学术投稿

免疫组织化学方法检测胰腺组织内的一氧化氮合酶

刘国贞;宋爱利

关键词:免疫组织化学方法, 检测, 胰腺组织, 发病机制, 内源性一氧化氮, 一氧化氮合酶, 坏死性胰腺炎, 一步测定, 急性出血, 保护作用, 死亡率, 发病率, 临床, 疾病, 大鼠, 病变, 报告
摘要:急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)在临床上属于发病率及死亡率较高的疾病,其发病机制十分复杂.近年来,内源性一氧化氮(NO)在AHNP发病中的作用受到了广泛的关注,但研究结果很不一致:有的报告NO使AHNP大鼠的胰腺病变加重[1];有的发现NO对AHNP有保护作用 [2].鉴于此,有必要进一步测定AHNP时胰腺组织内一氧化氮合酶(NOS)的表达情况,从而探讨内源性NO在AHNP发病中的作用.
首都医科大学学报杂志相关文献
  • 脾切除加食管胃底切除术治疗门静脉高压症26例临床报告

    采用择期脾切除加食管下段胃底切除术治疗门静脉高压症上消化道出血26例.26例患者均为肝炎后肝硬化伴有比较严重的食管胃底静脉曲张及1次以上出血史者.结果:全部病例均获随访,平均随访52个月.随访中无食管曲张静脉复发出血,无围手术期死亡,效果满意.提示:脾切除加食管下段胃底切除术能较易为患者所接受,疗效较好,复发出血率低,止血确切,是治疗门静脉高压症比较理想的一种手术方法.

    作者:张劲光;徐光勋;郭庆良;武聚山;钱智玲;郭文斌;吴健雄 刊期: 2004年第02期

  • 老年消化性溃疡的临床特点

    为了解老年消化性溃疡的临床特点,总结其诊断及治疗的经验,观察我院2001-2002年63例老年住院消化性溃疡病人的溃疡部位、大小、合并症的发生率和预后情况.结果:63例老年消化性溃疡患者中巨大消化性溃疡的发生率高达27.0%(17/63),以出血(呕血、黑便)为首发症状者多,为46 例 (73.0%),晕厥者占17.5%(11/63),溃疡穿孔占17.5%(11/63),规律性上腹痛很少.提示: 老年人消化性溃疡因临床症状不典型、病史长而易被忽视,因多合并全身性疾病而增加病死率,内镜下明确诊断和及时止血治疗为首选治疗,掌握手术时机对预后有重要影响;抗幽门螺杆菌(HP) 治疗可明显减少溃疡复发.

    作者:赵军;张泰昌 刊期: 2004年第02期

  • 犬心室肌3层细胞的分离定位方法

    随着膜片钳技术的逐渐推广和心肌电异质性等研究领域的发展,对犬等大型动物的应用越来越多,往往也需要对犬心室肌心外膜下细胞(Epi细胞) 、中间层细胞(M细胞)和心内膜下细胞(Endo细胞)进行准确的定位和分离.成功分离犬心肌细胞并使其保持良好状态是决定整个实验成败的核心环节.现将我们近3年来分离定位犬心室肌细胞的经验简介如下.

    作者:周鹏;杨新春;刘秀兰 刊期: 2004年第02期

  • 急性胰腺炎肾脏损害的发生机制

    临床上发现急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)常可导致多器官损伤,可累及心血管系统、肺脏、肝脏以及肾脏等,尤其是肾脏损害,特别是急性肾衰竭常常是急性胰腺炎的一种致死性并发症.文献报道急性胰腺炎并发肾功能损害的发生率为6%~78%,肾衰竭的发生率为23%~31%,并发肾衰竭患者的死亡率高达70%~80%.肾脏的损害与胰腺病变直接相关,肾脏损害的发生率与程度和急性胰腺炎的轻重呈正相关,而且其合并症多,预后差,死亡率高 [1~5].

    作者:王云帆;陈瑞芬 刊期: 2004年第02期

  • 急性缺氧对大鼠血管内皮细胞的损伤

    应用光镜及电镜,对急性缺氧状态下大鼠的肺小动脉内皮细胞(pulmonary small artery e ndothe lial cell,PSAEC)及肺毛细血管内皮细胞(pulmonary capillary endothelial cell,PCE C)进行形态学观察,并用显微分光光度仪对急性缺氧状态下PSAEC的乳酸脱氢酶(lactic de hydrogenase,LDH)活性进行定量分析.发现:急性缺氧可引起PSAEC和PCEC发生各种损伤性形态变化,损伤程度随缺氧时间延长而加重;与缺氧前相比,急性缺氧后各组PSAEC的LDH活性均下降,且随缺氧时间的延长,LDH活性下降得更明显.提示:急性缺氧可引起血管内皮细胞(VEC)损伤,损伤程度随缺氧时间的延长而加重,血管内皮细胞损伤的程度与其LDH活性密切相关.

