学术投稿

4种与胸腺细胞发育相关的小鼠cDNA文库的建立

李燕;王宏;陈慰峰

关键词:胸腺细胞发育, 小鼠, 胸腺基质细胞, 胸腺树突状细胞株, 细胞间相互作用, 活化胸腺细胞, 识别分子, 单抗, 编码基因, 上皮样, 质量, 显示, 文库, 克隆, 抗体, 构建
摘要:为深入研究胸腺细胞与胸腺基质细胞间相互作用的机制,我室制备了一系列抗胸腺基质细胞抗体,发现其中的两株单抗PF18-3和RS21-C6显示出非常有意义的作用.为克隆上述单抗识别分子的编码基因,我们成功地构建了分别来自早期T细胞株C320、ConA活化胸腺细胞、胸腺上皮样细胞株和胸腺树突状细胞株的4个高质量cDNA文库.
北京大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 用生物反应器培养决明发根合成游离蒽醌化合物

    目的:探索批量培养植物发根以生产次生代谢物的方法.方法:用容量5 L的生物反应器培养决明发根,连续观测液体培养基pH值变化,用分光光度计连续测定培养基中游离蒽醌类化合物的含量.结果:在36 d培养期内收获决明发根761 g,发根鲜重增殖了42倍.结论:培养基pH值的高低变化在一定程度上反映了生物反应器中游离蒽醌类化合物的合成情况.

    作者:常振战;果德安;郑俊华;金明善;谢梅英;沈昕;王沙生 刊期: 2000年第02期

  • 颌下腺切除后大鼠睾丸间质细胞的组织化学观察

    目的:探讨表皮生长因子对大鼠睾丸间质细胞合成睾酮的影响.方法:用组织化学和图像分析方法对颌下腺切除后不同时期大鼠睾丸间质细胞中与睾酮合成有关的一些酶和代谢物变化进行了研究.结果:大鼠颌下腺切除3周后,睾丸间质细胞中3β-羟基甾体脱氢酶、非特异性酯酶、琥珀酸脱氢酶的活性和脂类含量无明显变化,乳酸脱氢酶活性明显降低;术后5周,4种酶的活性均明显降低,脂类含量明显增多;术后7周的变化与5周相似,4种酶活性仍维持在较低水平, 脂类含量明显增多.结论:内源性的表皮生长因子缺乏可能导致大鼠睾丸间质细胞睾酮合成功能降低.

    作者:吴春云;李枫;唐军民;毕振伍 刊期: 2000年第02期

  • 针对胃癌多基因变异特性鉴定肿瘤易感基因

    目的:针对胃癌发生、发展过程中多基因变异的特性,鉴定几类与肿瘤相关的基因在胃癌中的改变,进一步探讨其与肿瘤易感性的关系.方法:选择c-met原癌基因、错配修复基因hMLH1、E-cadherin基因以及HLA-Ⅱ类区的(DQA1、DR2、DR3、DR4、DR7、DR9)6个基因位点,采用PCR系列技术对32例肠型胃癌标本和4个胃癌细胞系进行检测以确定上述基因在肠型胃癌中的变异情况.结果:在c-met基因第17、18和19外显子未检测到点突变.对错配修复基因hMLH1的D3S1298和D3S1561两个位点进行微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)和杂和性缺失(loss of heterozygosity, LOH)检测,其中在D3S1298位点检测到6例MSI,2例LOH,D3S1561位点有2例检测到MSI.在E-cadherin基因附近选择两个微卫星位点D16S3083和D16S3095进行MSI和LDH检测,D16S3083位点有4例检测到MSI,2例有LOH,D16S3095位点未检测到MSI和LOH.HLA-Ⅱ类基因区6个基因位点基因型在个体中存在着明显多态性,PCR-SSCP结果显示DR4基因位点有较高频率的变异(9/20),明显高于其它几个基因位点.结论:c-met原癌基因在胃癌中的变化方式不是以点突变为主, hMLH1、E-cadherin基因在肠型胃癌中有明显改变,HLA-Ⅱ类基因区DR4基因的变异可能与胃癌发生的易感性有关.

