学术投稿

以杆状病毒作为基因治疗载体的一种新方法

陆爱丽;董东生;程康;伏爽;王德炳;侯纬敏

关键词:血小板生成素, 基因治疗, 昆虫病毒, 杆状病毒科, 转染
摘要:目的:报道一种新的基因治疗方法.方法:将人全长血小板生成素(thrombopoietin, TPO)基因克隆至pBacMam-2载体,与BacVector-3000病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,经筛选后获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒,以此为载体,将人TPO基因导入小鼠体内.结果:获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒株,动物实验外周血小板计数升高至正常的2~3倍,RT-PCR结果显示TPO在小鼠组织中得到表达.结论:重组rhTPO昆虫病毒是一种有效的基因治疗载体.
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    目的:分析卵巢成熟性囊性畸胎瘤恶变的临床病理学特征及其与人类乳头瘤病毒感染的关系.方法:回顾性研究了14例卵巢成熟性囊性畸胎瘤恶变临床及病理学特征,并且应用PCR技术对其中7例的瘤体组织及宫颈组织进行了人类乳头瘤病毒检测.结果:14例卵巢畸胎瘤恶变病例发病年龄为30~82岁(平均61.7岁),组织学类型包括鳞状细胞癌(11例)、腺癌、甲状腺乳头状腺癌及甲状腺类癌(各1例).人类乳头瘤病毒检测没有发现阳性病例.结论:卵巢成熟性囊性畸胎瘤恶变是一种少见的病变,发病年龄以绝经后妇女为主,组织学类型以鳞状细胞癌为多见,未发现HPV感染与其的关系.

    作者:沈丹华;张雅贤;薛为成;颜婉嫦 刊期: 1999年第04期

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    非酮症性高渗性昏迷(nonketotic hyperosmolar coma, NKHC)是目前急诊科常见的临床综合征.其病因复杂,治疗难度大,死亡率高.

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  • 照射与非照射方法诱导小鼠皮肤移植耐受

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    作者:苑学礼;宋娴媛;谢蜀生;郭应禄 刊期: 1999年第04期

  • 卵巢上皮癌首次术中残留肿瘤组织大径超过2 cm患者的治疗与预后

    目的:对北京医科大学人民医院1970~1994年首次术中残留肿瘤组织大径超过2 cm的69例卵巢上皮癌患者的治疗与预后进行回顾性分析.方法:69例卵巢上皮癌中浆液性癌54例、粘液性癌10例、内膜样癌4例、透明细胞癌1例,其中Ⅱ期1例、Ⅲ期64例、Ⅳ期4例.全部先行手术,确定组织类型、临床分期.22例行第2次手术;7例行第3次手术 .首次术后67例进行了全身和腹腔化疗,2、3次术后对复发者又进行了全身化疗;对复发者中出现远处转移的9例患者除进行全身化疗,还进行了局部化疗,6例肺转移并出现胸水者加用了胸腔局部化疗, 2例肝转移行肝动脉化疗,2例脑转移者行开颅术后全身化疗.结果:69例中2年存活32例(50.7%);5年存活11例(28.1%);10年存活3例 ,生存率14.8%.6例肺转移合并胸水者,平均延长生存7个月(2~12月); 2例肝转移者分别延长生存9及29个月;2例脑转移者分别延长生存5、16个月.结论:在卵巢癌首次术中应尽可能切除肿瘤组织,对残留肿瘤组织大径超过2 cm患者术后应积极化疗,对复发者应再次手术,化疗可延长患者生命.

    作者:魏丽惠;钱和年;崔恒;富琪;屠铮;虞幸 刊期: 1999年第04期

  • K-ras 基因第1外显子点突变与37例子宫内膜癌临床情况的关系

    目的:研究中国子宫内膜癌患者的瘤组织中K-ras基因第1外显子(含第12,13密码子)的突变率,以及突变与子宫内膜癌临床情况的关系,探讨K-ras基因突变在子宫内膜癌发生中的作用.方法:37例子宫内膜癌的石蜡和部分冰冻标本行PCR扩增K-ras基因第1外显子(含第12,13密码子),经PCR-SSCP银染法检测突变.结果:37例子宫内膜癌患者中有12例存在K-ras基因突变,突变率为32.4%(12/37例).FIGO分期Ⅲ期、组织类型为腺鳞癌的患者突变率较高,在细胞低分化、侵肌1/2以上和绝经后的患者中突变比例也较高.石蜡和冰冻组织标本结果一致.结论:K-ras基因突变率在日、美两国内膜癌患者中不同.该组患者中的突变率与日本相似,高于美国.说明此种差异不仅存在于日本和美国患者之间,可能也存在于亚洲人与北美洲人之间.不同的基因背景,生活条件及内源性和外源性雌激素作用可能对K-ras基因突变率有影响,并引起了不同的临床表现.

