王炜；马德强；马健文；徐强；杨世杰
病人男，21岁、藏族、有犬羊接触史。右上腹隐痛2年，期间曾发热一次，结膜黄疸，纳食差，水泻便8 d。于1998年9月26日住院。查体：体温36.2℃，血压90/60 mmHg，消瘦，精神略差，结膜黄染呈金黄色，右上腹轻度压痛，肝区叩击痛明显，一分钟胆红素78.2 μmol/L，转氨酶63 U，血沉74 mm/1h，卡松尼氏试验阳性，B超提示肝右后叶直径6.1 cm液性暗区，心电图示窦性心动过绶伴心律不齐。于1998年10月14日在硬膜外麻醉下行右肋缘下切口。进入腹腔后见肝右后叶(Ⅷ段)有约8 cm×10 cm之包块与膈肌粘连，切开囊壁厚约0.60 cm，硬韧、吸出黄色脓性液约500 ml，无恶臭，期间加杂内囊残壳呈灰白色，待吸净后搔刮囊壁，3%双氧水，生理盐水反复冲洗。用乙醇纱布擦拭囊周壁，自囊壁处不断流出少量胆汁，因位置较深，胆瘘口细，费时许久未能探明胆瘘处，故在囊腔内置一根乳胶管行外引流，严密缝合原切开的囊壁，后关腹。术后24 h引流出胆汁500 ml，48 h胆汁量300 ml，与此同时，结膜黄疸消退，水泻便停止，复查总胆红素、转氨酶、血沉均趋于正常，此后每日胆汁量在200～300 ml之间增减，经过408 h后胆汁引流自行停止，经引流管造影残腔已闭合，拔除引流管。
作者：蒋宗华；常春超；达娃次仁 刊期： 2001年第01期
目的 了解p53基因及其蛋白在结肠癌发生、转移过程中的动态变化以及p53变异与生存期的关系。方法 p53基因exon 5-9以DGGE及自动DNA序列分析来检测。结果 41例大肠癌病人中，26例呈p53变异(63%)，其中6例仅在肝转移灶发现p53变异，其 余均为原发灶、转移灶一致性的变异。另有3例原发灶即有p53变异的病人，在转移灶出现了新增加的变异。生存分析显示，在肝转移灶含变异型p53的病人比含野生型P53者具有更长的术后生存期。结论 在结肠癌肝转移过程中，p53变异主要开始于肠癌原发灶，并被保持于转移至肝脏的癌细胞内，小部分p53变异也可以始发于转移灶。对于实施肝部分切除术的病人，术后生存期在转移癌灶含变异型p53者长于含野生型p53者。
作者：杨洋；罗荣城；郑航 刊期： 2001年第01期
目的 检测肝细胞肝癌(HCC)病人围手术期血清IL-10浓度并探讨其意义。方法 用ELISA检测法测定了30例HCC病人术前、术后血清IL-10浓度，以30例健康人为对照。结果 HCC病人术前、术后血清IL-10浓度均高于健康人，术前血清IL-10浓度高于术后。肿瘤直径＞5 cm和低分化的病人血清IL-10浓度高于肿瘤直径＜5 cm和高分化者(P<0.01)。结论 HCC细胞可能产生IL-10，IL-10可能参与HCC的免疫调节，IL-10可能是一个可反映HCC分化程度、估计预后及预测复发的指标。
作者：刘维藩；汪根树；谭小宇 刊期： 2001年第01期
Fas和Fas配体（FasL）是介导细胞凋亡的一对膜蛋白，两者均以膜分子和可溶性分子的形式存在。受不同致病因素影响的肝组织Fas、FasL表达水平不同，通过Fas系统介导的凋亡方式清除异常肝细胞的速度及程度与肝脏的病理过程密切相关。本研究旨在通过检测Fas、FasL在肝硬化和肝癌组织的表达及血中可溶性Fas（sFas）的含量，了解Fas、FasL和sFas在肝硬化转变为肝癌的过程中所起的作用。 1.材料和方法：本院1994～1997年肝硬化门静脉高压症病人术中取硬变肝活检标本和肝癌的手术切除标本，其中肝硬化49例，男30例，女19例，年龄24～65岁；原发性肝癌36例，男31例，女5例，年龄25～74岁。所有组织均立即经10％甲醛固定，石蜡包埋，5 cm连续切片。门静脉高压症和肝癌病人术前采外周静脉血，其中肝硬化28例，男18例，女10例，年龄28～69岁；原发性肝癌27例，男21例，女6例，年龄28～69岁。正常对照取自年龄匹配的健康志愿者。Fas、FasL免疫组化检测采用Dako Envision二步法，操作按说明进行，
