学术投稿

激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用

杨明;王丽萍;茅淑砚;吕静静;蒲春雪;王悦增

关键词:激光显微切割技术, 区域甲基化, 水平检测, 乳腺癌组织, 乳腺组织, 免疫组织化学技术, 特异性表达, 特异性蛋白质, 丝氨酸蛋白酶, 重亚硫酸盐, 甲基化状态, 织中表达, 睾丸, 分析技术, 低甲基化, 启动子, 基因组, 证明, 位点, 片段
摘要:睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术(MS-RDA技术)从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段.其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性.通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正常乳腺组织中则不表达.本文利用激光显微切割技术及重亚硫酸盐基因组DNA 序列法检测正常乳腺组织和乳腺癌组织中TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化状态,阐述TSP50乳腺癌组织中表达的机制.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • 人参皂甙-Rg3抑制增生性瘢痕中增殖细胞核抗原(PCNA)表达的实验研究

    增殖细胞核抗原(PCNA)是与细胞周期相关的核蛋白,其表达已被证实与细胞的增殖状态密切相关[1].研究表明PCNA与病理性瘢痕的形成关系密切[2].人参皂苷-Rg3(GS-Rg3)是从人参中分离提纯的一种单体,为四环三萜类人参二醇型皂甙[3].目前国内外关于GS-Rg3的研究主要是针对肿瘤的治疗,大量研究表明GS-Rg3能促进肿瘤细胞凋亡,并抑制其增殖[4].病理性瘢痕某些生物学特性与肿瘤相似,因此本实验通过建立兔耳增生性瘢痕,通过免疫组化技术研究GS-Rg3对兔耳增生性瘢痕中PCNA表达的影响.

    作者:赵自然;吴杰;张可佳;刘鹤松 刊期: 2011年第08期

  • 留置导尿致尿路感染的病原菌及耐药性分析

    住院患者发生的医院感染中尿路感染占42%,居医院感染的首位,其中93%由留置尿管引起[1].由于临床大量广谱抗菌药物的应用,使得尿路感染病原菌的菌群分布及细菌耐药性不断发生改变,为及时了解我院留置导尿引起尿路感染的病原菌现状及耐药性变化,给临床治疗提供可靠的用药依据,笔者对我院近两年留置导尿致尿路感染分离的314株病原菌进行鉴定和分析,现报道如下.

    作者:李丽荣;刘彦希;孙景春;王红 刊期: 2011年第08期

  • 呼出气冷凝液收集影响因素的探讨

    呼出气冷凝液(exhaled breath condensate ,EBC)与血液、汗液、泪液、尿液、唾液一样是检测呼吸道炎症因子的重要标本来源,其内含有大量的各种物质.这些物质分子的变化可反映氧化损伤、炎症以及相应治疗导致气道内环境的变化,故可用于监测呼吸疾病的变化[1-5].但现在影响EBC收集的因素很多,目前尚无规范的收集方法,因此标准的收集方法至关重要.本研究在自制呼出气冷凝液收集器的基础上对采集过程中呼出气的流量、EBC收集器的冷凝温度、收集的时间、呼吸方式等因素对EBC收集体积的影响进行分析,以探讨收集EBC的佳方式.

    作者:吕晓红;陈星海;李洋;钱东华 刊期: 2011年第08期

  • 甲减患者血清中泌乳素水平的变化

    甲状腺功能减退症作为一种常见的自身免疫性疾病,多见于性成熟女性.女性患者常伴有月经失调、闭经、溢乳,甚至导致不孕症的发生,严重者可出现垂体增生、蝶鞍增大,其发生机制可能与性激素的异常分泌呈密切相关.为了进一步探讨其相关性,我们随访了68例女性甲减患者在甲状腺激素替代治疗前后,血清泌乳素、雌二醇的变化情况;同时观察患者在替代治疗前后月经失调、溢乳等临床症状的改善情况.

    作者:王鑫;齐晨蕊;孙立娟 刊期: 2011年第08期

  • 探讨U-mALB、U-IgG、尿β2-MG在糖尿病早期肾病诊断中的检测意义

    随着糖尿病患者的增多,人们对糖尿病引起的血管病变特别是肾脏机能的损害也越加关注.如何早期发现肾脏血管的早期病变,对控制和预防糖尿病人患者肾损害有着非常重要的临床意义.