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    作者:肖雪;冯海兰;尹亚梅;潘韶霞 刊期: 1999年第04期

  • 放射治疗对肿瘤患者细胞免疫功能的影响

    放射治疗(以下简称放疗)在肿瘤治疗中起着重要作用,约80%肿瘤患者需要放疗,放疗不但对肿瘤有正相的杀伤作用,对机体免疫功能也有负相损伤作用,引起患者免疫功能性细胞的重新调节,本文试图通过对临床经过放疗的肿瘤患者的免疫功能检测,研究放疗对肿瘤患者免疫功能影响.

    作者:蔡勇;张雪梅;杨静贤;肖卫群;刘长青;苏星;张珊文 刊期: 1999年第04期

  • 颞下颌关节紊乱病关节液中转化生长因子β1的检测

    目的:研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)在颞下颌关节紊乱病病因及发病机制中的作用.方法:采用夹心法酶联免疫吸附测定法对31侧颞下颌关节紊乱病患者及7侧健康志愿者的关节液进行了TGF-β1的检测.结果:7侧健康志愿者关节的关节液中未能检测到TGF-β1的存在.结构紊乱类14侧中只有4侧呈阳性结果,而骨关节病类17侧中有16侧检测到TGF-β1的存在,二者的差异具有显著性.健康志愿者的关节液中TGF-β1水平与颞下颌关节紊乱病患者关节液TGF-β1水平差异也呈显著性.结论:TGF-β1在颞下颌关节紊乱病尤其是骨关节病类的病因及发病机制中可能起着重要作用.

    作者:方平科;马绪臣;马大龙;张震康;傅开元 刊期: 1999年第04期

  • 以杆状病毒作为基因治疗载体的一种新方法

    目的:报道一种新的基因治疗方法.方法:将人全长血小板生成素(thrombopoietin, TPO)基因克隆至pBacMam-2载体,与BacVector-3000病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,经筛选后获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒,以此为载体,将人TPO基因导入小鼠体内.结果:获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒株,动物实验外周血小板计数升高至正常的2~3倍,RT-PCR结果显示TPO在小鼠组织中得到表达.结论:重组rhTPO昆虫病毒是一种有效的基因治疗载体.

    作者:陆爱丽;董东生;程康;伏爽;王德炳;侯纬敏 刊期: 1999年第04期

  • 肌肉介导心钠素基因转移对肾性高血压大鼠的作用

    目的:观察肌肉介导心钠素(atrial natriuretic factor, ANF)基因转移对肾性高血压大鼠的治疗作用.方法:利用基因克隆技术克隆和构建了高表达效率的人ANF cDNA基因真核表达质粒,应用肌肉缝线法将质粒转移到大鼠骨骼肌中.结果:ANF基因可以在骨骼肌中表达,并可释放入血,明显降低肾性高血压大鼠的血压,并产生利钠利尿效应,其作用可维持4~6周.结论:应用基因缝线进行肌肉介导的基因转移,可在肌肉内有效表达效应蛋白质,且可释放入血,产生药物治疗效果.

    作者:秦阳军;张继峰;张晨晖;陈光慧;汤健 刊期: 1999年第04期

  • 共刺激分子B7在肾细胞癌的表达及意义

    目的:检测B7基因在肾细胞癌的表达及其与肾细胞癌分级、分期及预后的关系.方法:本文应用RT-PCR和免疫组织化学技术检测了22例肾细胞癌组织B7的表达.结果:RT-PCR 5例阳性,免疫组化4例阳性,B7 mRNA表达与肾癌病理分级、分期无关系;病理切片HE染色显示,B7阳性肿瘤组织内淋巴细胞浸润明显增多.结论:表达B7的肿瘤组织局部抗肿瘤免疫反应增强,提示B7表达可能与肿瘤预后有关.大部分泌尿系肿瘤不表达B7,为转B7基因治疗泌尿系肿瘤提供了理论依据.