作者：彭志海；韩国新；唐华美；张宜玲；杨传永 刊期： 2001年第01期
肿瘤的生物学特性与癌细胞的过度增殖有关，更与癌细胞的凋亡减少有关。bcl-w和bcl-x是bcl-2家族的重要成员，前者编码产物具有抗细胞凋亡功能〔1〕，迄今有关bcl-w基因对肿瘤细胞凋亡调控的研究文献报道甚少；后者存在两种片段，bcl-xL有抗凋亡作用，bcl-xS具促凋亡活性〔2〕。本研究采用免疫组织化学方法检测bcl-w和bcl-x在肝细胞癌(HCC)的表达及意义。 1.材料与方法:(1)标本：来自第四军医大学西京医院手术切除并经病理检查证实的组织。40例HCC高、低分化型分别为23例和17例；临床分期Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ 期为 13例、27例。取14例肝硬化对照。(2)主要试剂：羊抗人Bcl-w抗体、兔抗人Bcl-x抗体为美国Santa Cruz公司产品；桥抗兔抗羊抗体为美国Sigma公司产品; EnvisionTM试剂盒为丹麦Dako公司产品。(3)方法：采用免疫组化LDP法(Labelled Dextran Polymer法)〔3〕。阴性对照设PBS替代一抗的空白对照和鼠抗人乙脑单克隆抗体替代一抗对照。细胞浆呈黄色或阳性细胞率大于20%为阳性，细胞浆无黄色或阳性细胞反应率小于20%或背景同空白对照者为阴性。统计学处理采用χ2和配对计数资料的χ2检验。
作者：徐宏勇；李开宗；窦科峰；付由池；阎庆国；王映梅；李景梦 刊期： 2001年第01期
随着肝动脉栓塞化疗术(TAE)治疗中晚期肝癌日益增多,TAE治疗的副作用和并发症亦开始备受关注。本文报道我院1997年5月至1998年5月1?000例肝癌病人TAE治疗的副作用和并发症。 1.材料和方法：1?000例肝癌系1997年5月至1998年5月在我院行TAE且资料完整的连续性病例。原发性肝癌890例，其中192例系术后复发，转移性肝癌110例。男性878例，女性122例。年龄8～74岁，平均55岁。采用Seldinger法经股动脉插管（造影摄片程序略），导管通常为6F的Cook或Yashiro肝动脉导管，经腹腔动脉造影确定肿瘤大小部位及供血情况，同时利用间接门脉造影法观察有无门静脉受侵犯及其程度。在导丝引导下导管超选进入肝固有动脉或其分支后注入超液化碘油5～30 ml，阿霉素或表阿霉素20～40 mg，5-氟尿嘧啶0.5～1.0 g,卡铂100～200 mg，有肺转移灶者超选入支气管动脉灌注丝裂霉素或其它化疗药。部分病人加用明胶海绵碎片1/4～3/4块行肝动脉栓塞。 所有病人入院后均行肝功、肾功、电解质、血常规、AFP、CEA、 HBV三抗、PT、蛋白电泳及胃镜或钡餐检查，TAE术后3 d复查肝功、肾功、电解质、血常规。
作者：钱国军；曲增强；陈汉；高亚莲；程红岩；陈栋；徐爱民；朱伟；张惠敏 刊期： 2001年第01期
目的 探讨已累及肝内主干血管的肝癌手术经验，防止并发症与提高术后疗效。方法 将近10年来手术切除的肝门区肿瘤病人中，选择了紧贴肝内大血管1 cm以内的肝癌78例，肿瘤直径≤5 cm 21例，＞5 cm 57例，大者为20 cm×20 cm×18 cm，对术中如何防治并发症发生等进行总结分析。结果 术中并发大出血、术后胆瘘、伤及健侧肝门发生率分别为8.9%，3.8%和1.2%，无手术死亡。结论 虽然此类手术难度大、风险大，只要重视手术适应证选择、手术方法改进，仍可提高手术安全性，防止并发症的发生。
作者：吴伯文；潘泽亚；吴孟超 刊期： 2001年第01期
