学术投稿

15D-PGJ2对小鼠耳蜗基底膜螺旋神经节氧化损伤的防护作用

罗颜;曹忠胜;朱政文;袁辉

关键词:过氧化物酶体增殖物激活受体γ, 螺旋神经节, H2O2, 15d-PGJ2
摘要:目的:研究PPARγ激动剂15D-PGJ2对H2O2诱导的离体小鼠耳蜗螺旋神经节氧化损伤的防护作用。方法分离生后3-5 d的小鼠耳蜗基底膜,培养24 h后不同浓度PPARγ激动剂15D-PGJ2(10μM,30μM)预处理24h,再分别加入含有不同浓度H2O2(3mM,6mM)的培养基培养24小时。采用NF200免疫荧光染色方法行离体耳蜗基底膜螺旋神经纤维免疫荧光染色,在免疫荧光显微镜下观察各组螺旋神经纤维形态以及密度改变。结果3mM H202单独作用于原代培养的基底膜螺旋神经节24h时,螺旋神经纤维呈节断状损失改变,神经纤维逐渐变细局部断裂,染色变淡,神经纤维数量明显降低。随着H202浓度的增加,受损伤的螺旋神经微丝数目呈明显增加趋势。10μM 15D-PGJ2预处理24小时能提高H202损伤后基底膜螺旋神经纤维的数量。30μM 15D-PGJ2预处理组螺旋神经纤维数量明显增加。随着15D-PGJ2浓度提高,其保护作用加强。结论 PPARγ激动剂15D-PGJ2可减轻H2O2诱导的离体小鼠耳蜗基底膜螺旋神经节氧化损伤。
中华耳科学杂志相关文献
  • 《耳组织学》书讯

    《耳组织学》由孙建和、杨仕明教授等撰写,汇集了国内外几十年来的耳科科研成果,共30章,以耳组织学研究为中心,详细阐述了耳各部分组织结构、形态、成分及相应的生理功能,重点介绍了外耳、中耳的鼓室、咽鼓管及耳蜗的组织结构、血管分布和神经支配,耳蜗迷路、螺旋器,耳蜗骨架结构和生物化学成分,外毛细胞动力蛋白、神经递质、膜性结构、液体腔隙及听觉感受机制,前庭迷路、位觉斑、位觉砂、壶腹嵴及前庭血管分布、神经支配、内淋巴管和内淋巴囊的组织结构;并介绍了近年来国内外在耳发育方面的新研究成果及耳组织相关研究技术。《耳组织学》因其精准的描述和丰富的图片,令人耳目一新。本书从细胞、亚微、超微和分子水平阐述耳的各部分结构,使我们在认识和了解耳的组织结构和功能方面积累了丰富的知识,对医学生,研究生,解剖学、组织学和耳鼻咽喉科专业人员具有重要的参考价值。

    作者: 刊期: 2015年第01期

  • 老年性耳聋的防治进展

    目的:老年性耳聋已成为影响老年人生活质量的重要因素,通过本篇综述可以更好地了解老年性耳聋防治进展。方法在Pubmed,Science,Medline,CINAHL数据库搜索老年性耳聋预防、治疗的相关文献并进行系统分析、归纳总结。结果本文共引用了48篇文献资料,发现老年性耳聋在传统防治方法上近10年并无太大进展;而听觉辅助装置,如助听器、人工耳蜗、人工中耳等近10年发展很快并且已广泛应用于临床;干细胞移植技术及基因治疗技术对老年性耳聋的防治的基础研究也取得很大进步。结论虽然目前在老年性耳聋的防治方面已取得很多成就,但仍任重道远;基因治疗及干细胞移植技术在老年性耳聋防治上拥有广阔前景。

