耿僡临;石素胜;宣立学
目的 探讨miR-185影响人肺癌细胞迁移和侵袭能力的分子机制.方法 在肺癌细胞系H520和A549中转染miR-185mimic获得miR-185过表达,利用Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞的迁移和侵袭能力;荧光素酶报告实验验证miR-185靶向Six1基因;采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-185对细胞中Six1基因表达水平的影响;Western blot法检测miR-185过表达对肺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响.结果 miR-185过表达降低肺癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),上皮细胞标志物E-cadherin表达升高(P<0.01),间质细胞标志物vimentin表达降低(P<0.01),H520细胞过表达miR-185后,Six1基因表达水平降低(P<0.01),miR-185调控肺癌细胞的迁移和侵袭是通过靶向Six1基因实现的.结论 miR-185靶向Six1基因调控人肺癌细胞EMT途径.
作者:曹燕飞;任睿;杨晔;罗向晖;王水利 刊期: 2017年第08期
目的 观察葡萄籽原花青素对Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠肾脏细胞中表型转化标志蛋白α-SMA、E-cadherin表达的影响,旨在揭示葡萄籽原花青素对db/db小鼠糖尿病肾损伤的保护机制.方法 采用Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠为研究对象,16只雄性db/db小鼠随机分为2组:糖尿病组、糖尿病+葡萄籽原花青素灌胃组,每组各8只;8只相同周龄雄性db/m小鼠作为正常对照组及8只db/m小鼠+葡萄籽原花青素灌胃治疗对照组.以葡萄籽原花青素(5 mg/kg)灌胃,持续12周后检测E-cadherinh、α-SMA、p38MAPK和ERK1/2的蛋白表达.结果 糖尿病组小鼠肾组织中α-SMA、p38MAPK和ERK1/2蛋白表达明显增加,E-cadherin表达减少,尿中8-OHdG水平增加.葡萄籽原花青素能减少糖尿病组小鼠肾组织中α-SMA、p38MAPK和ERK1/2蛋白表达,尿中8-OHdG水平也明显降低,而E-cadherin蛋白表达增高(P<0.05).结论 葡萄籽原花青素抑制肾小管上皮细胞-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)生成,可能是通过抑制活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)生成,抑制p38MAPK和ERK1/2信号通路激活而实现的.葡萄籽原花青素对糖尿病肾病具有防治作用.
作者:韦金英;史永红;任韫卓;杜云霞;杜春阳;段惠军;吴海江 刊期: 2017年第08期
目的 观察小细胞肺癌干细胞和肿瘤组织中HIF-1α和HIF-2α的表达,并探讨其临床意义.方法 采用干细胞无血清培养技术富集小细胞肺癌细胞系H446第3代肿瘤球细胞作为肿瘤干细胞;实时荧光定量PCR法检测H446干细胞中HIF-1α和HIF-2α mRNA的表达;免疫荧光法检测H446干细胞中HIF-1 α和HIF-2α蛋白表达;免疫组化SP法检测小细胞肺癌组织中HIF-1α和HIF-2α蛋白表达.结果 小细胞肺癌干细胞HIF-2α mRNA表达上调(P<0.05),而HIF-1αmRNA表达下调(P<0.05);小细胞肺癌干细胞中HIF-2α蛋白呈阳性,而HIF-1α蛋白呈阴性;小细胞肺癌组织中HIF-1α的阳性率为46.7%(28/60),HIF-2α阳性率为25%(15/60).相关分析结果显示HIF-2α与小细胞肺癌干细胞标志物uPAR呈正相关且两者共同表达于小细胞肺癌坏死组织周围区域;HIF-2α与小细胞肺癌肿瘤直径和远处转移有关(P<0.05),而HIF-1α与患者年龄、性别、肿瘤直径、淋巴结转移、胸膜侵袭和远处转移无关(P>0.05).结论 HIF-2α在小细胞肺癌干细胞中表达上调且与小细胞肺癌干细胞标志物uPAR呈正相关,与小细胞肺癌肿瘤直径和远处转移相关,提示HIF-2α表达可能与小细胞肺癌干细胞样特征有关.
