揭由坤；叶璐；屈晓辉；付秋风
循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)及播散肿瘤细胞(disseminated tumor cell,DTC)的可靠检测主要取决于有效的细胞分离与鉴别,目前为新颖的“差相富集-多重瘤标免疫荧光染色-染色体荧光原位杂交(SE-iFISH)”技术平台,首次将CTC/DTC的富集方法与后续的原位、同步检测肿瘤细胞染色体异倍体的核型分析及多种肿瘤标志物的表型分析等进行有效整合,并成功应用于肿瘤细胞的基础分析与临床检测.大量临床实验证明,独特的SE-iFISH可以为分析CTC/DTC在肿瘤早期诊断、疗效快速评估、肿瘤耐药与复发的实时监测等提供可靠的技术保障.该文阐述SE-iFISH在不同瘤种患者及人源肿瘤动物模型体内的有效检测方法,并锁定具有不同临床意义的不同表型与核型的CTC/DTC亚类细胞,为后续的肿瘤单细胞分析与实验提供指导.
作者：由磊；赵烨；阚秀；李一林；王东民；张爱群；王红霞；刘颖；王丹丹；林平；郑直 刊期： 2017年第03期
目的 探讨p57kip2、ER、PR在男性乳腺癌(male breast cancer,MBC)中的表达及意义.方法 采用免疫组化EliVision法检测50例MBC、20例男性乳腺导管内原位癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)和20例男性乳腺发育(gynecomastia,GYM)组织中p57kip2、ER、PR蛋白的表达.结果 p57kip2蛋白在GYM中的表达高,在MBC中的表达低;MBC与DCIS、GYM中的表达相比,差异有显著性(P ＜0.05);p57kip2 蛋白表达在DCIS与GYM中相比,差异有显著性(P＜0.05).ER、PR蛋白在GYM中的表达高,在MBC中的表达低;ER、PR蛋白表达在MBC与GYM中相比,差异有显著性(P＜0.05).在MBC中,三者表达均与临床分期、组织学分级有关(P＜0.05),p57kip2蛋白表达与淋巴结转移有关(P＜ 0.05);p57kip2与ER呈负相关(P＜0.05),p57kip2与PR、ER与PR均呈正相关(P＜0.05).结论 男性乳腺组织从良性增生到恶性转化中p57 kip2、ER、PR蛋白表达逐渐降低,甚至完全丧失;联合检测p57kip2、ER、PR有助于MBC的诊断及预后判断.
作者：罗祖强；庄志泉；董为松；张凯 刊期： 2017年第03期
目的 观察RNF2在乳腺病变组织及乳腺上皮细胞系中的表达,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系.方法 运用免疫组化EnVision两步法检测21例乳腺良性病变组织和112例乳腺癌组织中RNF2蛋白的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系.应用qRT-PCR法检测2株乳腺正常上皮细胞系和5株乳腺癌细胞系中RNF2基因的表达.结果 乳腺癌组织中RNF2蛋白表达水平与乳腺良性病变组织相比显著升高(P＜0.05),且其表达与乳腺癌肿瘤直径、腋窝淋巴结转移数目、TNM分期显著相关(P均＜0.05);与患者年龄、组织学分级、ER、PR、HER-2表达情况无显著相关(P均＞0.05);乳腺癌细胞系RNF2 mRNA水平亦高于乳腺良性上皮细胞系(P＜0.05).结论 RNF2在乳腺癌组织中高表达,可作为乳腺癌治疗的潜在靶点.