    作者:郭瑞芳;闫晓红;王文礼;苏秀兰;李文梅;崔建涛;赵敏;吕有勇 刊期: 2000年第02期

  • 幽门螺杆菌的cagA基因和iceA基因与胃十二指肠疾病的关系

    目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)cagA基因及iceA基因的存在情况与胃十二指肠疾病的关系.方法:用PCR方法检测174例临床病人胃粘膜活检标本中Hp的cagA基因及iceA基因的存在情况.结果:cagA的检出率为89.7%(156/174),iceA1的检出率为62.1%(108/174),iceA2的检出率为32.2%(56/174),7例为iceA1 和iceA2皆阳性,3例未能检测到iceA等位基因型.各疾病组间cagA、iceA1、iceA2的检出率无统计学差异.结论:cagA基因及iceA基因不能作为本地区Hp毒力增强的标志.

    作者:张莉;林三仁;金珠;叶嗣懋;丁士刚 刊期: 2000年第02期

  • 电凝法治疗下肢静脉曲张

    目的:为了减少术中出血和术后皮下血肿和瘢痕, 介绍一种治疗下肢静脉曲张的电凝法.方法:下肢静脉曲张295例,共403条肢 体,除腹股沟切口高位结扎大隐静脉及其分支外,曲张静脉及大隐静脉主干均采取电凝法使之闭塞.结果:术后除1例外,均无皮下出血 及血肿.术后住院时间仅2~3 d.结论:电凝法治疗下肢静脉曲张是一种简便、易行的方法,此方法损伤小、出血少,并具有成形效果.

    作者:董国祥 刊期: 2000年第02期

  • 血液透析超滤脱水对急性肾功能衰竭患者近曲小管的影响

    目的:观察急性肾功能衰竭患者行血液透析治疗超滤脱水后,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG)的水平及肾组织活检光镜下近曲小管的组织形态和电镜下超微结构的变化,探讨超滤脱水对近曲小管的影响.方法:6例急性肾功能衰竭患者在血液透析超滤脱水过程中,监测血压、心率及血容量的变化;首次透析前0~1 h、透后即刻、透后第1天清晨、第2天清晨分别留尿检测NAG,其中4例在进行了4~6次透析后进行了肾活检.结果:6例患者透析过程中平均血容量下降(6.9±3.1)%,透中s与透前比较,平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、心率均无显著变化.透后即刻6例患者尿NAG均较透前升高,尚无随时间变化的规律,与血容量的下降率亦无明显相关.肾穿刺活检光镜及电镜下未发现明显肾小管损伤的新鲜病变.结论:急性肾衰患者血液透析过程中,合适的超滤脱水量不会引起血压的显著变化及肾脏的灌注不良,尽管有尿酶NAG的升高,但并未造成肾小管组织学上新的损伤.

    作者:王梅;王静艳;王素霞;左力;王海燕 刊期: 2000年第02期

  • 甲硫氨酸脑啡肽对NIH 3T3细胞和人肝癌Bel 7402细胞生长具有抑制作用

    目的:研究甲硫氨酸脑啡肽对体外培养的NIH3T3 细胞、人肝癌Bel7402细胞增殖的影响.方法:MTT微培养染色法检测不同质量浓度的甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3 细胞、人肝癌Bel7402细胞的作用以及一定质量浓度的纳洛酮、阿片δ受体单克隆抗体、5-氟脲嘧啶对这种作用的影响.结果:(1)10 mg.L-1至80 mg.L-1的甲硫氨酸脑啡肽对这2种细胞均有不同的抑制效应(NIH3T3 32%~66%与Bel7402 36%~64%);(2)纳洛酮能阻断甲硫氨酸脑啡肽对细胞抑制效应,阿片δ受体单克隆抗体没有这种阻断能力;(3)5-氟脲嘧啶(10 mg.L-1)和甲硫氨酸脑啡肽(50 mg.L-1)有协同作用.结论:甲硫氨酸脑啡肽能抑制细胞增殖.提示NIH3T3细胞和Bel 7402细胞胞膜上可能存在阿片ζ受体介导.

