断右肝占位,施行剖腹探查术。手术见:右肝与膈肌广泛纤维性粘连,肝大小形态正常,肝右后叶3.3 cm×3.0 cm灰白色区域,质地稍硬,未突出肝脏表面,周围肝组织正常,胆囊胆固醇息肉(切除),其它脏器未见异常。锐性分离粘连,游离肝脏,局部挖除肿块,肿块为灰白色曩性,3 cm×3 cm×3.2 cm,包膜完整,壁厚0.3 cm,质地坚韧,内容为乳白色牙膏样粘稠糊状物。病理报告:隐球菌病伴曩肿形成。术后7 d康复出院,随访4个月无异常。

    作者:宋小文;金世龙;顾红光;袁涛 刊期: 2001年第01期

  • 肝细胞肝癌细胞间粘附分子-1 mRNA表达的研究

    寻找甲胎蛋白(AFP)以外更新、更敏感的血清标记物是肝癌研究中的重要课题。近年有关细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和肝细胞肝癌(HCC)的研究提示,ICAM-1在HCC病人组织及血清中(cICAM-1)呈高水平表达〔1,3〕。本研究通过检测HCC组织中ICAM-1信使核糖核酸(ICAM-1 mRNA)的表达,探讨血清中高水平ICAM-1与HCC组织中ICAM-1 mRNA的相互关系,为cICAM-测定在HCC早期诊断及术后复发监测中的作用寻找理论依据。  1.材料与方法:1998年6月至1999年3月在我院行外科手术或经肝穿病理证实为肝细胞癌样本22例。男性19例,女性3例,年龄29~70岁,中位年龄48岁。肿瘤直径3.5~20.8 cm,中位直径13.7 cm。其中大肝癌(≥5 cm)20例,小肝癌(<5 cm)2例。血清甲胎蛋白(AFP)>400 ng/ml 11例,AFP 20~399 ng/ml 8例,AFP<20 ng/ml 3例。另取3例肝血管瘤无肝硬化肝组织作为正常对照。

    作者:徐静;梅铭惠;石青峰;杨景红;覃理灵 刊期: 2001年第01期

  • 化疗诱导人肝癌细胞凋亡中p53和bcl-2基因的调控

    目的 建立化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡的模型,初步探讨在该凋亡过程中重要凋亡相关基因p53和bcl-2的调控作用。方法 用丝裂霉素诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡,荧光显微镜和透射电镜观察肝癌细胞的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA片段的梯状条带,用流式细胞仪免疫荧光法检测凋亡不同时期P53和Bcl-2蛋白的表达量。 结果 8 mg/ml丝裂霉素作用12,24,48 h后,P53蛋白表达量明显增高,尤以12 h明显,而后逐渐下降。Bcl-2蛋白在整个凋亡过程中无明显变化。结论 在化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中,p53基因参与了调控,并为凋亡信号传导途径中的早期事件。丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡途径为p53依赖方式,而在该凋亡过程中,bcl-2基因的调控并不重要。

    作者:杨建青;杨连粤 刊期: 2001年第01期

  • 半肝血流阻断肝肿瘤切除术58例报告

    肝癌病人80%以上合并有肝硬化,常规第一肝门阻断肝切除肝缺血、肝功能损害重。我院自1994年至1998年5年间,采用半肝血流阻断肝切除58例,避免了上述缺点,现报告如下。  1.一般资料:本组男39例,女19例,年龄28~69岁。原发性肝癌54例,肝转移癌2例,肝海绵状血管瘤2例;右肝叶肿瘤36例,左肝叶肿瘤22例。合并肝硬化49例,术前肝功能Child A级35例,B级23例。  2.手术方法:取仰卧位或左侧斜卧位,切口一般选择右肋缘下或上腹“”字切口。组合拉钩牵开切口,游离肝脏,行半肝血流阻断。(1)右肝血流阻断:不解剖肝十二指肠韧带,沿肝总管行经向肝门寻及左右肝管汇合部,用直角钳沿肝包膜与格林氏鞘外钝性分离,在无阻力的情况下向肝十二指肠韧带后方,经门静脉分叉部上方与尾状叶交界处穿出,带入8号导尿管或细乳胶管,切肝时将此尿管或细乳胶管缩紧,即可阻断右肝血流。(2)左半肝血流阻断:同样方法寻及左右肝管汇合部,用直角钳在格林氏鞘外向肝横裂左后方分离,经小网膜囊穿出引入导尿管或细乳胶管,即可阻断左半肝血流。  3.结果:38例病人阻断半肝时间10~40 min,平均22 min,均行一次性阻断切除肝肿瘤。术中输血400~1?600 ml,平均650 ml。术后1例死于肝功衰竭(术前肝功B级);3例出现腹水,经治疗消失;反应性胸膜炎2例。术后住院时间10~31 d,平均16 d。

