学术投稿

dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗污染能力评价

王忠永;吴文兵;陶志华;陈晓东;戴菁

关键词:尿嘧啶DNA糖基化酶, 脱氧尿嘧啶, 荧光定量PCR
摘要:目的探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力.方法用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测.将一系列不同浓度的含dUTP的HBV-DNA PCR扩增产物作为污染源,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中,在荧光定量PCR仪上进行定量检测,从而得出含dUTP/UDG的PCR反应体系的抗污染能力.结果 1.佳抗污染实验条件:UDG酶含量0.05 U,消化时间37℃5 min,灭活时间92℃1 min;dUTP100%代替dTTP,四种底物浓度相等.2.含0.05 U的UDG抗污染反应体系对每管浓度为103拷贝/ml的污染物可完全消化,并随UDG含量的增高及消化时间的延长,抗污染能力增强.结论 dUTP/UDG反应体系的应用能有效防止PCR产物污染,但抗污染能力是有一定限度的,尚需加强实验室标准化管理,才能真正达到抗污染效果.
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    作者:梁红艳;温洁;姜晓峰 刊期: 2003年第02期

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    作者:李志艳;徐国兵;夏铁安;朱立华 刊期: 2003年第02期

  • 尿液内发现罕见蠊缨滴虫1例报道

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    作者:陈翠娥;刘德贵 刊期: 2003年第02期

  • Graves'病患者不同病程中白介素18水平分析

    Graves'病是一种器官特异性自身免疫性疾病,常由于甲状腺损伤释放出甲状腺成分刺激机体产生促甲状腺受体抗体(TRAb)和甲状腺素受体刺激抗体 (TSI),或病毒、细菌感染后产生的抗体与甲状腺组织成分发生交叉反应而引起发病,在其中,细胞因子起着非常重要的调控作用 .IL-18是新近发现的一种Th1相关性细胞因子,本文探讨了其在Graves'病患者不同病程中的表达差异,现将结果报告如下.

    作者:王小晋;俞伟男 刊期: 2003年第02期

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    作者:李秀臣;赵丛海;姜丽 刊期: 2003年第02期

  • 死胎胸腺组织中HBVDNA表达的初步探讨

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    作者:赵伟;刘伟;罗婵;刘兰侠;王兰 刊期: 2003年第02期

  • 肿瘤坏死因子及其可溶性受体对狼疮活动的价值

    目的探讨肿瘤坏死因子(TNFα)和可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)对系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动的价值. 方法分别采用狼疮活动标准记分(LACC)和SLE疾病活动指数(SLEDAI)判断狼疮活动和活动程度,采用双抗夹心ELISA法分别检测35例活动、25例稳定SLE和20例对照血浆TNFα、sTNFR1和sTNFR2水平. 结果 SLE患者血浆sTNFR水平显著高于正常对照组.狼疮活动、稳定及对照sTNFR水平差异显著;SLE活动期sTNFR1、sTNFR2升高者显著多于稳定期.sTNFR2水平与SLEDAI显著正相关(r=0.40,P<0.01);sTNFR1与sTNFR2显著正相关(r=0.62,P<0.001). 结论 SLE患者血浆sTNFR1与sTNFR1显著正相关(r=0.62,P<0.001).结论 SLE患者血浆sTNFR1、sTNFR2均升高,狼疮活动时sTNFR1、sTNFR2升高的患者明显增多,可作为判断狼疮活动的指标.

    作者:汪国生;李向培;厉小梅;单曙光;钱龙;王玮;张宏 刊期: 2003年第02期

  • 螺旋CT双期增强扫描对壶腹周围癌的诊断价值

    壶腹周围癌是一组起源于瓦特氏壶腹,胰头部胰管上皮,胰头部胆总管以及覆盖于胆总管乳头上十二指肠黏膜或其腺体的肿瘤,其中前三者较常见.本文着重讨论前三种肿瘤,因其有相似的临床症状且解剖部位毗邻,鉴别时困难,螺旋CT双期增强扫描可清晰地显示各种肿瘤特征性CT表现,大大提高了术前诊断的准确率.

    作者:毛淑华;张丽蓉;赵素岗 刊期: 2003年第02期

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    梗阻性黄疸的临床定位、定性诊断在其临床治疗中起着决定性作用,超声以其简便、经济、无创的优势为其他手段所不能替代并成为首选检查方法.本文对30例恶性梗阻性黄疸的超声声像图特征回顾分析并报告如下.

    作者:杨冬艳;孙志霞;王辉;伊莲花;周金丹 刊期: 2003年第02期

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    目的进一步探讨活化的部分凝血活酶时间(APTT)对低分子量肝素(LMWH)治疗的实验监测价值.方法对LMWH治疗前及治疗后的262份血浆标本进行了APTT和抗-Ⅹa的测定,观察不同抗-Ⅹa活性水平的LMWH对APTT的影响.结果当LMWH的抗-Ⅹa活性在0.8~1.2 U/ml时,APTT中度延长,当LMWH的抗-Ⅹa活性大于1.2 U/ml时,APTT明显延长.结论当使用治疗剂量的LMWH,特别是剂量≥1 mg/kg体重时,须常规监测APTT作为安全用药的实验检测指标.

    作者:刘贵建;王静;张永宏;赵淑芳;刘锦丽 刊期: 2003年第02期

  • 大剂量60Co γ照射加深低温保存对大鼠同种带瓣主动脉活性的影响

    目的研究大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活性与60Co γ照射剂量之间的关系.方法分别采用300、600、900和1200 Gy四种剂量对大鼠同种带瓣主动脉进行照射及在液氮中深低温保存三个月,观察不同剂量照射后同种带瓣主动脉的病理变化和内皮细胞活性.结果大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与照射剂量有关.在接受300和600Gy照射时内皮细胞活动度分别为(85.67±2.58)% 和(83.55±2.75)%,但它们与对照组相比无显著性差异(P>0.05);在接受900和1 200Gy照射时内皮细胞活动度分别为(72.29±1.96)% 和(32.57±3.48)%,它们与对照组相比有显著性差异(P<0.01).结论大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与60Co γ照射剂量有关,600Gy可作为参考剂量用于降低同种带瓣主动脉免疫原性的研究.

    作者:袁茂昆;赵洪序;张秀和 刊期: 2003年第02期

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    作者:卢兴国;徐志 刊期: 2003年第02期

  • 明胶酶A(MMP-2)蛋白在评估膀胱移行细胞肿瘤进展期的作用

    目的研究明胶酶A(MMP-2)在不同病理分期、分级的膀胱移行细胞肿瘤(TCCB)中的表达规律,并探讨以MMP-2来判断TCCB进展情况的可能性及方法.方法通过免疫组织化学和明胶酶谱等方法对47例手术切除的TCCB组织中MMP-2蛋白进行定量检测,同时取5例正常膀胱组织作为对照.对检测结果进行统计学分析.结果 (1) MMP-2蛋白在TCCB中呈阳性表达,在正常膀胱组织中MMP-2不表达或呈微量表达;(2)随着TCCB临床病理分期、分级的升高,MMP-2表达量呈现增高趋势,有统计学意义(P<0.01).结论 MMP-2蛋白表达与TCCB的恶性发展密切相关.临床上可将MMP-2作为判断TCCB进展情况的标志物.

    作者:周洪澜;王医术;侯毅;李一雷;王心蕊;赵忠文 刊期: 2003年第02期

中国实验诊断学杂志

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