学术投稿

兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立

郭雄明;任文陟;张嘉保

关键词:兔, AFLP, FAFLP, DNA指纹法
摘要:目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨.方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测.结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分.结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测.
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    作者:杨震;王平;陈良安;田庆;梁志欣;范保星 刊期: 2007年第03期

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    目的:利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG224,制备高纯度的GCRG224蛋白.方法:采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG224 cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pET102/D-TOPO中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达融合蛋白,凝胶回收目的蛋白.结果:SDS-PAGE证实在大肠杆菌中高效表达出相对分子量约16.8ku的Thioredoxin/GCRG224融合蛋白.薄层凝胶扫描显示,其表达量占菌体总蛋白质的22.3%.经凝胶回收法得到纯度近100%的蛋白产品.结论:在大肠杆菌中成功表达Thioredoxin/GCRG224融合蛋白,并制备了高纯度的蛋白产品,为后续功能研究及其抗体研制创造了条件.

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    以往对血视神经屏障这一概念存在许多争议.有人认为在血液和视神经之间存在血视神经屏障.也有学者认为视乳头区缺乏血视神经屏障.近运用血脑屏障特异性标记物和内源性毛细血管通透性示踪剂,结合电镜超微结构研究,证实视乳头筛板前区毛细血管缺乏典型的血脑屏障特性.而筛板区、筛板后区毛细血管具有血脑屏障特性.

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    作者:黄晓辉;陈凛;李荣 刊期: 2007年第03期

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    作者:秦宇红;李天德;沈洪 刊期: 2007年第03期

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    作者:汪建新;翁翠莲;李新甫;薛庆亮;高强;郭丽娜 刊期: 2007年第03期

  • 人工关节置换治疗95岁以上患者股骨粗隆间骨折

    目的:报告人工关节置换治疗95岁以上患者股骨粗隆间骨折的疗效.方法:本组10例,男3例,女7例,年龄96.5(95~99)岁行人工关节置换12侧(双侧2例),人工股骨头置换11侧,人工全髋关节置换1侧.每例患者均有5种以上不同程度的并存病,伤前基本都能扶手杖活动,部分生活自理.患者入院后,除1例骨折畸形愈合继发骨关节炎患者外,均在3 d内手术,有2例入院当天急诊手术.手术采用气管插管全麻,多功能监护仪监护.新鲜骨折者术中重建股骨大、小粗隆、骨水泥型双动人工股骨头置换.结果:全部病例均顺利通过手术,7 d内下床者3例,8~14 d下床5例.并发症:一过性精神障碍5例;肺部感染2例;引流管口延迟愈合2例;上述并发症经对症处理均治愈,住院期间死亡1例.随访8例,随访时间5~12个月.3例可自己扶助行器在室内活动;3例在他人保护下扶助行器活动;2例分别于出院后3、5个月因其它疾病死亡.结论:人工关节置换治疗95岁以上患者股骨粗隆间骨折可降低死亡率,改善高龄患者生活质量.

    作者:梁雨田;陶笙;郭义柱;唐佩福;张群;梁向党;崔庚;杨明玉 刊期: 2007年第03期

  • 牛磺酸对实验动物免疫功能及游泳耐力的影响

    目的:研究牛磺酸对机体的免疫功能和运动耐力的影响.方法:以小鼠作为研究对象,用于检测指标的实验动物均分为三组,杏仁露组、杏仁露+牛磺酸组和对照组,采用灌胃方式,14 d后以脾指数、迟发性变态反应、血清溶血素水平、B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖指数和游泳时间作为观察指标.结果:牛磺酸可增强小鼠的SRBC-DTH水平和使脾指数增高,并可显著刺激小鼠脾内B淋巴细胞的增殖,增强其B淋巴细胞的溶血素抗体的分泌,延长小鼠的游泳时间;但对T细胞的增殖无明显作用.结论:该结果表明牛磺酸可调节实验动物的免疫功能和增强其运动耐力.

    作者:曹志然;戎瑞雪;王蓓;赵盛;陈淑兰 刊期: 2007年第03期

  • 十二指肠静脉曲张1例

    1 临床病例 男性患者,22岁.主因排暗红色血便9 d入院.1994年7月29日因反复呕血、黑便7个月诊断为肝前型门脉高压症,行脾切除术.2006年9月24日无诱因排大量暗红色血便伴意识丧失,经输血、补液治疗后清醒,给予双囊三腔管压迫止血无效,2006年10月3日转入我院.

    作者:李明阳;孙刚 刊期: 2007年第03期

  • 放射治疗对小鼠肾癌移植瘤效应的观察

    目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌的抑瘤作用.方法:采用Annexin-Ⅴ-FITC/PI法检测不同剂量放疗后Renca细胞的凋亡率,建立BALB/c小鼠的肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型.采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2、IFN-γ分泌水平.结果:①在一定照射剂量范围内,Renca细胞的凋亡率随剂量的增加而升高.②放疗组小鼠移植瘤生长速度较对照组明显减慢.③放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2及IFN-γ明显较肿瘤对照组升高.结论:放疗组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发的Renca细胞凋亡和小鼠脾细胞分泌IL-2及IFN-γ能力增强有关.