    作者:韩国新;彭志海 刊期: 2001年第01期

  • 阻塞性黄疸病人外科治疗中检测AKBR和IV-C的指导作用

    由于各种原因所致肝内或者肝外胆管梗阻形成阻塞性黄疸,引起胆汁淤积,肝细胞损坏,出现轻重不一的肝硬化及全身一系列病理变化。目前很多的研究提示Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ,Ⅳ-C)对肝硬化诊断均有较高价值,而动脉血酮体比(arterial blood ketone body ratio,AKBR)则是反映肝细胞能量代谢的较准确指标。因此,我们对阻塞性黄疸病人手术前后联合测定Ⅳ-C和AKBR并报告如下。  材料与方法:(1)研究对象:本组阻塞性黄疸病人39例,其中肝内胆管多发结石21例,肝外胆管结石13例,胰腺癌3例,壶腹部癌2例。全部经我院B超,CT或ERCP及PTC确诊。其中男25例,女14例。平均年龄51.3岁(28~69岁)。术前肝功能Child分级为A期26例,B期10例,C期3例。所有病人均行根治性或姑息性手术解除胆道梗阻。(2)AKBR测定:术前,术后1,2,3,7 d分别在10%葡萄糖输注状态下(使血糖维持在6.7~11.2 mmol/L)抽取桡动脉血2 ml,按Ozawa〔1〕等的方法测定计算AKBR值=ACAC(乙酰乙酸)/β-OHD(β-羟丁酸)×K。试剂购自美国Sigma公司。(3)Ⅳ-C的测定:于术前和术后3 d按沈宜等〔2〕的方法抽血测血清Ⅳ-C,材料与仪器来自军事医学科学院。

    作者:冉江华;杨炯;郭群;张家骅;陆晓青 刊期: 2001年第01期

  • p53变异与结肠癌肝转移肝部分切除术后病人生存期的关系

    目的 了解p53基因及其蛋白在结肠癌发生、转移过程中的动态变化以及p53变异与生存期的关系。方法 p53基因exon 5-9以DGGE及自动DNA序列分析来检测。结果 41例大肠癌病人中,26例呈p53变异(63%),其中6例仅在肝转移灶发现p53变异,其 余均为原发灶、转移灶一致性的变异。另有3例原发灶即有p53变异的病人,在转移灶出现了新增加的变异。生存分析显示,在肝转移灶含变异型p53的病人比含野生型P53者具有更长的术后生存期。结论 在结肠癌肝转移过程中,p53变异主要开始于肠癌原发灶,并被保持于转移至肝脏的癌细胞内,小部分p53变异也可以始发于转移灶。对于实施肝部分切除术的病人,术后生存期在转移癌灶含变异型p53者长于含野生型p53者。