作者：李庆；吴正升；沈玉君；冯利杰；沈玉先 刊期： 2017年第03期
目的 探讨管状囊性肾细胞癌(tubulocystic renal cell carcinoma,TRCC)的临床病理特征、诊断与鉴别诊断.方法 对1例60岁男性患者额部转移性TRCC行HE及免疫组化EnVison两步法染色,光镜下观察组织形态学特征,并复习相关文献.结果 镜下可见肿瘤由纤细的纤维性间质分隔的大小不等的囊状和小管结构组成,囊腔内含嗜伊红蛋白,囊腔内衬覆扁平或柱状上皮细胞,部分呈“鞋钉样”突向腔内.细胞核圆形或卵圆形,空泡状,可见核仁,Fuhrman核3级,核分裂象不易见,胞质丰富,嗜酸性.免疫表型:肿瘤细胞vimentin、P504s、CK19、CKpan和EMA均呈弥漫强阳性,CD10和CK7均呈阴性,Ki-67增殖指数＜5％.结论 TRCC十分罕见,好发于成年男性,大部分患者预后良好,复发和转移者罕见,转移性病灶依赖于病理学诊断,并为原发灶的查找提供重要线索和依据.
作者：杜薇；姚丽青 刊期： 2017年第03期
目的 探讨细胞免疫化学p16/Ki-67双染预测子宫颈上皮内高级别瘤变及其意义.方法 随机收集行细胞学检查标本123例,其中不明意义的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell of undetermined significance,ASC-US)及以上病例(合计103例)同时行高危人乳头瘤病毒(high risk-human papillomavirus,HR-HPV)检测且具有活检结果,20例液基细胞学检查未见恶性细胞和上皮内病变细胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM),通过细胞免疫化学双染检测p16/Ki-67结果.结果 20例液基细胞学NLIM的标本中p16/Ki-67双染结果均阴性,ASC-US病例中预测CIN2+的敏感性66.67％、特异性95.92％、阳性预测值50.00％、阴性预测值97.92％,低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)病例中预测CIN2+的敏感性91.67％、特异性95.00％、阳性预测值91.67％、阴性预测值95.00％,高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL)病例中预测CIN2+的敏感性92.86％、特异性0、阳性预测值92.86％、阴性预测值0;ASC-US及以上病例预测CIN2+的敏感性89.66％、特异性94.28％、阳性预测值86.67％、阴性预测值95.65％.结论 HR-HPV阳性的ASC-US和LSIL病例中进行p16/Ki-67双染检测,可以明显提高CIN2+检出的预测值,细胞免疫化学p16/Ki-67双染有望成为HPV筛查的有效辅助方法.
作者：印永祥；赵华；梁洁；张金秋；赵敏；王家俊 刊期： 2017年第03期
目的 探讨混合性副神经节瘤(paraganglioma,PGL)的临床病理特征、免疫表型和分子遗传学改变及其预后的关系.方法 收集7例混合性PGL,采用免疫组化EnVision两步法检测相关免疫组化标志物.结果 7例混合性PGL均与节细胞神经瘤混合,患者年龄21～74岁,平均51岁,男女比为2∶5,肿瘤发生于腹膜后、消化道、头颈等部位.CT均示占位性病变,肿瘤边缘清晰,密度不均,可有坏死、出血及囊性变,动脉期呈轻～中度强化,静脉期强化减弱.镜下肿瘤由两种肿瘤细胞构成,一种呈嗜铬细胞分化,细胞排列成不规则巢、团状或腺泡状,以小巢、团状为主,间质血管丰富.细胞大小一致,体积较大,呈多边形,核圆形或卵圆形,可见小核仁,染色质细颗粒状,胞质丰富,粉染,颗粒状,核分裂少见.另一种为束状及编织状排列的施万细胞背景下,散在或聚集分布的神经节细胞,细胞体积大,胞质丰富,核仁清楚,散在分布或排列成群,并可见神经纤维.免疫表型:PGL成分中Syn、CgA均呈弥漫强阳性,而在节细胞神经瘤成分中则显示弱阳性或灶阳性;施万细胞和间质细胞S-100均呈阳性;部分PGL中SDH-B呈灶阳性,部分不表达或弱表达SDH-B;7例Ki-67增殖指数均小于1％.结论 混合性PGL临床非常罕见,其发病部位多位于腹膜后,女性多见,影像学CT示动脉期呈轻～中度强化,静脉期强化减弱,肿瘤密度不均,可有坏死、出血及囊性变.SDH-B表达缺失,提示患者预后不良.
