学术投稿

胃癌相关基因GCRG213的克隆及其在大肠杆菌中的表达

伍银桥;王刚石;王孟薇;吴本俨;尤纬缔;王卫华

关键词:胃肿瘤, 基因, GCRG213, 融合蛋白, 大肠杆菌
摘要:目的:利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG213.方法:采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG213 cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pET102/D-TOPO中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物.结果:高效表达出相对分子量约29.4 ku 的重组融合蛋白.薄层凝胶扫描显示,其表达量占菌体总蛋白质的28.7%.结论:在大肠杆菌中成功表达了Thioredoxin-GCRG213融合蛋白,为后续功能研究、蛋白制备及其抗体研制奠定了基础.
解放军医学院学报杂志相关文献
  • 女性SLE患者血清CA12-5检测的临床意义

    1 对象和方法1.1 对象 61 例我院1996~2002住院患者,均为女性,平均年龄30.32岁(范围11~56岁).诊断符合1982年美国风湿病学会修订的SLE诊断标准.将患者按临床症状及实验室检查评定积分,累计4分或以上者为活动期,小于 4 分者为缓解期.所有患者均排除妇科肿瘤.正常对照组 40 例,均为健康体检女性,平均年龄 31.68 岁(范围15~55岁),年龄与患者组无明显差异.

    作者:王亚强;颜平;王福党 刊期: 2004年第04期

  • 老年胃癌患者预后多因素分析

    目的:研究影响老年胃癌预后的独立因素.方法:采用单因素,Kaplan-meier生存曲线及COX多因素回归分析了 92 例老年胃癌患者临床病理因素及治疗措施对预后的影响.结果:单因素分析表明,老年胃癌预后与血小板计数、体重、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),COX多因素回归分析表明TNM分期、淋巴结转移和血小板增多是影响老年胃癌预后的独立因素,TNM分期Ⅰ期、无淋巴结转移和血小板≤30×1012/L的5年生存率分别为91.2%、92.3%、86.7%,而Ⅳ期、淋巴结转移和血小板>30×1012/L的 5 年生存率分别为41.7%、44.44%、50%(P<0.01),根治性手术仍是影响胃癌预后的重要因素.结论:TNM分期、淋巴结转移和血小板增多是影响老年胃癌预后的独立因素.

    作者:栾复新;王孟薇 刊期: 2004年第04期

  • 低温储存对皮肤组织E-钙黏素和β-连接素表达的影响

    目的:观察黏附分子E-钙黏素(E-cadherin)、β-连接素(β-catenin)在不同温度储存皮肤组织中的分布,以探讨其与皮肤冷冻损伤的关系.方法:用 E-cadherin、β-catenin 抗体对 5 种储存条件下的皮肤作免疫组化染色,用图像分析仪测定表皮组织中的含量.结果: 与新鲜皮片组相比,-196℃ H 抗冻液中储存皮肤组织结构保存较好,E-cadherin、β-catenin 含量变化不明显,而 4 ℃、-20 ℃、-80 ℃储存皮肤组织结构破坏明显,含量亦明显下降. 结论: 皮肤低温储存冷冻损伤与黏附分子破坏有关.

    作者:贾晓明;王翠娥;吴小红;李豫川;曹军田;甘永华;蔡宏 刊期: 2004年第04期

  • 三维适形放疗治疗支气管肉芽肿1例

    1 临床病例男性患者,60 岁,干部.4 年前无明显诱因出现咳嗽、气短,在当地医院行纤维支气管检查其活检病理诊断为:支气管内肉芽肿.多次接受局部肉芽刮除、激光烧灼手术,效果不佳.由于反复发作支气管阻塞、哮喘、肺部感染而赴上海某医院行支气管内放支架,症状缓解,但 3 个月后复发,后到广州某医院行电烧后缓解,3 月后再次出现咳嗽、哮喘、伴有血痰,又先后行电烧两次,效果均不佳.

    作者:何昌秀;王迎选 刊期: 2004年第04期

  • 腹膜后副神经节瘤外科治疗

    目的:探讨腹膜后副神经节瘤的诊断治疗.方法:1992 年 1 月至2001年 1 月经手术治疗腹膜后副神经节瘤 34 例.结果:全部病例均经手术和病理证实.手术中死亡 1 例,手术死亡率为2.6%.大部分病例有症状或肿块,11 例有功能.术前B超、CT、MRI均能准确发现肿瘤.34 例均完整切除肿瘤,其中恶性肿瘤 8 例(20.6%),良性 26 例(79.4%).结论:强调充分的术前准备,术中及术后严密监测,手术切除肿瘤是根本的治疗方法.