目的 建立化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡的模型,初步探讨在该凋亡过程中重要凋亡相关基因p53和bcl-2的调控作用。方法 用丝裂霉素诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡，荧光显微镜和透射电镜观察肝癌细胞的形态学改变，琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA片段的梯状条带，用流式细胞仪免疫荧光法检测凋亡不同时期P53和Bcl-2蛋白的表达量。 结果 8 mg/ml丝裂霉素作用12，24，48 h后，P53蛋白表达量明显增高，尤以12 h明显，而后逐渐下降。Bcl-2蛋白在整个凋亡过程中无明显变化。结论 在化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中，p53基因参与了调控，并为凋亡信号传导途径中的早期事件。丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡途径为p53依赖方式，而在该凋亡过程中，bcl-2基因的调控并不重要。
作者：杨建青；杨连粤 刊期： 2001年第01期
目的 分析原发性肝癌并胆道癌栓的临床、影像学及病理特点，总结其诊断的规律 。方法 分析近4年来我院收治的肝癌并胆道癌栓42例病人的一般情况，病人入院后行常规实验室检查及B超、CT、MRI、ERCP、PTC等检查。结果 本组术前正确诊断率为71.8%。临床表现为肝癌及梗阻性黄疸症状。实验室检查AFP阳性27例，乙肝表面抗原阳性28例。术前血清胆红素增高者33例，血清碱性磷酸酶增高19例，白细胞增高18例。影像学特点为：肝内肿瘤，胆道扩张，胆道内占位。术中见癌栓组织松脆易碎，多与胆道壁无相连，与肝内原发病灶相连或不相连。B超、CT、MRI、ERCP、PTC的正确诊断率分别为8.11%、2.63%、10.00%、69.70%、100%。结论 肝脏占位，肝炎病史，AFP升高同时出现胆道扩张、黄疸，应考虑到本病存在，并选择多种检查手段，综合分析结果。
作者：孙婧璟；吴孟超；沈锋；王义 刊期： 2001年第01期
《中华肝胆外科杂志》随着国家发展、科技进步的步伐迈入了新世纪。值此，谨向指导、关心、支持我们的中华医学会、中华医学杂志社领导、解放军总医院领导、各地专家、学者、编委和热心的作者、读者表示衷心的敬意和谢意。 从今年起改出月刊，扩展容量、增强时效、丰富栏目、活跃争鸣是我们以饱满的热情和巨大的努力为适应学术发展、满足形势需要、更好地为读者和作者服务的有力举措。以求努力反映我国肝胆胰脾外科临床防治研究和临床实验研究新进展、新技术、新趋势、新动态的信息，它无疑也是中华外科分会各相关学组等基本的学术阵地。 不断提高刊物质量是努力实现办刊宗旨的中心的任务。改出月刊，加大了我们的责任，提出了更高的要求。我们将围绕编辑出版计划在审、编、排、校、印的各个环节，更加严谨、细致地做好工作。 科学性、先进性是期刊质量的核心，要强化稿件审、编全过程，把尊重作者和保证质量结合起来，在执行各项规范的同时，还要强调医学统计学的要求和处理，坚持敬业、求实、严谨的学风和严肃的负责精神。 我们将更好地学习和遵照有关政策、法规，管理好杂志各方面的工作，继续执行“提高为主、兼顾普及；面向临床、重视科研”的原则，进一步密切同各位专家，各地编委的联系和沟通，依靠众多的力量和智慧，更好地为读者服务。
作者： 刊期： 2001年第01期