    作者:李鸿伟;俞莉章;那彦群 刊期: 1999年第04期

  • 质粒DNA对大鼠骨骼肌肌质网Ca2+转运的影响

    目的:观察DNA与骨骼肌肌质网蛋白结合后对肌质网功能的影响.方法:应用差速离心分离大鼠骨骼肌肌质网,并用45CaCl2作为示踪剂,观察质粒DNA pcDNA3和pcDNA3/ANF对肌质网钙转运功能的影响.结果:两种质粒均可明显增加肌质网Ca2+摄取,呈明显的量效关系,并且也可促进肌质网钙释放.结论:外源质粒DNA可影响肌质网钙转运功能.

    作者:赵文;李载权;姜志胜;汤健;贾弘禔;刘乃奎;唐朝枢 刊期: 1999年第04期

  • 子宫内膜癌多药耐药基因1产物表达及其临床意义

    目的:探讨子宫内膜癌多药耐药(multidrug resistance 1, MDR1)基因1产物P-糖蛋白(P-gp)表达与子宫内膜癌MDR的关系. 方法:用SP免疫组化法测定40例子宫内膜癌,10例子宫内膜增殖症和10例正常子宫内膜组织 P-gp表达,并与PR受体、细胞分级和临床分期等预后因素进行相关分析.结果:[ HTSS (1)上述所有组织均有P-gp表达,其中子宫内膜癌P-gp强阳性表达率较正常子宫内膜组织高,差异有显著性;与子宫内膜增殖症比较,二者差异无显著性.(2)P-gp强阳性表达与子宫内膜癌临床分期、组织病理类型、PR受体以及5年生存率无关; 与细胞分级有关,低分化内膜癌P -gp强阳性较中、高分化内膜癌P-gp强阳性表达高,二者差异有统计学意义.结论:子宫内膜癌患者对抗肿瘤药具有先天性抗药性,P-gp表达是子宫内膜癌化疗疗效不佳的原因之一.

    作者:桂黎明;魏丽惠;富琪;周蓉;屠铮;虞有志;虞幸 刊期: 1999年第04期

  • 超声心动图无创性估测左室舒张压--与心导管相关性的研究

    目的:应用经胸超声心动图技术估测左心室舒张压.方法:对68例病人通过二维及脉冲多普勒记录二尖瓣、肺静脉血流及左心房参数,并与心导管检查相结合,分析超声指标与左心室舒张压的相关性.结果:(1)肺静脉参数比二尖瓣参数与左室舒张压更具相关性;(2)左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure, LVEDP)明显升高时,肺静脉逆流峰速(PA)及PA的速度时间积分(PAVTI)增高,PA的持续时间(PAd)延长,肺静脉与二尖瓣A峰时限(PAd-Ad)延长,左房径(left atrium diameter, LAd)增大,左房射血分数降低;(3)PAd-Ad与LVEDP及LVa(左房收缩时左室压上升值)的相关系数分别为r=0.52, r=0.48, P<0.001;(4)多元回归分析示LVEDP与PAd-Ad, LAd, E/A, PAVTI及S Fract 相关,以此建立判别函数对LVEDP明显升高进行预测的敏感性是72%,特异性是78%.结论:综合肺静脉、二尖瓣血流及左房参数,可提高预测左心室舒张压的可靠性.

    作者:赵焱丽;毛节明;谢道银;王连平 刊期: 1999年第04期

  • 同型半胱氨酸对大鼠心肌细胞钙摄取的影响

    目的:研究同型半胱氨酸(homocysteine, HCY)对心肌细胞钙摄取的影响及其作用机制.方法:采用同位素技术测定培养大鼠心肌细胞钙的摄取,观察不同HCY浓度对培养心肌细胞钙摄取的影响及蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)抑制剂或蛋白磷酸酶抑制剂与HCY同时培养对培养心肌细胞钙摄取的影响.结果:HCY呈浓度依赖性促进心肌细胞钙的摄取,HCY促进心肌细胞钙摄取的作用为PKC抑制剂H7和多粘菌素(polymycin B, PB)所抑制,并且受蛋白磷酸酶抑制剂Okadaic acid 作用而增强.结论:HCY促进心肌细胞钙摄取,可能与PKC所介导的蛋白磷酸化过程有关.

    作者:李载权;马健;张钧华;高炜;周爱儒;唐朝枢;刘乃奎 刊期: 1999年第04期

  • β-catenin基因在肾癌中的表达

    为了探讨肾癌中β-环连蛋白(β-catenin)表达变化的原因,我们应用RT-PCR等方法对26例肾癌患者β-catenin基因(CTNNB1)的表达进行了研究.