    作者:孔庆龙;郑伟;李荣;陈凛 刊期: 2004年第04期

  • 老年肝癌自发性破裂的早期表现与治疗

    目的:总结老年人肝癌破裂出血临床特点、诊断治疗经验.方法:回顾分析 8 例(14 例次)肝癌破裂出血发病临床症状、体征.结果:8 例占同期肝癌的11.42%(8/70),静态发病、腹痛即刻达高峰,转移性下腹疼痛,伴出汗、恶心、呕吐,大便频;腹腔积血;超声提示有腹腔积液.经导管动脉栓塞 ( TAE)出血即刻停止,经手术切除者存活 2 731 d.结论:老年肝癌患者突发腹痛、出汗、便频常是肝癌破裂出血的信号,超声发现新的腹腔积液、或原有积液增多,腹腔穿刺证实腹腔积血.一般治疗补充血容量稳定生命体征;TAE是首选治疗方法,以后择期手术.

    作者:蔡昌豪;吴本俨;吴道宏;王孟薇 刊期: 2004年第04期

  • 不同水平干预对AngⅡ作用心肌细胞活力的影响

    目的:通过使用血管紧张素II(AngII)两种亚型受体AT1-R、AT2-R拮抗剂(Valsartan和CGP42112A)及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)特异阻断剂,观察对心肌细胞活力的影响,探讨从受体和MAPK信号不同水平的阻断是否能有效干预心肌细胞能量代谢,为寻找新的心衰预防与治疗药物提供实验依据.方法:应用MTT比色法测定AngII对培养心肌细胞活力的影响和AngII受体拮抗剂及MAPK抑制剂的干预作用.结果:AngII刺激心肌细胞在10-8~10-5mol/L浓度范围,一定时间内呈浓度依赖性增加心肌细胞活力变化;使用Valsartan、PD98059可有效抑制AngII引起的心肌细胞活力改变;CGP42112A干预后对AngII作用无明显影响.结论:AngII的作用主要通过AT1-R介导;与细胞增殖、分化密切相关的ERK信号介入了心肌细胞能量代谢的过程,这对了解AngII在心功能不全代偿和心力衰竭发生中的作用及临床上探讨细胞信号系统不同层面对心衰进行干预具有重要参考价值.

    作者:李爱萍;陈光辉;李天德;刘航;易军;王莉 刊期: 2004年第04期

  • 雷米普利和氯沙坦对动脉粥样硬化早期形成的影响

    目的:研究雷米普利和氯沙坦对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)早期形成的影响.方法:将 44 只金黄地鼠随机分为 5 组,分别给常规饲料(对照组)、高脂饲料(含10%椰子油和0.05%胆固醇)、高脂饲料加雷米普利(2 mg·kg-1)、高脂饲料加氯沙坦(10 mg·kg-1)和高脂饲料加雷米普利(2 mg·kg-1)与氯沙坦(10 mg·kg-1)处理 12 周,测定血压、血脂、AS斑块面积和肝组织中胆固醇含量的变化.结果:数据表明雷米普利和氯沙坦不论是单独应用还是联合应用均能有效降低平均动脉压(P<0.001)和肝组织中胆固醇的含量, 雷米普利能显著降低血浆中甘油三酯的水平(P<0.05),结果还显示雷米普利与氯沙坦联合应用能提升血浆中高密度脂蛋白(P<0.05),各药物处理组的AS斑块面积有不同程度降低但无统计学意义.结论:雷米普利与氯沙坦具有一定的抑制AS形成作用,其机制可能与降低血压和改变脂代谢有关.

    作者:汪德清;Thomas G Neil;丁保国;田亚平;Tomlinson Brian;James AE Tony 刊期: 2004年第04期

  • 维甲酸、罗钙全和雄激素联合治疗MDS临床观察

    1 对象和方法1.1 对象我院1998~2002 年 2 月住院及门诊就诊的19例患者,均经过临床、血象及骨髓象检查,部分患者行骨髓活检,诊断符合FAB协作组标准.其中RA型 17 例、RAEB型 2 例.患者男性 9 例,女性 10 例,年龄 10~70 岁,中位数年龄 46 岁,病程 6 月~3.5 年.所有病例均有贫血,治疗前85%的病例有输血史;14 例全血细胞减少,3 例贫血合并白细胞减少,2 例贫血合并血小板减少.