    作者:李孟森;李平风;杨非易;葛韵琴;李刚;杜国光 刊期: 2000年第02期

  • 幽门螺杆菌对人和大鼠胃上皮细胞细胞外信号调节激酶活性的影响

    目的:研究幽门螺杆菌提取物对人胃上皮细胞株BGC-823和大鼠胃上皮细胞株RGM1的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)活性的影响.方法:采用蛋白质免疫印迹法测定ERK酶蛋白含量和活性.结果:在各观察时间点,两种细胞ERK酶蛋白含量无明显差异.在无血清存在情况下,幽门螺杆菌提取物使BGC-823 细胞ERK活性持续增加而对RGM1细胞ERK活性几乎没有影响;在有血清存在情况下,Hp提取物使BGC-823细胞ERK活性持续增加而使RGM1细胞ERK活性一过性增加.结论:幽门螺杆菌提取物对胃上皮细胞株BGC-823和RGM1的ERK活性的影响不同.

    作者:陈永昌;张建中;李铁;盛涛;朱文玉 刊期: 2000年第02期

  • 成人急性会厌炎症状影响因素分析

    急性会厌炎是以会厌及杓会厌皱襞为主要病变部位的急性炎症,其病情发展常难以预测,可突发喉梗阻甚至会窒息死亡.因此对该病充分认识与恰当处理可减轻病人痛苦,缩短住院日,降低死亡率.本文回顾性分析了我科自1988年10月至1996年10月收治的100例成人急性会厌炎病例.特别讨论重症急性会厌炎的发生、发展及治疗.

    作者:王全桂;李志光 刊期: 2000年第02期

  • 二苯乙烯氮杂环类化合物的抗癌定量构效关系

    钙调素(calmodulin, CaM)是细胞内重要的钙结合蛋白之一,对调节细胞分裂、增 殖起重要作用.近年来发现钙调素拮抗剂有一定的抗癌活性,其突出特点是:(1)它可 以抑制肿瘤细胞的增殖,可使癌细胞生长阻断在G1-S期转换上[1];(2)它可以使肿瘤 细胞向正常细胞逆转,有报道当用CaM拮抗剂三氟拉嗪处理人胃癌MGC-803细胞时,可使之趋 向于多边形正常上皮细胞形态转化[2];(3)它是一种肿瘤细胞多药耐药性的逆转剂[3].所以钙调素拮抗剂有可能发展成为一种新型的多功能的抗肿瘤药物.

    作者:刘波;朱娜;崔景荣;雷小平 刊期: 2000年第02期

  • 经导管髂内动脉灌注羟基喜树碱的实验研究

    临床上以顺铂+多柔比星方案经导管髂内动脉灌注治疗膀胱癌获得了显著的疗效[1],但顺铂严重的肾毒性使该方案的推广受到一定程度的限制[2].国内外研究发现无肾毒性的抗肿瘤药羟基喜树碱对于体外培养的人体膀胱癌细胞有明显的抑制作用[3].为明确其是否适合经导管髂内动脉灌注方案治疗膀胱癌,我们针对经动、静脉途径给药后羟基喜树碱与膀胱组织的亲和特性进行了动物实验研究.

    作者:王健;蒋学祥;邹英华;吕永兴;彭勃 刊期: 2000年第02期

  • 儿童肾外伤的急症处理

    目的: 提高儿童肾外伤的早期诊断和治疗,保存肾功能.方法:对56例儿童肾外伤进 行回顾性分析(男44例,女12例),其中4例先天性肾盂、输尿管交界处狭窄引起肾积水破 裂;29例合并其他脏器损伤(29/56),包括骨盆骨折6例,尿道损伤4例,大腿皮肤撕脱伤2 例,膀胱损伤2例,脾破裂6例,胰腺损伤2例,胫骨骨折2例,肝损伤5例;休克12例(12/ 5 6);对侧肾积水3例(3/56).全组患儿有肉眼血尿和患肾区触痛.结果:48例患儿保守 治疗,2例行Anderson-Hynes肾盂成形术,2例行肾切除术,4例行肾缝合术.随访 0.5~ 6年,肾功能改善.结论:对肾损伤患儿,一般不需手术治疗,只有发生严重肾损伤,需 行肾探查术或切除术.静脉肾盂造影和CT检查对儿童肾外伤的早期诊断和治疗非常必要.