    作者:杨洋;罗荣城;郑航 刊期: 2001年第01期

  • 肝癌中基质金属蛋白酶-9表达的临床意义

    已有资料表明,肿瘤细胞能分泌大量基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP),且具有高转移倾向的肿瘤细胞分泌的金属蛋白酶的含量亦高,对肿瘤的侵袭和转移起着极为重要的作用〔1〕。基质金属蛋白酶-9(MMP-9,E.C.)是金属蛋白酶类的主要成员之一。我们应用逆转录聚合酶链反应和明胶酶谱法检测肝细胞癌(HCC)组织、癌栓组织和癌旁组织中MMP-9 mRNA的表达水平和酶活性表达,以探讨其在HCC侵袭和转移过程中的意义。  1.资料与方法:7例正常肝组织,47例手术切除并病理证实的癌及癌旁组织,其中8例有门静脉主干癌栓。有包膜者25例,无包膜者22例。大肝癌24例(>5 cm),小肝癌23例(≤5 cm)。所有病例均无肝外转移征象。方法:(1)RT-PCR:使用Trizol溶液一步提取mRNA,条件为94℃ 1 min,65℃ 1 min,循环30次。扩增条带特异性经酶切分析证实。PCR产物经2%琼脂糖电泳,VDS扫描。以MMP-9和内标β-actin扫描值的比值作为MMP-9 mRNA的表达相对值,半定量分析MMP-9 mRNA表达水平。(2)明胶酶谱法:制备蛋白抽提液,行SDS-PAGE电泳后,将凝胶分别置于洗脱液、漂洗液、孵育液、染色液、脱色液中处理,后拍照。(3)统计学处理:MMP-9 mRNA表达相对值以±S,两组间均数采用t检验,两组间率采用χ2检验。

    作者:蔡阳;封光华;吴志全;樊嘉;贺斌;刘银坤;叶胜龙;汤钊猷 刊期: 2001年第01期

  • 肝尾叶肿瘤的手术切除

    肝尾叶肿瘤由于紧贴肝后下腔静脉且位置深,难以显露,极易发生大出血,手术难度很大。我们采用第三肝门解剖法分离结扎肝短静脉,使肝后下腔静脉与肿瘤分离,从而使肿瘤切除变得安全、简便,出血量明显减少〔1〕。大部分病人不需要行全肝血流阻断,自1994年4月至1998年8月,我们切除肝尾叶肿瘤34例,其中27例采用第三肝门解剖法切除,报告如下。  1.一般情况:34例病人中男性25例,女性9例。年龄25~57岁(平均42.3岁),原发性肝癌27例,肝血管瘤5例,胆管细胞癌1例,肝脂肪瘤1例。肿瘤位于左尾叶者10例,右尾叶者22例,尾叶横部者2例。肿瘤的直径3~12 cm,平均6.2 cm。(1)切口选择及肝脏游离:右尾叶肿瘤选择右肋缘下切口,左尾叶肿瘤选择左右肋缘下“人”字形切口。进腹后探查肝脏,切断肝周诸韧带,右尾叶肿瘤需游离肝裸区至肝后腔静脉侧壁,左尾叶肿瘤需完全游离肝左叶并切断肝胃韧带。必要时游离肝上、下腔静脉并置阻断带,所有病例均未行胸腹联合切口。(2)解剖第三肝门:将肝脏向左上方翻起,显露出肝下腔静脉,沿腔静脉浅面,由下至上,由右至左,仔细分离肝脏与下腔静脉之间的间隙,肝短静脉予以双重结扎并切断,直至肿瘤与下腔静脉完全分离。左尾叶除较小的肿瘤直接沿肿瘤边缘分离结扎血管外,较大肿瘤也可采用此法分离、结扎肝短静脉。(3)肿瘤切除途径:不同部位的肿瘤采用不同的切除途径:①右尾叶局部切除:于右肝门后缘横行切开肝实质,分离结扎肿瘤周围管道;②右尾叶联合其他肝叶切除:沿正中裂切开肝实质,至右肝门右侧,切断结扎需切除肝叶的管道,绕至右肝门后部,分离切除肿瘤;③左尾叶局部切除:将左叶翻向右上方,沿肿瘤与下腔静脉之间分离,结扎血管,切除肿瘤;④左尾叶联合其他肝叶切除:先切除左外叶或左半肝,再切除肿瘤;或左半肝联合肿瘤一并切除;⑤尾叶横部肿瘤切除:沿正中裂切开肝实质,结扎切断左、中肝静脉,沿肿瘤右侧分离结扎血管,连同左半肝一并切除。(4)肝血流阻断法:常规采用间歇性第一肝门阻断法,5例病人采用联合全肝血流阻断法