    作者:王岸柳;温祥云;刘国贞 刊期: 2004年第02期

  • 61例严重急性呼吸综合征临床分析

    回顾性分析确诊的61例严重急性呼吸综合征(SARS)患者.发现:发病2周为疾病的高峰期. 有明确SARS接触史者47人(77.1%).56例(91.8%)静点甲泼尼龙,54例(88.5%)使用利巴韦林治疗.用药后血红蛋白降低幅度达20 g/L者占44.4%(24/54),心动过速者占40.4%(23 /57).6例死亡患者中5例为老年人,均合并严重的基础病变,另1位患者在住院期间自杀.所有患者在出现症状后(8.6±5 .9)d(1~24 d)胸片显示异常,胸片浸润性病灶完全吸收的平均时间为(17.1±6.2)d(5~3 5 d).提示:对SARS患者,早期、持续一定时间的中等剂量的激素是必要的;治疗过程中应该重视大量激素和大量利巴韦林带来的不良反应.

    作者:冯力民;王保国;李晶华;刘小春;焦强 刊期: 2004年第02期

  • 应用超声心动图评价高血压患者收缩时间间期的变化及临床意义

    为探讨原发性高血压(以下简称高血压)患者左室收缩时间间期的变化及临床意义,观察35 7例初诊高血压患者以及100例正常人的左室射血分数(LVEF)、射血时间(LVET)、射血前期(PEP),并对以上指标分别进行方差分析.结果:高血压患者的LVET、PEP、PEP/LVET与正常组比较有显著性差异(P<0.05);LVEF 与正常组比较无显著性差异.结果提示:收缩时间间期可敏感的反映左室后负荷的升高.

    作者:高敬;华琦 刊期: 2004年第02期

  • 棕褐沙林蚁水提物抗炎作用初探

    为观察棕褐沙林蚁水提物对佐剂性关节炎的保护作用,用二甲苯制作小鼠耳郭肿胀模型,称量耳片,计算肿胀度;用弗氏完全佐剂制作大鼠佐剂性关节炎模型,用容积法测量大鼠足跖肿胀率;用分光光度计法测量前列腺素E2(PGE2).结果:小鼠灌胃给予棕褐沙林蚁水提物2、4 g/kg 时,对二甲苯所致小鼠耳郭肿胀有显著抑制作用,其作用类似于消炎痛.棕褐沙林蚁水提物 100、450、900 mg/kg连续用药,均可明显剂量依赖性地抑制大鼠佐剂性关节炎的原发性及继发性炎症反应,可降低炎症局部的PGE2质量浓度,其作用与吡罗昔康相似.

    作者:陈怡;唐玉;刘进学;袁盛榕 刊期: 2004年第02期

  • 胰腺炎相关蛋白与结直肠癌DNA倍体性的关系

    为探讨结直肠癌组织中胰腺炎相关蛋白(PAP)mRNA表达与肿瘤DNA倍体性的关系,收集结直肠癌外科手术标本27例(病理均证实为腺癌),同时取距肿瘤边缘3 cm和8 cm的黏膜组织作为对照.采用逆转录聚合酶链技术,测定样本中有无胰腺炎相关蛋白的表达,并用流式细胞仪对各样本行细胞DNA倍体性分析.发现:PAP mRNA在结直肠癌中的表达阳性率为29.6% (8/27).在8例PAP mRNA阳性表达的肿瘤组织样本中,S期细胞比率(SPF)为18.91±8 .43,并有7例为非整倍体肿瘤;而另外19例PAP mRNA阴性肿瘤组织的SPF为12.11±7.02,有4例为非整倍体肿瘤.在B、C 2个对照组的黏膜组织中未能检测出PAP mRNA阳性表达及非整倍体组织.经统计学处理PAP mRNA阳性样本的非整倍体例数和SPF,与阴性样本相比差异有显著性(P<0.05);而肿瘤细胞的分化程度和扩散范围与PAP mRNA的阳性表达无明显相关.提示:PAP mRNA阳性肿瘤样本有较高增生活性,PAP mRNA的表达与肿瘤分化、浸润深度及淋巴结转移情况无关.

    作者:曹广;李非;孙家邦 刊期: 2004年第02期

  • 人胚胎海马神经干细胞体外培养方法的建立

    为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法,防止神经干细胞在培养过程中的分化,确立佳的传代时机和方法,分离16周人胚海马组织,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量的差异.结果:建立了人胚胎海马神经干细胞体外培养的优化条件,确立了佳传代方法与时机.提示:人胚胎海马神经干细胞在体外抑制分化的条件下可以长期处于未分化状态增生,并且可多次传代.