    作者:栾静;韩璐;范垂姝;刘飞 刊期: 2011年第08期

  • 磁性纳米复合粒子富集胎儿细胞在无创性产前诊断22q11.2微缺失综合征中的应用

    目的 探讨利用磁性纳米复合粒子富集胎儿细胞进行无创性产前诊断22q11.2微缺失综合征的可行性.方法 收集研究对象26例,分别经过磁性纳米粒子富集胎儿有核红细胞(研究组)及羊水穿刺胎儿细胞(对照组)进行荧光原位杂交(FISH)检测确定22q11.2是否存在异常,比较两组之间存在的差异.结果 两组在诊断22q11.2微缺失综合征方面一致率为100%(2/2),证实了利用该方法实现无创性产前诊断22q11.2微缺失综合征的可行性.结论 磁性纳米复合粒子富集胎儿细胞诊断22q11.2微缺失综合征为无创性的产前诊断,检测过程快速、准确、高效,较羊水穿刺胎儿细胞进行荧光原位杂交法具有无创及省力等优点,可望用于产前诊断22q11.2微缺失综合征,是一种值得推广的方法.

    作者:杜迎亭;潘颖;乔锋利;孙小淳;海德洋 刊期: 2011年第08期

  • Livin蛋白和LivinmRNA在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表达

    目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin和LivinmRNA在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用.方法 采用免疫组化和原位杂交方法检测87例散发性大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生及癌变组织中Livin在蛋白和mRNA水平的表达情况.结果 Livin蛋白在正常大肠黏膜、大肠管状腺瘤伴不同异型增生及腺瘤癌变病例中的阳性表达率分别为14.3%、52.3%和77.3%,腺瘤伴异型增生组和癌变组中Livin蛋白的表达明显高于正常大肠黏膜组(P<0.05),且癌变组中Livin蛋白的表达高于腺瘤伴异型增生组(P<0.05);Livin蛋白的表达随腺瘤异型增生程度的增高而增高,但无统计学意义(P>0.05).大肠管状腺瘤伴异型增生组和癌变组中Livin在mRNA水平的阳性表达率分别为50.8% 和81.8%,均明显高于正常大肠黏膜组,而且癌变组中LivinmRNA的表达明显高于腺瘤伴异型增生组(P<0.05);LivinmRNA随腺瘤异型增生程度的增高呈递增趋势,但无统计学意义(P>0.05).Livin在蛋白和mRNA水平的表达存在一致性(P<0.05).结论 Livin在大肠管状腺瘤癌变过程中可能起一定作用.

    作者:刘惠民;王立;吴文新 刊期: 2011年第08期

  • 三氯化镧对CBRH-7919细胞P21基因表达的影响

    研究表明细胞周期调控异常是肿瘤发生的重要原因[1,2],如果能阻抑肿瘤细胞周期的异常调控,则能阻滞肿瘤的进一步发展.稀土化合物具有明显的抑瘤性能[3-6],我们研究探讨了三氯化镧对大鼠肝癌细胞株CBRH-7919 P21基因表达的影响.

    作者:杨立明;郝利铭;姜文华 刊期: 2011年第08期

  • 激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用

    睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术(MS-RDA技术)从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段.其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性.通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正常乳腺组织中则不表达.本文利用激光显微切割技术及重亚硫酸盐基因组DNA 序列法检测正常乳腺组织和乳腺癌组织中TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化状态,阐述TSP50乳腺癌组织中表达的机制.

    作者:杨明;王丽萍;茅淑砚;吕静静;蒲春雪;王悦增 刊期: 2011年第08期

  • VEGF及MVD在外阴上皮内非瘤样病变、VIN及外阴鳞状细胞癌中的表达

    目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)在外阴上皮内非瘤样病变、外阴上皮内瘤样病变(VIN)及外阴鳞状细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法(S-P法)检测VEGF、MVD在外阴上皮内非瘤样病变40例(包括外阴鳞状上皮细胞增生20例及外阴硬化性苔藓20例)、VIN20例及外阴鳞状细胞癌20例中的表达.结果 VEGF在VIN中阳性表达率为35%,在外阴鳞状细胞癌中阳性表达率为80%,两者间具有显著差异性(P<0.05 ).MVD在正常外阴皮肤组织中MVD值为20.80,在外阴鳞状上皮增生中MVD值为29.45,在外阴硬化性苔藓中MVD值为17.40,在VIN中MVD值为38.90,在外阴鳞状细胞癌中MVD值为46.85,各组之间具有显著差异(P<0.05).结论 ①VEGF促进了VIN和外阴鳞状细胞癌新血管生成,在外阴癌变的过程中起到了重要作用.②外阴硬化性苔藓中存在微循环障碍.

