学术投稿

犬心室肌3层细胞的分离定位方法

周鹏;杨新春;刘秀兰

关键词:心室肌细胞, 心外膜下细胞, 膜片钳技术, 研究领域, 心内膜下, 心肌细胞, 核心环节, 定位, 电异质性, 中间层, 状态, 应用, 实验, 经验, 功分, 动物
摘要:随着膜片钳技术的逐渐推广和心肌电异质性等研究领域的发展,对犬等大型动物的应用越来越多,往往也需要对犬心室肌心外膜下细胞(Epi细胞) 、中间层细胞(M细胞)和心内膜下细胞(Endo细胞)进行准确的定位和分离.成功分离犬心肌细胞并使其保持良好状态是决定整个实验成败的核心环节.现将我们近3年来分离定位犬心室肌细胞的经验简介如下.
首都医科大学学报杂志相关文献
  • 脾切除肝硬化门脉高压大鼠血浆TNF-α质量浓度的变化

    为研究脾切除术、脾动脉结扎术对肝硬化门脉高压症(PHT)大鼠血浆肿瘤坏死因子(TNF-α ) 的影响,研究PHT时TNF-α与一氧化氮合酶(NOS)间的关系,建成PHT大鼠模型,用放射免疫分析法动态检测TNF-α,根据吸光度的大小测定血浆NOS活性,并观察术后4周内各组的病死率.发现:PHT大鼠血浆TNF-α质量浓度较正常对照组明显增高(P<0.01);PHT脾切除组术后3 d、7 d、14 d血浆TNF-α质量浓度与实验对照组比较有显著性差异(P <0.01);脾动脉结扎组TNF-α的质量浓度虽比实验对照组升高,但无显著性差异. 实验对照组血浆NOS活性明显高于正常对照组(P<0.01),且与TNF-α显著正相关( P<0.01,r=0.946);脾动脉结扎组NOS活性显著低于实验对照组及脾切除组(P <0.01).PHT时血浆TNF-α的质量浓度显著增高,提示:TNF-α可能在PHT形成中起重要作用. 与脾动脉结扎组相比较,脾切除组血浆TNF-α的质量浓度显著增高,血浆NOS活性以及病死率亦显著增高,提示:脾动脉结扎术后脾脏仍可发挥一定作用,PHT时应保留脾脏.

    作者:张淑文;刘东斌 刊期: 2004年第02期

  • 16例瘤壁钙化动脉瘤患者的临床分析

    回顾性分析16例瘤壁有钙化的颅内动脉瘤病例的影像学、临床资料及手术治疗,分析颅内血管钙化与颅内动脉瘤病理发生机制的关系.16例瘤壁有钙化的颅内动脉瘤的位置:后交通动脉 3例,大脑中动脉2例,前交通动脉2例,椎动脉5例,基底动脉4例.其中14例动脉瘤直径>1. 5 cm,9例>2.5 cm.所有病人的血钙、磷酸盐、血糖、肾功能正常;6例病人血脂增高.16 例患者均施行动脉瘤夹闭术,其中8例术中切除动脉瘤,治疗效果良好.

    作者:杨雷;赵继宗;王硕;赵元立;董建令 刊期: 2004年第02期

  • 颈部椎管内外肿瘤的外科治疗

    根据肿瘤与椎间孔的关系将27例颈部椎管内外肿瘤分为3种类型,并采取不同的手术方法:Ⅰ型(13例):瘤体主要在椎管内,向椎间孔内生长不超过1 cm,椎间孔轻微扩大,采用后正中切口手术.Ⅱ型(4例):瘤主体在椎管外,少部分长入椎间孔;采用颈部入路手术.Ⅲ型(10例):肿瘤在椎管内外都较大,椎间孔明显扩大;采用颈部和后正中入路,分2期切除肿瘤.结果:全切肿瘤25例,近全切除2例.其中23例随访6~79月,22例恢复工作.提示:对颈部椎管内外肿瘤,应分型选择术式,以利于全切肿瘤,并利于维持脊柱稳定性和椎动脉保护.

    作者:杨俊;刘伟明;王江飞 刊期: 2004年第02期

  • 2型糖尿病合并冠心病患者纤溶酶原激动抑制剂-1基因多态性分析

    为探讨纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)基因调节区-675 bp位点4G/5G多态性与2型糖尿病、2型糖尿病合并冠心病(CAD)的关系,采用特异性引物聚合酶链反应(PCR)方法,测定4G/5G基因型,并检测PAI-1抗原水平,共观察了121例单纯2型糖尿病(type Ⅱ diab etes)患者、87例2型糖尿病合并CAD患者和100例对照者.结果:合并CAD组的4G/4G基因型携带者明显高于对照组(49.4%比 37.0%,P<0.05),CAD组中PAI-1与三酰甘油(TG)呈正相关,并与4G/5G多态性有关, 表现为4G/4G基因型携带者的PAI-1质量浓度明显高于5G/5G基因型携带者[(39.82×10-3±3.11×10-3)ng/L比(38.04×10-3± 2.73 ×10-3)ng/L,P<0.05].提示:PAI-1基因4G/5G多态性与TG的联合作用与PA I-1抗原水平相关,并与2型糖尿病合并CAD的发病过程有关.