    作者:刘宸箐;侯晓丰;翟所强;于宁 刊期: 2015年第01期

  • 茵陈水提物对胆红素诱导神经母瘤细胞凋亡实验研究

    目的:采用分子生物学技术方法探讨胆红素诱导神经母瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡和茵陈水提物(Yincheng extract, YCE)的保护机制。方法噻唑蓝(MTT)观察茵陈提取物对SH-S5Y5细胞增殖影响,Western blotting观察NF-KB蛋白核质分布,免疫荧光显微镜观察JC-1探针标记线粒体电位变化,流式细胞仪Annexin-FITC/PI观察细胞凋亡,荧光定量PCR观察IL-1β、TNF-α变化。结果茵陈提取物浓度的时间依赖性提高胆红素对细胞增殖的抑制作用(p<0.05)。胆红素促进NF-KB核转移,茵陈提取物抑制NF-KB核转移。免疫荧光显微镜观察到胆红素处理组与正常组对比线粒体膜电位明显降低(p<0.05)表现早期凋亡特性。茵陈提取物抑制线粒体膜电位降低(p<0.05)。流式细胞Annexin-FITC/PI结果显示,胆红素诱导细胞凋亡,YCE保护胆红素诱导的凋亡。荧光定量PCR结果显示茵陈提取物抑制NF-KB转录因子调控的炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α基因的表达(p<0.05)。结论胆红素明显诱导SH-S5Y5细胞凋亡,YCE能有效抑制NK-KB激活和抑制线粒体膜电位变化,呈现多靶点抑制胆红素诱导的细胞凋亡。

    作者:张奕;梁勇;李鹏;符秋养;刘钊;李琦;张威;杨衬 刊期: 2015年第01期

  • 1196例突发性聋预后影响因素分析

    目的:探讨突发性聋预后的影响因素,为临床治疗及预后判断提供依据。方法对我科收治的1196例(1247耳)突发性聋患者的临床资料进行回顾性分析,将性别、年龄、耳侧、伴发症状、就诊时间、听力损失程度、伴有的基础疾病各因素进行分组,均与预后行χ2检验或Spearman秩相关,将对预后有影响的的因素引入有序Logistic回归分析,得出影响突发性聋预后的相关因素。结果性别、耳侧、耳鸣、耳闷、高血压病、糖尿病、脑梗,各组内预后差异无统计学意义(p>0.05),不同年龄、就诊时间、听力损失程度,是否伴有眩晕、颈椎病、血脂异常,其预后差异有统计学意义(p<0.05);而年龄、就诊时间、听力损失程度、眩晕与预后有相关性(p<0.05)结论就诊时间越短,听力损失程度越轻,不伴眩晕,突聋预后越好,年龄对预后的影响有明显的阶段性。

    作者:张燕霞;张强伟;任鸿杰;张芩娜 刊期: 2015年第01期

  • 全外显子组测序技术及其在遗传性耳聋研究中的应用

    近年来,全外显子组测序技术迅猛发展,为遗传疾病的基因研究带来了新的机遇,受到遗传学多个领域的重视与应用,其在遗传性耳聋的应用也日益受到关注。该技术先应用靶向富集技术捕获基因组的外显子区域,再通过高通量测序获得编码区序列遗传信息。本文主要介绍全外显子组测序的技术路线及在遗传性耳聋中的应用与研究成果。

    作者:姜海鸥;全庆丽;胡祥上;王义旺 刊期: 2015年第01期

  • 儿童先天性综合征型耳聋听器及相关听力学表现特征暨2015年北京市听力诊断中心第一季度学术研讨会会议纪要

    2015年3月28日由北京协和医院、北京大学第三医院、中国聋儿康复中心、北京同仁医院、解放军总医院和北京儿童医院六家北京市听力诊断中心第一季度学术研讨会在北京儿童医院举行。80人参加了此次会议,在会议中,各位专家、讲者及与会人员就相关内容进行了认真的交流和学习,现将会议主要情况向大家介绍如下。