作者：李微；付尧；郑重；吴鸿雁；陈骏 刊期： 2017年第03期
目的 探讨KAI1/CD82基因在鼻咽癌侵袭转移中的作用,分析转染KAI1/CD82基因的内皮祖细胞在鼻咽癌防治中的应用价值.方法 应用过表达KAI1/CD82基因的慢病毒转染血管内皮祖细胞,获得高表达KAI1/CD82基因的稳转细胞(KAI1/CD82-EPCs);构建荷人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,通过裸鼠尾静脉注入KAI1/CD82-EPCs;观察KAI1/CD82-EPCs对裸鼠腋下移植瘤及其转移灶的影响.结果 EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组成瘤时间(天)分别为14.70 ±3.81、15.05±3.85、14.20±3.55,差异无统计学意义(P =0.771);EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组移植瘤的重量(g)分别为1.388±0.204、1.487±0.223、1.485±0.234,差异无统计学意义(P=0.274);EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组肺转移灶生成率分别为55％、45％和10％,差异具有统计学意义(P=o.005),三组肺脏的转移灶数目分别为34.27±5.35、38.44±9.63、17.50±3.54,差异具有统计学意义(P=0.007);注射KAI1/CD82-EPCs的实验组肺转移灶KAI1/CD82呈阳性,EPCs组和空白组肺转移灶KAI1/CD82呈阴性.结论 转染KAI1/CD82基因的EPCs对鼻咽癌裸鼠模型的肺转移具有抑制作用.
作者：汪庚明；周燕；孙谦；徐洪波；查从亮；江浩；项平；陈振东 刊期： 2017年第03期
目的 探讨浅表肢端纤维黏液瘤的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断.方法 对1例发生于右手食指末端的浅表肢端纤维黏液瘤的临床表现、组织学形态及免疫表型进行回顾性分析,并文献复习.结果 患者男性,78岁,因右手食指末端肿块伴疼痛就诊.术中见肿块累及甲床,深至骨膜.大体可见肿块界限不清,直径约2 cm,切面灰白色,实性,质韧.镜下肿瘤位于真皮层内,无包膜.肿瘤实质由星形及梭形纤维母细胞样细胞组成,肿瘤细胞杂乱排列于间质中,部分区域呈席纹状及束状排列,间质呈黏液样及黏液胶原样.黏液样基质内见较丰富的纤细血管,并见散在的肥大细胞.肿瘤细胞温和,轻度异型.肿瘤无坏死,未见核分裂象.免疫表型:肿瘤细胞vimentin、CD34、CD99均呈弥漫阳性,EMA灶阳性,S-100、HMB-45、SMA、MSA、desmin、GFAP和CK均呈阴性.术后随访10个月,未见复发.结论 浅表肢端黏液瘤是一好发于指趾末端的软组织肿瘤,熟悉其临床病理特征,有助于与其他发生于指趾的软组织黏液性肿瘤鉴别.
作者：王振；陈祥义；邬万新 刊期： 2017年第03期
患者男性,66岁,因发现上腹部包块半个月入院.患者自觉进食后包块明显,有轻度压痛,无腹胀,恶心,呕吐.头腹部平扫+增强CT检查示肝左叶外侧见一类圆形多结节状低密度影,大小6.1 cm×6.8 cm,考虑肝脏少血供恶性肿瘤,胆管细胞癌可能性大(图1),遂行左肝肿瘤根治性切除术(包括胆囊切除术).