    作者:王旭东;樊峥;傅研;殷红;翟艳玲;祁雅慧;朱宇清;王瑾;赵相印 刊期: 2004年第02期

  • 糖尿病大鼠早期视网膜NT-3和GFAP的表达

    用链尿佐菌素(STZ)腹腔注射制作大鼠糖尿病(DM)模型.分别于模型建立后1周、2周、1 月处死大鼠,取眼球做冰冻切片.用免疫组化法定量、半定量分析视网膜神经营养因子3(NT-3)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的含量.结果: 与正常对照组比较,DM 1周、2周大鼠视网膜NT-3、GFA P表达无明显改变,DM 1月大鼠视网膜含NT-3的神经元数量及神经元内NT-3的含量减少( P <0.01),GFAP阳性细胞数量增加(P<0.05).提示:糖尿病大鼠早期视网膜神经元即已发生损害,同时视网膜含NT-3神经元数和神经细胞内NT-3含量均减少;视网膜神经细胞的损害可能与NT-3的减少有关.

    作者:卢艳;盛树力;吴航;郭丽 刊期: 2004年第02期

  • 人胚胎海马神经干细胞体外培养方法的建立

    为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法,防止神经干细胞在培养过程中的分化,确立佳的传代时机和方法,分离16周人胚海马组织,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量的差异.结果:建立了人胚胎海马神经干细胞体外培养的优化条件,确立了佳传代方法与时机.提示:人胚胎海马神经干细胞在体外抑制分化的条件下可以长期处于未分化状态增生,并且可多次传代.

    作者:赵春礼;孙晓红;鲁强;刘玉军;李敏;姜传涛;杨慧;徐群渊 刊期: 2004年第02期

  • 一组家庭聚集性暴发重症SARS病例及其康复期研究

    为了解严重急性呼吸综合征(SARS)的家庭聚集性暴发过程,分析SARS不同阶段的传染性和不同接触方式的危险性及预后影响因素,并进行康复期评价.以首发病例为线索,对密切接触者进行个案调查,分析其传播关系和传染性,并对康复者进行肺功能及血清抗体检查.结果 :与处于症状期的首发病例密切接触的共8人,均先后发病,死亡1例.发病者潜伏期长短与接触方式及个人感染的病毒载量有密切关系.SARS患者年龄大于60岁、伴基础疾病者病死率高.康复4周时患者仍有不同程度的肺功能障碍,血清IgG达(1.11±0.48)g/L.提示 :SARS患者症状期传染性强,未观察到SARS潜伏期具有传染性;年龄大于60岁、伴基础疾病的SARS患者预后较差.

    作者:阴赪宏;李晶铃;张淑文;王宝恩 刊期: 2004年第02期

  • 人食管癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达

    为探讨人食管癌组织中热休克蛋白70(HSP70)和糖调节蛋白94(grp94)的表达及意义,采用 SABC法检测人食管癌组织HSP70和grp94的表达,镜下观察HSP70和grp94在癌组织及癌旁组织中的表达特点.结果:92.6% (50/54) 食管癌组织中存在HSP70的表达,癌细胞存在胞质、胞核表达强度及部位的差异;而grp94的表达阳性率为70.4%(38/54),以胞质表达为主, 而癌旁组织表达较少.提示:人食管癌组织存在HSP70和grp94的表达异质性,呈现了胞质、胞核的表达差异,HSP70和grp94在人食管癌组织的表达特点为以后肿瘤抗原肽肿瘤疫苗的提取和实验奠定了基础.

    作者:李海燕;王小平;陈瑞芬;刘国贞;宋爱利 刊期: 2004年第02期

  • 人工股骨头置换术治疗老年人股骨颈骨折的疗效评价

    为探讨人工股骨头置换术治疗老年人股骨颈骨折的临床疗效,应用钛合金骨水泥型国产单极股骨头假体治疗头下型、头颈型股骨颈骨折并得到随访的病人36例,均为单侧股骨颈骨折,随访2.0~5.6年.结果:术中无骨折及血管、神经损伤,术后无下肢深静脉血栓,无切口感染.根据病人情况适当功能锻炼,根据Harr is评分法评定,优9例,良19例,中4例,差4例.提示:应用人工股骨头置换术治疗老年人股骨颈骨折效果满意.

