首都医科大学宣武医院神经生物学研究室
目的 观察脑室内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠黑质多巴胺能神经元的长时程毒性作用,探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用.方法 健康雄性SD大鼠48只,采用抽签法将大鼠随机分为LPS实验组和0.9%氯化钠注射液(NS)对照组,经大鼠右侧脑室一次性注射LPS 20;μL(1.25 g/L)或0.9%氯化钠注射液20μL.给药后2周、4周、12周、24周用酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学染色观察黑质多巴胺能神经元的变化,免疫组化及酶联免疫吸附实验(enzyme immunoassay system,ELISA)检测黑质纹状体系统BDNF表达的变化.结果 ①TH免疫组织化学染色结果显示,大鼠黑质多巴胺能神经元数目在LPS给药后期减少,24周时LPS实验组大鼠黑质TH阳性神经元数量为NS对照组的75.4%(P<0.01);②BDNF免疫组化结果显示,LPS实验组大鼠4周时黑质部位BDNF阳性细胞的表达较NS对照组高,而到12周和24周时其表达比NS对照组明显下降.ELISA检测结果显示,LPS实验组大鼠4周时黑质纹状体内BDNF表达是NS对照组的186.3%(P<0.01),而12周和24周时分别是NS对照组的42.3%(P<0.01)和61.0%(P<0.05).结论 脑室内注射LPS可导致大鼠黑质多巴胺能神经元变性,这一病变过程呈慢性迟发性.该模型大鼠黑质TH阳性神经元变性丢失前即出现黑质纹状体系统BDNF表达减少,提示BDNF表达减少可能是黑质多巴胺能神经元变性丢失的原因之一.
作者：赵咏梅；吕风月；徐群渊 刊期： 2009年第05期
卡氏肺孢子虫性肺炎(pneumocystiscariniipneumo-nia,PCP)是免疫功能受损患者严重的和常见的致死性条件感染性寄生虫病,已成为AIDS病患者的特征性疾病[1].PCP肺炎患者病情严重,缺乏相应的临床体征,如不及时治疗,其病死率高达20%～60%.
作者：谷俊朝；刘建；俞巍 刊期： 2009年第05期
目的 探讨纹状体神经肽强啡肽(dynorphin,DYN)、脑啡肽1(enkephalin l,ENKl)、P物质(substance P,SP)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)和多巴胺受体l和2(dopamine receptor 1 and 2,D1 r和D2r)是否受分子时钟机制的调控,它们的节律变化是否与时钟基因有关.方法 分别对刚出生(产后3 d)、断奶前(产后14 d)和成年(产后60 d)小鼠纹状体中上述基因24小时的mRNA用实时定量RT-PCR的检测方法观察其节律变化.结果 产后3 d小鼠纹状体内没有观察到相关基因的节律性变化;产后14 d时,纹状体内D2r、DYN和ENK1基因随时间呈现节律变化,出生后60 d时,纹状体内除D1r外,所有基因表达均随时间昼夜波动.结论 小鼠纹状体中神经递质相关基因的昼夜表达变化规律是在出生后逐渐形成的.
作者：丁晖；蔡彦宁；王玲玲；柴玉鑫；张燕莉；陈彪 刊期： 2009年第05期
目的 观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)降低脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)所致小鼠缺血性脑损伤的作用,探讨在HPC脑保护作用中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)的变化.方法 60只健康雄性BALB/c小鼠(18 g～22 g,8周～10周)分为:常氧假手术组(H0 sham),常氧缺血组(H0),HPC假手术组(H4 sham)和HPC缺血组(H4),每组15只.运用整体低氧预适应模型和脑中动脉梗死缺血模型,结合神经行为学评价、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、免疫组织化学和蛋白印迹(Western blotting)技术,观察HPC对小鼠脑缺血损伤的影响以及皮质组织内p38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量的变化.结果 研究发现,HPC可明显改善小鼠缺血后神经行为学表现,减小MCAO导致的鼠脑梗死面积,减轻半影区神经元的丢失,降低缺血区水肿率和密度值;与H0假手术组相比,缺血组小鼠皮质半影区p38 MAPK磷酸化水平显著增高;与常氧缺血组小鼠皮质半影区相比,HPC缺血组小鼠皮质半影区内p38 MAPK磷酸化水平增高更加明显.结论 p38MAPK信号转导通路可能参与了HPC对小鼠局灶性缺血脑的保护作用.