《中国微创外科杂志》设置的栏目有：内窥镜，介入治疗，临床论著，基础研究，经验交流，专家笔谈，新技术，国外医学动态，医疗器械进展，文献综述，短篇/个案报道，基层医院园地，争鸣园地等。传统外科是微创外科的基础，因此，有关传统外科方面的学术论文同样受欢迎。 《中国微创外科杂志》为双月刊，国际流行大16开，64页，采用铜版纸印刷，2001年2月创刊，对国内外公开发行，每期6元，全年36元，国内读者2001年可来信编辑部直接订阅，国外读者通过中国国际图书贸易总公司订阅。 编辑部地址：100083 北京海淀区花园北路49号北京大学第三临床医学院《中国微创外科杂志》编辑部 电话：010-62017691转2730 E-mail:PUH3-WCWK@mail.bjmu.edu.cn《中国微创外科杂志》编辑部
作者： 刊期： 2001年第01期
目的 探讨5种多药耐药(MDR)基因在肝癌组织中的表达，建立MDR的基因诊断标准。方法 用逆转录PCR、流式细胞术检测肝癌组织中5种MDR基因mRNA和蛋白质的表达，用MTT法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的IC50值。结果 肝癌耐药涉及mdr1、MRP、LRP、GSTP1和TopoⅡα基因。mdr1 mRNA≥0.5、MRP mRNA≥0.6、LRP mRNA≥0.8、GSTP1 mRNA≥0.7和Topo Ⅱα mRNA≤0.4为耐药联合诊断标准，符合率为98.00%。结论 多重MDR是肝癌耐药的主要形式。用逆转录PCR方法联合检测5种MDR基因mRNA表达在肝癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性
作者：刘景丰；陈孝平 刊期： 2001年第01期
肝海绵状血管瘤(Cavernous hemangioma of the liver , CHL)的组织来源及增长方式存有争议。有人认为 CHL是真性肿瘤，其增长是新血管瘤组织的形成〔1〕;有人认为是血管畸形，其增长是血窦在血流作用下扩张〔2〕。本实验检测 CHL内皮细胞PCNA表达及 AgNOR平均计数，了解CHL内皮细胞有无异常增殖，旨在探讨其增长方式，推测其是否是真性肿瘤。 材料与方法：标本：收集手术切除的 19位病人21个 CHL标本，男 8例，女 11例。年龄 34～55岁。瘤体直径小于 4 cm者 3个， 4～10 cm者 14个，大于 10 cm者 4个。 对照组：10例血管瘤旁正常肝组织和 3例其它病人正常肝组织汇管区血管。
作者：徐杰明；刘青光；潘承恩；马清涌；张梅 刊期： 2001年第01期
由于各种原因所致肝内或者肝外胆管梗阻形成阻塞性黄疸，引起胆汁淤积，肝细胞损坏，出现轻重不一的肝硬化及全身一系列病理变化。目前很多的研究提示Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ,Ⅳ-C)对肝硬化诊断均有较高价值，而动脉血酮体比(arterial blood ketone body ratio,AKBR)则是反映肝细胞能量代谢的较准确指标。因此，我们对阻塞性黄疸病人手术前后联合测定Ⅳ-C和AKBR并报告如下。 材料与方法：(1)研究对象：本组阻塞性黄疸病人39例，其中肝内胆管多发结石21例，肝外胆管结石13例，胰腺癌3例，壶腹部癌2例。全部经我院B超，CT或ERCP及PTC确诊。其中男25例，女14例。平均年龄51.3岁(28～69岁)。术前肝功能Child分级为A期26例，B期10例，C期3例。所有病人均行根治性或姑息性手术解除胆道梗阻。(2)AKBR测定：术前，术后1，2，3，7 d分别在10%葡萄糖输注状态下(使血糖维持在6.7～11.2 mmol/L)抽取桡动脉血2 ml，按Ozawa〔1〕等的方法测定计算AKBR值=ACAC(乙酰乙酸)/β-OHD(β-羟丁酸)×K。试剂购自美国Sigma公司。(3)Ⅳ-C的测定：于术前和术后3 d按沈宜等〔2〕的方法抽血测血清Ⅳ-C，材料与仪器来自军事医学科学院。
作者：冉江华；杨炯；郭群；张家骅；陆晓青 刊期： 2001年第01期
