学术投稿

寡核苷酸芯片技术检测乙肝病毒拉米夫定耐药株的应用研究

林峰;曾爱平;杨宁敏;饶高峰;颜鸣鹤;杨恩

关键词:乙型肝炎病毒, 寡核苷酸芯片, 拉米夫定耐药性
摘要:目的 建立乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片技术,并对乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片的临床应用进行了评价.方法 通过对388份服用拉米夫定、559份未服用拉米夫定的HBV DNA阳性血清以及359份HBV DNA阴性血清进行耐药突变检测,同时对照进行荧光定量PCR检测和DNA序列测定,对芯片法检测的准确度、实用性进行考评.结果 对388份乙型肝炎病毒DNA多聚酶突变标本均能检测到突变;528、552、555位密码子突变检测芯片法与测序法的符合率分别为96.6%,98.5%,100%.559例荧光PCR检测HBV DNA阳性的样品,除3份弱阳性标本外,均为阳性,且能进行乙型肝炎病毒DNA多聚酶拉米夫定耐药相关位点的检测,两者的符合率为99.7%.359份HBsAg阴性标本经芯片法检测,结果为HBV DNA全部阴性.结论 乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片可用于临床检测病人血清中的野生型和拉米夫定耐药突变型病毒株,指导临床用药.
医学研究杂志相关文献
  • 苯那普利对FSGS大鼠肾组织细胞外基质影响

    目的 探讨苯那普利对局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的影响.方法 建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠FSGS模型,经苯那普利进行灌胃治疗8周,然后采用半定量病理分析苯那普利对肾组织ECM影响,以及生化检测尿蛋白、血脂、肾功能变化.结果 FSGS大鼠经苯那普利治疗后,肾组织ECM积聚减少(P<0.01),血脂、肌酐、尿素氮和尿蛋白较模型组降低(P<0.05~0.01).结论 苯那普利可以抑制肾组织ECM积聚,改善肾功能,防治肾纤维化.

    作者:王军;朱晓玲;王永钧;陈洪宇;林宜;鲁盈;李涛;卜爽剡 刊期: 2007年第01期

  • 腹腔镜与开腹肝硬化脾切除肝功能和白细胞变化的比较

    目的 观察肝硬化门脉高压症继发性脾功能亢患者行腹腔镜脾切除(laparoscopic splenectomy,LS)和开腹脾切除(open splenectomy,OS)术前后肝功能和血白细胞的变化.方法 回顾性分析自2003年3月~2006年3月76例因肝硬化门脉高压症继发性脾功能亢进而行脾切除术患者的临床资料,其中LS 27例、OS 49例.收集和分析术前1天及术后第1、3、7天血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(Tbil)、直接胆红素(Dbil)和血白细胞(WBC).结果 (1)两组术后第1天Tbil、Dbil比较差异有显著性(P<0.05),第1、3天WBC比较差异有显著性(P<0.05),第7天AST比较差异有显著性(P<0.05);两组术后ALT比较差异无显著性.(2)LS组ALT、AST、Tbil、Dbil术后均较术前升高,但仅AST升高有统计学意义(P<0.05);OS组ALT、AST、Tbil、Dbil术后均比术前显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 肝硬化门脉高压症继发性脾功能亢进患者行LS和OS都会导致肝功能和血白细胞的变化,但OS变化更大,两者差异具有显著性,表明LS对肝功能影响和对机体的创伤比OS小.