作者:栾雅静;郑旭;仇晓菲 刊期: 2017年第08期
目的 探讨肺筛状腺癌(lung cribriform adenocarcinoma,LCA)的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及分子遗传学特点.方法对20例LCA进行组织学形态观察、免疫组化及特殊染色检查、随访并复习相关文献.结果 女性5例,男性15例,年龄39~74岁(中位年龄59.25),肿块直径1.5 ~5.5 cm(平均直径3.265 cm).镜下肿瘤呈分叶状或结节状,肿瘤细胞较一致,呈筛状排列,腺样,微囊样,实性,其中筛状结构特征明显,核分裂象较少,未见坏死.免疫表型:肿瘤细胞TTF-1(20/20)、Napsin A(18/20)、SPB(19/20)、CK7(20/20)、CD56(2/20)、EGFR(7/20)、β-catenin(4/20)和ALK(2/20)均阳性,Tg、CDX-2、Syn、CgA、S-100和SMA均阴性.9例(9/20)检测到EGFR基因突变信号.20例均行手术切除,术后16例(16/20)行化疗,2例放疗,4例未治疗.结论 LCA属罕见的肺癌,具有特征性的病理学表现,临床及病理均需与腺泡型腺癌、腺样囊性癌、神经内分泌癌、转移性甲状腺乳头状癌等肿瘤相鉴别,治疗以手术切除及化疗为主,预后较差.
作者:黄海建;江秋菊 刊期: 2017年第08期
肾结石是泌尿外科常见疾病,发病率较高.围绕肾结石病因学研究所建立的动物模型已经较为成熟,以往肾结石动物模型的研究多是从生化、病理甚至蛋白角度出发,临床多采用X线、CT等影像学技术对泌尿系结石进行诊断,而微计算机断层扫描技术(micro computed tomography,Mirco-CT)是一种采用了与普通临床CT不同的微焦点X线球管,对活体小动物或多种硬组织进行扫描成像分析的技术,该技术在一些基础研究领域已有所建树[1-2],本实验首次采用Mirco-CT对肾结石大鼠模型进行扫描,并与HE染色的病理结果进行比较,探讨这种新方法的可行性,希望能为以后肾结石的相关研究提供新思路.
作者:褚浩;王勤章;钱成;王议鹤;吴双;钱彪 刊期: 2017年第08期
人眼球玻璃体淀粉样变性是一种罕见的疾病,国内外文献中仅见少数病例报道[1].其主要症状是眼前黑影或羽毛状飘动并伴有视力进行性缓慢下降直至完全丧失,眼部检查可见玻璃体混浊,其间杂有灰色颗粒状物,而附着于晶状体后囊的“足盘样”混浊有助于诊断[2].目前医学界认为其可能是由于分子构象异常导致难溶性的淀粉样物质在细胞外的异常沉积所致,有些玻璃体混浊可能是全身病变的早期改变,而有些很可能是唯一症状¨].对于散在、絮状漂浮以及少量不定形的病变玻璃体,如果按照常规组织处理方法或普通细胞学方法均难以获得满意的病理制片效果,给病理医师的正确诊断带来一定的难度.为此,本科室经过简单处理,把散在、絮状漂浮以及少量不定形的病变玻璃体,制作成简易细胞块,并在此基础上行甲基紫染色和甲醇刚果红染色,就能很好的解决上述问题,从而为正确的病理诊断打下了良好的基础[3].现将玻璃体简易细胞块制作法介绍如下.
作者:陈辉;梁艳;饶秋;石群立;周晓军;马恒辉 刊期: 2017年第08期
子宫颈癌是女性生殖系统中常见的肿瘤之一,近几年子宫颈癌的发病率呈逐年上升且发病年龄日趋年轻化[1].在临床工作中对子宫颈癌及癌前病变的筛查要求越来越高.目前各大医院相继开展FISH技术检测子宫颈hTERC基因检测应用.同时已有很多子宫颈液基细胞涂片FISH技术检测的相关报道.而子宫颈石蜡包埋切片FISH技术检查子宫颈hTERC基因在临床应用比较少.本文针对子宫颈石蜡包埋组织切片和液基薄层细胞学(thinprep cytologic test,TCT)标本用FISH技术检查子宫颈hTERC基因实验操作进行比较观察.
作者:潘晓婷;吴秀;张哲珺;甘丹卉;蒋光愉 刊期: 2017年第08期
目的 探讨necroptosis(坏死性凋亡)抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureter obstruction,UUO)小鼠肾脏炎症的影响.方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、左侧输尿管结扎组(UUO组)、UUO+ Nec-1治疗组(UN组),术后7天处死小鼠取左肾.收集血清测定肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾脏形态学改变;免疫组化法和Western blot法分别检测肾脏组织中坏死性凋亡相关指标RIP1、RIP3、MLKL以及炎症相关因子TNF-α、IL-1β、MCP-1的表达.结果 与Sham组相比,UUO组小鼠RIP1、RIP3和MLKL蛋白表达明显升高,同时伴有TNF-α、IL-1β、MCP-1表达增多.Nec-1治疗显著降低了上述蛋白的表达水平,同时HE染色显示肾间质炎性反应和肾小管损伤程度有所减轻,Scr和BUN水平提示肾功能有所改善.结论 Nec-1通过抑制necroptosis减轻了单侧输尿管梗阻小鼠肾脏的炎症反应,这可能成为治疗肾脏继发炎症的新靶点.