    作者:杨扬;张杰 刊期: 2015年第01期

  • 水杨酸盐毒性与大鼠耳蜗核炎症因子表达

    目的:本研究采用对大鼠急性及慢性水杨酸盐腹腔注射建立耳鸣动物模型,通过检测大鼠耳蜗核中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),白介素6(IL-6)以及NMDA受体亚基(NR2B)mRNA及其蛋白的表达,了解慢性水杨酸盐诱导的耳鸣动物耳蜗核中是否出现炎症因子表达的改变,以探讨炎症因子在耳鸣中的作用。方法实验动物随机分为4组,按给药时间分别为:正常对照组、急性注射2小时组、慢性注射14天组、停药后恢复14天组。各组大鼠断头处死后迅速分离出耳蜗核;采用SYBR Green实时荧光定量PCR(real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction, real-time RT-PCR)及Western blot(蛋白质印迹)方法,检测各组大鼠耳蜗核TNF-α,IL-1β,IL-6及NR2B基因mRNA及其蛋白的表达,观察各组间的差异。结果(1)在慢性注射14天组,TNF-α和NR2B mRNA及其蛋白表达水平较正常对照组、急性注射2小时组、停药后恢复14天组高,且差异有统计学意义(p<0.05);急性注射2小时组、慢性注射14天组、停药后恢复14天组IL-1βmRNA水平较正常组高,慢性注射14天组、停药后恢复14天组IL-1β蛋白水平较正常组高,差异有统计学意义(p<0.05);IL-6 mRNA及其蛋白表达水平在四组之间无明显差异;(2)TNF-α和NR2B mRNA表达具有明显的正相关(p<0.01);IL-1β和NR2B mRNA表达无明显正相关(p>0.05)。结论(1)长期注射水杨酸盐可能通过上调耳蜗核中TNF-α, IL-1β和NR2B基因表达导致大鼠耳鸣;(2)TNF-α和NR2B可能在水杨酸盐诱发耳鸣的过程中起协同作用。

    作者:胡守森;梅玲;陈建勇;吕静荣;黄治物;吴皓 刊期: 2015年第01期

  • 听神经病实验动物模型

    听神经病的临床听力学特征主要表现在具有正常的耳蜗感受器电位和异常的听性脑干反应波形以及对语言的理解障碍,其病理学改变部位被确定是在周边听觉系统,主要表现在内毛细胞缺损、听神经末梢破坏、听神经纤维脱髓鞘病变、螺旋神经节细胞缺损,或上述一个或几个部位同时发生病变。本文介绍了模拟听神经病的各种实验动物模型,其中包括模拟单纯内毛细胞缺损的Slc19a2基因缺陷小鼠和Ggt1基因缺陷小鼠实验模型;模拟单纯Ⅰ型传入神经末梢损害的谷氨酸盐实验模型;模拟单纯脱髓鞘病变的甘油实验模型;模拟Ⅰ型螺旋神经节及其神经纤维损害的乌苯酐实验模型和免疫性疾病损害模型;模拟单纯神经纤维脱髓鞘病变的胆红素实验模型和髓鞘缺陷仓鼠模型;模拟单纯听神经近端脱髓鞘病变的阿霉素模型和压力夹伤听神经实验模型;以及模拟整个周边听觉系统全程病变的卡铂南美栗鼠实验模型。这些实验模型可以分别用于模拟听神经病的一种或几种临床表现及病变特征的实验研究。