    作者:周伟平;吴孟超;陈汉;姚晓平;杨甲梅;杨广顺;吴伯文 刊期: 2001年第01期

  • 奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶

    一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕,重症急性胰腺炎(SAP)急性期常伴有急剧的全身病理生理改变,细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2,3〕,诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情,是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO)。  材料和方法  1.实验动物:雄性SD大鼠200~250 g128只,清洁级,购自中国科学院上海实验动物中心。随机分为假手术组8只,SAP组60只,治疗组60只,其中SAP组和治疗组各观察20只动物死亡率。  2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作:参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进  氯胺酮(50 mg/kg)和3%苯比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管,无菌条件下,手术显微镜下,十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管,微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)1.0 ml/kg,注射速度0.2 ml/min,注射持续10 min。肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。假手术组仅翻动胰腺后关腹,治疗组于诱发SAP后皮下注射奥曲肽(诺华公司),每次14 μg/kg q8 h×2 d。

    作者:黄鹤光;冷希圣;杨波 刊期: 2001年第01期

  • 包膜外钝性剥离治疗肝海绵状血管瘤64例报告

    肝海绵状血管瘤(CHL)是肝脏常见的良性肿瘤。随着B超、CT等检查手段的不断提高,本病的检出率日渐增高。对较大的有临床症状的CHL需要采取相应的治疗措施。我院自1990年1月至1998年7月采用包膜外钝性剥离法治疗CHL64例,取得良好效果,现报告如下。  1.一般资料:男27例,女37例,年龄小者31岁,年龄大者57岁。全部病人术前均有不同程度的上腹不适、腹痛、腹胀、恶心,16例上腹可触及肿块,肿块表面光滑,质地中等硬,呈囊性感,24例有肝肿大,全部病例无肝硬化表现。(1)本组病例术前均经B超和CT检查,肝动脉造影12例。术前明确诊断59例,全部病例术后均经病理确诊为CHL。(2)本组病例CHL 57例为单发、7例为多发,位于肝右叶39例、肝左叶18例、累及两叶者7例,其中8例位于第Ⅷ肝段。全部病例都位于肝包膜下,瘤体>10 cm的29例,<5 cm的5例,介于5~10 cm之间的30例。大直径18 cm,小直径4 cm,瘤体与正常肝组织有明显界限,表面光滑,色暗红或呈斑驳状。当阻断第一肝门时,肿瘤均明显缩小、变软,与周围肝组织界限更趋明显。(3)本组64例均采用气管插管、静脉复合麻醉。右侧肋缘下斜切口或倒“V”形切口。根据手术需要适当的离断肝周韧带,经肝十二指肠韧带阻断肝动脉及门静脉,待肿瘤变软、缩小后,开始手术。在肿瘤与正常肝组织交界处,用刀切开肝包膜,用手指和刀柄沿血管瘤包膜从四周由浅入深钝性分离,如遇进出肿瘤的血管,予以结扎,直至血管瘤完全剥除为止。当遇到与血管瘤粘连的胆管和血管时,用刀柄钝性分离推开。一般肝门阻断20 min左右即可将肿瘤完全剥离,彻底止血后,用一片游离的大网膜覆盖在肝创面上,部分病例可直接将肝组织对拢缝合,后膈下置胶管引流。