    作者:占小莉;王跃东;叶再元;竺杨文;谢志杰 刊期: 2007年第01期

  • 鹅膏蕈及镍铬钴混合物对小鼠肝毒性及SOD活性影响

    目的 探讨鹅膏蕈镍铬钴混合物对小鼠肝毒性及SOD活性的影响.方法 鹅膏蕈镍铬钴混合物腹腔注射染毒小鼠,共3周.每周随机处死5只动物,称肝重、体重,测全血和肝SOD活性.结果 实验组小鼠生长缓慢,肝脏肿大,肝脏系数增高.染毒3周末,实验组小鼠肝重1.89±0.13g,肝脏系数6.21±0.18;对照组分别为1.60±0.20g和4.41±0.35,有显著性差异(P<0.05).肝和全血SOD活性染毒1周后明显下降,第2周起又回升至原有水平,直到实验结束.病理学检查可见肝细胞变性坏死,小叶静脉充血,炎性细胞浸润.结论 鹅膏蕈镍铬钴混合物对肝脏有明显损伤作用,对体内SOD活性也有一定影响.

    作者:周继;李玉白 刊期: 2007年第01期

  • 23例胰性脑病临床诊治研究

    目的 探讨胰性脑病的发病机制、诊断,评价各种治疗措施的疗效.方法 回顾分析23例PE的诊治经过及疗效.结果 本组治愈出院12例.11例死亡,病死率为47.8%,其中手术组死亡5例,病死率为62.5%,非手术组死亡6例,病死率为40%.5例死于MOSF,1例死于感染性休克.结论 PE的发生与胰酶、炎症介质和感染等因素有关;PE的诊断应以AP为基础,以精神神经症状的出现为条件,相关辅助诊断标准有待于进一步确定.AP的常规治疗、治疗MOSF及纠正水电解质等是PE的基础治疗,神经营养保护治疗是PE的重要内容.

    作者:张雨华;李晓娟;林立 刊期: 2007年第01期

  • 肾性骨病中西医治疗研究进展

    肾性骨病(ROD)是慢性肾功能衰竭(CRF)的主要并发症之一,据报道尿毒症病人100%有骨病存在.并且患者数量逐渐增加,严重影响其生活质量.近5年国内外学者做了大量研究,在中西医方面均取得了重大进展,现将成果综述如下.

    作者:刘宪莉;刘学东;张洪玲;宋立群 刊期: 2007年第01期

  • 我国传染病现状及防治体系建设

    自从有了人类,就有了与人类为敌的病原微生物,这一事实将永远持续下去.尽管人类与它们进行了长期艰苦卓绝的斗争,但迄今为止,被人类消灭的病原微生物只有天花病毒一种,而新问世或新发现的传染病种类却越来越多.

    作者:邹郁松 刊期: 2007年第01期

  • 吸烟对输卵管功能的影响

    吸烟对生殖的影响已得到公认,然而,大多数研究都没有深入到吸烟与输卵管这一与生殖息息相关的器官之间的相互关系.本文回顾输卵管的功能,尤其是拾卵和受精卵的输送以评价主动吸烟和被动吸烟对输卵管功能产生的影响.

    作者:行俊秀;王晓强;吴效科 刊期: 2007年第01期

  • 血浆置换治疗慢性重型肝炎终末期肝病模型预后分析

    目的 评估终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分系统对慢性重型肝炎患者短期(3个月)预后的预测能力及临床应用价值.方法 分析我院2003~2005年收治的391例慢性重型病毒性肝炎患者的临床资料,分为血浆置换(plasma exchange,PE)组和非血浆置换组,应用MELD模型公式对每个患者进行评分,观察3个月内的病死率.应用c-统计值(concordance statistic)评估MELD模型的预测准确性.结果 236例患者在3个月内死亡,病死率为60.6%.MELD分值在小于30和30~40的患者的病死率,PE组分别为25%、75%,而非PE组分别为42%、90.7%,PE组患者病死率明显低于非PE组,差异有统计学意义(P<0.05).MELD分值达到并超过40的患者的病死率,PE组和非PE组均为100%,两组的差异没有统计学意义.应用该模型预测患者3个月内死亡与否的佳MELD临界值,PE组为30,敏感性66.7%,特异性86.7%,c-统计值为0.823;而非PE组分别为27、76.4%、79.1%及0.832.结论 慢性重型肝炎患者短期内(3个月)死亡危险性随MELD分值的增加而上升,MELD模型能较准确预测慢性重型肝炎患者短期的临床预后.