作者：刘旭；封素娟；张彩艳；卜祥宁；张楠；闫睿；王芊芸；李俊发 刊期： 2009年第05期
[编者按]胡大一,主任医师、教授、博士生导师,卫生部健康教育首席专家,教育部重点学科心血管内科负责人,国家突出贡献专家、享受政府特殊津贴.现任北京大学人民医院心脏中心主任、心血管病研究所所长、首都医科大学心血管病研究所所长、复旦大学公共卫生学院临床流行病学研究中心主任.
作者： 刊期： 2009年第05期
目的 探讨酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因上游调控区的功能.方法 PCR法扩增人TH基因上游片段,插入pGL3-Basic质粒,构建一个表达荧光素酶的报告基因.将报告基因瞬间转染MES23.5、293及Cos7细胞,用Dual Luciferase Assay法测定目的 DNA片段的启动子活性.结果 测序结果表明,分离的DNA片段长度为520 bp,与人TH基因-493/+27区一致.与pGL3-Basic质粒相比较,构建的报告基因在3种细胞中显著表达(P<0.01).结论 TH基因-493/+27区具有明显的启动子活性,构建的报告基因有助于研究TH基因表达的调节.
作者：李尧华；叶懿文；高楠；李昕；于顺；杨慧；陈彪 刊期： 2009年第05期
目的 对高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)失败的HIV/AIDS患者,进行回顾性基因型耐药检测,了解HAART过程中HIV-1耐药位点的产生,分析基因型耐药检测在HAART过程中的必要性及指导意义.方法 采用Versant HIV-1 RNA 3.0检测病毒载鼍;采用TriTEST CD4 FITC/CD8 PE/CD3 PerCP Reagent检测CD4+T淋巴细胞计数;采用Tmgene HIV-1 Genotyping Kit和OpenGene DNA系统进行基因型耐药检测;用Blast等分子生物学软件进行HIV-1亚型分析.结果 20例患者中,17例保存有治疗前的血浆标本,其中1例在治疗前即存在非核苷类逆转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)耐药相关突变.20例患者均进行了治疗后耐药检测,其中3例未检出耐药相关突变.其他17例检出耐药相关突变,其中13例出现NNRTIs耐药相关突变;突变位点主要为K103N、Y188L、Y181C、V106M和G190A;11例显示有核苷类逆转录酶抑制剂(nucleoside/nucleotide reverse transcriptase inhibitors,NRTIs)耐药相关突变,突变位点主要为M184V、T/215Y/F、D67N、K70R以及K219E/Q;3例出现蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PIs)耐药相关突变,其中主突变为M46I/L、V82WA,而次级突变中以M36I、L63P出现的频率高.20例患者中B亚型9例(45%,9/20),CRF01_AE重组亚利5例(25%,5/20),CRF07_BC重组亚型5例(25%,5/20),CRF06_CPX1重组亚型1例(5%,1/20).结论 对治疗失败的患者进行基因型耐药检测可以帮助医生判断HAART失败的原因,并指导治疗方案的优化;亚型分析显示HIV-1病毒亚型的流行与感染途径之间存在明显的联系.
作者：魏飞力；吴昊；张彤；李庆；刘志英；王蕊；焦艳梅；陈德喜 刊期： 2009年第05期
目的 探讨黏附分子在阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)关系中的作用.方法 应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测31例OSAHS合并冠心病患者(OSAHS+CHD组)、31例单纯OSAHS患者(OSAHS组)和28例健康志愿者(正常对照组)血清中细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的含量.结果 OSAHS+CHD组和OSAHS组血清中ICAM-1高于正常对照组(P<0.05);OSAHS组血清VCAM-1与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而OSAHS+CHD组血清VCAM-1与正常对照组比较差异无统计学意义.OSAHS患者的ICAM-1与睡眠呼吸暂停低通气指数呈显著正相关(r=0.544,P<0.01),ICAM-1、VCAM-1均与体质量指数呈正相关(r=0.280,P<0.05).结论 血清ICAM-1水平增高是OSAHS患者发生冠心病的重要危险因子之一.