    作者:王炜;马德强;马健文;徐强;杨世杰 刊期: 2001年第01期

  • 肝癌基因治疗研究进展

    肝癌是世界上恶性程度极高,且预后极差的恶性肿瘤之一,每年全球约有125万人患病。在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第二位,每年至少有10万名新发现病人,和11万名肝癌病人死亡〔1〕。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种,但治疗效果都十分有限,并未显著延长病人的生存期。大部分肝癌病人对化疗及放疗等治疗均不敏感,能手术根治的病人仅占15%。随着分子生物学和免疫学理论及技术的不断发展和对肿瘤发病机制的不断认识,人们可以利用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗,且在该领域已显示出一定的临床治疗效果。如Habib等〔2〕使用野生型p53基因治疗原发性肝细胞癌的临床治疗试验,取得了很大的成功,引起人们的普遍关注。本文就目前肝癌基因治疗的研究现状和发展趋势作一综述。  一、肝癌基因治疗中所使用的载体系统和治疗途径的选择  目前在肝癌基因治疗实验当中使用多的是病毒载体系统,包括腺病毒载体〔3〕、逆转录病毒载体〔4〕、腺相关病毒载体〔5〕等,非病毒载体系统主要是使用脂质体〔2,6〕介导,且已进入临床试验阶段。在肿瘤基因治疗中,腺病毒载体系统具有许多优点,如制备容易,能获得高纯度、高滴度的腺病毒体;无遗传毒性,以游离型状态存在,不整合进入宿主DNA中;表达时间相对短暂,一般15~20 d左右,不会造成对免疫系统的长期慢性刺激〔7〕;感染宿主范围相对较广,尤其是能感染复制、分裂期的细胞。近几年临床上使用腺病毒载体治疗恶性肿瘤的例子越来越多〔8〕。体外实验证实,数个人的肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Hnh7、HLE、HLF、SK-HEP-1和大鼠肝癌细胞系McA-RH7777等,均对腺病毒十分易感,50MOI可使近100%的细胞被感染〔9〕。作者曾在军事医学科学院百环生物医学研究中心吴祖泽院士指导下,以腺病毒载体介导绿色荧光蛋白基因作为标记基因,也证实3个人的肝癌细胞系HepG2、SMMC7721、BEL-7402,一个胆管癌细胞系QBC939,一个正常肝细胞系L02,均对腺病毒易感,50MOI可使90%左右的靶细胞受感染。Castell等〔10〕利用携带LacZ基因的腺病毒体,感染体外原代培养的正常肝细胞,结果证实:肝细胞对腺病毒十分易感,15MOI感染1 h,可使80%的肝细胞受感染,20MOI感染1 h可使100%的肝细胞受感染;导入的目的基因可以在肝细胞内高效表达;感染腺病毒后,并不影响肝细胞的正常生化功能,如肝细胞的尿素合成、胞膜蛋白合成、生物转化活性等,认为使用腺病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗,是十分有效的工具载体。但有实验表明大剂量腺病毒载体对肝功能还是有影响的〔11〕,随感染病毒量的加大,肝脏的毒性作用也加大,且感染腺病毒的靶细胞刺激机体产生免疫反应,从而使腺病毒的转化效率降低,限制了重复使用。使用逆转录病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗,也有其有利之处:因逆转录病毒只感染处于复制、分裂期的细胞,而处于非复制期的细胞则不受感染。因肿瘤细胞多处于分裂期,而肿瘤周围的正常肝细胞多处于静止期,故逆转录病毒载体具有一定的靶细胞特异性〔4〕。Kitten等〔12〕使用逆转录病毒载体,通过门静脉注入大鼠肝内,有46%±17%的肝细胞受到感染,随病毒滴度的升高,细胞的转导效率也 增加。虽然逆转录病毒载体能将目的基因有效地导入肝癌细胞内,对肝脏这样的低分裂组织局部应用较为合适,但系统体内(in vivo)法应用,就会对骨髓、生殖细胞、肠上皮细胞等分裂增殖旺盛的组织,产生致死性杀伤作用,有产生与放、化疗相似副作用的危险。对于原发性肝细胞癌,癌细胞的增殖生长一般比较缓慢〔12〕,因此使用逆转录病毒载体可能转化效率较低,但对于肝转移癌,因为细胞增殖较为旺盛,故使用逆转录病毒载体较为合适。对于使用腺相关病毒载体进行肝癌的基因治疗,目前还研究较少,但腺相关病毒无致病性,有广泛的宿主范围,能感染不分裂的S期细胞,并能整合到宿主DNA的特异部位中,故减少了发生插入突变的危险性。Su等〔5〕使用AAV介导AFP/HSV-TK基因,证实目的基因能在肝癌细胞中高效表达,并具有杀伤肝癌细胞的作用。