作者：魏淑飞；黄文勇；程林；徐晓；汪亮亮；曹芳；李婷 刊期： 2017年第03期
目的 探讨富于细胞性血管纤维瘤(cellular angiofibroma,CAF)的临床病理、免疫表型、鉴别诊断及预后.方法 对3例CAF行HE和免疫组化MaxVision法染色,分析临床资料并复习相关文献.结果 CAF瘤细胞丰富,呈短梭形,核卵圆形,偶见核分裂象;瘤组织中含大量管壁厚薄不一的血管,部分管壁玻璃样变性,间质可见水肿及黏液样变性.免疫表型:瘤细胞vimentin呈弥漫阳性,CD34、ER、PR呈阳性或部分阳性,SMA、desmin、S-100均呈阴性.结论 CAF是一种少见的间叶性肿瘤,多发于两性生殖区,其镜下以密集的短梭形细胞和丰富血管为特征,治疗以手术切除为主,患者预后良好.
作者：龚智泉；刘欣；王力夫；孔令非 刊期： 2017年第03期
目的 探讨广西地区健康人群与不同地区、种族人群的内皮细胞蛋白C受体(endothelial cell protein C receptor,EPCR)基因rs9574 C/G(4678 C/G)位点多态性分布频率的差异.方法 通过单碱基延伸的PCR技术及DNA测序法检测130例广西正常体检人群EPCR基因3'-非编码区rs9574 C/G基因型及等位基因型频率,并对比分析其与中国北京人、非洲人、日本人和欧洲人的基因型及等位基因型频率分布差异.结果 广西地区健康人群EPCR基因rs9574 C/G位点存在三种基因型,分布频率分别为CC(39.2％)、CG(46.2％)、GG(14.6％),等位基因频率分别为C(62.3％)、G(37.7％).rs9574 C/G位点基因型及等位基因型分布频率在男女组间相比差异无统计学意义(P＞0.05).广西人群rs9574 C/G位点基因型分布频率与欧洲人和非洲人相比差异有统计学(P＜0.05),而与日本人、中国北京人相比差异无统计学意义(P＞0.05);等位基因分布频率与非洲人、欧洲人和日本人相比差异有统计学意义(P＜0.05),而与中国北京人相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 广西地区人群EPCR基因3'-非编码区rs9574 C/G位点多态性在不同地区、种族人群间的分布频率存在差异.
作者：梁燕冰；彭丁伟；黄雨睛；韦叶生；罗维贵；李军；廖品琥 刊期： 2017年第03期
目的 探讨青少年结膜痣(juvenile conjunctival nevus,JCN)的临床病理学特征及免疫表型、诊断及鉴别诊断.方法 对12例JCN进行光镜观察及免疫组化EnVision两步法染色,并复习相关文献.结果 12例患者平均年龄15.5岁,在眼球结膜、泪阜和角结膜缘可见色素性斑块.镜下均为复合痣,非黏附性痣细胞团融合性生长,且缺乏皮肤痣常见的成熟现象.痣细胞多为上皮样,大小形态较一致,整个病变中缺乏核分裂象和坏死.免疫表型:HMB-45阳性主要表达于交界区和黏膜固有层上部,Ki-67增殖指数2％～4％.结论 JCN是特殊部位发生的良性痣细胞增生性病变,需与结膜恶性黑色素瘤鉴别,临床资料、组织学改变、免疫表型及基因检测对鉴别诊断均具有重要作用.