作者：樊昕；魏欣；杜凤和 刊期： 2009年第05期
目的 探讨HIV-1慢性感染者(病程12个月)CD8+T淋巴细胞及其各亚群:纯真CD8+T细胞(TN)、中心记忆CD8+T细胞(TCM)、效应记忆CD8+T细胞(TEM)和效应记忆CD8+T细胞RA(TEMRA)的增生、消亡情况.方法 观察23例未经抗病毒治疗、病程大于12个月的HIV-1感染者以及16例健康对照者,通过流式细胞仪分析,根据CIM5RO,CD27表达情况,CD8+T细胞分为TN(CD45R0-CD27+)、TCM(CD45R0+CD27+)、TEM(CD45RO+CD27-)和TEMRA(CD45R0-CD27-).以Ki-67抗原的表达代表细胞的增生,Annexin V检测阳性代表细胞的消亡,比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+T细胞及其各亚群增生消亡的情况;并把HIV-1慢件感染者按CD4+T细胞计数200个/mm3以及350个/mm3为观察点分成3组,比较3组间的CD8+细胞及其各亚群增生消亡的情况.结果 健康组(n=16)CD8+细胞各亚群检出率为TN 34.92%±12.68%、TCM25.44%±10.36%、TEM 14.64%±10.58%和TEMRA25.00%±12.59%;与之相比HIV-1慢性感染组(n=23)检出率为TN17.14%±8.03%(t=5.368,P=0.000)、TCM 31.40%±14.02%(t=-1.448,P=0.156)、TEM 20.17%±13.17%(t=-1.393,P=0.172)和TEMRA31.48%±15.16%(t=-1.405,P=0.168).CD8+T细胞增生率为:健康组0.15%±0.09%,感染组1.33%±0.90%(x=4.655,P=0.000);健康组消亡率为8.74%±4.73%,感染组24.08%±13.72%(x=-4.169,P=0.000).HIV-1慢性感染者按CD4+T细胞计数分成CD4≤200个/mm3组(A组,n=5)、CD4计数200～350个/mm3组(B组,n=12)和CD4 ≥350个/mm3组(C组,n=6),3组间各亚群组成比中TN所占比例在A组明显减少,而CD8+T细胞各哑群的增生率、消亡率在3组间差异没有统计学意义.结论 ①与健康对照组相比,HIV-1慢性感染者CD8+T细胞及其各亚群消亡率增加,增生率也相应大幅增加,细胞进入高速更新的状态;②HIV-1慢性感染者CD8+TN亚群的检出率明显下降,并在CD4≤200个/mm3组降至低,CD8+TM资源随病情进展不断耗竭.
作者：任翊；刘意；李海英；张彤；吴昊；陈新月 刊期： 2009年第05期
目的 探讨生理状态和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,杀菌渗透增强蛋白(murine bactericidal/permeability-increasing protein,muBPI)在小鼠组织器官和细胞中的表达情况.方法 ①实验小鼠分为3组,即LPS未刺激组、LPS刺激组和阴性对照组;②制备小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、睾丸、小肠组织切片和骨髓细胞、腹腔灌洗细胞、骨髓源树突状细胞涂片;③采用免疫组化方法检测muBPI在上述组织器官和细胞中的表达.结果 ①LPS未刺激组小鼠睾丸、小肠、肾脏组织切片和骨髓细胞、腹腔灌洗细胞、骨髓源树突状细胞涂片均呈黄色着染;LPS刺激后上述组织切片和细胞涂片呈棕黄或深棕色着染;阴性对照组呈现非特异微弱黄色背景着染;②LPS未刺激组小鼠肺、肝组织切片呈微弱黄色背景着染;LPS刺激后上述组织切片呈棕黄色着染;阴性对照呈微弱黄色背景着染;③其余器官组织切片在LPS刺激或未刺激组均呈现与阴性对照组相同的非特异微弱黄色背景着染.结论 ①生理状态下,小鼠睾丸、小肠、肾脏、骨髓细胞、腹腔灌洗细胞和骨髓源树突状细胞可组成性表达BPI蛋白,LPS刺激后BPI蛋白表达量显著增高;②生理状态下,小鼠肺、肝组织不表达BPI蛋白,LPS可诱导上述组织表达BPI蛋白;③其余组织器官在生理状态下和LPS刺激后均不表达BPI蛋白.
作者：郭玲；许晴；吕喆；刘振龙；范宜强；王炜；孔庆利；安云庆 刊期： 2009年第05期
目的 探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者区别于正常人的血清蛋白质差异表达.方法 选择原发性PD患者35例和正常人35例,用弱阳离子交换(weak cationic exchange,WCX)磁珠捕获血清蛋白质组分,用MALDI-TOF-MS(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometer)检测各样品的蛋白质质谱,统计学筛选差异表达分子,监督神经网络算法建立区分模型,盲法验证.结果 在PD组和对照组之间筛杏到8个差异分子(非参数检验Z值范围为-4.458～-3.059,P<0.05).以监督神经网络算法建市区分模型,其判断正确率为81.4%.对25例新样本的盲法验证结果显示,模型的正确率为76.0%.结论 PD患者血清蛋白质的表达谱有别于正常人.蛋白质组学数据结合生物信息学方法可能有助于PD的诊断.