    作者:王淑芹 刊期: 2000年第02期

  • 急性机械性绞窄性肠梗阻预测模型的建立和检验

    目的:应用多变量分析方法建立急性机械性绞窄性肠梗阻的预测模型.方法:总结3家医院7至10年间收治的急性机械性肠梗阻571例,分别应用logistic回归和分类与回归树(classification and regression tree, CART)方法建立急性绞窄性肠梗阻的预测模型,用交叉应证方法对模型进行检验,并与临床经验的诊断进行比较.结果:腹痛性质、压痛包块、腹水征、肌紧张、既往手术史和类似发作史是建立模型的重要变量,其中前4项与肠绞窄呈正相关,后两项与肠绞窄呈负相关;logistic模型的敏感度为71.8%,特异度为73.1%,CART模型的敏感度为73.1%,特异度为69.8%,两种模型的敏感度明显高于临床医师的经验判断(45.2%).结论:logistic和CART模型对急性机械性绞窄性肠梗阻具有预测作用,对临床诊断有参考意义.

    作者:王立新;史宗道;赵一鸣;汪欣;蒋斌;顾晋;姜可伟;周孝思 刊期: 2000年第02期

  • 氟化钠稳定血标本中乳酸水平的观察

    血乳酸增高常见于组织严重缺氧的各种疾病,在休克的不可逆期及疾病的终末期,血乳酸可达25 mmol.L-1以上.但乳酸测定时,若血乳酸标本不及时处理,血乳酸水平将逐渐增高,乳酸增高的主要原因是糖酵解作用.

    作者:李振荣;张捷 刊期: 2000年第02期

  • 错(牙合)畸形牙弓形态的模拟及比较

    目的:比较不同类型错(牙合)畸形的牙弓形态.方法:采用三维测量仪精密测量正常及4组不同类型错(牙合)(ClassⅠ双颌前突、ClassⅡ1、ClassⅡ2、ClassⅢ)的原始模型,圆锥曲线模拟其牙弓形态.结果:不同类型错(牙合)牙弓形态的差异有显著性,甚至某些分组的上下颌之间牙弓形态的差异也有显著性.结论:临床上弯制弓丝时采用单一的标准牙弓形态是不完全科学的,应考虑错的不同类型及其矫治前不同的牙弓形态以防止畸形复发.

    作者:聂琼;林久祥 刊期: 2000年第02期

  • 电穿孔法对分枝杆菌进行高效基因转化

    目的:探讨卡介苗(Bacille Calmette-Guerin, BCG) 分枝杆菌的电穿孔转化方法及其影响因素.方法:在基因脉冲仪上用电穿孔法对快生长型耻垢分枝杆菌--M. Smegmatis mc2155和BCG电转化大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒ME-65.结果:电穿孔法可以成功地转化两种分枝杆菌,筛选出卡那霉素抗性菌 株.通过对转化子提取质粒进行酶切鉴定和PCR扩增均证明为阳性重组体.转化效率达104/μgDNA.重组质粒可以在分枝杆菌中稳定复制.初步结果表明,质粒DNA的构象和浓度、初始培养物的浓度和活力、电转化参数包括电压、电阻以及转化前对菌体的冰浴时间等都对转化效率有一定的影响.结论: BCG重组疫苗研制中分枝杆菌的基因转化问题的解决为研制能表达分枝杆菌及其它感染性疾病或肿瘤抗原的BCG多价重组疫苗提供了实验基础.