    作者:李鹏;丁大连;曾祥丽;Richard Salvi 刊期: 2015年第01期

  • 低频旋转乳突振动对正常志愿者听力的影响

    目的:我们设计了一种新颖的治疗眩晕低频旋转乳突振动设备,本研究是为了评估该设备对听觉系统的安全性。方法选12名无眩晕主诉的志愿者,男性10例,女性2例,年龄23-25岁。将低频振动投放于右侧乳突,分别于振动前、振动后0.5小时、7天、和1年行纯音听阈检测,分析比较双耳的不同频率气、骨导阈值的变化。结果受试者双耳在低频振动后0.5小时的,右耳(暴露耳)在0.25、0.5、1.0 kHz骨导听阈分别降低了3、5、3 dB,有显著性差异(p<0.05),气导阈移无显著性差异;振动后7天,左耳(对照耳)在0.25、0.5 kHz气导听阈分别提高了3、2 dB,有显著性差异(p<0.05);振动后1年右耳在0.25、0.5、8kHz气导听阈分别降低了6、6、9 dB,在0.25、0.5、1 kHz骨导听阈分别升高了7、3、4 dB,均有显著性差异(p<0.05),左耳在2、4、8 kHz气导听阈分别提高了6、6、10 dB,在0.25、0.5、1、2、4kHz骨导听阈分别升高了7、6、6、8、8 dB,均有显著性差异(p<0.05)。结论振动后0.5小时及7天的听阈变化无规律,且数值小,无临床意义;1年后的左耳听阈升高6-10 dB,右耳低频气导听阈降低,低频骨导听阈提高,不符合振动引起的特异性改变,因此,该治疗眩晕的低频乳突振动设备对听觉系统是安全的。

    作者:彭日顺子;郑贵亮;张青;郑宏良;邹静 刊期: 2015年第01期

  • 扩张法外耳再造术常见并发症原因分析和护理对策

    目的:探讨扩张法外耳再造术常见并发症的原因分析及有效的护理对策。方法对我科室2010年1月到2012年1月723例扩张法外耳再造术患者的护理情况进行回顾性分析,探讨并发症的原因及护理对策。结果723例患者(754例扩张器)完成扩张法外耳再造术,术后42例发生并发症:扩张器血肿、扩张皮瓣破溃、感染、切口裂开、扩张器渗漏、软骨支架外露等。经积极治疗,精心护理,并发症治愈完成了外耳再造40例。经过1个月~3年的随访,再造耳形态良好结论扩张法外耳再造术周期长、步骤多,容易出现并发症,经规范操作、及时发现并发症及时处,能有效提高扩张法外耳再造术成功率。

    作者:牟莉;吴启侠;姜海霞;袁凤华;王雪如;商月;刘佳;阮晶晶;张滨;孙梦瑾;王佳丽 刊期: 2015年第01期

  • 大鼠耳科常规手术径路

    目的:介绍几种在大鼠耳科实验研究中常用的手术方法。方法将大鼠麻醉后,根据不同的实验需求,分别演示经耳后切口的后鼓室径路、经耳上切口的上鼓室径路、经颈部腹侧切口的下鼓室径路、经颈部背侧切口的枕后径路等手术方法。结果通过不同的手术径路可从不同的角度暴露大鼠的中耳和内耳,为引导耳蜗生物电反应的各种耳蜗电极置放、经圆窗膜转染或置药、药物经耳蜗外淋巴腔灌流、耳蜗内淋巴腔灌注、听骨链中断、以及内淋巴囊手术破坏等各种不同实验目的提供佳手术方案。结论根据大鼠颞骨解剖特点,选择不同的中耳内耳手术径路,可以为实现不同的实验目的服务,对实验成功提供技术保障。

    作者:李鹏;丁大连;高可雷;Richard Salvi 刊期: 2015年第01期

  • HO-1在顺铂诱导豚鼠螺旋神经元损伤中的作用

    目的:检测血红素加氧酶-1在豚鼠耳蜗螺旋神经节顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Western Blot技术,观察耳蜗螺旋神经元损伤后HO-1在不同组间的表达变化。将32只健康豚鼠随机分为4组,每组8只。A组对照组:按体重以0.9%生理盐水12ml/kg腹腔注射,早晚各一次,持续3天。B组顺铂组:按体重12mg/kg顺铂腹腔注射(IP),早晚各一次,持续3天。C组阿魏酸(FA)+顺铂组:先150mg/kgFA腹腔注射预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。D组FA+锌原卟啉Ⅸ(ZnppⅨ)+顺铂组:同时给予150mg/kgFA+ZnppⅨ15umol/kg IP预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。采用免疫组织化学及Wstern Blot技术检测不同组间螺旋神经元HO-1蛋白表达变化。结果在不同的分组中,HO-1在耳蜗螺旋神经节中表达量不同。空白组中,螺旋神经节组织存在微弱的HO-1表达,其蛋白表达量为0.48±0.07;A组蛋白表达量为0.81±0.07,B组蛋白表达量为0.9±0.05,C组蛋白表达量为0.61±0.07。4个组两两间差异均有统计学意义(p<0.0001)。结论 HO-1在C组中表达量多,B组次之,D组少,表明HO-1可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。

