目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白.方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8 C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵表达载体,然后转化酵母菌株Y187和AH109,Western blot法检测诱饵蛋白在转化酵母菌株内的表达.通过自激活实验和毒性实验检测诱饵表达载体是否适合利用酵母双杂交的方法筛选相互作用蛋白.转化诱饵质粒的酵母菌株Y187与AH109(文库菌)杂交,待三叶形合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序.结果:成功构建了pGBKT7-FLA8-C双杂交诱饵载体;经检测该载体的表达产物对Y187和AH109均无自激活和毒性作用,可用于酵母双杂交实验;杂交后筛选得到2个阳性克隆,测序结果显示为鞭毛结合蛋白107(FAP107)和含蛋白结合结构域的预测蛋白.结论:成功筛选得到了与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的蛋白,分别为FAP107和预测蛋白.
作者:李靓;崔柳青;王瑞莉;毛丽红;韩康;柴丹丹;薛乐勋 刊期: 2013年第01期
目的:观察纤维介素2(fgl2)基因沉默对心肌微血管内皮细胞(MMVECs)增殖、迁移及血管生成素-1、-2(Ang-1、Ang-2) mRNA表达的影响.方法:制作并包装人fgl2 RNA干扰慢病毒fgl2-RNAi-LV.将细胞分为单纯MMVECs组(对照组)、GFP空载体慢病毒转染组(GFP组)和fgl2-RNAi-LV转染组.稳定转染4 d后,应用实时定量RT-PCR法检测各组fgl2、Ang-1和Ang-2 mRNA的表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移能力.结果:与对照组及GFP组比较,fgl2-RNAi-LV转染组fgl2 mRNA表达明显下调(F=180.301,P<0.001),Ang-1、Ang-2 mRNA的表达明显增加(F=59.450和54.572,P<0.001),MMVECs的增殖能力与迁移能力增强(F=5.341和6.122,P<0.05);对照组与GFP组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:fgl2基因沉默促进MMVECs的增殖、迁移,其分子机制可能与Ang-1、Ang-2 mRNA表达上调有关.
作者:郑振中;王亮;吴友平;殷然;王梦洪;郑泽琪;彭景添;魏云锋 刊期: 2013年第01期
目的:编制适用于16岁以上中国公民的和谐心理量表.方法:依据相关理论,采用访谈法、专家分析法形成初始问卷,使用探索性因素分析、平行分析和验证性因素分析探讨问卷的结构,并对问卷的信度、效度进行考察.结果:和谐心理量表包括人格和谐、情绪和谐、人际和谐、社会和谐、意志和谐、自然和谐以及认知和谐等7个维度;各维度及总问卷的内部一致性系数依次为0.748、0.726、0.698、0.646、0.653、0.637、0.602和0.838,各维度及总量表的重测信度依次为0.578、0.652、0.649、0.634、0.556、0.496、0.558和0.680;构念效度和内部结构效度良好.结论:所编制的和谐心理量表具有良好的心理测量学特征,可用于相关研究.
作者:许慧;贾黎斋;李福华;李志敏 刊期: 2013年第01期
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化形成及核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-4(IL-4)表达的影响.方法:75只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:BLM组25只,气管注射BLM 5 mg/kg制作肺间质纤维化模型;NAC组25只,于注射BLM前5天开始,每天给予 NAC 250 mg/kg直至取材;对照组25只,气管注射生理盐水.第1、3、7、14、28天处死小鼠,取右肺组织行HE染色和Masson染色,左肺组织测羟脯氨酸(HYP)含量;分别采用ELISA法和SP免疫组化染色检测支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量和灌洗细胞中NF-κB p65的表达.结果:第7、14、28天,BLM组肺组织病理可见实变及胶原沉积,而NAC组明显减轻;3组小鼠肺组织HYP含量差异有统计学意义,NAC组HYP含量低于BLM组(P<0.05);第1、3、7天,3组小鼠支气管肺泡灌洗细胞NF-κB p65的表达水平及支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量差异有统计学意义,且NAC组2指标均低于BLM组(P均<0.05).结论:NAC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致纤维化相关细胞因子IL-4的产生,进而减轻BLM所致小鼠肺间质纤维化.
作者:刘卫青;张晓晔;朱敏;秦秉玉 刊期: 2013年第01期
目的:探讨伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的改变.方法:20只SD大鼠随机分为假手术组与模型组,用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法制作大鼠SAP模型.24 h后,测定2组小肠推进比、结肠蠕动频率、粪便含水量,并进行胰腺病理评分;制作结肠黏膜下神经丛全层标本,运用免疫荧光技术观察黏膜下神经节NOS阳性神经元的变化.结果:与假手术组相比,模型组小肠推进比减少[(41.04±4.36)% vs(14.54±2.30)%,t=15.477,P<0.001],结肠蠕动频率减慢[(13.40±1.35)min-1 vs (4.00±0.93) min-1,t=16.748,P<0.001],粪便含水量降低[(41.56±6.69)% vs(12.98±6.56)%,t=8.869,P<0.001],胰腺病理评分增高[(1.20±0.63) vs (15.75±1.72),t=23.569,P<0.001],但其结肠黏膜下NOS阳性神经元计数无明显改变[(22.49±5.14)% vs(26.36±2.57)%,Z=-1.955,P=0.055].结论:伴胃肠动力障碍的SAP大鼠结肠黏膜下NOS阳性神经元可能未发生明显重塑.