    作者:王征旭;王红阳;吴孟超 刊期: 2001年第01期

  • 生长激素与肝脏

    人类生长激素(human growth hormone,hGH)是垂体前叶α细胞分泌的分子量为21500的蛋白质,由191个氨基酸组成。生长激素分泌受下丘脑中央隆起部产生的生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)和脑、下丘脑、胰岛、胃肠道及体内其他部位产生的生长抑素(somatostatin,SS)所调节。SS主要控制着生长激素的基础分泌,而GHRH则控制着生长激素的脉冲式分泌。垂体可根据代谢需要而分泌不同分子形式的生长激素。肝脏对生长激素的代谢有重要作用,90%以上的生长激素在肝脏内降解。甲状腺功能亢进或低下、糖尿病、慢性肝病后期及肾功能不全等均可使其代谢廓清率降低。  生长激素具有促生长作用,并对中间代谢与能量代谢有影响。生长激素能促进蛋白质合成,增强钠、钾、钙、磷、硫等重要元素的摄取与利用,同时通过抑制糖的消耗,加速脂肪分解,使能量来源由糖代谢向脂肪代谢转移,有利于机体的生长与修复过程。生长激素既可直接与靶组织特异性受体结合,也可刺激肝、肾及其他部位产生胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)而表现其合成代谢效应。  一、生长激素对肝脏基因表达的影响

    作者:刘哲;刘永雄;冯玉泉 刊期: 2001年第01期

  • 新生血管生成与肝细胞癌侵袭、转移和预后的关系

    目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)新生血管生成与临床病理指标的关系及其可否用于预测HCC侵袭、转移和预后。方法 采用免疫组织化学方法,检测了20例正常肝组织、20例肝硬化组织、85例HCC及癌旁组织中CD34的表达,以及HCC的微血管密度(MVD)。结果 CD34的染色定位在血管内皮细胞上,HCC窦样血管CD34表达为强阳性;除门管区小血管分支及中央静脉外,癌旁肝组织、肝硬化组织、正常肝组织基本不表达CD34;HCC的MVD范围(18~360)/0.74 mm2、(156.5±62.4)/0.74 mm2。HCC的MVD与肿瘤大小、病灶数目、分化程度、门静脉瘤栓形成、包膜状况均有显著关系(P<0.05或0.01);与HBsAg是否阳性、术前AFP水平无关(P>0.05);与预后亦有关,少血管组(MVD<156)预后显著优于多血管组(MVD≥156),术后平均无瘤生存期少血管组为53个月,多血管组为14个月,(P<0.001)。结论 CD34的表达反映了HCC的新生血管化,与HCC的发展有关。MVD可作为判断HCC侵袭、转移和预后的指标。

    作者:韩圣华;黄建富 刊期: 2001年第01期

  • 原发性肝癌多药耐药基因的表达及意义

    目的 探讨5种多药耐药(MDR)基因在肝癌组织中的表达,建立MDR的基因诊断标准。方法 用逆转录PCR、流式细胞术检测肝癌组织中5种MDR基因mRNA和蛋白质的表达,用MTT法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的IC50值。结果 肝癌耐药涉及mdr1、MRP、LRP、GSTP1和TopoⅡα基因。mdr1 mRNA≥0.5、MRP mRNA≥0.6、LRP mRNA≥0.8、GSTP1 mRNA≥0.7和Topo Ⅱα mRNA≤0.4为耐药联合诊断标准,符合率为98.00%。结论 多重MDR是肝癌耐药的主要形式。用逆转录PCR方法联合检测5种MDR基因mRNA表达在肝癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性

    作者:刘景丰;陈孝平 刊期: 2001年第01期

  • 人原发性肝癌病人多药耐药基因表达及意义

    目的 探讨原发性肝癌(PHC)癌组织及癌周组织mdr1表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高,特异性强的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,定量检测48例PHC病人癌组织及癌周组织中mdr1表达水平。其中18例病人术前行肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗。结果 PHC癌组织中mdr1阳性率为63.3%,远高于癌周组织的26.7%(P<0.01);术前行TACE组癌组织中mdr1阳性率为88.9%,远比未化疗组63.3%高。结论 PHC存在内源性MDR和获得性MDR,mdr1高表达是PHC病人MDR产生的重要机制之一。