    作者:杨清明;马健;王志红;李晓红;彭朝津;李平生 刊期: 2004年第04期

  • 中青年重症阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者的特点分析

    目的:根据多导睡眠仪的监测结果,分析中青年重症阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome ,OSAS)患者的特点.方法:①对经多导睡眠仪确诊的16例重症OSAS患者的多导睡眠仪(polysomnography, PSG)信号进行分析.16 例患者中 35 岁以下的青年人 8 例,40 岁以上的中年人 8 例.②比较两组患者各睡眠时相的呼吸事件所占的百分数.③比较两组患者的体块指数(body mass index,BMI)、紊乱指数(apnea and hypopnea index,AHI)、氧减指数(saturation impair time index ,SIT90-70 )、平均氧饱和度、低氧饱和度、平均呼吸暂停时间及长呼吸暂停时间.结果:①青、中年患者Ⅱ期睡眠中呼吸事件所占的百分数有显著差异.Ⅰ、Ⅲ+Ⅳ期睡眠中呼吸事件所占的百分数青年组均比中年组高,但无统计学意义.②两组患者AHI指数、氧减指数、低氧饱和度、平均氧饱和度均有显著差异.结论:①中青年患者非快动眼睡眠(non -rapid-eye-movement, NREM)中呼吸事件发生的频率存在差异.②青年患者AHI和SIT90-70高于中年患者,低氧饱和度、平均氧饱和度低于中年患者.

    作者:肖红喜;胡敏;温伟生;祝静;杨舸;周宏志 刊期: 2004年第04期

  • 活体下颌骨与HYBRIDⅢ假人头结合模型撞击损伤的有限元研究

    目的:建立活体下颌骨与HYBRIDⅢ假人头结合的人体头部有限元模型.探讨下颌骨正面撞击时响应过程,研究其损伤的生物力学机制.方法:根据人体下颌骨的螺旋CT扫描图像,利用三维重建、图像处理和网格划分技术,建立人体下颌骨的三维有限元模型.根据颞下颌关节的解剖结构及其力学特点,将已建立的下颌骨模型通过关节和经过修改的HYBRIDⅢ假人头部模型相连接,从而建立活体下颌骨与HYBRIDⅢ假人头结合的人体头部有限元模型,对下颌骨进行初步边界约束.模拟计算此模型在下颌骨正中撞击正前方刚体试验.结果:下颌骨正中撞击正前方刚体,下颌骨会以颞下颌关节为轴向后轻微滑动,因而应力上升过程中有一回落,此处为滑动力.应力沿下颌骨外斜线向升支和颞下颌关节传递,髁突及髁突颈部应力有明显集中.骨结构的横截面积陡然减小的区域出现应力集中.在喙突(颞肌)边界约束条件下,喙突应力亦有一定改变.结论:髁突及髁突颈部相对于下颌骨体其骨结构的横截面积陡然减小,同时下颌骨以髁突为轴向后轻微滑动,造成此处较强的应力有集中.从理论上,这可能是下颌骨撞击损伤的生物力学机制之一.由于将活体下颌骨与HYBRIDⅢ假人头结合,有助于对下颌骨进行边界约束.

    作者:张海钟;黄旭明;李师勇;柳春明;马春生;杜汇良;黄世霖 刊期: 2004年第04期

  • 大鼠肾组织PAM染色法改良

    1 材料和方法1.1 大鼠肾组织石蜡切片Wistar大鼠肾组织石蜡块6块,每块切片2张,分别采用常规PAM(periodic acid-silver methenamine)染色和改良法染色.

    作者:尹忠;师锁柱;张雪光;陈香美 刊期: 2004年第04期

  • 磷烧伤的实验研究

    目的:为了探讨磷烧伤过程中形成的磷酸的毒性作用.方法:通过于健康Wistar大鼠背部注射磷酸溶液的方法,确定50%与100%致死量(D50与D100).参考标准 20 mg/cm2磷烧伤动物模型创面的残留磷含量,选取45%磷酸溶液制作磷酸烫伤模型,比较磷酸烫伤组(Ⅰ)、磷烧伤组(Ⅱ)、汽油烧伤组(Ⅲ)和热水烫伤组(Ⅳ)伤后的大鼠死亡率.结果:大鼠D50与D100分别为 110 mg 与 150 mg 磷酸;Ⅰ、Ⅱ组动物死亡率相似(60%以上),显著高于Ⅲ、Ⅳ组的30%.结论:磷烧伤在磷烧伤过程中形成的大量磷酸,是磷烧伤中毒的主要原因.

    作者:李桂珍;阮仕荣;胡安军;卢青军;胡秀莲 刊期: 2004年第04期

  • PET在胃癌诊断中的价值与CT对照研究

    目的:评价术前应用正电子发射型断层扫描(PET)、CT对胃癌的诊断价值.方法:28 例胃癌患者术前行PET全身显像,23 例行CT检查,将以上结果和病理分期对照.结果:PET和CT对胃癌局部病灶的显示率分别为92.9%和82.6%, PET对淋巴结的检测准确性(87.5%)高于CT(61.9%).PET检测出 8 例远处转移患者,CT漏诊 3 例.结论:PET相对于CT能更准确检测原发和复发胃癌淋巴结及远处转移灶,对胃癌的临床诊断有较高的应用价值.