作者:袁园;林中;李小玲 刊期: 2013年第01期
目的:通过测定梗死后心肌组织中F-肌动蛋白(F-actin)、热休克蛋白27(HSP27)蛋白和mRNA的表达,探讨缬沙坦对大鼠急性心肌梗死后细胞骨架蛋白的影响及可能机制.方法:将54只大鼠分为心肌梗死组(MI组,n=11)、缬沙坦组(X组,n=13)、假手术组(SH组,n=15)和正常对照组(N组,n=15).前2组大鼠结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,SH组只穿线不结扎.X组给予缬沙坦(15 mg/kg),1次/d,灌胃治疗4周,其余3组给予等体积生理盐水.4周后HE染色进行心肌组织形态学分析,免疫组化、RT-PCR方法测定各组心肌组织中F-actin、HSP27蛋白和mRNA的表达.结果:光镜下观察,N组和SH组心肌细胞排列整齐,无肌纤维破坏,MI组和X组可见梗死区心肌细胞坏死,纤维组织增生,X组较MI组梗死面积小,纤维组织增生轻.4组中HSP27、F-actin蛋白和mRNA的表达差异有统计学意义(F蛋白=312.760、310.587,P均<0.001;FmRNA=1 527.549、1 290.958,P均<0.001).与SH组比较,MI组和X组HSP27、F-actin蛋白和mRNA表达量升高(P<0.05);MI组HSP27、F-actin蛋白和mRNA表达量高于X组(P<0.05).MI组与X组中HSP27、F-actin的表达呈正相关(蛋白:rMI组=0 807,P=0 003;rX组=0.805,P=0.001;mRNA:rMI组=0.615,P=0.044;rX组=0.762,P=0.002).结论:缬沙坦可能通过调节细胞骨架蛋白F-actin、HSP27的表达而改善心肌梗死后心室重构.
作者:陈杰;张丽华;牛少辉 刊期: 2013年第01期
目的:探讨胃腺癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及沉默SLP-2对胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响.方法:采用免疫组化法检测45例胃腺癌患者的癌组织、配对癌旁正常胃黏膜组织中SLP-2蛋白的表达情况,分析其与临床病理特征的关系;将SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞,采用MTT法和流式细胞术检测转染后细胞的增殖状况及细胞周期.结果:SLP-2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率(68.9%,31/45)高于癌旁正常组织(26.7%,12/45)(χ2=15.429,P<0.001).胃腺癌组织中SLP-2的表达与淋巴结转移及TNM分期密切相关(校正χ2=4.784,5 318,P均<0.05).SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞后,细胞增殖活性降低;G1细胞期增多,S期细胞减少(F=14 459,11.825,P均<0.05).结论:SLP-2参与了胃腺癌的发生、发展.
作者:张剑;李建生;吴敏;赵晔;张自森 刊期: 2013年第01期
目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT).方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株.结果:在氯霉素浓度为300 mg/L的选择压力下,野生型盐藻10 d左右死亡,转化藻仍正常生长,得到表达氯霉素抗性的盐藻转化株.结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的.
作者:张汇征;崔柳青;潘卫东;薛乐勋 刊期: 2013年第01期
目的:明确阿司匹林在血液透析患者中应用的出血风险.方法:检索数据库Medline、Cochrane图书馆、维普数据库、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库.纳入关于阿司匹林在血液透析患者中应用的所有前瞻性临床随机对照试验,评价文献质量,并提取符合纳入标准的数据,采用 RevMan 4.2进行meta分析.结果:纳入10项临床随机对照试验,共686例患者,有44例发生出血事件,其中治疗组20例,对照组24例,OR(95%CI)=0.90(0.47~1.72),P=0.74,组间差异无统计学意义.纳入患者中有104例发生透析血管通路血栓事件,其中治疗组39例,对照组65例,OR(95%CI)=0.37(0.16~0.84),P=0.02,组间差异有统计学意义.结论:未发现阿司匹林增加血液透析患者的出血风险,同时阿司匹林能降低血液透析患者血管通路血栓形成的风险.
作者:聂晟;谢迪;李璐;梁敏 刊期: 2013年第01期
目的:评价还原性谷胱甘肽(GSH)对哮喘豚鼠气道上皮细胞的保护作用.方法:采用随机数字表法将48只豚鼠分为对照组、模型组、地塞米松组和GSH组4组,每组各12只动物.后3组利用鸡卵白蛋白致敏并激发大鼠建立哮喘模型,分别给予相应的干预后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学检查;取右肺制作组织匀浆测定GSH;左肺常规制片,行病理观察,免疫组化法测γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果:与模型组相比,GSH组BALF中嗜酸性粒细胞和上皮细胞计数降低(F=69.639和62.360,P<0 001),支气管周围炎性细胞浸润相对较轻,上皮细胞较完整,基底膜破坏相对较轻;肺组织GSH水平接近对照组,高于模型组(F=113.047,P<0.001),肺组织γ-GCS和TNF-α在支气管壁和支气管旁均有表达,但低于模型组(F=64 444和89.895,P<0.001).结论:GSH对哮喘豚鼠上皮细胞气道起保护作用.