作者：陈倩；杨杰；王彬 刊期： 2017年第03期
目的 探讨细胞蜡块结合免疫组化在恶性胸水的诊断及鉴别诊断中的作用,并分析胸水细胞蜡块在肺腺癌分子病理检测中的作用.方法 回顾性分析142例恶性胸水的液基细胞学、细胞蜡块HE染色以及免疫组化EnVision两步法染色,并结合细胞形态抗体的表达情况对恶性胸水进行肿瘤分类.采用ARMS-PCR法对其中40例经免疫组化EnVision染色确诊为肺腺癌的胸水细胞蜡块,进行表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变检测.结果 142例胸水细胞蜡块经免疫组化染色证实肺腺癌99例,肺小细胞癌4例,肺鳞状细胞癌3例,乳腺癌13例,卵巢癌9例,胃癌2例,甲状腺癌1例,子宫内膜癌1例,间皮瘤5例,淋巴瘤3例,恶性黑色素瘤1例,滑膜肉瘤1例.40例肺腺癌中EGFR基因突变20例,其中19del突变9例,L858R突变11例.结论 恶性胸水细胞蜡块行免疫组化检测不仅有助于肿瘤的明确诊断,更有助于对肿瘤进行分类并判断肿瘤原发部位及帮助判断预后.利用胸水细胞蜡块可以对肺腺癌进行EGFR基因突变的检测,为肺腺癌的基因检测提供新型的标本来源.
作者：隋燕霞；柳雨；蒋娜；蒋伊娜；张冠军 刊期： 2017年第03期
石蜡包埋法是目前病理科常用的组织包埋方法之一[1],日常工作中,受组织结构及取材等多因素影响,一个脱水盒中需放置多块组织,在石蜡包埋时,多块组织面难以保证在同一包埋面上,不仅导致组织切片切面不全,影响诊断,而且反复深切或重切,会造成局部病变组织缺失、延误诊断等严重后果.实践工作中,我们运用斜面包埋手法,较好地解决了多块数、多层次类组织包埋的平整度,有效避免因包埋导致的切片不全,现将斜面手法应用在石蜡包埋中及注意事项总结如下.
作者：杨洋；于洁；潘成然；张宪菊；郭琳；陈忠政；季昌华 刊期： 2017年第03期
1临床资料本例读片资料由四川大学华西医院病理科提供,通讯读片编号B10-3.患者女性,37岁,发现右侧乳腺包块2年余,伴进行性长大半年.临床查体:右侧乳腺12点距乳头5 cm处扪及不规则包块,大小6 cm×5 cm,质硬,表面欠光滑,边界不清.挤压右侧乳头后见中央偏内侧单孔血性溢液.双侧腋窝及锁骨区未扪及肿大淋巴结.包块活检病理诊断考虑“恶性肿瘤”,遂行不保留乳头乳晕的右侧乳腺皮下单纯切除和右腋窝Ⅰ、Ⅱ水平淋巴结清扫.
作者：陈卉娇；卫亚妮；景秋洋；步宏；魏兵 刊期： 2017年第03期
组蛋白H3是细胞核染色质的重要组成成分,也是核心组蛋白之一[1-2].PHH3是磷酸化的组蛋白H3,其只存在细胞有丝分裂期而不出现于分裂间期和凋亡细胞中,从而有利于有丝分裂细胞的计数[1-4].Ribalta等[4]报道PHH3蛋白可以帮助脑膜瘤的肿瘤分级以及区分凋亡细胞;在皮肤的平滑肌肿瘤中简单计数核分裂细胞[5];Tsuta等[6]认为,PHH3同样可以在肺神经内分泌癌中计数核分裂细胞;除此之外,PHH3还可以预测星形细胞瘤患者的生存期[7],协助子宫内膜癌的病理分级等[8].因此采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测PHH3蛋白表达具有重要意义,本文现采用不同IHC法检测PHH3,探讨佳染色方案.
作者：高丽丽；朱长乐 刊期： 2017年第03期
随着人们生活水平的日益提高以及医疗条件的不断改善,病理切片向高等级医院会诊也越来越多,患者不及时归还HE切片及组织蜡块的情况也时有发生,病理档案资料仅存有一些免疫组化切片,如果想把此病例作为教学和学术交流将难以进行.我们通过反复试验,摸索出一种将免疫组化标记褪色后,重新进行HE染色的病理技术,现介绍如下.