作者:肖夏;张涛;杨昕达;滕晴;侯佳;任韫卓 刊期: 2017年第08期
目的 探讨原发性肺淋巴上皮瘤样癌(lymphoepithelioma-like carcinoma,LELC)的临床病理特点、治疗及预后.方法 回顾性分析20例原发性肺LELC的临床资料、病理形态、免疫表型、治疗等,并复习相关文献.结果 镜下癌细胞呈合体样、巢片状排列生长;细胞核大、空泡状,核仁明显,细胞异型较大,间质内具有丰富的淋巴细胞浸润,类似鼻咽未分化癌的形态.免疫表型:癌细胞CKpan (20/20)、EBER (20/20)、CK5/6 (19/20)、p63(18/20)及p40(16/20)均阳性.3例行EGFR基因突变检测阴性,2例行EML4-ALK融合基因检测阴性,1例行K-RAS基因突变检测阴性.治疗以手术、放化疗等综合治疗为主.结论 原发性肺LELC是肺部少见的恶性肿瘤,组织形态及免疫组化是诊断的主要手段,但要排除其他部位转移;同时EGFR、ALK等肺癌常见基因突变在肺LELC中少见,PD1/PD-L1突变可能有一定的潜在治疗价值.目前,临床仍以经验性治疗为主.
作者:李雯;康德勇;杨映红 刊期: 2017年第08期
目的 探讨非小细胞肺癌液基细胞学标本在突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测EG-FR基因突变中的应用及特点.方法收集诊断阳性的液基细胞学标本,提取样本DNA,采用ARMS法检测EGFR基因突变情况,并分析EGFR基因突变与临床特征、标本类型、病理类型、肿瘤细胞含量等关系.结果 279例液基细胞学样本中检测EGFR基因突变117例,突变率为41.9%,其中腺癌突变率为44.7%,非腺癌突变率为15.4%;细胞学标本中肿瘤细胞含量丰富时、中等时、小的集群、少量时EGFR基因突变率分别为53%、44%、45%、24%;EGFR基因突变标本中,19外显子缺失突变(19Del)发生比例为51.9%,21外显子错义突变L858R发生比例为39.4%.结论 各种类型的液基细胞学标本能够很好的用于非小细胞肺癌EGFR基因突变检测;肿瘤细胞含量丰富的样本EGFR基因突变率高于肿瘤细胞含量较少的样本.EGFR基因19Del为常见.
作者:万涛;余雪梅;胡前芳;徐莉;刘金华;李岱容 刊期: 2017年第08期
目的 探讨输尿管肾源性腺瘤(nephrogenic adenoma,NA)的临床病理学和免疫表型特征.方法 回顾性分析1例输尿管NA合并肾脏结核的临床资料及病理学特征,对其行HE及免疫组化EnVision法染色,并复习相关文献.结果 患者男性,18岁.大体上输尿管腔内见狭窄区;镜下见黏膜下增生腺体形成小管状、乳头状结构,管腔大小形状不一,被覆单层立方上皮,黏膜下见慢性炎细胞浸润;肾脏结核改变.免疫表型:AMACR (P504s)(+);CK7(弱+);CK34βE12(局灶+);CD10、CK20、Villin、vimentin(-).结论 输尿管NA是非常少见的泌尿系统病变,需与息肉、移行细胞癌及腺癌鉴别,掌握其组织形态特征及免疫表型是正确诊断的关键.
作者:秦东瑞;周莉;朱琳;马广贞 刊期: 2017年第08期
目的 探讨血管母细胞瘤(hemangioblastoma,HB)的临床病理学特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断.方法 回顾性分析5例中枢神经系统HB的临床资料、病理学和免疫表型特征并复习相关文献.结果 5例HB临床表现主要为头痛、头晕、下肢乏力、行走不稳等.影像学检查均提示脑实性或囊实性占位.镜下肿瘤主要由间质细胞及丰富的毛细血管构成.免疫表型:间质细胞表达NSE、S-100、CD56、vimentin、Inhibin-α,不表达GFAP、CD10、EMA、CgA和Syn,血管内皮细胞均表达CD31、CD34,Ki-67增殖指数均<2%.结论 HB是一种少见的中枢神经系统肿瘤,影像学检查具有一定的提示作用.镜下主要由肿瘤性间质细胞和不同成熟阶段的毛细血管构成,结合病理组织学和免疫表型特点可诊断.