    作者:周文红;应豪;叶俊茂 刊期: 2007年第01期

  • 血浆置换治疗慢性重型肝炎疗效影响单因素分析

    目的 探讨血浆置换(plasma exchange,PE)治疗对慢性重型肝炎疗效的影响因素.方法 对109例慢性重型肝炎患者在内科综合治疗基础上进行PE治疗,用SPSS软件分析治疗次数、年龄、发病基础、并发症、生化指标等各因素对PE治疗慢性重型肝炎疗效的影响.结果 治愈好转67例,有效率61.47%;PE的次数以3次为宜,随着次数增加,疗效无明显提高;年龄越大,疗效越差;早期、中期有效率明显高于晚期(P<0.01);在肝硬化基础上发生重型肝炎者有效率只有41.38%,低于携带者和慢性肝炎基础上发生重肝者(P<0.05);治疗前并发症越多,疗效越差;血清总胆红素(TBIL)升高、总胆固醇(TC)、胆碱酯酶活力(CHE)及凝血酶原活动度(PTA)下降的程度与PE的疗效有关(P<0.05).结论 PE为重型肝炎治疗提供了有效的手段,大大提高了疗效,但应把握治疗时机和治疗次数,及早治疗,严密观察病情变化,使病人得到及时救治.

    作者:金洁;叶卫江;王洁;俞海燕 刊期: 2007年第01期

  • 单味中药或中药提取物辅助治疗肝外阻塞性黄疸的作用与机制

    阻塞性黄疸(obstructive jaundice,OJ)分为肝外阻塞性黄疸和肝内阻塞性黄疸,肝外阻塞性黄疸发病原因复杂多样.目前,对辅助治疗肝外阻塞性黄疸的中药研究越来越多,而且越来越细化,突出表现在从原来的临床组方用药的摸索,到对其中有效单味中药及相应的提取物的作用与机制研究.诸多研究证实,单味中药在辅助治疗肝外阻塞性黄疸方面有良好的作用,本文将对有关药物的作用与机制进行综述.值得一提的是,这些治疗作用毕竟是有限的和辅助的,对于阻塞性黄疸的根本治疗还在于明确梗阻部位,尽早采取减黄措施,使胆管引流通畅.

    作者:张喜平;仇凤梅 刊期: 2007年第01期

  • 转化生长因子β研究新进展

    转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族由30多个成分组成,包括TGF-βs(即狭义的TGF-β)、活化素(activins)以及成骨蛋白(bone morphogenic proteins,BMPs),它在调节细胞生命周期、胚胎发育等人体众多的生物反应方面起重要作用[1].胚胎期TGF-β信号反常将导致发育异常,如果其在生后出现异常,将会引起许多疾患,常见的如肿瘤、自身免疫疾病、组织纤维化等[2].

    作者:代继宏 刊期: 2007年第01期

  • 加斯清与思密达合用对胆汁反流性胃炎疗效及胃内胆汁的影响

    胆汁反流性胃炎(BRG)是幽门括约肌功能失调或胃肠吻合术后使含胆汁酸的十二指肠液反流入胃引起的胃黏膜充血、水肿、糜烂等炎性病变[1].BRG是常见的消化道疾病,占慢性胃炎的16.03%,胆汁反流是导致消化性溃疡、慢性胃炎尤其是萎缩性胃炎的主要原因之一,也是引起胃黏膜癌前变化的原因之一,有效治疗本病对防止胃黏膜萎缩并阻断其癌变有积极的临床意义.近年来随着胃镜工作的普遍开展,BRG的诊断逐渐增多.我院自2001~2004年以来以加斯清合用思密达治疗胆汁反流性胃炎60例,并用24小时胃内胆汁连续监测法研究其对胃内胆汁的影响,现报告如下.

