利民；周彩峰；周志南；谢俊房
目的:观察芦丁锗的抗氧化能力.方法:将芦丁与氧化锗在碱性条件下反应生成芦丁锗,用DPPH自由基清除实验检测芦丁锗的抗氧化能力.结果:芦丁与锗形成芦丁锗配合物后,共轭体系增大,紫外光谱红移,清除自由基能力增强,芦丁锗与芦丁清除DPPH自由基的EC50分别是55.84 mg/L和58.95 mg/L.结论:芦丁锗比芦丁的氧化能力增大,可以用作自由基清除剂.
作者：翟巍；郑赛飞；王素红；翟广玉 刊期： 2013年第01期
目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白.方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8 C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵表达载体,然后转化酵母菌株Y187和AH109,Western blot法检测诱饵蛋白在转化酵母菌株内的表达.通过自激活实验和毒性实验检测诱饵表达载体是否适合利用酵母双杂交的方法筛选相互作用蛋白.转化诱饵质粒的酵母菌株Y187与AH109(文库菌)杂交,待三叶形合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序.结果:成功构建了pGBKT7-FLA8-C双杂交诱饵载体;经检测该载体的表达产物对Y187和AH109均无自激活和毒性作用,可用于酵母双杂交实验;杂交后筛选得到2个阳性克隆,测序结果显示为鞭毛结合蛋白107(FAP107)和含蛋白结合结构域的预测蛋白.结论:成功筛选得到了与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的蛋白,分别为FAP107和预测蛋白.
作者：李靓；崔柳青；王瑞莉；毛丽红；韩康；柴丹丹；薛乐勋 刊期： 2013年第01期
目的:探讨伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的改变.方法:20只SD大鼠随机分为假手术组与模型组,用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法制作大鼠SAP模型.24 h后,测定2组小肠推进比、结肠蠕动频率、粪便含水量,并进行胰腺病理评分;制作结肠黏膜下神经丛全层标本,运用免疫荧光技术观察黏膜下神经节NOS阳性神经元的变化.结果:与假手术组相比,模型组小肠推进比减少[(41.04±4.36)% vs(14.54±2.30)%,t=15.477,P<0.001],结肠蠕动频率减慢[(13.40±1.35)min-1 vs (4.00±0.93) min-1,t=16.748,P<0.001],粪便含水量降低[(41.56±6.69)% vs(12.98±6.56)%,t=8.869,P<0.001],胰腺病理评分增高[(1.20±0.63) vs (15.75±1.72),t=23.569,P<0.001],但其结肠黏膜下NOS阳性神经元计数无明显改变[(22.49±5.14)% vs(26.36±2.57)%,Z=-1.955,P=0.055].结论:伴胃肠动力障碍的SAP大鼠结肠黏膜下NOS阳性神经元可能未发生明显重塑.
作者：袁园；林中；李小玲 刊期： 2013年第01期
目的:对先天性静止性夜盲症(CSNB)候选基因附近的6个STR基因座在河南汉族人群中的遗传多态性分布进行群体遗传学研究.方法:取100名健康无关个体的河南汉族人群血样,提取DNA,应用PCR结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,对CSNB候选致病基因RHO、PDE6B和GNAT1附近的D3R1、D3R2、D4P1、D4P2、D3G1及D3G2等6个STR基因座进行基因型分析.结果:6个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,杂合度在0.660~0.800,多态性信息含量为0.550~0.730(≥0.5),个体识别率在0.761~0.891(＞0.7),D3R1、D4P2、D3G2 的非父排除率＞0.5.结论:这6个基因座是一组良好的遗传标记,可用于CSNB致病基因的定位;D3R1、D4P2及D3G2在法医学方面具有一定的应用价值.
作者：杨洋；朱运良 刊期： 2013年第01期
目的:观察中国20～60岁男性腰3(L3)椎体松质骨密度和生物力学的变化.方法:取捐献的新鲜中国男性L3椎体32个,年龄20～60岁,分成20～、30～、40～和50～60岁4个年龄组,每组8个椎体.常规操作去除L3椎体周围软组织及附属结构,只保留椎体部分.沿椎体正中矢状面将椎体切成左右两半,均保留上下终板,制成规则试件,一部分行密度测量,另一部分行生物力学实验.结果:①随着年龄的增长,骨胶原交联能力下降,胶原纤丝粗细不等,走向一致,但排列松散、稀疏、紊乱,连接相邻较粗纤丝的更细的胶原纤丝的走向杂乱无章.②与20~岁组比较,30~60岁的L3椎体松质骨表观密度和体积比均逐渐减小(F=8.280、10.600,P均<0.001),但30~60岁各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05).③与20~岁组比较,50~60岁组的L3椎体松质骨弹性模量和极限应力均减小(F=4.330、9.800,P均<0.05).结论:中国20~60岁男性椎体松质骨的密度、极限载荷和弹性模量逐渐减小,骨密度和生物力学随年龄的变化可能是中国男性骨质疏松和骨折危险性增加的根本原因.
