学术投稿

缺血再灌注小鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换电流的改变

张知非;侯晓丽;崔茜;臧益民;王军

关键词:Na+/Ca2+交换电流, 缺血再灌注, 心室肌细胞, 膜片钳
摘要:目的 观察缺血再灌注损伤对小鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白电流的直接影响,探讨缺血再灌注损伤中Ca2+超载的机制.方法 采用全细胞打孔膜片钳技术, 观察缺血再灌注损伤对急性分离的小鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白电流(INa/Ca)的影响.细胞外灌流代谢抑制剂(5 mmol/L氰化钠和10 mmol/L 脱氧葡萄糖)模拟化学性心肌细胞缺血状态.结果 缺血8 min明显抑制了小鼠心室肌细胞钠钙交换蛋白内向和外向电流[在-100 mV,电流从(-0.04±0.01)nA减小到 0 nA ;在+50 mV,电流从(0.25±0.08)nA减小到(0.11±0.03)nA].而随后的再灌注则导致钠钙交换蛋白电流迅速而明显的增大,尤以外向电流增大更加显著[在+50 mV,电流从(0.25±0.08)nA增大到(0.49±0.12)nA].结论 缺血再灌注直接影响小鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白的功能及状态,使Na+/Ca2+交换蛋白的反向转运功能明显增强,这种改变可能是导致缺血再灌注损伤中Ca2+超载的关键因素.
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    目的 观察缺血再灌注损伤对小鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白电流的直接影响,探讨缺血再灌注损伤中Ca2+超载的机制.方法 采用全细胞打孔膜片钳技术, 观察缺血再灌注损伤对急性分离的小鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白电流(INa/Ca)的影响.细胞外灌流代谢抑制剂(5 mmol/L氰化钠和10 mmol/L 脱氧葡萄糖)模拟化学性心肌细胞缺血状态.结果 缺血8 min明显抑制了小鼠心室肌细胞钠钙交换蛋白内向和外向电流[在-100 mV,电流从(-0.04±0.01)nA减小到 0 nA ;在+50 mV,电流从(0.25±0.08)nA减小到(0.11±0.03)nA].而随后的再灌注则导致钠钙交换蛋白电流迅速而明显的增大,尤以外向电流增大更加显著[在+50 mV,电流从(0.25±0.08)nA增大到(0.49±0.12)nA].结论 缺血再灌注直接影响小鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换蛋白的功能及状态,使Na+/Ca2+交换蛋白的反向转运功能明显增强,这种改变可能是导致缺血再灌注损伤中Ca2+超载的关键因素.

    作者:张知非;侯晓丽;崔茜;臧益民;王军 刊期: 2006年第06期

  • 消痔灵双层4步注射治疗完全性直肠脱垂临床疗效评价

    目的 客观评价消痔灵双层4步注射治疗完全性直肠脱垂的临床疗效与安全性.方法 将36例患者随机分为A、B 2组,A组20例为高浓度组;B组16例为低浓度组,采取双层4步注射疗法.以直肠脱垂长度、排粪造影结果作为疗效性指标,患者一般情况、全血细胞分析、肝肾功能检查作为安全性指标.并进行3个月1次的随访.结果 A组临床控制19例,有效1例;B组临床控制16例.两组近期疗效未见显著差异,均未见严重肝肾功能损害,经3至36个月随访,复发7例.复发病例中有4例经再次注射而达到临床控制,1例行开腹作肠管切除术,1例行开腹直肠悬吊固定术,1例行PPH手术.结论 该疗法痛苦小,疗效较好,操作简便,费用低廉,且可重复使用,可作为完全性直肠脱垂的首选治疗方法,适宜于基层医院推广应用.