    作者:王瑶;黄建华;吕海燕;郭佳;杨军;马林 刊期: 2007年第03期

  • 阴茎背神经阻滞麻醉包皮环切术的解剖学基础及临床应用

    目的:探讨阴茎背神经阻滞麻醉用于包皮环切术的解剖学基础及其临床应用.方法:甲醛浸泡的男尸9具,包括成年男尸1具,童尸3具,婴幼儿尸3具,新生儿尸1具,胎儿尸1具,阴茎局部解剖显露阴茎背侧的血管及神经组织,利用解剖显微镜、放大镜以及肉眼观察阴茎背神经、血管的分布和走行.阴茎背神经的解剖学基础决定麻醉位点的选择,10例包茎患儿经阴茎背神经两点阻滞麻醉实施包皮环切术.使用VAS(视觉模拟分析)来判断麻醉效果.结果:阴茎背神经自耻骨联合下阴茎根部2点及10点处发出,沿阴茎长轴延伸至阴茎头.阴茎背动脉位于神经的内侧,阴茎背静脉位于阴茎的中央.实施阴茎背神经两点阻滞麻醉后即刻的VAS值为0~4mm(即无痛至轻度疼痛),7~15 min包皮环切术结束后,VAS值为0~1mm.结论:两点法阴茎背神经阻滞麻醉(耻骨联合下阴茎根部2点及10点)遵循了该神经的解剖学基础,麻醉效果肯定.

    作者:肖元宏;刘洲禄;彭少林;王威;韩宇 刊期: 2007年第03期

  • 逐瘀通脉胶囊对脑缺血大鼠脑组织中IL-1β含量的影响

    目的:观察逐瘀通脉胶囊对脑缺血大鼠模型脑组织中白细胞介素-1β(IL-1β)含量的影响,探讨逐瘀通脉胶囊抑制脑缺血损伤级联反应的作用机制.方法:雄性Wistar大鼠,随机分成假手术对照组、脑缺血组、脑缺血+药物组(逐瘀通脉胶囊组).采用大脑中动脉栓塞方法,制作脑缺血模型,在光镜下观察各组大鼠脑组织形态学改变.应用免疫组化方法检测脑组织中IL-1β的含量.结果:脑缺血模型成功后,脑缺血+药物组(逐瘀通脉胶囊组)周围脑组织中IL-1β阳性细胞数,随不同的时间点变化而逐渐增加,但与脑缺血组比较,在不同的时间点均低于脑缺血组,有显著性差异(P<0.05),具有统计学意义.结论:逐瘀通脉胶囊能够抑制IL-1β的合成与分泌,对脑缺血后的级联反应具有抑制作用.

    作者:王丽娜;刘芳;张伟玲;吴玉波;张秋滨 刊期: 2007年第03期

  • 兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立

    目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨.方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测.结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分.结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测.

    作者:郭雄明;任文陟;张嘉保 刊期: 2007年第03期

  • CYP450热点突变基因芯片分型方法的建立

    目的:探索适合多位点同步检测的SNP扩增方案和杂交检测条件,建立芯片杂交信号判读的标准.方法:设计多重扩增的引物和探针;优化荧光标记引物的多重PCR条件.自行制备氨基化片基并点样制片,激光共聚焦扫描后判读检测结果.结果:野生与突变探针杂交信号比值大于4或小于2.5对分型结果的判断有意义,而当信号值在2.5~4范围内应重新检测分析.结论:通过多片段同步扩增和不同位点平衡杂交的实现,本方法适于流行病学调查,体现了寡核苷酸芯片对药物代谢酶多态性基因分型的优势.

    作者:李健;丛玉隆;文思远;陈苏红;乔平;张敏丽;王升启 刊期: 2007年第03期

  • 低氧促进大鼠骨骼肌成肌细胞体外增殖

    目的:探讨轻中度低氧对大鼠骨骼肌成肌细胞(SkMs)增殖的影响.方法:采用血球计数板计数法和流式细胞术观察了3%、10%氧浓度及CoCl2对SkMs数量和增殖指数的影响.结果:低氧组细胞较对照组细胞数量和增殖指数明显增加(P<0.05),10%氧浓度促增殖作用更为明显,CoCl2对大鼠SkMs没有促增殖作用.结论:轻中度低氧可以促进大鼠SkMs的增殖,为体外大量扩增细胞提供了新思路.

    作者:王凡;赵彤;吴海涛;朱玲玲;陈晓萍;刘国树;范明 刊期: 2007年第03期

  • 那格列奈和瑞格列奈治疗2型糖尿病有效性和安全性的临床研究

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    作者:宗文漪;高妍;袁申元;冯凭;罗佐杰;汪寅章;郭晓蕙;柴瑞敏;郑宝忠;秦映芬;潘长玉 刊期: 2007年第03期

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    作者:宁淑娥;潘杰;李维华 刊期: 2007年第03期

解放军医学院学报杂志

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主管:解放军总医院-解放军医学院

主办:解放军总医院-解放军医学院