    作者:李启祥;杨立新;桑双进;张则正 刊期: 2004年第02期

  • 老年消化性溃疡的临床特点

    为了解老年消化性溃疡的临床特点,总结其诊断及治疗的经验,观察我院2001-2002年63例老年住院消化性溃疡病人的溃疡部位、大小、合并症的发生率和预后情况.结果:63例老年消化性溃疡患者中巨大消化性溃疡的发生率高达27.0%(17/63),以出血(呕血、黑便)为首发症状者多,为46 例 (73.0%),晕厥者占17.5%(11/63),溃疡穿孔占17.5%(11/63),规律性上腹痛很少.提示: 老年人消化性溃疡因临床症状不典型、病史长而易被忽视,因多合并全身性疾病而增加病死率,内镜下明确诊断和及时止血治疗为首选治疗,掌握手术时机对预后有重要影响;抗幽门螺杆菌(HP) 治疗可明显减少溃疡复发.

    作者:赵军;张泰昌 刊期: 2004年第02期

  • 人VEGF基因昆虫杆状病毒表达载体的构建

    为了在昆虫杆状病毒表达系统表达人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因,用Hind Ⅲ对pcDNA 3.1/VEGF进行酶切,回收575 bp的VEGF片段,与pFastBacI载体连接,得到含VEGF基因的转座载体pFast/VEGF,Nco I酶切鉴定方向;将其转化到含有穿梭载体杆粒(Bacmid) 的DH10Bac感受态细胞,得到重组杆状病毒穿梭载体Bacmid/VEGF,采用琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增对重组转座载体、穿梭载体进行鉴定.将Bacmid/VEGF转染sf-9细胞,进行病毒重组及噬斑筛选.结果:琼脂糖电泳得到杆粒(Bacmid)DNA条带,PCR扩增得到575 bp的VEGF片段,病毒液在10-7稀释度时出现噬斑,约50个/孔.说明已成功构建了重组杆状病毒穿梭载体并重组出杆状病毒.

    作者:孙丽翠;王雅梅;祁雅慧;闫豫东;张静宜 刊期: 2004年第02期

  • 2种骨切片硫堇-苦味酸染色法的比较

    骨切片的染色法有多种,其中硫堇-苦味酸染色法是比较常用的染色方法,但书中及各实验室的染液配制及染色方法不尽相同[1~4],因此我们对2种硫堇染液和2种脱水、透明方法做了一些比较和探讨,以便选择一种效果较好的染色方法.

    作者:曾晓蓓;孙海梅;李宝红 刊期: 2004年第02期

  • 食品红花黄色素抗氧化作用的研究

    为观察食品红花黄色素(food safflor yellow,FSY)的抗氧化作用,用邻二氮菲-Fe2 +氧化法检测FSY清除H2O2/Fe2+体系产生的羟自由基的作用,用硫代巴比妥酸比色法观察小鼠肝匀浆的脂质过氧化,用比色法观察Fe2+/H2O2体系产生的羟自由基致红细胞膜的破裂.发现:2.00~5.33 g/L FSY对羟自由基的清除率为29.6%~100%, 呈明显的量效关系;0.298~1.194 g/L FSY对小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制率为4.6%~ 70.6%,呈明显的量效关系;0.023~0.228 g/L FSY缓解羟自由基引发红细胞破裂的抑制率为16.0%~29.8%.研究结果提示:FSY具有明显的抗氧化作用.

    作者:金鸣;李金荣;吴伟 刊期: 2004年第02期

  • 急性早幼粒细胞白血病中白血病细胞CD117的表达

    为观察CD117分子在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的表达及探讨其意义,采用三色流式细胞术对22例APL骨髓白血病细胞表面CD117的表达进行分析.结果:CD117 在 APL中的表达率为19/22,在急性粒细胞白血病(AML-M1)和AML-M2中的表达率分别为2/ 2和18/21.19例CD 117+的APL患者中,18例CD34-、HLA-DR-,1例部分细胞HLA-DR+.提示:APL 患者有较高水平的CD117表达,CD117与CD34、HLA-DR联合进行多色流式细胞术分析,可用于APL微小残留病灶的检测.