    作者:赵春礼;孙晓红;鲁强;刘玉军;李敏;姜传涛;杨慧;徐群渊 刊期: 2004年第02期

  • 人食管癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达

    为探讨人食管癌组织中热休克蛋白70(HSP70)和糖调节蛋白94(grp94)的表达及意义,采用 SABC法检测人食管癌组织HSP70和grp94的表达,镜下观察HSP70和grp94在癌组织及癌旁组织中的表达特点.结果:92.6% (50/54) 食管癌组织中存在HSP70的表达,癌细胞存在胞质、胞核表达强度及部位的差异;而grp94的表达阳性率为70.4%(38/54),以胞质表达为主, 而癌旁组织表达较少.提示:人食管癌组织存在HSP70和grp94的表达异质性,呈现了胞质、胞核的表达差异,HSP70和grp94在人食管癌组织的表达特点为以后肿瘤抗原肽肿瘤疫苗的提取和实验奠定了基础.

    作者:李海燕;王小平;陈瑞芬;刘国贞;宋爱利 刊期: 2004年第02期

  • 米非司酮对雄激素非依赖性前列腺癌LNCaPC4-2和PC3细胞的作用机制

    为探讨抗孕激素药米非司酮对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株LNCaPC4-2、PC3的促凋亡及生长抑制作用,将不同浓度的米非司酮加入到体外培养的2株前列腺癌细胞中,分别在培养后3 d、5 d、7 d用SRB染色法检测细胞生长抑制率;用流式细胞仪检测加药后24 h、 48 h LNCaPC4-2和PC3细胞凋亡情况.发现:高浓度米非司酮(20 μmol/L)对雄激素非依赖性细胞株LNCaPC4-2、PC3于3 d、5 d、7 d的细胞生长抑制率分别为55.79% 、66.37%、71.54%和87.42%、98.15%、100%.不同浓度米非司酮即2.5、5、10、15、20 μm ol/L对LNCaPC4-2、PC3细胞株7 d时的细胞生长抑制率分别为17.07%、35.77%、53.6 6% 、63.41%、71.54%和48.25%、63.42%、82.37%、95.31%、100%.前列腺癌细胞株LNCaPC 4-2受15 μmol/L米非司酮作用24 h和48 h细胞凋亡率分别为19.30%、30.04%;PC3受米非司酮15 μmol/L作用24 h细胞凋亡率为44.52%.提示:米非司酮对LNCaPC4-2、P C3细胞株有时间和剂量依赖的生长抑制作用,其生长抑制作用是通过促进细胞凋亡实现的.

    作者:毕泗成;徐秀红;邵强;杜林栋 刊期: 2004年第02期

  • 人VEGF基因昆虫杆状病毒表达载体的构建

    为了在昆虫杆状病毒表达系统表达人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因,用Hind Ⅲ对pcDNA 3.1/VEGF进行酶切,回收575 bp的VEGF片段,与pFastBacI载体连接,得到含VEGF基因的转座载体pFast/VEGF,Nco I酶切鉴定方向;将其转化到含有穿梭载体杆粒(Bacmid) 的DH10Bac感受态细胞,得到重组杆状病毒穿梭载体Bacmid/VEGF,采用琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增对重组转座载体、穿梭载体进行鉴定.将Bacmid/VEGF转染sf-9细胞,进行病毒重组及噬斑筛选.结果:琼脂糖电泳得到杆粒(Bacmid)DNA条带,PCR扩增得到575 bp的VEGF片段,病毒液在10-7稀释度时出现噬斑,约50个/孔.说明已成功构建了重组杆状病毒穿梭载体并重组出杆状病毒.

    作者:孙丽翠;王雅梅;祁雅慧;闫豫东;张静宜 刊期: 2004年第02期

  • 2种骨切片硫堇-苦味酸染色法的比较

    骨切片的染色法有多种,其中硫堇-苦味酸染色法是比较常用的染色方法,但书中及各实验室的染液配制及染色方法不尽相同[1~4],因此我们对2种硫堇染液和2种脱水、透明方法做了一些比较和探讨,以便选择一种效果较好的染色方法.

    作者:曾晓蓓;孙海梅;李宝红 刊期: 2004年第02期

  • 糖尿病大鼠早期视网膜NT-3和GFAP的表达

    用链尿佐菌素(STZ)腹腔注射制作大鼠糖尿病(DM)模型.分别于模型建立后1周、2周、1 月处死大鼠,取眼球做冰冻切片.用免疫组化法定量、半定量分析视网膜神经营养因子3(NT-3)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的含量.结果: 与正常对照组比较,DM 1周、2周大鼠视网膜NT-3、GFA P表达无明显改变,DM 1月大鼠视网膜含NT-3的神经元数量及神经元内NT-3的含量减少( P <0.01),GFAP阳性细胞数量增加(P<0.05).提示:糖尿病大鼠早期视网膜神经元即已发生损害,同时视网膜含NT-3神经元数和神经细胞内NT-3含量均减少;视网膜神经细胞的损害可能与NT-3的减少有关.