作者:王正;王艳芬;蒋淑婉;刘爽;丁永玲 刊期: 2017年第08期
目的 探讨CHK1蛋白在食管胃结合部腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化和Western blot法检测141例正常胃黏膜、112例胃黏膜上皮内瘤变及141例食管胃结合部腺癌中CHK1蛋白的表达,并分析其与食管胃结合部腺癌临床病理征特的关系.结果 从正常胃黏膜组→低级别上皮内瘤变组→高级别上皮内瘤变组→食管胃结合部腺癌组,免疫组化及Western blot检测结果显示CHK1蛋白表达分别为9.22%、22.73%、48.53%、79.43%及1、2.40±0.11、5.39±0.37、9.01 _±1.52,CHK1蛋白表达逐渐上升(P<0.05).在食管胃结合部腺癌中,CHK1蛋白表达与食管胃结合部腺癌病理分化程度及Lauren分型相关(P<0.05).结论 CHK1蛋白在食管胃结合部腺癌发生、发展中起重要作用.
作者:闫静波;卫茹 刊期: 2017年第08期
患者女性,39岁,因停止排便排气1周,加重伴腹部胀痛2天入院.患者发病初期未予重视,后因腹部胀痛,呈持续性、进行性加重,遂就诊于当地医院,初诊为肠梗阻,行腹部平片检查,提示肠梗阻,遂予以输液等治疗.后因治疗后患者症状无缓解前来我院就诊,完善相关检查后,于全麻下行剖腹探查术.术中肠壁可见大量散在分布的灰白色结节,大小不等,大径约0.5 cm;盆底可见粘连带并包绕乙状结肠,乙状结肠于肠系膜根部形成360°扭转,扭转肠管明显扩张,扩张段肠管直径约12 cm,肠管呈暗红色,动脉搏动及肠蠕动消失,扭转绞榨乙状结肠长约40 cm.术中诊断:(1)肠梗阻;(2)乙状结肠扭转.
作者:辛晴;刘斌;袁杭;李长天;孙亚敏;赵腾蛟 刊期: 2017年第08期
目的 探讨Uba-2在肝癌组织中的差异表达以及过表达和低表达时其对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 qRT-PCR法检测肝癌组织中Uba-2 mRNA的表达;将Uba-2的过表达载体和siRNA表达载体转染至肝癌细胞HepG2后,MTS实验检测Uba-2对肝癌细胞增殖能力的影响;细胞迁移/侵袭实验检测其对肝癌细胞侵袭转移能力的影响;Western blot法检测肝癌细胞HepG2中TGF-β1~3及VEGF、Snail蛋白的表达.结果 Uba-2在肝癌组织中呈高表达,与癌旁肝组织中的表达差异有显著性(P<0.01),qRT-PCR法检测Uba-2在HepG2细胞中过表达或低表达;细胞增殖实验数据显示Uba-2表达水平与肝癌细胞HepG2的增殖能力相关,siRNA干扰沉默HepG2细胞中Uba-2的表达会抑制其增殖生长,细胞迁移/侵袭实验数据显示Uba-2过表达能促进肝癌细胞HepG2的侵袭、转移能力,且与阴性对照组细胞相比差异有统计学意义;Western blot结果显示Uba-2的异常表达影响TGF-β2及VEGF、Snail蛋白表达水平.结论 Uba-2基因在肝癌组织中的高表达可能具有促进肝癌细胞增殖及侵袭转移的作用.
作者:袁征;李珍;孙彦珍 刊期: 2017年第08期
目的 探讨β-catenin在食管癌侵袭转移过程中的作用.方法 转染有效的β-catenin基因siRNA干扰片段于食管癌Eca-109细胞中,下调β-catenin表达:CCK-8增殖实验检测沉默该基因对食管癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验检测对其侵袭、迁移能力的影响;Westem blot法检测β-catenin表达下调后WISP2、TCF4及E-cadherin蛋白表达.结果 CCK-8增殖实验结果显示,干扰组(siRNA干扰片段有效转染的下调β-catenin组)细胞增殖能力明显低于空白对照组(未处理组)及阴性对照组(转染无意义片段组)(P<0.05),而空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).Transwell小室实验结果显示,干扰组迁移、侵袭能力均低于空白对照组及阴性对照组(P<0.05).Western blot结果显示,WISP2、E-cadherin蛋白在干扰组中的表达量高于空白对照组及阴性对照组(P<0.05);TCF4蛋白在干扰组中的表达量低于空白对照组及阴性对照组(P<0.05).结论 在食管癌细胞中,下调β-catenin后,Wnt信号通路的相关因子也出现明显改变,推测沉默食管癌中Wnt信号通路β-catenin因子,E-cadherin表达增加,抑制上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),阻碍食管癌细胞增殖,通过减少TCF4表达,促进下游靶基因WISP2表达,从而抑制肿瘤细胞侵袭、转移;β-catenin基因有望成为靶向治疗食管癌的候选基因.