    作者:刘晓军;刘俊宝;李莉巍;张炜阳 刊期: 2011年第08期

  • 应用常规MRI和ADC值鉴别中青年脑内多发急性、亚急性缺血梗死与急性脱髓鞘斑块

    目的 研究中青年急性或亚急性缺血梗死和急性脱髓鞘斑块在MRI的影像特征,并分析两者的ADC值差异,探讨两者的鉴别诊断要点.方法 回顾性分析15例中青年多发缺血梗死患者和12例脱髓鞘患者的脑内病灶,分析病变在常规MRI上分布、形态和信号特点,并选取22个急性,亚急性缺血梗死灶和25个急性脱髓鞘病灶,测量两组病灶内和病灶周围10-15 mm的正常表现脑白质(NAWM)的ADC值,比较是否存在差异.结果 缺血梗死灶分布以基底节、侧脑室旁及皮层为主,其次为分水岭区,多发病灶集中于单侧半球或以单侧为主,病灶形态呈片状,楔形.脱髓鞘病灶分布以双侧侧脑室旁额顶枕叶白质为主,呈圆形或椭圆形,边界清晰.急性或亚急性缺血梗死病灶的ADC值明显低于急性脱髓鞘病灶(6.08×10-4mm2/s±1.49 vs 9.68×10-4mm2/s±2.27,P<0.001),病灶周围NAWM的ADC值两组间未见有统计学差异.结论 根据常规MRI上病灶的分布与形态特点,联合能够反映病理基础的ADC值综合判断,可以成为鉴别急性或亚急性缺血梗死灶和急性脱髓鞘病灶的有效方法.

    作者:李郁欣;鲍奕舫;张军;耿道颖 刊期: 2011年第08期

  • 基因诊断在MNS血型系统中的应用

    MNS血型系统的抗原取决于寡糖和多肽构成的唾液糖蛋白(sialocophorins),存在于红细胞膜的血型糖蛋白A(glycophorin A,GPA),受控于4号染色体的GPA基因,在临床输血和遗传学研究中具有重要意义.近年来时有因MNS血型系统血型不符造成输血时产生抗体;或由于抗体的产生了造成血型鉴定和配血困难,甚至引起新生儿溶血病的报告[1-4],储备一定数量已知MNS血型的健康献血者是建立和完善红细胞库的基础,也是为临床提供更配型血液制品的基础.应用PCR-SSP技术对109名随机供血者进行了基因分型,并与血清学表型结果相比较,报告如下.

    作者:黄新宝;鞠海英 刊期: 2011年第08期

  • 胎儿纤连蛋白与宫颈长度联合测定预测双胎妊娠自发早产的价值

    双胎妊娠虽属生理现象,但是对母儿均有不良影响,早产是其重要的并发症,也是造成新生儿死亡和患病的主要原因.据统计,55%的双胎新生儿属于低出生体重儿,双胎围生期死亡率约为47‰-120‰,主要的围产儿死亡原因为早产,特别是早产所致的极低体重儿和呼吸窘迫综合征[1].因此,临床工作中早期有效预测早产的发生,及时采取干预措施,是降低早产发生、改善不良妊娠结局的关键.目前对早产的预测和临床监测的指标主要有:经超声检测宫颈长度、实验室生化指标和相关免疫指标等[2],但多数研究仅限于将这些指标应用于单胎妊娠早产的预测,而对双胎妊娠早产的预测研究甚少.本研究着重分析双胎妊娠中宫颈阴道分泌物胎儿纤连蛋白(fFN)联合宫颈长度的测定对双胎妊娠自发早产预测的意义.

    作者:温岩;孙晓艳;贾君容;孙晓峰 刊期: 2011年第08期

  • 多层螺旋CT及三维重建在小儿气管、支气管异物诊断中的价值

    气管、支气管异物是耳鼻咽喉科常见急重症之一,以1-3岁儿童多见,如不及时诊治,可能因窒息危及生命,取出异物是唯一的治疗方法.传统X线胸片及普通CT多以间接征象进行判断,对小儿气管、支气管异物定位虽有一定帮助但欠直观.随着多层螺旋CT(multi-slice spiral CT,MSCT)及三维重建技术的广泛应用,气管、支气管异物能够直观而准确的定位,小儿气道异物诊断准确性得到了极大的提高[1].我们对2007年8月至2010年3月35例术前MSCT加三维重建诊断为气管、支气管异物病例与手术结果对照,评价MSCT加三维重建在小儿气管支气管异物诊断中的价值.