作者:张铁栓;张国俊;刘颖 刊期: 2013年第01期
目的:探讨子痫前期(PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及溶血磷脂酸(LPA)受体蛋白Edg4表达的影响.方法:体外培养HUVEC,取对数生长期的细胞分为对照组、正常晚孕组、轻度PE组和重度PE组4组,分别用RPMI 1640培养液、含体积分数20%正常晚期孕妇血浆、20%轻度PE患者血浆和20%重度PE患者血浆的RPMI 1640培养液继续孵育48 h.应用MTT比色法检测细胞增殖能力,应用免疫细胞化学SP法和RT-PCR检测细胞Edg4蛋白及其mRNA表达水平.结果:4组细胞增殖抑制率及Edy4蛋白、mRNA的表达差异均有统计学意义(F=104.200,χ2=32.941,F=5 803.360,P均<0.05).与对照组和正常晚孕组相比,轻度和重度PE组HUVEC增殖抑制率增大,Edg4蛋白及mRNA表达明显升高,且重度PE组较轻度PE组升高更明显(P<0.05).结论:PE患者血浆LPA水平升高可能是引起血管内皮细胞损伤的原因之一.
作者:李留霞;李秀芳;张兰兰;张毅 刊期: 2013年第01期
目的:观察中国20~60岁男性腰3(L3)椎体松质骨密度和生物力学的变化.方法:取捐献的新鲜中国男性L3椎体32个,年龄20~60岁,分成20~、30~、40~和50~60岁4个年龄组,每组8个椎体.常规操作去除L3椎体周围软组织及附属结构,只保留椎体部分.沿椎体正中矢状面将椎体切成左右两半,均保留上下终板,制成规则试件,一部分行密度测量,另一部分行生物力学实验.结果:①随着年龄的增长,骨胶原交联能力下降,胶原纤丝粗细不等,走向一致,但排列松散、稀疏、紊乱,连接相邻较粗纤丝的更细的胶原纤丝的走向杂乱无章.②与20~岁组比较,30~60岁的L3椎体松质骨表观密度和体积比均逐渐减小(F=8.280、10.600,P均<0.001),但30~60岁各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05).③与20~岁组比较,50~60岁组的L3椎体松质骨弹性模量和极限应力均减小(F=4.330、9.800,P均<0.05).结论:中国20~60岁男性椎体松质骨的密度、极限载荷和弹性模量逐渐减小,骨密度和生物力学随年龄的变化可能是中国男性骨质疏松和骨折危险性增加的根本原因.
作者:刘国民;孔宁;白云深;韩宏志 刊期: 2013年第01期
目的:建立肝癌细胞中C60含量测定的荧光分析法.方法:采用荧光分光光度法,以220 nm为激发波长,在371 nm发射波长处测定肝癌细胞中C60的荧光强度.肝癌细胞经破碎、离心处理后进行测定,以减小蛋白质和酶的干扰.结果:该方法检测肝癌细胞中C60含量的标准曲线为I=2.240 3C+44.188(r=0.995 8,P<0.05),检测范围在1.28~46.08 mg/L,检测限为0.275 mg/L,平均回收率为86.5%,RSD为10.8%.结论:该方法简便、准确、快速,可用于肝癌细胞中C60的定量分析.
作者:姚寒春;孙敏;张振中 刊期: 2013年第01期
目的:探讨宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1的表达及意义.方法:分别采用免疫组化SP法和原位杂交法检测宫颈鳞状细胞癌(84例)和慢性宫颈炎(20例)组织中Bmi-1蛋白和mRNA的表达情况,并分析其表达与宫颈鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系.结果:宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1蛋白及mRNA的阳性表达率分别为71.4%和58.3%,高于其在慢性宫颈炎组织中的阳性表达率(5.0%和10.0%)(χ2=29.394和15.100,P均<0 001);且Bmi-1蛋白和mRNA在宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性表达与临床分期、淋巴结转移有关(χ2=18.088、20.000和16 622、28.476,P均<0.001),而与肿瘤分化程度无关(P>0.05).Bmi-1蛋白及mRNA在宫颈鳞状细胞癌中的表达呈正相关(rP=0.305,P=0.003).结论:Bmi-1可能成为判断宫颈癌生物学行为的可靠的生物学指标.
作者:林爱琴;朱晓菡;吕新全;薛金慧 刊期: 2013年第01期
目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体.方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16 L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存.结果:构建的HPV16 L1-pVE5523重组表达载体经PCR鉴定正确;获得的目的基因片段经测序与GenBank公布的HPV16 L1基因序列符合.结论:成功构建了HPV16 L1-pVE5523表达载体.