作者：李尧华；叶懿文；李昕；于顺；杨慧；陈彪 刊期： 2009年第05期
目的 比较七氟烷和丙泊酚分别复合瑞芬太尼靶控输注行静吸复合麻醉和全静脉麻醉用于支撑喉镜术的效果.方法 ASA Ⅰ-Ⅱ级择期行支撑喉镜下声带息肉切除术患者40例,用随机数字表分为丙泊酚组(P组)和七氟烷组(S组),每组20例.麻醉诱导:静脉注射咪唑安定1.0～1.5 mg,瑞芬太尼4μg/L血浆靶控输注,P组丙泊酚3 mg/L血浆靶控输注,S组静脉注射丙泊酚1.5～2.0 mg/kg,2组均用琥珀胆碱1.5～2.0 mg/kg静脉注射后行气管插管控制呼吸.麻醉维持:S组吸入2%～4%七氟烷,使呼气末七氟烷浓度达到1MAC,同时靶控输注瑞芬太尼;P组仍为血浆靶控输注瑞芬太尼和丙泊酚.2组均静脉滴注琥珀胆碱,吸人65%氧化亚氮.随手术进程调整麻醉深度.记录患者不同时间点的平均动脉压(MAP)及心率(HR),记录苏醒时间、拔管时间及不良反应发生率.结果 2组患者的HR在诱导后1 min(T1)较术前(T0)明显降低(P<0.05)、MAP在诱导后1 min (T1)及插管后1 min(T2)较术前(T0)明显降低(P<0.05);P组患者在诱导后1 min(T1)、插管后1 min(T2)及术毕(T7)的HR明显低于S组(P<0.05);S组苏醒时间、拔管时间明显短于P组(P<0.05).结论 2种麻醉方法均可用于支撑喉镜术,应用七氟烷麻醉的患者诱导时血流动力学更加平稳、苏醒更快.
作者：李丽；杨文婧；李天佐 刊期： 2009年第05期
目的 探讨老年2型糖尿病患者合并代谢综合征(MS)的临床特征及对糖尿病大血管病变及肾脏损害的影响.方法 选择2型糖尿病患者257例,分为合并代谢综合征组(MS组,120例)和非代谢综合征组(非MS组,137例),对比分析2组患者的临床资料及冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)、下肢动脉硬化、脑梗死的发病情况.结果 代谢综合征组患者的体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗值、胆固醇、三酰甘油均较非代谢综合征组明显增高,MS组B细胞功能较非Ms组差,差异有统计学意义(P<0.01);代谢综合征组患者尿酸及尿白蛋白排泄率较非代谢综合征组均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),代谢综合征组冠心病的发病比例显著高于非代谢综合征组(P<0.05).结论 与非代谢综合征组的老年2型糖尿病患者比较,合并代谢综合征患者的β细胞功能较差、胰岛素抵抗及肾脏损害较重,冠心病发生率更高.
作者：洪旭；马清；陈海平；于恒池；尹洁；郝雅斌 刊期： 2009年第05期
帕金森病是常见的与衰老有关的神经系统变性疾病,临床上以静止振震颤、运动迟缓、僵直、姿势不稳定为主要症状,其主要病理变化为黑质多巴胺能神经元的大量丢失,在尚存活的神经元中存在嗜酸性细胞内包涵体--Lewy body.
作者：首都医科大学宣武医院神经生物学研究室 刊期： 2009年第05期
目的 了解北京市部分男男同性恋(men who have sex with men,MSM)人群HIV-1的分子流行情况,监测该地区人群HIV毒株的新流行情况.方法 提取17例男男同性恋者HIV-1抗体阳性样本全血基因组DNA,直接进行巢式PCR扩增HIVenv基因C2-V5区及gag基因P17-P24区,对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析,确定基因亚型.结果 17例患者中,共存在CRF01-AE、B亚型和CRF07-BC 3种亚型,其中CRF01-AE 9例(52.94%),B亚型5例(29.41%),CRF07-BC 3例(17.65%).结论 小样本量的流行病学调查显示,北京地区部分男男同性恋人群中主要存在CRF01-AE、B和CRF07-BC 3种亚型;CRF01-AE已取代B亚型而成为北京市MSM人群中HIV主要流行亚型,CRF07-BC重组亚型在北京市MSM人群中增长迅速.