    作者:孔连宝;杜竞辉;王学浩;钱建民;赵中辛 刊期: 2001年第01期

  • 肝海绵状血管瘤内皮细胞PCNA、AgNOR测定分析

    肝海绵状血管瘤(Cavernous hemangioma of the liver , CHL)的组织来源及增长方式存有争议。有人认为 CHL是真性肿瘤,其增长是新血管瘤组织的形成〔1〕;有人认为是血管畸形,其增长是血窦在血流作用下扩张〔2〕。本实验检测 CHL内皮细胞PCNA表达及 AgNOR平均计数,了解CHL内皮细胞有无异常增殖,旨在探讨其增长方式,推测其是否是真性肿瘤。  材料与方法:标本:收集手术切除的 19位病人21个 CHL标本,男 8例,女 11例。年龄 34~55岁。瘤体直径小于 4 cm者 3个, 4~10 cm者 14个,大于 10 cm者 4个。  对照组:10例血管瘤旁正常肝组织和 3例其它病人正常肝组织汇管区血管。

    作者:徐杰明;刘青光;潘承恩;马清涌;张梅 刊期: 2001年第01期

  • 《中国微创外科杂志》即将创刊

    《中国微创外科杂志》设置的栏目有:内窥镜,介入治疗,临床论著,基础研究,经验交流,专家笔谈,新技术,国外医学动态,医疗器械进展,文献综述,短篇/个案报道,基层医院园地,争鸣园地等。传统外科是微创外科的基础,因此,有关传统外科方面的学术论文同样受欢迎。  《中国微创外科杂志》为双月刊,国际流行大16开,64页,采用铜版纸印刷,2001年2月创刊,对国内外公开发行,每期6元,全年36元,国内读者2001年可来信编辑部直接订阅,国外读者通过中国国际图书贸易总公司订阅。  编辑部地址:100083 北京海淀区花园北路49号北京大学第三临床医学院《中国微创外科杂志》编辑部  电话:010-62017691转2730 E-mail:PUH3-WCWK@mail.bjmu.edu.cn《中国微创外科杂志》编辑部

    作者: 刊期: 2001年第01期

  • 紧贴肝门大血管的肝癌手术并发症的防治

    目的 探讨已累及肝内主干血管的肝癌手术经验,防止并发症与提高术后疗效。方法 将近10年来手术切除的肝门区肿瘤病人中,选择了紧贴肝内大血管1 cm以内的肝癌78例,肿瘤直径≤5 cm 21例,>5 cm 57例,大者为20 cm×20 cm×18 cm,对术中如何防治并发症发生等进行总结分析。结果 术中并发大出血、术后胆瘘、伤及健侧肝门发生率分别为8.9%,3.8%和1.2%,无手术死亡。结论 虽然此类手术难度大、风险大,只要重视手术适应证选择、手术方法改进,仍可提高手术安全性,防止并发症的发生。

    作者:吴伯文;潘泽亚;吴孟超 刊期: 2001年第01期

  • 肝细胞肝癌病人围手术期血清IL-10的变化及意义

    目的 检测肝细胞肝癌(HCC)病人围手术期血清IL-10浓度并探讨其意义。方法 用ELISA检测法测定了30例HCC病人术前、术后血清IL-10浓度,以30例健康人为对照。结果 HCC病人术前、术后血清IL-10浓度均高于健康人,术前血清IL-10浓度高于术后。肿瘤直径>5 cm和低分化的病人血清IL-10浓度高于肿瘤直径<5 cm和高分化者(P<0.01)。结论 HCC细胞可能产生IL-10,IL-10可能参与HCC的免疫调节,IL-10可能是一个可反映HCC分化程度、估计预后及预测复发的指标。

    作者:刘维藩;汪根树;谭小宇 刊期: 2001年第01期

中华肝胆外科杂志

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