作者:罗波;段素群;郑小莉;毛樱逾 刊期: 2013年第01期
目的:探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病(DM)大鼠肾组织中胰岛素样生长因子1(IGF-1)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为对照组(n=12)、糖尿病组(DM组,n=11)、MMF组3组(n=10).于8周末检测24 h尿蛋白量、血糖、内生肌酐清除率(Ccr)、相对肾质量(左肾质量/体质量);PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化、Western印迹检测肾脏IGF-1、MMP-2的表达.结果:3组大鼠相对肾质量、血糖、24 h尿蛋白和Ccr差异有统计学意义(F分别为51.097、150.925、161.315和103.307,P<0.001),MMF组相对肾质量、24 h尿蛋白和Ccr均低于DM组,高于对照组(P<0.05).与对照组比较,DM组肾小球体积增大,系膜区基质明显增生,肾小球毛细血管袢受压,基底膜增厚,而MMF组较DM组有所改善.3组大鼠肾组织IGF-1、MMP-2蛋白表达差异有统计学意义(F分别为15.715和20.449,P<0.001),DM组中IGF-1的表达较对照组增加,MMP-2的表达较对照组下降;MMF组IGF-1较DM组下降,MMP-2增加(P<0.05).结论:MMF可能通过减少肾脏IGF-1的表达,同时上调MMP-2表达,起到保护肾脏的作用.
作者:李敏;王建生;刘东伟 刊期: 2013年第01期
目的:研究磷酸肌酸钠(PCr)对缺氧窒息幼鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:24只幼鼠随机分为PCr干预组(PCr组)、模型组和正常对照组,每组8只.PCr和模型组幼鼠制作缺氧窒息模型,PCr组幼鼠在制作模型前0.5 h和缺氧窒息后即刻腹腔注射1.4 mg/g的PCr.模型组在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水.正常对照组不作处理.缺氧窒息后6 h,切除各组幼鼠肾脏,采用HE染色法观察肾组织病理形态变化,RT-PCR和免疫组织化学法检测肾组织HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白的表达.结果:模型组幼鼠肾组织可见肾小管上皮细胞肿胀,大量炎性细胞浸润,部分上皮细胞变性坏死,肾小球出现水肿、甚至固缩;PCr组幼鼠肾小管和肾小球受损状况明显减轻.3组幼鼠肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白的表达比较,差异有统计学意义(F=196.805、484.734、90.410和79.329,P均<0.001),PCr和模型组均较正常对照组升高,PCr组较模型组降低(P<0.05).结论:PCr可能通过下调HIF-1α、VEGF的表达减轻肾组织的缺氧性损伤.
作者:刘月梅;陈莹;李永凤;刘春艳 刊期: 2013年第01期
目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因.方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析.结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库.选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23S rRNA核糖体核糖核酸).结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用.
作者:宋春花;王颖芳;段广才;郗园林 刊期: 2013年第01期
目的:分析预备留学本科生自尊、压力应对方式和幸福感特征,评估该群体整体心理状况.方法:采用分层随机整群抽样的方法共调查大一到大四本科生330人,其中非预备留学本科生243人,预备留学本科生87人.通过半结构化访谈以及自尊量表、压力应对方式问卷和幸福感指数量表收集数据.结果:预备留学本科生面临的压力较多来源于语言考试和学校申请,其自尊水平高于非预备留学本科生(t=5.301,P=0.022);但幸福感程度与非预备留学本科生比较,差异没有统计学意义(t=0.993,P=0.320);面对压力时,更多采用解决问题和求助等积极的应对方式,但也经常会采用幻想的消极应对策略,女生比男生更多地会采用求助的方式来解决问题(t=2.661,P=0.009).结论:预备留学本科生主要的压力来自于对适应国外学习的担心;其自尊感水平较高;积极的压力应对方式是自尊和幸福感的部分中介变量.
作者:王中杰;耿耀国;王宇中 刊期: 2013年第01期
目的:对先天性静止性夜盲症(CSNB)候选基因附近的6个STR基因座在河南汉族人群中的遗传多态性分布进行群体遗传学研究.方法:取100名健康无关个体的河南汉族人群血样,提取DNA,应用PCR结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,对CSNB候选致病基因RHO、PDE6B和GNAT1附近的D3R1、D3R2、D4P1、D4P2、D3G1及D3G2等6个STR基因座进行基因型分析.结果:6个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,杂合度在0.660~0.800,多态性信息含量为0.550~0.730(≥0.5),个体识别率在0.761~0.891(>0.7),D3R1、D4P2、D3G2 的非父排除率>0.5.结论:这6个基因座是一组良好的遗传标记,可用于CSNB致病基因的定位;D3R1、D4P2及D3G2在法医学方面具有一定的应用价值.
作者:杨洋;朱运良 刊期: 2013年第01期
目的:构建杜氏盐藻FLA8原核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的开放阅读框,通过预先添加的酶切位点切割后按正确的顺序插入到经相同酶切割后的原核表达载体pET28a(+)中,转化到大肠杆菌DE3中测序正确后进行原核表达.结果:成功地将FLA8的开放阅读框插入到表达载体中,FLA8在大肠杆菌中的表达主要以包涵体的形式存在,蛋白质的相对分子质量为87 000.结论:杜氏盐藻FLA8基因原核表达载体构建成功.