    作者:臧桐;庄立岩;张志文;辛殿旗;郭应禄 刊期: 1999年第04期

  • 骨巨细胞瘤中成纤维样基质细胞体外钙化能力的研究

    目的:探讨骨巨细胞瘤的组织来源.方法:体外培养.Gomori法碱性磷酸酶染色,生化检测细胞培养上清液中的碱性磷酸酶含量.免疫组织化学染色检测骨钙素在成纤维样基质细胞中的表达.使用含B-甘油磷酸钠和CaCl2的培养液,观察成纤维样基质细胞体外钙化能力.结果:成纤维样基质细胞中碱性磷酸酶和骨钙素呈阳性表达,在体外具有钙化能力.在细胞培养上清液中有碱性磷酸酶.结论:骨巨细胞瘤中的成纤维样基质细胞具有某些成骨细胞的特点,为进一步探讨其组织来源提供了实验依据.

    作者:赵宁侠;于世凤 刊期: 1999年第04期

  • 低氧性肺动脉高压大鼠肺血管结构及血浆一氧化氮的变化

    目的:探讨一氧化氮(NO)在低氧性肺动脉高压形成中的作用.方法:参与实验全过程的Wistar大鼠共12只(6个对子).以右心导管法测定肺动脉压力,以分光光度法间接测定血浆NO含量,并对大鼠肺组织标本进行显微结构观测和超微结构观察.结果:低氧组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组[(2.75±0.30) kPa vs (2.06±0.14) kPa,P<0.05],其血浆NO间接含量明显低于对照组[(3.5±1.2) μmol.L-1 vs (4.8±0.4) μmol.L-1,P<0.05].光镜下,低氧组大鼠肺小血管肌化程度明显增强,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT)和相对中膜面积(RMA)明显增加[肺中等肌型动脉RMT:(9.94±0.30)% vs (7.70±0.41)%;肺中等肌型动脉RMA:(18.87±0.54)% vs (14.76±0.75)%; 肺小肌型动脉RMT:(15.15±0.21)% vs (10.12±0.60)%;肺小肌型动脉RMA:[(27.99±0.88)% vs (19.23±1.05)%, P均<0.01].电镜下,肺中、小肌型动脉内皮细胞增生、肥厚、肿胀,平滑肌细胞增生、肥厚,并由收缩表型向合成表型转化.结论:低氧后NO水平的降低可能参与了低氧性肺血管结构重建及低氧性肺动脉高压的形成.

    作者:齐建光;杜军保;贾建峰;赵斌;张前进;李万镇 刊期: 1999年第04期

  • 丙型肝炎病毒NS3蛋白真核表达载体的构建及其基因免疫研究

    基因免疫是指将编码特异抗原的目的基因重组表达载体直接接种到宿主组织内,在体内表达基因产物,进而激发宿主产生特异性免疫反应.自1990年首次报道发现基因免疫以来,这一新的免疫技术已经在基础免疫学研究和疫苗研制等许多领域得到广泛应用.对许多疾病(如流感)的基因免疫接种,可以产生抵御再次感染的保护性免疫反应[1].在小鼠体内接种HCV包膜蛋白和核心蛋白的重组质粒可诱导产生特异性体液免疫和细胞免疫反应[2~4].本研究中我们构建了HCV NS3区真核表达载体,对其基因免疫效果进行初步探讨.

    作者:范涛;高建恩;陶其敏 刊期: 1999年第04期

  • 戊型病毒性肝炎心电图和心肌酶的变化及与甲、乙型急性病毒性肝炎的异同

    目的:观察戊型病毒性肝炎心电图和心肌酶的变化并与急性甲、乙型病毒性肝炎心电图和心肌酶变化进行比较.方法:对各型急性病毒性肝炎患者同时进行心电图和心肌酶动态观察.结果:甲、乙、戊型急性病毒性肝炎心电图异常率分别为10/30、6/30、7/30,心肌酶升高率分别为8/30、 3/30、 3/30.结论:戊型急性病毒性肝炎患者心电图和心肌酶的变化及与甲、乙型急性病毒性肝炎心电图和心肌酶的变化基本相似.

    作者:陆海英;田庚善 刊期: 1999年第04期

北京大学学报(医学版)杂志

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