    作者:胡海燕;苑凤昌;刘颂 刊期: 2007年第01期

  • 浙江省2005年医药卫生科研进展

    一、基础医学研究1.我国大肠癌高危人群防治的基础与临床应用研究:浙江大学肿瘤研究所进行了4个方面的实验及现场人群研究.(1)散发性大肠癌癌前病变的干预阻断:在海宁市,24.44万人群经直肠镜筛查出4076例腺瘤及息肉高危人群,持续20年肠镜随访干预,先后摘除复发腺癌和息肉4076+1370例.

    作者:余金牛 刊期: 2007年第01期

  • 尿毒症患者血透前后血小板参数及血红蛋白测定临床意义

    目的 观察血液透析对尿毒症患者血小板参数及血红蛋白的影响.方法 用全自动血细胞分析仪检测健康人组和尿毒症组血透前后的PLT(血小板),MPV(血小板平均体积),PDW(血小板分布宽度)Hb(血红蛋白).结果 尿毒症组血透前与健康人组Hb、PLT、MPV、PDW差异非常显著,两者经t检验,P<0.01;尿毒症组血透前与血透后PLT、MPV、PDW、Hb差异显著,两者经t检验,P<0.01.讨论血液透析是一种有效的治疗手段,它可以影响尿毒症患者PLT、MPV、PDW、Hb,这对临床观察治疗有一定的意义.

    作者:韩颖;刘瑞萍 刊期: 2007年第01期

  • 脊髓延髓肌萎缩症研究进展

    脊髓延髓肌萎缩症(spinal and bulbar muscular atrophy,SBMA),又名Kennedy病,是一种X连锁隐性遗传病,其病程呈缓慢、渐进趋势,引起运动神经元的退化性功能紊乱,包括对称性肢体近端肌肉无力、萎缩,吞咽及发音困难等;同时有轻度雄激素不敏感症状.致病基因定位于X染色体长臂近侧端(Xq11-12),编码雄激素受体(androgen receptor,AR)蛋白.当编码区域内的三核苷酸序列CAG重复次数病态扩增超过一定限度时即导致疾病的发生,但是具体的致病机制尚未有统一的定论.

    作者:隋佳梅;黄尚志 刊期: 2007年第01期

  • 慢性肝病患者肢体感染临床诊治特点

    目的 分析、总结慢性肝病患者肢体感染的临床诊治特点.方法 回顾分析29例慢性肝病患者并发严重肢体感染的临床资料,总结其临床表现、治疗方案.结果 慢性肝病患者肢体感染尤其是弧菌性感染,病情重,并发多脏器功能不全率高、早期诊断,早期抗菌药物治疗和尽早外科手术暴露并彻底清除坏死组织效果好.结论 慢性肝病患者肢体感染应早期诊断和抗菌药物治疗,肢体肿胀坏死明显者尽早外科手术暴露并彻底清除坏死组织.

    作者:程俊彦;卢中秋;李景荣;卢才教;赵初环;黄唯佳 刊期: 2007年第01期

  • 外周血淋巴细胞中乙肝病毒cccDNA检测研究

    目的 做外周血淋巴细胞中乙肝病毒cccDNA检测研究,并探讨其临床意义.方法 采用淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,用荧光定量PCR法检测外周血淋巴细胞中cccDNA含量.结果 36例CAH患者中检出29例阳性(80.56%),61例CPH患者中检出32例阳性(52.46%),59例ASC标本中检出1例阳性(0.02%).47例健康人标本检测结果均为阴性.CAH组、CPH组、携带者及阴性对照组之间互相存在统计学差异(P<0.05),携带者组和阴性对照组之间无统计学差异.对定量资料的统计学分析显示:CAH组检测的基因拷贝数较CPH组基因拷贝数明显增高,两者具有统计学差异(P<0.05).结论 (1)cccDNA在外周血淋巴细胞中的存在,对于慢性乙肝病毒持续感染状态的建立和维持,可能具有重要意义.(2)检测外周血淋巴细胞乙肝病毒cccDNA存在及其含量高低,可以作为评估临床抗乙肝病毒治疗有效性的一个参考指标.(3)该检测还可用于乙肝患者治疗中的复发及预后判断.