    作者:邓丹;骆文龙 刊期: 2015年第01期

  • 幼鼠内耳单个器官培养步骤及分类方法

    内耳离体培养在研究内耳细胞功能、内耳组织发育再生、细胞损伤退化等方面具有重要价值。但由于内耳的组织结构微小复杂,其取材和培养具有较大难度,使该技术的普及和应用受到一定限制。本文在简要点评不同内耳离体培养方法优劣的基础上,结合本实验室多年来积累的实践经验,详细介绍了新生大鼠各个内耳终器取材及培养的具体步骤。从解剖迷路到分离终器,从凝胶制备到标本铺放,都有详细的操作指南,本文还针对各环节中的技术动作和关键事项进行了具体探讨并配以指导图例,希望这些内容能够弥补以往文献中抽象简略的条款式步骤所造成的实验困难,为开展内耳器官培养研究的初学者提供一定的帮助。

    作者:于进涛;丁大连;李鹏;高可雷;蒋海燕;孙虹;Richard J. Salvi 刊期: 2015年第01期

  • 大鼠颞骨的特殊解剖结构

    由于大鼠的大部分器官功能与结构及其基因序列已被查清,因此大鼠被广泛应用于各种医学实验研究。尽管有关大鼠颞骨解剖的图谱或文献已有发表,但是对大鼠颞骨表面和内部的结构仍然缺乏足够的了解和正确的认识,为了准确描述大鼠颞骨的解剖结构,补充先前未搞清楚的一些大鼠颞骨解剖盲区,也为了开展实验性大鼠颞骨手术奠定一个坚实的解剖学基础,本文重点介绍了大鼠颞骨的一些特殊解剖结构,以期与同道交流并为初学者提供可参考经验。

    作者:李鹏;高可雷;丁大连;Richard Salvi 刊期: 2015年第01期

  • 大鼠内耳解剖结构及其取材技术

    大鼠被广泛应用于内耳科学研究,其内耳膜迷路取材和观察对评估内耳感觉上皮的组织形态学改变和病理学改变以及分子生物学改变有着不可或缺的重要意义。由于大鼠内耳结构精巧复杂,如何完整取出内耳膜迷路一直是相关研究的难点之一。为促进同道间交流并为初学者提供经验,本文在详细介绍大鼠内耳的解剖结构的同时还点评部分与其他哺乳类实验动物内耳结构的异同之处,并在组织学层面讨论了耳蜗和前庭感受器解剖结构的生理学意义。本文在介绍大鼠内耳解剖结构的基础上,进一步讲解了两种不同的内耳膜迷路取材技术并强调某些关键步骤的操作体会和技巧。

    作者:高可雷;李鹏;蒋海燕;丁大连;孙虹;Richard Salvi 刊期: 2015年第01期

  • 2015第二十四届国际诱发反应测听协作组学术年会会议通知IERASG2015

    由国际诱发反应测听协作组(IERASG)主办、韩国听力学协会和韩国耳鼻咽喉-头颈外科协会承办的IERASG组织第24届学术年会将于2015年5月10-14日在韩国釜山举行,受IERASG主席John D. Durrant教授和第24届学术年会主办单位韩国听力学协会秘书长兼24届学术年会学术委员会主席及大会总秘书长Jun Ho Lee教授委托,希望能够在中国推广和宣传本届学术年会,能够吸引更多中国听力学、耳科及耳内科医学、听力康复等从业人员前去参会,该年会是诱发反应测听领域中世界顶级学术活动。