    作者:路艳艳;皇甫永穆 刊期: 2000年第02期

  • 一组癌基因扩增与胃癌生物学行为的相关分析

    目的:探讨癌基因HER2、mdm-2和C-myc扩增与胃癌恶性程度、转移及预后的关系.方法:用差异竞争性多聚酶链反应检测胃癌原发灶、癌旁、转移淋巴结及远处脏器转移癌中HER2、mdm-2和C-myc的基因变异.结果:HER2扩增频率在近端胃癌组中明显高于远端胃癌组(分别是11/13和5/19, P<0.005),侵及浆膜组明显高于未侵及浆膜组(12/18和4/14, P<0.05).mdm-2的扩增频率在转移淋巴结中高于胃原发癌(12/21和12/32,P>0.05),在3例淋巴结微转移灶中发现mdm-2扩增.C-myc在胃癌原发灶及转移淋巴结中的扩增频率分别是6/32和5/21, 2例远处脏器转移癌中有扩增.结论:HER2 、mdm-2和C-myc基因扩增与胃癌的快速生长有关,三者联合检测可能为判断胃癌恶性程度、转移及预后提供有价值的信息.

    作者:时军;崔建涛;吕有勇 刊期: 2000年第02期

  • 前列腺癌药物去势后血清激素水平早期变化

    目的:通过检测前列腺癌患者药物去势早期血清中激素水平,了解与前列腺癌疗效有关的激素变化情况并探讨相关问题;方法:6例前列腺腺癌患者(D期),每月皮下注射LHRH类似物1次,并于第0、1、3、5、7、10天及第2、3、4、6、8、12周分别抽血测定血清中睾酮(testosterone, T)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、雌二醇(estradiol, E2)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平;结果:基础值:T(678.0±24.8) ng.L-1,E2 (27.4±5.4) ng.L-1,LH (13.6±2.8) IU.L-1, FSH (12.9±4.2) IU.L-1;高值:LH(第3天)(32.6±3.4) IU.L-1,T(第3天)(1176.0±35.7) ng.L-1,E2(第5天)( 75.0±8.4) ng.L-1,FSH(第5天)(23.0±4.2) IU.L-1;此后激素水平急速下降,降至基础值以下:LH(第10天)(9.8±3.6) IU.L-1,T(第10天)(231.5±28.6) ng.L-1,E2(第14天)(24.2±6.7) ng.L-1,FSH(第10天)(7.1±3.3 ) IU.L-1;T在第21天左右达到去势水平(38.7±4.6) ng.L-1;结论:药物去势后血清睾酮出现一过性升高,高可达基础值的1.7倍,然后迅速下降,3周左右达到去势水平;雌激素水平在用药后也有一过性升高,但与睾酮升高不同步,提示在治疗初10 d左右应同时加用雌激素或雄激素阻断剂;LH和FSH也出现一过性增高,但FSH升幅不及LH显著.

    作者:姜辉;朱积川;王晓峰;许清泉;白文俊;侯树坤 刊期: 2000年第02期

  • 变应原皮试过敏休克1例

    临床常规对变应性鼻炎进行皮肤试验查找过敏原.和其他药物过敏试验一样,对高度过敏者行该试验时也应提高警惕,以防过敏性休克发生.我科自开展此项检查以来,共进行400例检测,其中有1例发生过敏性休克,现报告如下.

    作者:古雅兰;檀庆兰;李学佩 刊期: 2000年第02期

  • 4种与胸腺细胞发育相关的小鼠cDNA文库的建立

    为深入研究胸腺细胞与胸腺基质细胞间相互作用的机制,我室制备了一系列抗胸腺基质细胞抗体,发现其中的两株单抗PF18-3和RS21-C6显示出非常有意义的作用.为克隆上述单抗识别分子的编码基因,我们成功地构建了分别来自早期T细胞株C320、ConA活化胸腺细胞、胸腺上皮样细胞株和胸腺树突状细胞株的4个高质量cDNA文库.

    作者:李燕;王宏;陈慰峰 刊期: 2000年第02期

北京大学学报(医学版)杂志

北京大学学报(医学版)杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:北京大学