作者：刘国民；孔宁；白云深；韩宏志 刊期： 2013年第01期
急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)临床表现缺乏特异性,误诊率与漏诊率均较高[1].未经治疗的APE病死率为30%,如能早期诊断和充分治疗,病死率可降低至2%~8%[2].APE因栓子的大小、数量、栓塞的部位不同,对患者生命的威胁差异很大,较小的栓子可能无任何临床症状,而较大的栓子可引起呼吸困难、紫绀、昏厥、猝死等.
作者：刘桂芝 刊期： 2013年第01期
目的:研究磷酸肌酸钠(PCr)对缺氧窒息幼鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:24只幼鼠随机分为PCr干预组(PCr组)、模型组和正常对照组,每组8只.PCr和模型组幼鼠制作缺氧窒息模型,PCr组幼鼠在制作模型前0.5 h和缺氧窒息后即刻腹腔注射1.4 mg/g的PCr.模型组在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水.正常对照组不作处理.缺氧窒息后6 h,切除各组幼鼠肾脏,采用HE染色法观察肾组织病理形态变化,RT-PCR和免疫组织化学法检测肾组织HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白的表达.结果:模型组幼鼠肾组织可见肾小管上皮细胞肿胀,大量炎性细胞浸润,部分上皮细胞变性坏死,肾小球出现水肿、甚至固缩;PCr组幼鼠肾小管和肾小球受损状况明显减轻.3组幼鼠肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白的表达比较,差异有统计学意义(F=196.805、484.734、90.410和79.329,P均<0.001),PCr和模型组均较正常对照组升高,PCr组较模型组降低(P<0.05).结论:PCr可能通过下调HIF-1α、VEGF的表达减轻肾组织的缺氧性损伤.
作者：刘月梅；陈莹；李永凤；刘春艳 刊期： 2013年第01期
目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体.方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16 L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存.结果:构建的HPV16 L1-pVE5523重组表达载体经PCR鉴定正确;获得的目的基因片段经测序与GenBank公布的HPV16 L1基因序列符合.结论:成功构建了HPV16 L1-pVE5523表达载体.
作者：罗波；段素群；郑小莉；毛樱逾 刊期： 2013年第01期
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化形成及核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-4(IL-4)表达的影响.方法:75只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:BLM组25只,气管注射BLM 5 mg/kg制作肺间质纤维化模型;NAC组25只,于注射BLM前5天开始,每天给予 NAC 250 mg/kg直至取材;对照组25只,气管注射生理盐水.第1、3、7、14、28天处死小鼠,取右肺组织行HE染色和Masson染色,左肺组织测羟脯氨酸(HYP)含量;分别采用ELISA法和SP免疫组化染色检测支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量和灌洗细胞中NF-κB p65的表达.结果:第7、14、28天,BLM组肺组织病理可见实变及胶原沉积,而NAC组明显减轻;3组小鼠肺组织HYP含量差异有统计学意义,NAC组HYP含量低于BLM组(P<0.05);第1、3、7天,3组小鼠支气管肺泡灌洗细胞NF-κB p65的表达水平及支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量差异有统计学意义,且NAC组2指标均低于BLM组(P均<0.05).结论:NAC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致纤维化相关细胞因子IL-4的产生,进而减轻BLM所致小鼠肺间质纤维化.
作者：刘卫青；张晓晔；朱敏；秦秉玉 刊期： 2013年第01期
目的:探讨妊娠晚期孕妇抑郁的发生情况及影响因素.方法:采用爱丁堡产后抑郁量表、社会支持评定量表和自编的一般情况调查表对222例妊娠晚期孕妇进行调查.结果:222例妊娠晚期孕妇中66例检出有抑郁心境,检出率为29.7%.中等社会支持、不孕史、性别期望高为危险因素,其OR值(95%CI)分别为6.065(1.157～31.802)、3.356(1.005～11.205)、3.582(1.511～8.488);婆媳关系好、上过孕妇学校、家庭月收入高为保护性因素,其OR值(95%CI)分别为0.138(0.059～0.322)、0.149(0.030～0.737)、0.302(0.103～0.884).结论:妊娠晚期孕妇抑郁比较普遍,要加强对产前抑郁认识,为孕妇提供针对性支持.