    作者:陈凛;卫勃;邵明哲;田嘉禾;姚树林;孔庆龙;夏绍友;李荣 刊期: 2004年第04期

  • 人OPG与肿瘤坏死因子族蛋白的结合研究

    目的:检测 OPG 与 TNF 家族蛋白的结合及探索它们相互作用机制. 方法:免疫沉淀分析加Western印迹,酶联免疫吸附测定方法,偶联剂交叉链接,表面胞质团共振. 结果:OPG 与 RANKL, TRAIL 和 TNFα用不同方法检测均有结合.OPG 与 TNFα的结合由 Biacore 进一步证实, 在pH为 7.4, 温度在20℃时, 其离解系数为 7.0 nmol/L, 同OPG-TRAIL亲和力.偶联剂交叉链接显示 OPG-TNFα结合的比例为1∶ 1.结论:TNFα能与OPG结合, 物理条件影响其结合.

    作者:步荣发;Christopher W Borysenko;李亚男;Sara E Kalla;Harry C Blair 刊期: 2004年第04期

  • 应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究

    目的:建立一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法,以减少对胰岛细胞的损伤,获得高质量的胰岛组织.方法:选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(histopaque-1077)纯化胰岛细胞.结果:可收获大量的高纯度胰岛,纯度达95%以上,体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好,将胰岛移植于糖尿病小鼠体内可短期纠正其高血糖状态.结论:应用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法.

    作者:罗芸;薛毅珑;李崇辉 刊期: 2004年第04期

  • 烧伤治疗措施改进及疗效分析

    目的:探讨治疗措施的进步对患者治疗效果的影响.方法:1997年 3 月至2003年 2 月入院的烧伤患者 2 721 例.其中烧伤面积≥30%者 248 例,<30%者 2 473 例.分析患者平均住院时间、治愈率、半数致死面积(LA50)、Ⅲ度LA50.改进的治疗措施主要针对危重烧伤患者并发症的预防和治疗.结果:平均住院天数 25 d,总的治愈率达99.71%,LA50 为98.97%,Ⅲ度烧伤面积LA50为89.32%,较我所既往报道有进一步提高.结论:治疗手段的改进完善了危重烧伤患者并发症的预防和治疗,进而提高了烧伤治疗水平.

    作者:杨红明;柴家科;梁黎明;李利根;高建川;吴炎秋 刊期: 2004年第04期

  • 老年肺癌患者肺叶切除术前、术后肺功能比较

    目的:研究老年肺癌患者肺部手术前、后的肺功能变化.方法:对76例老年肺癌患者在肺部手术前、后进行肺功能测定,肺功能检查按常规方法进行.结果:一侧全肺切除肺活量(VC)下降47.17%;用力肺活量(FVC)下降44.77%;第一秒用力呼气容积(FEV1)下降39.68%;肺叶切除后VC、FVC、FEV1值平均下降约20%左右,一侧全肺切除后VC、FVC、FEV1下降值较肺叶切除有显著意义下降.结论:肺叶切除后VC、FVC和FEV1值平均下降值约20%,一侧全肺切除后VC、FVC和FEV1下降值较肺叶切除显著.

    作者:王德龙;刘长庭 刊期: 2004年第04期

  • 肺血栓栓塞消融手术的配合

    1 工作原理 TZ血栓消融器 (ATD) 是一种经皮放置的旋转式血栓消融导管, 由压缩空气或氮气提供能量. 驱动轴贯穿导管与封装与导管远端的叶轮相连, 使叶轮以 100 000 r/min 的速度旋转,产生一个环流漩涡,以便将血栓托到导管近端端头,在端头上产生了一个负压区, 该负压区会将血栓吸入到封装的叶轮中.

    作者:林汉英;唐文捷;王广义 刊期: 2004年第04期

  • 适用于虚拟手术的鼻腔模型三维重建

    目的:通过三维重建技术,构建出适用于虚拟手术中实时复杂交互的鼻腔模型.方法:①对高分辨率的人体切片数据进行图像分割和边缘提取;②采用面绘制技术对提取的轮廓序列进行三维数据生成;③对重建的模型根据实时交互的需要进行优化.结果:重建出的鼻腔模型在具有较少的面片数的同时保持了较高的几何分辨率和光滑性,读入虚拟手术系统后,在实时交互下能表现出较好的解剖精确性和实时绘制的真实感.结论:基于人体切片数据重建出的模型可较好地适用于虚拟手术中的复杂交互操作.

    作者:谭珂;郭光友;潘新华;王大君 刊期: 2004年第04期

解放军医学院学报杂志

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主管:解放军总医院-解放军医学院

主办:解放军总医院-解放军医学院