作者:侯永杰;李庆华;薛乐勋 刊期: 2013年第01期
目的:介绍微阵列数据的差异表达分析和基于错误发现率的多重假设检验.方法:通过t检验对一个关于前列腺癌的微阵列数据进行基因差异表达分析,采用BH程序进行错误发现率的控制和经验估计.结果:当错误发现率为0.05时通过BH程序得到21个差异表达基因;当以|t|≥3作为拒绝域时,得到105个基因,对应的错误发现率估计值为0.20.结论:相对传统的总体错误率,错误发现率更加适合于微阵列这种高维数据多重比较的错误控制;而且能同时控制或估计错误发现率.
作者:王婷;曾平;黄水平;赵华硕 刊期: 2013年第01期
目的:建立高效液相色谱手性固定相法拆分联萘酚对映体的新方法.方法:采用正相高效液相色谱法,CHIRALPAK IC柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)对联苯酚对映体进行拆分,流动相为正己烷异丙醇(6040~955,VV)和正己烷无水乙醇(6040~955,VV);柱温15~35 ℃,流速0.4~1.0 mL/min,紫外检测波长254 nm.根据拆分结果确定佳色谱条件.结果:手性分离的佳色谱条件为正己烷无水乙醇=8020(VV),流速0.8 mL/min,柱温25 ℃,联萘酚对映体在6 min内分离度达到2.43.结论:CHIRALPAK IC柱可以快速、高效地拆分联萘酚对映体,该方法可用于联萘酚的分离及其在不对称合成中光学纯度的快速检测.
作者:马思佳;贾欣;孙慧斌;金建闻;庞丽;陈政;杜斌;张振中 刊期: 2013年第01期
目的:肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在人结直肠癌组织中的定量与分布检测.方法:采用Real-time PCR对30例人结直肠癌手术切除标本及15例内镜取材的正常结直肠标本中TAMs标记物CD68 mRNA表达水平进行定量检测,应用免疫组织化学方法检测标本中TAMs的组织分布.分析结直肠癌手术切除标本中CD68 mRNA的表达与临床病理参数之间的关系.结果:CD68 mRNA在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织(t=2.720,P<0.001).不同临床病理参数的结直肠癌组织中CD68 mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05).TAMs分布于结直肠癌组织间质和肿瘤上皮细胞中.结论:TAMs高水平分布于结直肠癌组织间质和肿瘤上皮细胞中.
作者:袁娜娜;卢高峰;唐芙爱 刊期: 2013年第01期
原发性干燥综合征(primary Sjgren's syndrome,pSS)是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫性疾病,临床表现以肺部受累较为常见,发生率为9%~90%[1].pSS患者早期多无明显症状和体征,晚期可因呼吸衰竭而死亡.作者回顾性分析了150例pSS患者的临床资料,比较有无肺部病变的pSS患者的临床表现,分析有肺部病变pSS患者的临床特征,以期提高对pSS肺部病变的诊治水平.
作者:路武杰;靳建军;王静 刊期: 2013年第01期
目的:观察芦丁锗的抗氧化能力.方法:将芦丁与氧化锗在碱性条件下反应生成芦丁锗,用DPPH自由基清除实验检测芦丁锗的抗氧化能力.结果:芦丁与锗形成芦丁锗配合物后,共轭体系增大,紫外光谱红移,清除自由基能力增强,芦丁锗与芦丁清除DPPH自由基的EC50分别是55.84 mg/L和58.95 mg/L.结论:芦丁锗比芦丁的氧化能力增大,可以用作自由基清除剂.
作者:翟巍;郑赛飞;王素红;翟广玉 刊期: 2013年第01期
急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)临床表现缺乏特异性,误诊率与漏诊率均较高[1].未经治疗的APE病死率为30%,如能早期诊断和充分治疗,病死率可降低至2%~8%[2].APE因栓子的大小、数量、栓塞的部位不同,对患者生命的威胁差异很大,较小的栓子可能无任何临床症状,而较大的栓子可引起呼吸困难、紫绀、昏厥、猝死等.
作者:刘桂芝 刊期: 2013年第01期
血管生成在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生和发展中起非常重要的作用.参与血管发生过程的细胞因子多种多样,血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是其中重要的.
作者:刘少平;钱文军;茅卫东 刊期: 2013年第01期
目的:观察人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化患者的临床疗效.方法:失代偿期肝硬化患者42例,根据Child-Pugh分级均为B或C级,其中行人脐带间充质干细胞治疗22例(观察组),未行干细胞治疗20例(对照组).2组常规治疗相同.分别观察治疗前及治疗后4、8周2组患者血液生化、凝血、临床症状及体征等指标的变化.结果:与治疗前相比,2组治疗后谷丙转氨酶、总胆红素、血氨水平下降,白蛋白合成增加;凝血酶原时间缩短,凝血酶原活动度增加(P均<0.05);2组临床症状和体征均有改善,观察组优于对照组.结论:人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化能改善患者临床症状和检测指标,具有较好的临床疗效和安全性.