作者：利民；周彩峰；周志南；谢俊房 刊期： 2013年第01期
目的:建立肝癌细胞中C60含量测定的荧光分析法.方法:采用荧光分光光度法,以220 nm为激发波长,在371 nm发射波长处测定肝癌细胞中C60的荧光强度.肝癌细胞经破碎、离心处理后进行测定,以减小蛋白质和酶的干扰.结果:该方法检测肝癌细胞中C60含量的标准曲线为I=2.240 3C+44.188(r=0.995 8,P<0.05),检测范围在1.28～46.08 mg/L,检测限为0.275 mg/L,平均回收率为86.5%,RSD为10.8%.结论:该方法简便、准确、快速,可用于肝癌细胞中C60的定量分析.
作者：姚寒春；孙敏；张振中 刊期： 2013年第01期
目的:探讨胃腺癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及沉默SLP-2对胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响.方法:采用免疫组化法检测45例胃腺癌患者的癌组织、配对癌旁正常胃黏膜组织中SLP-2蛋白的表达情况,分析其与临床病理特征的关系;将SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞,采用MTT法和流式细胞术检测转染后细胞的增殖状况及细胞周期.结果:SLP-2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率(68.9%,31/45)高于癌旁正常组织(26.7%,12/45)(χ2=15.429,P<0.001).胃腺癌组织中SLP-2的表达与淋巴结转移及TNM分期密切相关(校正χ2=4.784,5 318,P均＜0.05).SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞后,细胞增殖活性降低;G1细胞期增多,S期细胞减少(F=14 459,11.825,P均＜0.05).结论:SLP-2参与了胃腺癌的发生、发展.
作者：张剑；李建生；吴敏；赵晔；张自森 刊期： 2013年第01期
目的:评价还原性谷胱甘肽(GSH)对哮喘豚鼠气道上皮细胞的保护作用.方法:采用随机数字表法将48只豚鼠分为对照组、模型组、地塞米松组和GSH组4组,每组各12只动物.后3组利用鸡卵白蛋白致敏并激发大鼠建立哮喘模型,分别给予相应的干预后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学检查;取右肺制作组织匀浆测定GSH;左肺常规制片,行病理观察,免疫组化法测γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果:与模型组相比,GSH组BALF中嗜酸性粒细胞和上皮细胞计数降低(F=69.639和62.360,P<0 001),支气管周围炎性细胞浸润相对较轻,上皮细胞较完整,基底膜破坏相对较轻;肺组织GSH水平接近对照组,高于模型组(F=113.047,P＜0.001),肺组织γ-GCS和TNF-α在支气管壁和支气管旁均有表达,但低于模型组(F=64 444和89.895,P＜0.001).结论:GSH对哮喘豚鼠上皮细胞气道起保护作用.
作者：张铁栓；张国俊；刘颖 刊期： 2013年第01期
目的:介绍微阵列数据的差异表达分析和基于错误发现率的多重假设检验.方法:通过t检验对一个关于前列腺癌的微阵列数据进行基因差异表达分析,采用BH程序进行错误发现率的控制和经验估计.结果:当错误发现率为0.05时通过BH程序得到21个差异表达基因;当以|t|≥3作为拒绝域时,得到105个基因,对应的错误发现率估计值为0.20.结论:相对传统的总体错误率,错误发现率更加适合于微阵列这种高维数据多重比较的错误控制;而且能同时控制或估计错误发现率.