    作者:李华山;李国栋;李东冰;王春晓;王晓锋;景建中;寇玉明;张建华;胡占岭 刊期: 2006年第06期

  • 梅毒患者外周血单核细胞体外诱导树突状细胞的形态学与功能研究

    目的 探讨梅毒患者外周血单个核细胞(PBMC)向树突状细胞(DC)分化的形态学与功能特征.方法 分别分离健康人(10例,对照组)和梅毒患者(10例,实验组)外周血中PBMC,与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)共同培养.用倒置显微镜观察细胞形态,用流式细胞仪测定细胞表型,同时进行混合淋巴细胞反应(MLR),观察其刺激同种异体未致敏T淋巴细胞增殖的能力.结果 梅毒患者PBMC经GM-CSF与IL-4诱导获得的细胞具有典型的DC形态特征.细胞表面的CD80、CD83、CD86及HLA-DR的表达率分别为77.92%、39.34%、75.78%和95.42%.与对照组相比,CD80表达明显增高(P<0.05)、CD86表达明显降低(P<0.05),CD83及HLA-DR的表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).MLR结果显示,梅毒患者PBMC诱导分化的DC可以刺激同种异体T细胞增殖.结论 经GM-CSF、IL-4刺激后,梅毒患者的PBMC可以诱导分化为具有典型形态特征及抗原呈递功能的DC,DC表型的特征可能影响梅毒患者的细胞免疫状态.

    作者:张海萍;连石;朱威 刊期: 2006年第06期

  • 体外诱导培养人树突状细胞的生物学特性及其神经免疫调节功能分析

    目的 研究人表皮树突状细胞在皮肤的免疫反应和疾病发生发展过程中的作用.方法 取胎儿脐带血分选单核细胞,在体外用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)进行定向诱导分化,培养树突状细胞(MoDC),观察培养细胞在不同阶段的变化;用流式细胞仪分析诱导分化细胞的细胞膜表面标志性抗原HLA-DR、CD1a和CD80的表达;对诱导分化的细胞分别给予脂多糖体(LPS),LPS和降钙素相关基因肽(CGRF)和单纯CGRF刺激,检测不同处理后MoDC表达IL-12 mRNA变化.结果 脐带血干细胞在体外诱导分化培养第7天呈现明显树突状分支,并可检测到HLA-DR和CD1a分子的表达.结论 CGRP对MoDC表达IL-12 mRNA的调节有双重性.

    作者:何焱玲;齐焕英;徐俊珠;董洁 刊期: 2006年第06期

  • 孕激素对围绝经期综合征的治疗作用

    目的 探讨应用孕激素治疗围绝经期妇女月经紊乱及围绝经期综合征的作用.方法 选择有围绝经症状伴子宫异常出血或月经周期改变的122例围绝经期妇女作为研究对象.分为2组:A组(54例):月经过多、异常出血,经诊刮术病理证实为子宫内膜异常增生的功能性子宫出血患者.给予炔诺酮6~8 mg/d×22 d×2个周期,之后于月经第16天服用安宫黄体酮6~8 mg/d×10 d×1个周期.B组(68例):月经周期改变,稀发或不规律,月经量正常、轻度增加或减少者.月经周期第16天给予安宫黄体酮6~8 mg/d×10 d×3个周期.用药前后2组计有85例进行了促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)的测定,有围绝经综合征的94例进行Greene评分.2组用药前后均用B超测量子宫内膜厚度.结果 2组用药前及用药后比较,FSH值明显下降(P<0.01),E2值明显上升(P<0.05),差异均有统计学意义.而LH值虽有下降,但差异无统计学意义(P>0.05).122例患者中有围绝经期症状的计有94例(77%).用孕激素治疗3月后Greene评分明显降低,用药前后比较差异有统计学意义(P<0.01).2组之间FSH、LH、E2、Greene评分值比较差异均无统计学意义(P>0.05).2组用药后子宫内膜厚度均明显变薄(P<0.01).结论 围绝经期妇女应用孕激素治疗能够有效缓解围绝经症状,调整月经周期,并对子宫内膜产生保护作用.

    作者:赖爱鸾;张李松;姜桂英;金巧凤;孙艳格 刊期: 2006年第06期

  • 在沉默中爆发——2006年诺贝尔生理学或医学奖简介

    2006年10月2日,瑞典卡罗琳斯卡研究院宣布,2006年诺贝尔生理学或医学奖颁发给2位美国科学家:Andrew Z. Fire和Craig C. Mello,以表彰其在RNA干扰双链RNA引发的基因沉默领域所做出的杰出贡献.本文从2位获奖科学家的简介,主要贡献,RNA干扰发现的意义以及该奖项存在的遗憾等方面进行综述.