一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕，重症急性胰腺炎(SAP)急性期常伴有急剧的全身病理生理改变，细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2，3〕，诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情，是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO)。 材料和方法 1.实验动物：雄性SD大鼠200～250 g128只，清洁级，购自中国科学院上海实验动物中心。随机分为假手术组8只，SAP组60只，治疗组60只，其中SAP组和治疗组各观察20只动物死亡率。 2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作：参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进 氯胺酮(50 mg/kg)和3%苯比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管，无菌条件下，手术显微镜下，十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管，微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)1.0 ml/kg，注射速度0.2 ml/min，注射持续10 min。肉眼下，大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。假手术组仅翻动胰腺后关腹，治疗组于诱发SAP后皮下注射奥曲肽(诺华公司)，每次14 μg/kg q8 h×2 d。
作者：黄鹤光；冷希圣；杨波 刊期： 2001年第01期
目的 探讨一氧化氮（NO）,内皮素（ET-1）与肝硬化及门静脉高压症病人肝功能的关系。方法 按肝功能Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级分组比较肝炎后肝硬化、门脉高压病人血中的NO（酶法)、ET-1（放射免疫法)水平和肝功能的关系。结果 肝功能Ⅰ级组病人（13例）血中的NO水平远远低于肝功能Ⅱ级组（21例）和Ⅲ级组（21例）的病人［（22.7±2.3) μmol/L对(50.9±6.2)μmol/L和(51.9±5.7) μmol/L，P均< 0.01)］，而血浆ET-1水平在肝功能Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级各组之间差异无显著意义［（49.6±8) pg/ml，(55.9±8.6) pg/ml 和(54.2±11.2) pg/ml,P＞ 0.05）］。结论 血清NO在术前估价门静脉高压病人肝储备功能中有重要意义，而ET-1则未见明显价值。
作者：黎靖；雷正明；李代渝；郑思琳；夏先明 刊期： 2001年第01期
肝尾叶肿瘤由于紧贴肝后下腔静脉且位置深，难以显露，极易发生大出血，手术难度很大。我们采用第三肝门解剖法分离结扎肝短静脉，使肝后下腔静脉与肿瘤分离，从而使肿瘤切除变得安全、简便，出血量明显减少〔1〕。大部分病人不需要行全肝血流阻断，自1994年4月至1998年8月，我们切除肝尾叶肿瘤34例，其中27例采用第三肝门解剖法切除，报告如下。 1.一般情况：34例病人中男性25例，女性9例。年龄25～57岁(平均42.3岁)，原发性肝癌27例，肝血管瘤5例，胆管细胞癌1例，肝脂肪瘤1例。肿瘤位于左尾叶者10例，右尾叶者22例，尾叶横部者2例。肿瘤的直径3～12 cm，平均6.2 cm。(1)切口选择及肝脏游离：右尾叶肿瘤选择右肋缘下切口，左尾叶肿瘤选择左右肋缘下“人”字形切口。