作者：鲁波；包磊；任丽芳；沈寅；张鹏；钱洁芳 刊期： 2017年第03期
目的 探讨CD90在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征、分子分型的相关性.方法 构建80例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变的组织芯片,采用免疫组化MaxVision法检测乳腺不同病变组织中CD90、ER、PR、Ki-67和HER-2的表达水平,并进一步分析其相关性.结果 CD90在乳腺浸润性导管癌和乳腺良性病变中的阳性率分别为62.5％和20.0％,两者差异有统计学意义(P ＜0.001);CD90表达与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移相关(P＜0.05),与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期及组织学分级无关(P＞0.05);在乳腺浸润性导管癌不同分子亚型中,CD90阳性率以Luminal A型低(40.0％)、三阴型高(82.4％),各亚型之间差异有统计学意义(P＜0.05);CD90与ER(r=-0.342,P＜0.05)、PR(r=-0.374,P＜0.05)表达呈负相关,与Ki-67表达之间无相关性(r=0.084,P＞0.05).结论 CD90表达与乳腺癌分子分型有关,其高表达提示患者预后不良.
作者：杨海玉；刘勇；戴艳枝；吴晓霞；黄桃；袁晟 刊期： 2017年第03期
目的 探讨肿瘤BRCA1细胞内定位对放射线和PARP抑制剂敏感性的影响.方法 采用siRNA干扰抑制乳腺癌细胞株MCF7内源性BRCA1表达,转染BRCA1细胞内定位不同的载体:pCMV-3xFlag-WT-BRCA1、pCMV-3 xFlag-NES-BRCA1、pC-MV-3xFlag-NIS-BRCA1.采用免疫荧光法检测BRCA1的细胞定位及细胞核γ-H2AX和Rad51核焦点形成,应用流式细胞技术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测体外细胞存活.结果 转染WT-BRCA1有47％细胞核表达,23％细胞质表达,30％细胞质和细胞核均表达,NES-BRCA1 mutant表达主要定位于细胞核(87％);NLS-BRCA1 mutant定位于细胞质(82％).WT-BRCA1、NES-BRCA1 mutant和NLS-BRCA1 mutant三种载体转染的细胞4 Gy放射处理后2h,Rad51核焦点阳性细胞数分别为87％、84％及13％;放射后24 h,γ-H2AX核焦点阳性细胞分别为22％、25％及59％.NLS-BRCA1 mutant转染细胞较WT-BRCA1和NES-BRCA1 mutant转染细胞ABT-888和放射处理后诱导的凋亡细胞增加,克隆存活减少.结论 BRCA1的细胞内定位影响DNA双链断裂同源重组修复,并可预测肿瘤对放射和PARP抑制剂的敏感性.
作者：姜桔红；刘静；李智；顾莹莹 刊期： 2017年第03期
患者男性,75岁.因发现舌根部肿物1个月余入院.入院后体检发现舌根部有一直径约3 cm的隆起型肿物,伴吞咽困难.未发现全身浅表及深部淋巴结肿大.遂行肿物活检术.病理检查眼观:小组织0.6 cm ×0.5 cm ×0.3 cm大小,灰白色.镜检:鳞状上皮下见淋巴样肿瘤细胞呈弥漫或模糊结节样增生,结节内部见少量CD21阳性的滤泡树突网.肿瘤细胞分布弥漫、黏附性差,细胞大到中等大小.大部分瘤细胞胞质呈透明空泡状、核偏位贴近胞膜,细胞呈印戒样,形态酷似印戒细胞癌(图1).散见核分裂象,但未见Russell小体.免疫表型:肿瘤细胞CD20强阳性(图2),广谱CK、CD3、CD10、BCL-6、MUM1、Cyclin D1均阴性,Ki-67增殖指数约40％;PAS染色呈阴性.
作者：侯力；张晴晴；孙雷；任秀和；吕泉清；朱旭 刊期： 2017年第03期
临床与实验病理学杂志
主管:
主办：安徽医科大学;中华医学会安徽分会