作者:朱明慧;刘旭华;韩际奥;杨柯;杨璐;曹巍 刊期: 2013年第01期
目的:探讨家族史、BMI、吸烟、饮酒与贲门癌发病风险及预后的关系.方法:采用问卷调查记录16 605例贲门癌患者和26 053例非癌就诊者的家族史、吸烟、饮酒情况,并测量其身高和体质量.对贲门癌患者中电话或住址明确的2 000例进行电话或入户随访,以死亡或搬迁为随访中止事件.生存分析及死亡风险评估采用Kaplan-Meier法和Cox 模型.结果:家族史阳性明显增加贲门癌的发病风险(P<0.001,OR=2.012,95%CI =1.874~2.160);不同BMI患癌风险有较大差异,低体质量组的患癌风险是正常组的近4倍(OR=3.864,95%CI=3.459~4.317),超重组的患癌风险低于正常组(OR=0.323,95%CI=0.293~0.357);吸烟明显提升贲门癌的发病风险(P<0.001,OR=1.979,95%CI=1.785~2.194),而饮酒对贲门癌发病风险的影响较小(P<0.001,OR=0.749,95%CI=0.678~0.827).家族史阳性患者生存期优于阴性者(P=0.010,RR=0.677,95%CI=0.502~0.912).结论:家族史阳性、吸烟和低体质量均提示较高的贲门癌发病风险,而饮酒的作用较弱;家族史阳性可能是贲门癌患者预后较好的独立影响因素.
作者:杨霞;王建坡;崔纪丽;蔺红丽;侯志超;朱文亮;宋昕;李学民;王心东;李吉林;王立东 刊期: 2013年第01期
肺癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势,其传统的化疗、放疗方法和近年提出的肿瘤细胞免疫治疗、放射免疫治疗均给患者及社会带来了极大的经济负担[1-2].如何实现肺癌的个体化治疗已逐渐成为肿瘤治疗的新方向[3-4].近年来出现的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(如吉非替尼、厄洛替尼)备受关注.
作者:孙丽娟;付群;李宏云;秦超;冯永海 刊期: 2013年第01期
目的:评价血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)水平对冠状动脉粥样硬化严重程度及不良事件风险的预测价值.方法:对45例急性冠脉综合征(ACS)患者和35例稳定性心绞痛(SA)患者行冠脉造影(QCA)检查和IVUS-VH分析,同时行血浆LP-PLA2水平测定.结果:ACS组斑块坏死核心、钙化成分比例较SA组高(t=5.655,10.974,P<0.001).ACS组患者冠状动脉病变处以正性重构为主,SA组以负性重构为主(χ2=40.555,P<0.001).ACS组患者血浆LP-PLA2水平较SA组显著升高(t=2.934,P=0.004).ACS和SA组患者随着Gensini积分增加,血浆LP-PLA2水平均逐渐增高(F=4.227,3.783,P<0.05).ACS患者斑块中坏死核心比例与血浆LP-PLA2水平呈明显正相关(r=0.439,P=0.003).结论:血浆LP-PLA2水平可用以评价斑块性质及冠脉狭窄严重程度.
作者:牛原源;李新华;赵晓燕;武丽娜;吴世陶;吴摇斐;李文龙 刊期: 2013年第01期
气管插管或气管切开术常用于危、急、重患者的紧急抢救,是解除上呼吸道阻塞、防止下呼吸道分泌物潴留、保证正常供氧、维持生命的有效措施.但如果操作或处理不当,可导致术后拔管困难,甚至终生戴管,严重影响患者的生活质量[1].气管切开术后拔管困难发生率为3.3%~19.3%,气管切开术后引起拔管困难的原因约51.3%是气管狭窄[2-3].作者利用介入放射学方法置入可取出内支架治疗21例气管狭窄性拔管困难,顺利拔出气管套管,恢复正常气道通气,明显提高了患者生活质量,报道如下.
作者:李宗明;吴刚;韩新巍;申翔宇;任克伟;路慧彬;马骥;丁鹏绪 刊期: 2013年第01期
目的:检测喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中缺氧诱导因子-1(HIF-1)和人表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白的表达.方法:采用免疫组化法检测78例喉鳞癌组织和23例癌旁正常组织中HIF-1、HER-2蛋白的表达,分析二者与临床病理参数的关系.结果:喉鳞癌组织中HIF-1、HER-2蛋白的阳性表达率分别为71.8%、80.8%,均高于癌旁正常组织(30.4%,34.8%,χ2=12.947和17.990,P均<0.05);HIF-1、HER-2蛋白的表达与组织分化程度、颈淋巴结转移及临床分期均有关(P<0.05).喉鳞癌组织中HIF-1和HER-2蛋白的表达正关联(rP=0.385,P<0 001).结论:HIF-1和HER-2蛋白可能在喉鳞癌的发生、分化和转移中起协同作用.