    作者:万岁桂;徐娟;巩文玉;孙雪静;田丁 刊期: 2004年第02期

  • 汽南社区中老年妇女骨密度的相关性分析

    为探讨北京汽南社区中老年妇女骨密度的相关因素,选择142名44~76岁、身体健康的志愿汉族妇女,使用跟骨骨密度仪测量跟骨骨密度(BMD);由医生认真填写调查病史表,包括年龄、绝经年龄、月经史、生育史、既往史、妇科手术史、家族史、嗜好等,与BMD进行相关性分析;并对月经周期、生殖年和妇科手术史对BMD 的影响进行分析.发现:年龄、绝经年与BMD呈负相关(P<0.05),生育史、哺乳史与BMD关系不明显;月经不规律组的BMD为(363.6±66.7)mg/cm 2,低于规律组的(38 8.7±84.9)mg /cm 2;生殖年长组的BMD为(415.7±67.3)mg/cm 2,高于生殖年短组的(368.7±68.7)m g/cm 2;无妇科手术组的BMD为(382.6±84.2)mg/cm 2,高于手术组的(372.4±48.9)mg/cm 2,但经统计学处理均无显著性差异.提示:年龄、绝经年龄是影响老年妇女骨密度的主要因素,有月经不规律病史、生殖年短及有妇科手术史的妇女的BMD较低.

    作者:张李松;赖爱鸾;姜桂英;张洪涛;丁磊;林守清;余卫 刊期: 2004年第02期

  • 产科急症中子宫切除术23例分析

    产科急症中子宫切除术是治疗产科急性子宫出血、抢救产妇生命的一项重要措施.本研究对23例产科急症中子宫切除术的临床资料进行回顾性分析.

    作者:吴庆庆;姜桂英 刊期: 2004年第02期

  • Id4对K562细胞增生的影响及其机制的探讨

    为了探讨Id4基因的反义核酸对人红白血病K562细胞增生的作用,用DNA重组技术将人反义Id 4基因插入到真核表达载体pXJ41-neo上,重组质粒和空载体分别转染K562细胞,得到pAId4 和pK562(对照)克隆细胞株.发现:pAId4的生长受到抑制,倍增时间加长.免疫印迹实验分析相关蛋白的表达,其中CDK4和CyclinD1在pAId4细胞中的表达量均低于对照细胞pK562,而RB蛋白在pAId4细胞中的表达量高于对照细胞pK562,揭示了反义Id4引起细胞出现生长抑制的可能机制,并探讨了Id4基因对人红白血病K562细胞增生的具体作用.研究结果对造血干细胞的体外扩增、分化及红白血病的基因治疗均有重要的参考价值.

    作者:刘欣;曾少举;王永潮;张瑾峰 刊期: 2004年第02期

  • 银杏叶提取物对缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bax基因表达的影响

    为探讨缺氧复氧致原代培养的大鼠大脑皮质神经细胞凋亡中,Bax基因的表达及银杏叶提取物(EGB)对其的调节作用,用胎龄16~17 d Wistar大鼠的大脑皮质神经细胞进行原代分离培养.采用原位末端标记法(TUNEL)透射电镜技术确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型,并应用免疫组织化学方法显示缺氧复氧不同时间Bax基因的表达.结果:缺氧复氧可以使大鼠大脑皮质神经细胞发生凋亡,随缺氧时间的延长,凋亡细胞数逐渐增多,至缺氧8 h,复氧18 h达高峰,银杏叶提取物预保护可使凋亡细胞数减少;同时随着缺氧时间的延长,Bax基因表达逐渐增高,EGB可逆转缺氧复氧时Bax的表达.提示:EGB对缺氧复氧时Bax的表达具有明显的抑制作用,这可能是EGB对抗缺氧复氧时胎鼠大脑皮质神经细胞发生凋亡的机制之一.

    作者:季凤清;孙海梅;郭燕茹;郭崇洁;赵天德 刊期: 2004年第02期

  • 人肝癌组织热休克蛋白70的表达

    为探讨人肝癌组织热休克蛋白70(HSP70)的表达及意义,采用SABC法检测人肝癌组织HSP70的表达,图像分析HSP70在癌组织中的表达特点.结果显示:25例肝癌组织中均存在HSP70的表达,不同癌组织存在胞质、胞膜和胞核表达强度及部位的差异.证实人肝癌组织存在HSP70的表达异质性,呈现了胞质、胞膜和胞核的表达差异,HSP70在人肝癌组织的表达特点为今后肿瘤抗原肽瘤苗的提取和实验研究作了铺垫.

    作者:王小平;刘国贞;宋爱利;廖静;陈瑞芬;郎振为 刊期: 2004年第02期

  • 应用超声心动图评价高血压患者收缩时间间期的变化及临床意义

    为探讨原发性高血压(以下简称高血压)患者左室收缩时间间期的变化及临床意义,观察35 7例初诊高血压患者以及100例正常人的左室射血分数(LVEF)、射血时间(LVET)、射血前期(PEP),并对以上指标分别进行方差分析.结果:高血压患者的LVET、PEP、PEP/LVET与正常组比较有显著性差异(P<0.05);LVEF 与正常组比较无显著性差异.结果提示:收缩时间间期可敏感的反映左室后负荷的升高.

    作者:高敬;华琦 刊期: 2004年第02期

首都医科大学学报杂志

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