    作者:徐岱;吴晓星;武静 刊期: 2007年第01期

  • 大孔树脂对地锦草、金银花叶与杭白菊总黄酮吸附分离性能研究

    目的 考察3种大孔树脂和聚酰胺对地锦草总黄酮、金银花叶总黄酮和杭白菊总黄酮的吸附分离性能,以探讨大孔树脂等在精制地锦草、金银花叶和杭白菊有效部位的应用.方法 以总黄酮为考察指标,筛选适用的大孔树脂等型号,评价大孔树脂的吸附与解吸工艺.用分光光度法测定总黄酮含量.结果 地锦草、金银花叶和杭白菊总黄酮精制的适用树脂分别为D101、DA201、DM301;DA201;D101、DA201、DM301.地锦草总黄酮对DA201和对D101、金银花叶总黄酮对DA201、杭白菊总黄酮对DA201和对D101的上样浓度分别为0.49~1.47和0.42~1.31、1.03~2.07、0.50~1.00和0.71~1.99mg/ml,动态吸附阶段的泄漏点分别为8和10、2、2和1BV,乙醇洗脱液中总黄酮含量较高的乙醇浓度分别为20%、30%、40%和20%、30%、40%;10%、20%、30%;30%、40%、50%和20%、30%、40%.温度对DA201和D101吸附地锦草总黄酮影响不大,而对DA201或D101吸附金银花叶和杭白菊总黄酮有一定影响.结论 3种大孔树脂和聚酰胺对中药总黄酮有效部位的提取精制有较大差别.

    作者:朱英;何远;李丽 刊期: 2007年第01期

  • 慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平与肝纤维化程度间相关性分析及意义

    目的 深入分析慢性乙型肝炎患者血清、唾液乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)含量与肝组织及血清纤维化程度间关系的结果,探讨有关因素的临床意义.方法 采用荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)精确定量配对检测200例慢性乙型肝炎患者血清、唾液中HBV-DNA含量;按肝组织纤维化程度(S)进行病理分级为0~4级,用放射免疫分析法(RIA)测定患者血清、唾液中层黏蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(IVC)、前Ⅲ型胶原(PCⅢ)的含量.结果 血清、唾液HBV-DNA含量与肝组织纤维化程度均无显著相关性(r=0.09,P=0.22;r=0.05,P=0.52);血清、唾液HBV-DNA含量变化与肝纤维化LN、HA、IVC、PCⅢ指标之间结果分析亦均无明显关系(P均>0.05).结论 HBV-DNA含量与肝组织及血清纤维化程度间无明显相关,其可能原因为:①复杂的病理免疫及发病机制;②病理分级方法学差异;③评价方法的局限性.了解这些因素的存在,能够帮助诊断及选择合理治疗.

    作者:潘红英;谌翠容;张永乐;李冰茹;叶荣夏;卢德荣;娄国强;施军平 刊期: 2007年第01期

  • 99m Tc标记肿瘤显像研究

    实体肿瘤中普遍存在乏氧细胞,利用甲硝唑能在乏氧组织浓聚的特点,合成了二乙三胺五乙酸(DT-PA)-甲硝唑.恶性肿瘤因为糖酵解作用增强,合成DTPA-DG(脱氧葡萄糖).因此我们把研究99mTc-DTPA-甲硝唑、99mTc-DTPA-DG一步法标记及质量控制的方法、肿瘤动物分布与显像方法做重点研究.

    作者:陈跃;李昌平;匡安仁;黄占文;何菱;杨西群;莫廷树;张春银;李举联 刊期: 2007年第01期

医学研究杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中国医学科学院