    作者:中国医师协会耳鼻咽喉科分会;耳内科学组诱发反应测听协作组 刊期: 2015年第01期

  • 水杨酸钠可逆性抑制耳蜗螺旋神经节神经元GABAa受体电流

    目的:探讨水杨酸钠对大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)GABAa受体的作用。方法采用全细胞膜片钳记录技术,观察离体培养大鼠SGN的GABAa受体激活电流的特性及水杨酸钠对其作用特点。结果在SGN上可记录到GABAa受体激动剂GABA诱发的内向电流,该电流呈浓度依赖性且可被荷包牡丹碱所阻断;水杨酸钠作用在SGN上未诱出电流,100μM、500μM的GABA与不同浓度的水杨酸钠(500μM、1000μM、5000μM)分别联合作用时,GABA诱发的电流可被不同程度地抑制,且该抑制作用呈可逆性。结论大鼠SGN上可记录到GABAa受体电流,且水杨酸钠以浓度依赖的方式可逆性抑制GABAa受体电流,抑制作用与GABA浓度有关。

    作者:蔡正;姚晨;陈慧英;黄志辉;覃继新;苏纪平 刊期: 2015年第01期

  • Neurod1与内耳感觉神经及毛细胞发育的相关研究

    本文主要介绍了Neurod1在内耳感觉神经元及毛细胞发育中的相关研究。Neurod1是bHLH转录因子家族中的重要一员,它能促进感觉神经元前体细胞分化为成熟感觉神经元细胞。在内耳中,Neurod1主要表达于感觉神经元细胞,部分感觉上皮也有表达。Neurod1基因条件性敲除小鼠可出现听力及平衡障碍,其内耳感觉神经元细胞大量缺失,同时内耳中的传入及传出神经也存在缺陷。Neurod1基因敲除小鼠螺旋神经节中还可出现异位毛细胞的生长。在内耳发育过程中,Neurod1基因与多种基因相互调控,协同促进内耳发育成熟。如Neurog1、Atoh1、Sox2、Nhlh1等。

    作者:王春梅;卿洁;谢鼎华 刊期: 2015年第01期

  • 哺乳动物耳蜗发育中的细胞周期调控

    哺乳动物内耳细胞发育的分子调控是近期的研究热点。多项研究表明,多种细胞周期蛋白参与了听觉上皮的发育调控,其中包括内耳细胞发育中的增殖、分化等过程。在哺乳动物耳蜗发育的相关研究中,深入认识有关细胞周期调控因子及其作用,以及相关基因的调控机制,均显得极为必要。为此,本文简要综述近年来的国内外相关研究进展。

    作者:钟翠萍;韩宇;黄小段;严星 刊期: 2015年第01期

  • 颞骨朗格汉斯组织细胞增生症临床分析

    目的:分析颞骨朗格汉斯组织细胞增生症(Langerhans cell histiocytosis,LCH)的临床特点、诊断、治疗和预后。方法回顾性收集解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科2009年6月至2014年6月收治并经病理证实的颞骨LCH作为研究对象,按2009年国际组织细胞协会提出的诊断标准、临床分类和疗效评定标准,分析其临床表现、诊断、治疗及预后等临床特点,根据年龄、临床分类分组,比较组间预后差异。结果本组颞骨LCH主要表现为耳漏、耳聋、耳颞部包块、肉芽肿等;16例患者中,幼儿组10例(年龄≤4岁),成人组6例(年龄24岁~68岁),经统计分析组间预后差异无统计学意义。按国际组织细胞协会的分类,多系统组4例,单系统组12例,单系统组预后优于多系统组,差异有统计学意义。结论颞骨LCH临床表现多样,以耳漏和耳聋为常见症状而面神经极少受累,确诊主要靠病理。手术切除是首选治疗方法,颞骨LCH单系统受累患者预后优于多系统受累者。

    作者:李晓红;韩维举 刊期: 2015年第01期

中华耳科学杂志

中华耳科学杂志

主管:解放军总医院

主办:解放军总医院耳鼻咽喉科研究所