作者:秦燕子;王晓丽;刘明俊;王乐乐;单利娜;李卓然;陶仪声 刊期: 2017年第08期
目的 探讨乳腺转移性横纹肌肉瘤的临床病理学特征.方法 回顾性分析4例乳腺转移性横纹肌肉瘤的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断等并复习相关文献.结果 镜下见小圆形恶性肿瘤细胞浸润,细胞核染色质较深,核分裂象多见.免疫表型:4例Myogenin、desmin均阳性,3例MyoD1阳性,1例PR弱阳性,CK、ER、GCDFP-15、GATA-3均阴性.结论 乳腺转移性横纹肌肉瘤罕见,与乳腺原发性恶性肿瘤鉴别困难,可结合病史、组织学形态及免疫表型进行鉴别.
作者:耿僡临;石素胜;宣立学 刊期: 2017年第08期
美国Weinstein等[1]在1987年率先提出远程病理会诊理念,为提高诊断效率,科学合理的运用医疗资源指出了新途径.随着数字切片扫描系统的诞生及网络传输技术的迅猛发展,这一新型诊疗技术逐渐步入临床实践之中.其中,将病理切片经计算机多媒体技术转化成可存储全切片数字化图像(whole slide image,WSI),(亦称为数字切片或虚拟切片)并进行传输起关键性作用[2],阅读视野的清晰度及制片质量也决定了阅片者是否可以及时根据数字切片作出准确的病情诊断.2011年12月,我院作为卫生部国家病理远程会诊与质控试点单位,开始实施基于WSI制作的远程病理会诊工作.本文收集328例远程病理会诊病例作为研究对象,对其数字切片的应用情况进行全面的回顾性分析,以评估该技术在病理诊断领域中的应用价值,现介绍如下.
作者:申成香;杨小苗;司有谊;怀建国 刊期: 2017年第08期
目的 检测核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal S6 protein kinase 4,RSK4)、CD44和MMP-9在原发性肾细胞癌(primary renal cell carcinoma,pRCC)及转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)中的表达,探讨三者表达水平及与临床病理特征的相关性.方法 采用免疫组化EnVision法检测52例pRCC及48例mRCC中RSK4、MMP-9和CD44蛋白的表达,并分析三者表达的相关性及与临床病理特征的关系.结果 48例mRCC中RSK4、CD44及MMP-9的阳性率分别为75% (36/48)、68.75% (33/48)及91.7% (44/48),而三者在52例pRCC中的阳性率分别为44.2% (23/52)、34.6% (18/52)及69.2%(36/52).RSK4、CD44及MMP-9在mRCC中的表达高于pRCC(PRsK4=0.002;PMMP-9=0.002;PCD44=0.001);RSK4、CD44及MMP-9表达与mRCC患者年龄、性别和肿瘤Fuhrman分级、转移部位之间未见明确相关性(P>0.05).在mRCC中,三者之间的表达呈正相关(P=0.008);两两相关分析发现RSK4与CD44(P =0.019)、MMP-9与CD44(P=0.05)的表达之间存在正相关,而RSK4与MMP-9(P=1.00)未见明确相关性.结论 RSK4、CD44及MMP-9在mRCC中的表达高于pRCC,提示三者可能介导肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)的转移,而其具体作用机制尚有待进一步研究.
作者:马静;余州;李明阳;李培峰;李侠;王哲;范林妮 刊期: 2017年第08期
卵巢癌病死率位居妇科三大恶性肿瘤之首,病理同型癌症患者的基因层面差异导致其对传统放、化疗敏感性各异….患者源性异种移植(patient-derived xenograft,PDX)小鼠模型中除了癌细胞以外,还包括人体免疫、纤维、脉管细胞等间质成分,与传统细胞株悬液构建的小鼠模型相比,保留了原肿瘤部分免疫生长微环境,为卵巢癌耐药机制研究、新药开发及治疗方案筛选提供了具有预测价值的个性化抗癌药物疗效检测平台[2].然而目前PDX建模方法存在成瘤率低、周期长、成本高、难以扩大规模等不足,本实验针对其不足进行改进,现介绍如下.
作者:李若玢;陈均源;欧阳媛;高绿芬;王晓玉 刊期: 2017年第08期