    作者:张婷;王晓民 刊期: 2006年第06期

  • 层流低切应力刺激对人脐静脉血管内皮细胞Toll样受体mRNA表达的影响

    目的 用RT-PCR和Northern杂交技术,评价层流低切应力刺激对人脐静脉血管内皮细胞Toll样受体(TLR-4)信号受体表达的影响.方法 用未刺激和经42 μN/cm2处理1 h的脐静脉血管内皮细胞提取总RNA,采用RT-PCR和Northern杂交技术观察切应力刺激1 h人脐静脉血管内皮细胞TLR-2和TLR-4 mRNA的表达情况.结果 RT-PCR和Northern杂交均显示,层流低切应力刺激1 h后血管内皮细胞TLR-4表达增强,TLR-2几乎无变化.结论 层流低切应力可引起人脐静脉内皮细胞TLR-4 mRNA表达增加,提示炎症信号受体TLR-4可能介导层流切应力诱导的血管内皮细胞某些效应基因的表达.

    作者:梁峰;胡大一;吴明营;李田昌;史旭波;汤楚中;王伯瑶;黄宁;吴琦;刘旭晴 刊期: 2006年第06期

  • 中药保守治疗子宫肌瘤40例

    子宫肌瘤为妇科常见的良性肿瘤之一,发病机制不完全清楚,治疗方法很多,例如激素治疗、手术治疗、介入治疗和中药治疗[1]等,为了找到一种不良反应少、快捷的保守治疗方法.我们用中药红金消结胶囊保守治疗子宫肌瘤40例,现报告如下.

    作者:熊晓燕;郑萍;姚秀英 刊期: 2006年第06期

  • 雄激素源性秃发526例生活质量调查与分析

    目的 探讨影响雄激素源性秃发患者生活质量的相关因素,包括年龄、性别、病程、家族史和临床分级.方法 采用Hamilton-Norwood hair loss Scale以及Ludwig Scale分级法,对526例门诊病例进行雄激素源性秃发的分级评估,并用皮肤病生活质量指数(dermatology life quality Index,DLQI)调查问卷进行生活质量调查.每项指标分没有、轻微、严重、非常严重4个档次,分别赋值0 、1 、2 、3,得出生活质量分值.结果 年龄和临床分级的分组DLQI差异有统计学意义(P<0.05),而性别、病程、家族史等因素的分组DLQI差异无统计学意义 (P>0.05).结论 对雄激素源性秃发患者而言,年龄越轻、病情越轻则对生活质量影响越大,应当及早给予积极治疗,并加大宣传以提高患者对疾病的认识.

    作者:徐峰;杨勤萍;周静;盛友渔;王侠生 刊期: 2006年第06期

  • PAPⅠ基因在实验性急性胰腺炎模型大鼠中的表达

    目的 研究胰腺炎相关蛋白Ⅰ(pancreatitis associated proteinⅠ,PAPⅠ)在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)动物模型胰腺组织中的表达特点及意义.方法 大鼠轻型胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)和重型胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型由逆行胰胆管注射1.5%及3.0%牛磺胆酸钠制备.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织PAPⅠ mRNA的表达,同时检测胰腺组织病理改变、湿/干质量比率、腹水量以评价炎症程度.结果 PAPⅠ mRNA在正常对照组无表达, AP造模后6 h即明显升高, 24 h达高峰,48 h迅速下降.SAP组PAPⅠ mRNA表达水平在6、24、48、72 h各时间点均显著高于MAP组(P<0.05).同时PAPⅠ mRNA表达与胰腺组织病理、胰腺组织湿/干质量比率和腹水量相关.结论 PAPⅠ mRNA的表达变化与AP时胰腺组织损伤程度相关.