    作者:万明 刊期: 2011年第08期

  • 血清抗苗勒管激素水平与多囊卵巢综合征关系的研究

    抗苗勒管激素(anti-muilerian hormone,AMH)是转化生长因子β(transforming growth factors β,TGF-β)超家族的成员之一,主要由窦前及小窦卵泡的颗粒细胞产生,具有抑制卵泡募集和影响优势卵泡选择的作用,是评价女性卵巢储备功能的敏感指标[1-3].多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是育龄妇女常见的内分泌代谢紊乱性疾病,发病机制不明确.本文对PCOS患者进行血清AMH水平检测,并进行分析.

    作者:秦辛玲 刊期: 2011年第08期

  • HBV感染者血清中前S-2抗原与血清标志物之间的相关性研究

    我国是乙型病毒性肝炎的高感染区,其是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种疾病,是我国肝硬化和肝癌的主要原因,成为危害我国人民身体健康的主要疾病[1],引起临床的重视.本研究探讨HBV感染者血清中前S-2抗原(PreS2-Ag)与血清标志物(HBV-M)之间的相关性,为该疾病的相关临床工作提供一定的参考信息,现将相关的资料总结报道如下.

    作者:虞玲 刊期: 2011年第08期

  • 骨膜促进兔膝关节骨-肌腱结点愈合的影像学评估

    骨-肌腱结点是在肌腱韧带和骨相连的应力集中部位,因此他们在很多运动中容易遭受损伤,此类损失也称之为结点病.国内外已经有相关的促进骨-肌腱结点愈合研究[1,2].但骨-肌腱结点由于涉及到肌腱、钙化软骨、未钙化软骨和骨四层过渡结构其愈合机制较为复杂,且其愈合的分子机制及细胞机制仍然不甚清楚,我们通过对促进骨-肌腱结点愈合的研究并进行影像学检测,以期从影像学角度探讨骨-肌腱结点愈合的相关机制,现报道如下.

    作者:李爱国;陈鸿辉;江斌;董飞;杨小红;叶伟雄 刊期: 2011年第08期

  • 不同剂量的氯吡格雷对介入术后P选择蛋白的影响

    P选择蛋白是一种在激活细胞表面表达的黏着分子,它能介导激活的上皮细胞或血小板与白细胞之间的反应.P选择蛋白在动脉粥样硬化斑处表达增加,在不稳定型心绞痛病人中也发现这种蛋白分子具有高血浆水平.P蛋白与组织发生血栓性炎症有明显的相关性[1].因此我们推测大剂量的氯吡格雷也能有效减少血浆P蛋白的水平.从而起到防止术后血栓和保护心肌的作用.因此我们测定了术后在应用了不同药物剂量(氯吡格雷)下患者的血浆P蛋白浓度变化.旨在明确使用了600 mg氯吡格雷较长规剂量相比能否有效的降底P选择蛋白的浓度,同时改善患者的预后.

    作者:吴其明;宋毓青 刊期: 2011年第08期

  • PCR-SSP法在强直性脊椎炎患者中HLA-B27的诊断作用

    HLA-B27是人类白细胞抗原B位点上的一个重要的等位基因,与脊椎关节系统疾病如强直性脊柱炎(AS)、反应性关节炎(ReA)、Reiter 氏综合征(RS)等许多严重危害人类健康的疾病密切相关.HLA-B27的检测有血清学检测和PCR技术检测两种,我们对疑为强直性脊椎炎患者的HLA-B27进行了两种方法的检测,报告如下.

    作者:周建月;田晓丰 刊期: 2011年第08期

  • 图形视网膜电图联合视网膜神经纤维厚度测定在青光眼诊断中的临床应用价值

    目的 探讨图形视网膜电图联合视网膜神经纤维厚度测定对于青光眼的诊断的临床意义.方法 选自2007年5月至2009年09月在我院经治的青光眼患者40例进行PERG,PVEP和OCT及视野检查,并对检查结果进行分析处理,分析各种方法对于青光眼的早期诊断所具有的特异性和敏感性.结果 PERG、PVEP在青光眼组与对照组的比较中差异具有统计学意义(P<0.05).青光眼组PERG与PVEP振幅异常率比较差异具有统计学意义(P<0.05).青光眼组PERG与OCT异常率指数比较差异具有统计学意义(P<0.05);在早期青光眼的异常率的比较显示PERG较PVEP,OCT和视野明显(P<0.05).结论 图形视网膜电图联合视网膜神经纤维厚度测定对于青光眼的诊断具有很大的临床意义,在很大程度上提高了青光眼早期诊断的准确率,值得在临床广泛使用和推广.

    作者:吴文洁 刊期: 2011年第08期

中国实验诊断学杂志

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主办:吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院