作者：王婷；曾平；黄水平；赵华硕 刊期： 2013年第01期
目的:探讨用乳癌组织中E-cadherin和CD44V6的表达水平预测乳癌腋窝淋巴结转移的价值.方法:用免疫组化法检测98例乳癌(浸润性导管癌)患者手术切除标本中E-cadherin和CD44V6的表达情况,以术后病理检查结果为金标准,根据E-cadherin和CD44V6的表达水平预测腋窝淋巴结转移情况,分析单一因素和联合模式预测的灵敏度、特异度、误诊率和漏诊率等指标.结果:E-cadherin单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为60.71%,漏诊率为39.29%,特异度为92.86%,误诊率为7.14%;CD44V6单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为64 29%,漏诊率为35.71%,特异度为61.91%,误诊率为38.10%;E-cadherin和CD44V6串联模式预测的灵敏度为41.07%,漏诊率为58.93%,特异度为95.24%,误诊率为4.76%;E-cadherin和CD44V6并联模式预测的灵敏度为83.93%,漏诊率为16.07%,特异度为59.52%,误诊率为40.48%.结论:E-cadherin单一因素和E-cadherin与CD44V6串联模式预测乳癌淋巴结转移的特异度高,可为腋窝淋巴结清扫术的取舍和术后治疗方案的选择提供帮助;E-cadherin与CD44V6并联能提高淋巴结转移的检出率.
作者：孟新；张程达；牛雅萱；刘秀玮；王蒙；张卫东 刊期： 2013年第01期
目的:探讨子痫前期(PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及溶血磷脂酸(LPA)受体蛋白Edg4表达的影响.方法:体外培养HUVEC,取对数生长期的细胞分为对照组、正常晚孕组、轻度PE组和重度PE组4组,分别用RPMI 1640培养液、含体积分数20%正常晚期孕妇血浆、20%轻度PE患者血浆和20%重度PE患者血浆的RPMI 1640培养液继续孵育48 h.应用MTT比色法检测细胞增殖能力,应用免疫细胞化学SP法和RT-PCR检测细胞Edg4蛋白及其mRNA表达水平.结果:4组细胞增殖抑制率及Edy4蛋白、mRNA的表达差异均有统计学意义(F=104.200,χ2=32.941,F=5 803.360,P均<0.05).与对照组和正常晚孕组相比,轻度和重度PE组HUVEC增殖抑制率增大,Edg4蛋白及mRNA表达明显升高,且重度PE组较轻度PE组升高更明显(P<0.05).结论:PE患者血浆LPA水平升高可能是引起血管内皮细胞损伤的原因之一.
作者：李留霞；李秀芳；张兰兰；张毅 刊期： 2013年第01期
血管生成在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生和发展中起非常重要的作用.参与血管发生过程的细胞因子多种多样,血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是其中重要的.
作者：刘少平；钱文军；茅卫东 刊期： 2013年第01期
目的:观察纤维介素2(fgl2)基因沉默对心肌微血管内皮细胞(MMVECs)增殖、迁移及血管生成素-1、-2(Ang-1、Ang-2) mRNA表达的影响.方法:制作并包装人fgl2 RNA干扰慢病毒fgl2-RNAi-LV.将细胞分为单纯MMVECs组(对照组)、GFP空载体慢病毒转染组(GFP组)和fgl2-RNAi-LV转染组.稳定转染4 d后,应用实时定量RT-PCR法检测各组fgl2、Ang-1和Ang-2 mRNA的表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移能力.结果:与对照组及GFP组比较,fgl2-RNAi-LV转染组fgl2 mRNA表达明显下调(F=180.301,P<0.001),Ang-1、Ang-2 mRNA的表达明显增加(F=59.450和54.572,P<0.001),MMVECs的增殖能力与迁移能力增强(F=5.341和6.122,P<0.05);对照组与GFP组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:fgl2基因沉默促进MMVECs的增殖、迁移,其分子机制可能与Ang-1、Ang-2 mRNA表达上调有关.
作者：郑振中；王亮；吴友平；殷然；王梦洪；郑泽琪；彭景添；魏云锋 刊期： 2013年第01期
目的:肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在人结直肠癌组织中的定量与分布检测.方法:采用Real-time PCR对30例人结直肠癌手术切除标本及15例内镜取材的正常结直肠标本中TAMs标记物CD68 mRNA表达水平进行定量检测,应用免疫组织化学方法检测标本中TAMs的组织分布.分析结直肠癌手术切除标本中CD68 mRNA的表达与临床病理参数之间的关系.结果:CD68 mRNA在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织(t=2.720,P<0.001).不同临床病理参数的结直肠癌组织中CD68 mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05).TAMs分布于结直肠癌组织间质和肿瘤上皮细胞中.结论:TAMs高水平分布于结直肠癌组织间质和肿瘤上皮细胞中.
作者：袁娜娜；卢高峰；唐芙爱 刊期： 2013年第01期
目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因.方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析.结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库.选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23S rRNA核糖体核糖核酸).结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用.
作者：宋春花；王颖芳；段广才；郗园林 刊期： 2013年第01期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