    作者:梁阔;李非;张淑文;崔叶青;刘爽;孙海晨 刊期: 2006年第06期

  • 大蒜素对肺癌A549细胞株β防御素表达的影响

    目的 β防御素(human beta defensins,HBD)是人体产生的天然抗菌物质,本研究通过大蒜素对β防御素表达的影响,探讨大蒜素的免疫调节机制.方法 采用含大蒜素的细胞培养液处理人肺癌A549细胞,观察其对A549细胞不同种类β防御素mRNA表达水平的影响.结果 含5 μg/mL的大蒜素细胞培养液可使HBD3 mRNA的表达上调,而对HBD2和HBD1的表达无显著影响.结论 大蒜素可以使A549细胞HBD3的表达升高,这可能是大蒜素参与人体免疫调节,提高机体免疫力的机制之一.大蒜素处理后HBD3升高而HBD2水平,不变进一步证实了HBD3与HBD2的诱导表达途径不同.

    作者:司利钢;刘玺诚;李文梅;吕有勇;饶小春;马渝燕 刊期: 2006年第06期

  • 小干扰RNA对肝星状细胞基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的抑制作用

    目的 观察化学合成的小干扰RNA(siRNA)转染大鼠肝星状细胞(HSC)T6后不同时间点,对基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的抑制作用,同时筛选高效的siRNA片断.方法 对大鼠TIMP-1 mRNA nt161~181、nt 190~208、nt208~226、nt 226~244 及nt 445~463化学合成的5对siRNA和1对荧光标记的非特异siRNA(与TIMP-1 mRNA 无同源性的FITC标记的21nt siRNA),在阳离子脂质体的介导下将不同浓度的非特异siRNA转染至大鼠HSC-T6后,用流式细胞仪确定佳转染浓度.提取转染50 nmol/L siRNAs后24 h,48 h和72 h细胞蛋白,用 Western blot 检测TIMP-1蛋白质表达,筛选出抑制效率高的siRNA,同时确定siRNA转染细胞后的佳作用时间.结果 50 nmol/L siRNAs对HSC T6有较高的转染效率;5对siRNA中的3对在转染后48 h有较强的抑制HSC T6 细胞TIMP-1基因表达的作用,其中抑制作用强的1对siRNA对TIMP-1表达的抑制作用与对照组相比可增强80%以上,而在转染后72 h,其抑制作用基本消失.结论 化学合成的siRNA在短时期内可有效地抑制TIMP-1基因的表达,筛选到的高效阻抑TIMP-1表达的siRNA可构建于病毒载体,以实现长期抑制TIMP-1表达的功效.

    作者:丛敏;王萍;刘天会;徐雍;卢炎;唐淑珍;刘晓明;王宝恩;贾继东;尤红 刊期: 2006年第06期

  • 绿色荧光蛋白和酪氨酸羟化酶在骨髓基质细胞中的表达

    目的 研究反转录病毒介导的绿色荧光蛋白(EGFP)基因和酪氨酸羟化酶(TH)基因在原代培养的骨髓基质细胞(bMSCs)中的表达情况.方法 体外分离培养大鼠四肢骨的bMSCs,原代培养8~10 d后, 同时利用含EGFP和TH基因的反转录病毒上清依次转染bMSCs并进行抗性筛选,7~10 d可得到稳定表达EGFP的bMSCs,在稳定转染EGFP后10 d进行TH病毒上清的转染,7~10 d可得到稳定表达TH和EGFP的bMSCs.结果 原代培养bMSCs 3~4 d后生长至70%~80%汇合,病毒转染EGFP后第2天,细胞呈现弱荧光,经G418筛选2~3 d后出现阳性细胞,约8~10 d生长融合,阳性率60%~70%,第2~5代阳性细胞比率无明显变化.TH阳性率也达60%以上.结论 利用反转录病毒载体可有效地将EGFP和TH基因转至bMSCs中,并能在体外稳定表达传代.这种表达EGFP和TH的bMSCs对于研究bMSCs的体内迁移分化及帕金森病(PD)的基因治疗具有重要意义.