作者：刘志英；李海英；张彤；黄晓婕；魏飞力；徐萌；焦艳梅；徐小宁；陈德喜；吴昊 刊期： 2009年第05期
目的 对AJu-LTR PCR检测整合型HIV-1的实验方法进行优化.方法 收集20例HIV-1感染患者及10例健康对照者的抗凝血标本,纯化CD4+T细胞并提取DNA,根据整合型HIV-1 DNA的特点设计引物,首轮PCR 5'端引物来自于人类保守的Alu序列,3'端引物来自于HIV-1 L11R U5区序列,扩增片段包含了整合位点上游的人类基因组DNA序列和整合的HIV-1 LTR的序列.第二轮引物针对HIV-1 LTR U3区的序列.在首轮PCR基础上,PCR产物稀释后进行第二轮PCR.结果 经过优化的Alu-LYR PCR,20例HIV病人全部检测到整合的HIV-1.结论 经优化后,Ah-LTR PCR检测整合型HIV-1的实验方法的灵敏度明显提高.
作者：李娟；焦艳梅；画伟；张彤；吴昊；高艳青 刊期： 2009年第05期
目的 研究帕金森病(PD)患者血清对外源性α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响,初步分析血清促进α-Syn寡聚体形成的机制.方法 将重组人α-Syn加入PD患者和对照组血清中,37℃振荡孵育,用免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体的形成情况,用ELISA分析α-Syn寡聚体的形成量.结果 α-Syn在血清中振荡孵育后主要形成二聚体和十四聚体.与对照组血清相比较,PD患者血清具有促进α-Syn寡聚体形成的作用.在血清中加入还原性谷胱甘肽可明显减弱PD患者血清促进α-Syn寡聚体形成的作用.结论 PD患者血清促进α-Syn寡聚体的形成,其机制可能与α-Syn的氧化修饰有关.
作者：李雁；殷娟娟；李昕；吴燕川；刘光伟；李尧华；于顺 刊期： 2009年第05期
目的 研究人α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)对神经元突起牛长的作用.方法 原代培养新生大鼠大脑皮质神经元,细胞外添加α-Syn蛋白,测定不同时间神经元突起的长度;观察添加不同浓度的α-Syn蛋白后神经元突起的生长情况.结果 α-Syn处理组神经元突起的平均长度在培养1 h、2 h和4 h时均明显大于对照组,α-Syn的这一作用可被其特异性单克隆抗体阻断;向培养基中添加不同浓度的α-Syn后,神经元突起的长度随α-Syn浓度的增加而增加.结论 α-Syn具有促进神经元突起生长的作用,并且呈明显的量-效关系.
作者：刘光伟；王鹏；李尧华；李昕；何欣；于顺 刊期： 2009年第05期
目的 探讨地塞米松对哮喘模型大鼠治疗的不同阶段(撤停前、撤停中、撤停后)的阴虚与阳虚证证候属性.方法 建立大鼠慢性哮喘模型,腹腔注射地塞米松模拟激素干预过程,观察哮喘大鼠在激素干预不同阶段的症状表现,包括体质量、腋温、爪温、爪r值、尾r值.结果 激素干预组于激素撤停前阶段首先表现为阴虚证,在阴虚证的基础上又出现阳虚证的表现;撤停中及撤停后阶段基本符合阳虚证的辩证特点.结论 激素干预哮喘模型在激素应用的不同阶段具有不同的证候特点.
作者：刘仁慧；赵晖；穆阳；王培；杨婧；张翼；刘苏；王秀娟 刊期： 2009年第05期
免疫重建炎性综合征发生于艾滋病患者应用高效抗反转录病毒疗法后的免疫重建过程中,本文分别对其概念、发病机制、诊断、临床表现和治疗等方面进行了综述.综合文献资料认为在病人的诊治上重要的一点是提高对免疫重建炎性综合征的诊断和鉴别,以免延误病情.免疫重建的特征之一是恢复了针对机会性感染致病原的免疫反应,因此除非有可能威胁患者生命或导致高致残率外,都应继续应用高效抗反转录病毒疗法.
作者：吴巍；黄世敬；王阶 刊期： 2009年第05期
首都医科大学学报杂志
主管:北京市教育委员会
主办：首都医科大学