    作者:卢艳;盛树力;吴航;郭丽 刊期: 2004年第02期

  • 一组家庭聚集性暴发重症SARS病例及其康复期研究

    为了解严重急性呼吸综合征(SARS)的家庭聚集性暴发过程,分析SARS不同阶段的传染性和不同接触方式的危险性及预后影响因素,并进行康复期评价.以首发病例为线索,对密切接触者进行个案调查,分析其传播关系和传染性,并对康复者进行肺功能及血清抗体检查.结果 :与处于症状期的首发病例密切接触的共8人,均先后发病,死亡1例.发病者潜伏期长短与接触方式及个人感染的病毒载量有密切关系.SARS患者年龄大于60岁、伴基础疾病者病死率高.康复4周时患者仍有不同程度的肺功能障碍,血清IgG达(1.11±0.48)g/L.提示 :SARS患者症状期传染性强,未观察到SARS潜伏期具有传染性;年龄大于60岁、伴基础疾病的SARS患者预后较差.

    作者:阴赪宏;李晶铃;张淑文;王宝恩 刊期: 2004年第02期

  • 产科急症中子宫切除术23例分析

    产科急症中子宫切除术是治疗产科急性子宫出血、抢救产妇生命的一项重要措施.本研究对23例产科急症中子宫切除术的临床资料进行回顾性分析.

    作者:吴庆庆;姜桂英 刊期: 2004年第02期

  • 2型糖尿病合并冠心病患者纤溶酶原激动抑制剂-1基因多态性分析

    为探讨纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)基因调节区-675 bp位点4G/5G多态性与2型糖尿病、2型糖尿病合并冠心病(CAD)的关系,采用特异性引物聚合酶链反应(PCR)方法,测定4G/5G基因型,并检测PAI-1抗原水平,共观察了121例单纯2型糖尿病(type Ⅱ diab etes)患者、87例2型糖尿病合并CAD患者和100例对照者.结果:合并CAD组的4G/4G基因型携带者明显高于对照组(49.4%比 37.0%,P<0.05),CAD组中PAI-1与三酰甘油(TG)呈正相关,并与4G/5G多态性有关, 表现为4G/4G基因型携带者的PAI-1质量浓度明显高于5G/5G基因型携带者[(39.82×10-3±3.11×10-3)ng/L比(38.04×10-3± 2.73 ×10-3)ng/L,P<0.05].提示:PAI-1基因4G/5G多态性与TG的联合作用与PA I-1抗原水平相关,并与2型糖尿病合并CAD的发病过程有关.

    作者:王旭东;樊峥;傅研;殷红;翟艳玲;祁雅慧;朱宇清;王瑾;赵相印 刊期: 2004年第02期

  • 人肝癌组织热休克蛋白70的表达

    为探讨人肝癌组织热休克蛋白70(HSP70)的表达及意义,采用SABC法检测人肝癌组织HSP70的表达,图像分析HSP70在癌组织中的表达特点.结果显示:25例肝癌组织中均存在HSP70的表达,不同癌组织存在胞质、胞膜和胞核表达强度及部位的差异.证实人肝癌组织存在HSP70的表达异质性,呈现了胞质、胞膜和胞核的表达差异,HSP70在人肝癌组织的表达特点为今后肿瘤抗原肽瘤苗的提取和实验研究作了铺垫.

    作者:王小平;刘国贞;宋爱利;廖静;陈瑞芬;郎振为 刊期: 2004年第02期

  • 脉压对高血压患者心脏功能的影响

    为探讨原发性高血压(以下简称高血压)患者24 h动态脉压(APP)与心脏功能的关系,对555名初诊或停药2周以上的轻中度高血压患者[男275例,女280例;年龄(47.1±12.7)岁]进行2 4 h动态血压监测和超声心动图检查.根据脉压(PP),将555名患者分为4组, A组:PP≤5.32 kPa(40 mmHg);B组:5.45 kPa(41 mmHg)≤PP≤6.65 kPa(50 mmHg );C组:6.78 kPa(51 mmHg)≤PP≤7.98 kPa(60 mmHg);D组:PP≥8.11 kPa(61 mmHg). 研究结果显示:随24 h APP增大,左室舒张功能减退,主要表现为心房收缩期与舒张早期充盈峰值流速之比值(A/E)增加,舒张早期充盈时间(EDFP)延长;左室收缩功能无明显变化.提示:脉压增高导致高血压患者左室舒张功能减退,而对左室收缩功能无明显影响.

    作者:李梅;华琦;刘力松;刘荣坤;杨峥 刊期: 2004年第02期

首都医科大学学报杂志

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主办:首都医科大学