    作者:赵春礼;段春礼;张海燕;孙晓红;赵焕英;鲁强;刘玉军;杨换 刊期: 2006年第06期

  • 多克隆CNTF抗体对肉毒毒素引起肌麻痹超微结构的影响

    目的 研究多克隆睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)抗体对肉毒毒素(botulinumToxin,BTX)引起的肌麻痹的作用.方法 10只新西兰兔,分别在双侧眼外肌肌腹和面部皮下注射A型肉毒毒素(botulinumToxin A,BTXA),注射后第4天在右侧眼外肌和面部皮下注射多克隆CNTF抗体,左侧相同部位注射等量生理盐水作为对照,在注射后14 d,行电镜观察双侧眼外肌和面肌的肌细胞、运动终板及神经纤维的改变.结果 注射BTXA后14 d眼外肌和面肌的肌纤维均明显萎缩,线粒体肿胀,肌纤维结构无明显破坏;神经髓鞘板层松散,可见髓样小体,运动终板处可见清亮的兴奋性神经递质小泡增多密集.右侧注射CNTF组可见肌细胞核内移,胞质内线粒体肿胀聚集,肌细胞呈空泡样改变,局部肌丝断裂溶解,变性的肌细胞坏死崩解成细胞碎片;运动终板处也可见大量清亮小泡聚集,神经髓鞘增多.结论 注射多克隆CNTF抗体后,与单纯注射BTXA者比较,局部肌细胞结构出现不可逆性破坏,延长了肌肉麻痹恢复时间,提示多克隆CNTF抗体可能延长BTX的肌麻痹作用.

    作者:闫丽娟;吴晓;孙异临;李鑫 刊期: 2006年第06期

  • 银屑病中医证候的时相性研究

    目的 对银屑病中医证候的时相性进行研究.方法 采用临床流行病学群体研究的方法,通过前瞻性、多中心、大样本的设计,调查银屑病血热证、血燥证和血瘀证3个主要中医证候,在不同病期、病程等方面的证候分布及演变规律,揭示银屑病中医证候的时相性.结果 银屑病血热证、血燥证、血瘀证证候的分布与病期、本次复发时间密切相关,而与总病程无关.结论 银屑病3个主要证型之间存在着时相性,每一次发病初期为血热证,随着时间的延长,逐渐转化为血燥证或血瘀证.

    作者:姜春燕;王莒生;邓丙戌;陈凯;王萍;蔡念宁;陶毅;刘瓦利;瞿幸;赵一鸣 刊期: 2006年第06期

  • 细胞免疫在尖锐湿疣发病及治疗中的作用

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    作者:刘永鑫;郑和义 刊期: 2006年第06期

  • 临产前羊水栓塞1例报道

    1 临床资料患者40岁,因妊娠38周+2,高龄初产,临近预产期于2004年2月3日收入院.患者平时月经规律,末次月经2003年5月8日,预产期2004年2月15日,在北京友谊医院门诊定期产前检查,妊娠过程顺利.既往体健,有青霉素过敏史.家族中无遗传病史.1996年和1998年2次人工流产,手术顺利.入院查体:体温36.7 ℃,脉搏80次/min,呼吸12次/min,血压90/70 mmHg(12.0/9.3 kPa),体质量76 kg,表情自如,自由体位,心率80次/min,律齐,心音有力,各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音,双肺呼吸音清,腹部膨隆,双下肢浮肿(-).产前检查:宫高33 cm,腹围106 cm,胎儿头位,子宫壁软,无宫缩,胎心率142次/min,律齐,骨盆外测量:髂棘间径26 cm、髂嵴间径29 cm、骶耻外径20 cm、坐骨结节间径8.5 cm,耻骨弓角度90°.肛查:宫颈未消,宫口未开,骨盆内腔基本正常.各项辅助检查(如心电图、TCT、肝功能、肾功能、尿常规、血常规、AIDS筛查等)结果正常.

    作者:蔺莉;衡宗华;刘庆萍 刊期: 2006年第06期

  • 石蓝草合剂治疗面部激素依赖性皮炎35例

    目的 探讨石蓝草合剂对面部激素依赖性皮炎的治疗作用.方法 对35例面部激素依赖性皮炎患者给予石蓝草合剂治疗,并根据症状配合湿敷及外用药物.治疗前后对患者的红斑、水肿、干燥、脱屑现象和瘙痒、不适感等进行评价.结果 治疗4周后红斑消退率为68.6%,水肿全部消退,干燥、脱屑及瘙痒不适感明显改善.结论 石蓝草合剂具有清热凉血、解毒除湿之功效,对于面部激素依赖性皮炎辨证为热毒壅滞证者有较好疗效.

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首都医科大学学报杂志

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