作者:巴云鹏;张晓;宋瑞彪 刊期: 2013年第01期
症状监测即系统、持续地收集临床明确诊断前能够指示可能疾病暴发或其他公共卫生事件的相关资料,科学分析并合理解释,及时实现预警功能并开展公共卫生调查,落实相关干预措施.该监测不能诊断疾病,但可提供疾病暴发早期迹象的数据资料[1].该研究依托科研院所社会公益研究专项<传染病症状监测预警技术研究>,按国家疾控中心<综合医院传染病相关症候群回顾性调查>方案要求,对河南省内一家县级人民医院所有就诊的可能患有感染性疾病患者的门诊日志进行整理、录入和分析,报道如下.
作者:何景阳;朱谦;窦萍 刊期: 2013年第01期
铬在自然界中分布广泛,六价铬[Cr(Ⅵ)]已被证实具有致癌性,其所致的肺癌是8种职业性肿瘤之一.有研究[1-3]表明,活体细胞内90%的抗坏血酸(ascorbic acid,Asc)参与Cr(Ⅵ)的还原代谢,且是Cr(Ⅵ)的主要还原剂.机体肺细胞内Asc的平均水平为1.3 mmol/L[4],但在体外细胞培养中含量却非常低[5-6],脱氢抗坏血酸(dehydroascorbic acid,DHA)孵育可以使细胞内氧化形成Asc,使其达到或接近机体正常生理浓度[7].Reynolds等[8]发现DHA孵育H460和IMR90细胞90 min后,再用Cr(Ⅵ)染毒细胞,细胞的急性毒性增强.作者用DHA孵育A549细胞后,观察重铬酸钾(K2Cr2O7)对A549细胞的增殖及毒性作用,探讨DHA在K2Cr2O7致A549细胞损伤中的作用.
作者:画宝勇;马丽华;李时恩 刊期: 2013年第01期
脊髓型颈椎病是中老年人的常见病、多发病,社会生活节奏加快、工作方式的变化、电脑的普及应用等原因导致其发病率逐年上升.脊髓型颈椎病的治疗很多学者[1]均认为一经确诊就应考虑手术治疗,有明确的脊髓功能障碍者,不宜观望和消极等待,外科干预是恢复脊髓功能的重要手段.脊髓型颈椎病作为一种慢性退行性的疾病,往往会在患者内心引起严重的不良情绪和心理反应,同时外科手术作为一种能够解除病痛的有效治疗手段,常常也会带来躯体痛苦和心理影响.目前国内对于脊髓型颈椎病患者心理状况的研究较少,尤其是对于其围手术期心理的定量分析研究.该研究通过分析脊髓型颈椎病患者术前心理状况,同时探讨患者围手术期心理干预的效果,为脊髓型颈椎病患者采取相应心理干预措施提供科学依据.
作者:陈岩;李幼辉;陆刚;王利民;牛琪惠;郭慧荣 刊期: 2013年第01期
目的:探讨用乳癌组织中E-cadherin和CD44V6的表达水平预测乳癌腋窝淋巴结转移的价值.方法:用免疫组化法检测98例乳癌(浸润性导管癌)患者手术切除标本中E-cadherin和CD44V6的表达情况,以术后病理检查结果为金标准,根据E-cadherin和CD44V6的表达水平预测腋窝淋巴结转移情况,分析单一因素和联合模式预测的灵敏度、特异度、误诊率和漏诊率等指标.结果:E-cadherin单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为60.71%,漏诊率为39.29%,特异度为92.86%,误诊率为7.14%;CD44V6单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为64 29%,漏诊率为35.71%,特异度为61.91%,误诊率为38.10%;E-cadherin和CD44V6串联模式预测的灵敏度为41.07%,漏诊率为58.93%,特异度为95.24%,误诊率为4.76%;E-cadherin和CD44V6并联模式预测的灵敏度为83.93%,漏诊率为16.07%,特异度为59.52%,误诊率为40.48%.结论:E-cadherin单一因素和E-cadherin与CD44V6串联模式预测乳癌淋巴结转移的特异度高,可为腋窝淋巴结清扫术的取舍和术后治疗方案的选择提供帮助;E-cadherin与CD44V6并联能提高淋巴结转移的检出率.
作者:孟新;张程达;牛雅萱;刘秀玮;王蒙;张卫东 刊期: 2013年第01期
目的:探讨妊娠晚期孕妇抑郁的发生情况及影响因素.方法:采用爱丁堡产后抑郁量表、社会支持评定量表和自编的一般情况调查表对222例妊娠晚期孕妇进行调查.结果:222例妊娠晚期孕妇中66例检出有抑郁心境,检出率为29.7%.中等社会支持、不孕史、性别期望高为危险因素,其OR值(95%CI)分别为6.065(1.157~31.802)、3.356(1.005~11.205)、3.582(1.511~8.488);婆媳关系好、上过孕妇学校、家庭月收入高为保护性因素,其OR值(95%CI)分别为0.138(0.059~0.322)、0.149(0.030~0.737)、0.302(0.103~0.884).结论:妊娠晚期孕妇抑郁比较普遍,要加强对产前抑郁认识,为孕妇提供针对性支持.