进腹后探查肝脏，切断肝周诸韧带，右尾叶肿瘤需游离肝裸区至肝后腔静脉侧壁，左尾叶肿瘤需完全游离肝左叶并切断肝胃韧带。必要时游离肝上、下腔静脉并置阻断带，所有病例均未行胸腹联合切口。(2)解剖第三肝门：将肝脏向左上方翻起，显露出肝下腔静脉，沿腔静脉浅面，由下至上，由右至左，仔细分离肝脏与下腔静脉之间的间隙，肝短静脉予以双重结扎并切断，直至肿瘤与下腔静脉完全分离。左尾叶除较小的肿瘤直接沿肿瘤边缘分离结扎血管外，较大肿瘤也可采用此法分离、结扎肝短静脉。(3)肿瘤切除途径：不同部位的肿瘤采用不同的切除途径：①右尾叶局部切除：于右肝门后缘横行切开肝实质，分离结扎肿瘤周围管道；②右尾叶联合其他肝叶切除：沿正中裂切开肝实质，至右肝门右侧，切断结扎需切除肝叶的管道，绕至右肝门后部，分离切除肿瘤；③左尾叶局部切除：将左叶翻向右上方，沿肿瘤与下腔静脉之间分离，结扎血管，切除肿瘤；④左尾叶联合其他肝叶切除：先切除左外叶或左半肝，再切除肿瘤；或左半肝联合肿瘤一并切除；⑤尾叶横部肿瘤切除：沿正中裂切开肝实质，结扎切断左、中肝静脉，沿肿瘤右侧分离结扎血管，连同左半肝一并切除。(4)肝血流阻断法：常规采用间歇性第一肝门阻断法，5例病人采用联合全肝血流阻断法
作者：周伟平；吴孟超；陈汉；姚晓平；杨甲梅；杨广顺；吴伯文 刊期： 2001年第01期
目的 研究经颈内静脉肝内门体分流术(TIPS)加改良Sugiura术对门静脉高压症病人门静脉血流循环、肝外门体分流情况的影响。方法 对14例门静脉高压症病人，进行治疗前后的99mTc动态显像、直接门静脉测压自身对比研究。结果 术前、TIPS及改良Sugiura术后病人的肝脏、门静脉开始显影时间分别显著提前；门静脉压力逐步降低；TIPS术后门体分流率（shunt index, SI）明显下降，而改良Sugiura术后无显著变化；肝脏放射性-时间曲线斜率上升。结论 TIPS加改良Sugiura术造成的门静脉及肝外门体分流的改变有助于提高治疗门静脉高压症的临床疗效。
作者：赵翼；吴性江；朱虹；黎介寿 刊期： 2001年第01期
目的 探讨原发性肝癌(PHC)癌组织及癌周组织mdr1表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高，特异性强的逆转录－聚合酶链反应(RT－PCR)技术，定量检测48例PHC病人癌组织及癌周组织中mdr1表达水平。其中18例病人术前行肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗。结果 PHC癌组织中mdr1阳性率为63.3%，远高于癌周组织的26.7%(P<0.01)；术前行TACE组癌组织中mdr1阳性率为88.9%，远比未化疗组63.3%高。结论 PHC存在内源性MDR和获得性MDR，mdr1高表达是PHC病人MDR产生的重要机制之一。
作者：孔连宝；杜竞辉；王学浩；钱建民；赵中辛 刊期： 2001年第01期
肝癌是世界上恶性程度极高，且预后极差的恶性肿瘤之一，每年全球约有125万人患病。在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第二位，每年至少有10万名新发现病人，和11万名肝癌病人死亡〔1〕。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，但治疗效果都十分有限，并未显著延长病人的生存期。大部分肝癌病人对化疗及放疗等治疗均不敏感，能手术根治的病人仅占15%。随着分子生物学和免疫学理论及技术的不断发展和对肿瘤发病机制的不断认识，人们可以利用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗，且在该领域已显示出一定的临床治疗效果。