作者:利民;周彩峰;周志南;谢俊房 刊期: 2013年第01期
目的:分析西部民族地区高校大学生城镇居民医疗保险(城居医保)的参保情况及其影响因素.方法:采用分层随机整群抽样的方法抽取627名西部民族地区某高校在校大学生作为样本,采用问卷调查方法对城居医保的参保情况进行调查.结果:64.9%的学生不了解城居医保,74.8%的学生认为政府、学校、学生三方共同承担医保费用,大学生城居医保的参保率为38.4%,未参保的主要原因有觉得没有必要参加(28.3%)、参加了其他类型的医疗保险(23.3%)、家庭经济状况(21.4%)等,59.7%的参保大学生对城居医保的满意程度感觉一般,不满意的方面主要有报销比例低、报销程序复杂、卫生服务态度较差、医疗服务不能满足健康需求等.结论:西部民族地区大学生城居医保参保率及利用率偏低;应进一步完善筹资机制,改善医疗服务质量,建立以城居医保为主,其他医疗保险为补充的、全面可持续的大学生医疗保障体系.
作者:郭振友;石武祥;张丽华;杨子靖;孟繁文 刊期: 2013年第01期
目的:探讨AHDC1基因变异及临床病理指标对食管癌高低发区患者生存期的影响,加深对食管癌预后分子机制的认识.方法:采用入户家访、现场问卷普查、电话随访和住院病理核查等方法收集3 478例食管癌患者的临床病理资料和死亡情况;采集每例患者空腹外周静脉血5 mL,采用Taqman基因分型技术检测AHDC1基因rs4908343位点的变异情况.结果:Kaplan-Meier分析显示AHDC1基因AA/AG型患者5 a生存率高于GG型患者,浸润黏膜层患者高于浸润肌层和浆膜层患者,无淋巴结转移患者高于有淋巴结转移患者,早期患者高于中晚期患者,手术治疗的患者高于非手术患者,食管癌高发区患者高于低发区患者(χ2=6.650、52.756、39 087、61 314、75 635、175.205,P均<0.05);Cox回归模型分析提示AHDC1基因GG型[RR(95%CI)=1.197(1.008~1 421)]、中晚期[RR(95%CI)=2.004(1.358~2.956)和3.594(2.392~5.399)]及低发区[RR(95%CI)=2.891(2 243~3.726)]影响食管癌患者的预后(P均<0.05).结论:AHDC1基因型、临床分期及高低发区是影响食管癌预后的重要因素.
作者:李洪雷;范宗民;王伟鹏;周胜理;王亚豪;黄静;董金成;李贝;郭金生;张连群;王立东 刊期: 2013年第01期
目的:探讨Netrin-1在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达情况及其与ESCC发生发展的关系.方法:采用免疫组化和原位杂交法分别检测40例ESCC及40例正常食管黏膜组织中Netrin-1 蛋白和mRNA的表达.结果:ESCC组织中Netrin-1蛋白的阳性表达率为47.5%(19/40),高于正常食管黏膜组织的5.0%(2/40)(χ2=18 660,P<0.001).ESCC组织中Netrin-1 mRNA的阳性表达率为52.5%(21/40),高于正常食管黏膜组织的5 0%(2/40)(χ2=22.029,P<0.001).Netrin-1 mRNA和蛋白的表达与ESCC的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期均有关(χ2mRNA=12.420、12.477、9.528、10.566,χ2蛋白=8.878、8.021、8.338、9.950,P均<0.05).ESCC组织中Netrin-1蛋白与mRNA的表达有关联(rP=0.517,P<0.001).结论:Netrin-1表达与ESCC的发生发展有关,可作为ESCC预后判断的辅助指标.
作者:刘宗文;王文娟;田薇薇;梁冰;杨家梅;刘萍;张钰浩;张艳 刊期: 2013年第01期
目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响.方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞.实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和未转染组.RT-PCR、Western blot法检测转染后各组细胞PTEN基因mRNA和蛋白表达水平.采用CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术和Transwell试验分别检测各组细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡率及侵袭能力.结果:与未转染组比较,沉默1组、沉默2组PTEN mRNA和蛋白表达量均降低,PTEN表达组PTEN mRNA相对表达量升高(F=25.762,P<0.001);与未转染组比较,PTEN表达组细胞软琼脂克隆形成数和穿透细胞数均降低,细胞凋亡率增加(F=50.752、29.981、32.193,P均<0.001).结论:上调PTEN的表达水平可以有效抑制EC9706细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移能力,同时促进细胞凋亡.
作者:黄丽艳;王娜;汤黎明;许燕;黄幼田;杨红艳;董子明 刊期: 2013年第01期
恶性肿瘤导致的死亡人数在发展中国家高居第二位,而在发达国家更是高居榜首,是发达国家的首要死亡原因[1],严重威胁着人类的健康及生存.目前,恶性肿瘤的诊断与治疗水平已有了极大提高,化疗、放疗、手术治疗、生物治疗等综合治疗手段的应用已经极大改善了恶性肿瘤的治疗效果,使肿瘤患者的生存率明显提高.
作者:岳冬丽;韩交玲;关方霞;张毅 刊期: 2013年第01期