如Habib等〔2〕使用野生型p53基因治疗原发性肝细胞癌的临床治疗试验，取得了很大的成功，引起人们的普遍关注。本文就目前肝癌基因治疗的研究现状和发展趋势作一综述。 一、肝癌基因治疗中所使用的载体系统和治疗途径的选择 目前在肝癌基因治疗实验当中使用多的是病毒载体系统，包括腺病毒载体〔3〕、逆转录病毒载体〔4〕、腺相关病毒载体〔5〕等，非病毒载体系统主要是使用脂质体〔2，6〕介导，且已进入临床试验阶段。在肿瘤基因治疗中，腺病毒载体系统具有许多优点，如制备容易，能获得高纯度、高滴度的腺病毒体；无遗传毒性，以游离型状态存在，不整合进入宿主DNA中；表达时间相对短暂，一般15～20 d左右，不会造成对免疫系统的长期慢性刺激〔7〕；感染宿主范围相对较广，尤其是能感染复制、分裂期的细胞。近几年临床上使用腺病毒载体治疗恶性肿瘤的例子越来越多〔8〕。体外实验证实，数个人的肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Hnh7、HLE、HLF、SK-HEP-1和大鼠肝癌细胞系McA-RH7777等，均对腺病毒十分易感，50MOI可使近100%的细胞被感染〔9〕。作者曾在军事医学科学院百环生物医学研究中心吴祖泽院士指导下，以腺病毒载体介导绿色荧光蛋白基因作为标记基因，也证实3个人的肝癌细胞系HepG2、SMMC7721、BEL-7402，一个胆管癌细胞系QBC939，一个正常肝细胞系L02，均对腺病毒易感，50MOI可使90%左右的靶细胞受感染。Castell等〔10〕利用携带LacZ基因的腺病毒体，感染体外原代培养的正常肝细胞，结果证实：肝细胞对腺病毒十分易感，15MOI感染1 h，可使80%的肝细胞受感染，20MOI感染1 h可使100%的肝细胞受感染；导入的目的基因可以在肝细胞内高效表达；感染腺病毒后，并不影响肝细胞的正常生化功能，如肝细胞的尿素合成、胞膜蛋白合成、生物转化活性等，认为使用腺病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗，是十分有效的工具载体。但有实验表明大剂量腺病毒载体对肝功能还是有影响的〔11〕，随感染病毒量的加大，肝脏的毒性作用也加大，且感染腺病毒的靶细胞刺激机体产生免疫反应，从而使腺病毒的转化效率降低，限制了重复使用。使用逆转录病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗，也有其有利之处：因逆转录病毒只感染处于复制、分裂期的细胞，而处于非复制期的细胞则不受感染。因肿瘤细胞多处于分裂期，而肿瘤周围的正常肝细胞多处于静止期，故逆转录病毒载体具有一定的靶细胞特异性〔4〕。Kitten等〔12〕使用逆转录病毒载体，通过门静脉注入大鼠肝内，有46%±17%的肝细胞受到感染，随病毒滴度的升高，细胞的转导效率也 增加。虽然逆转录病毒载体能将目的基因有效地导入肝癌细胞内，对肝脏这样的低分裂组织局部应用较为合适，但系统体内(in vivo)法应用，就会对骨髓、生殖细胞、肠上皮细胞等分裂增殖旺盛的组织，产生致死性杀伤作用，有产生与放、化疗相似副作用的危险。对于原发性肝细胞癌，癌细胞的增殖生长一般比较缓慢〔12〕，因此使用逆转录病毒载体可能转化效率较低，但对于肝转移癌，因为细胞增殖较为旺盛，故使用逆转录病毒载体较为合适。对于使用腺相关病毒载体进行肝癌的基因治疗，目前还研究较少，但腺相关病毒无致病性，有广泛的宿主范围，能感染不分裂的S期细胞，并能整合到宿主DNA的特异部位中，故减少了发生插入突变的危险性。Su等〔5〕使用AAV介导AFP/HSV-TK基因，证实目的基因能在肝癌细胞中高效表达，并具有杀伤肝癌细胞的作用。
作者：王征旭；王红阳；吴孟超 刊期： 2001年第01期
中华肝胆外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
