张文书；杨庆春
随着科技的发展,电子显微镜技术已在生物科技、病理诊断等方面得到普遍应用.但对于整个电镜技术流程而言,超薄切片技术不仅是技术的难点,更是反映结果的关键步骤.为得到一张优质切片,越来越多的电镜工作者喜欢采用钻石刀切片,但因钻石刀价格昂贵且刀刃极易受损,操作者应注意钻石刀的维护与保养,以延长其使用期.为使初学者对生物超薄切片技术有更全面的认识,现将常用生物材料进行超薄切片制备的方法及注意事项汇总如下.
作者：李宁宁；张俊霞；刘湘花；李瑞琴 刊期： 2016年第08期
目的 探讨低蛋白性肥厚性胃病(Menetrier病)临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断.方法 回顾性分析3例Menetrier病的临床特征、组织学形态及免疫表型,并复习相关文献.结果 3例患者中,成人女性2例,小儿1例,临床表现均有腹痛及低蛋白血症,内窥镜显示胃窦及胃体胃壁明显增厚,表面高低不平,局部呈脑回样改变,局部结节状及息肉样改变,组织学显示小凹上皮增生明显,延伸并局部扩张,固有腺体萎缩,固有层水肿及急慢性炎细胞浸润.免疫表型:3例EGFR表达均增强,HP及CMV均阴性.3例患者出院后1例成人及小儿恢复良好,另1例成人病情反复,3年后因其他相关疾病死亡.结论 Menetrier病为罕见疾病,临床表现及检查无特异性,易误诊为其它疾病,需结合组织学形态并排除其他鉴别诊断,必要时行内镜黏膜切除来明确诊断.
作者：贾旭春；王璐；储玮；郭勇；李增山 刊期： 2016年第08期
患者女性,44岁,数月前出现小腹胀痛,伴大便次数增多(每日3～4次),便后自觉排不尽和肛门坠胀感,大便带黏液和鲜血,偶有排便困难感.患者自行按照“痔疮”治疗数日,未见好转后遂到外院就诊.外院肛门镜检查提示“直肠癌”,于肠镜下取病理活检提示“直肠恶性肿瘤,考虑神经内分泌癌,建议行免疫组化检查”.为进一步检查明确诊断及治疗,患者遂来我院就诊,门诊以直肠癌收入院.入院查体:患者精神一般,食欲差,体重减轻.
作者：全勇；陈敬彬 刊期： 2016年第08期
目的 探讨网状血管内皮瘤(retiform hemangioendothelioma,RH)的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及预后.方法 采用免疫组化法检测RH组织中CD31、CD34、FⅧRAg、D2-40的表达,并复习相关文献.结果 镜下见肿瘤主要由细长、分支状类似睾丸网的血管网组成,内皮细胞呈鞋钉样,侵犯皮肤附属器和皮下脂肪组织.免疫表型:瘤细胞表达CD31、CD34、FⅧRAg,不表达D2-40.背景中的淋巴细胞表达CD3.结论 RH是一种极少见的具有复发倾向的低度恶性血管源性肿瘤.少数病例可出现转移及死亡.RH应与血管肉瘤、Dabska瘤、鞋钉样血管瘤、梭形细胞血管瘤等鉴别.
作者：刘芳；郭莉；张良运；胡维维 刊期： 2016年第08期
目的 探讨Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK活化和上皮-间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)的影响.方法 采用RT-PCR法检测不同浓度Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK、E-cadherin、vimentin mRNA表达的影响.Western blot法检测不同浓度Bufalin对ECA109细胞中FAK活化水平及FAK、E-cadherin、vimentin蛋白表达的影响.采用Transwell小室实验检测不同浓度Bufalin对ECA109细胞迁移与侵袭能力的影响.结果 RT-PCR结果表明Bufalin抑制FAK、E-cadherin、vimentin的mRNA表达.Western blot结果表明Bufalin抑制E-cadherin、vimentin的表达和FAK的活化.Transwell实验结果表明Bufalin可以抑制ECA109细胞的迁移及侵袭.药物干预组(20、40、60、80、100 nmol/L Bufalin及PF562271组)与阳性对照组相比,Transwell迁移实验结果显示穿过基膜的细胞个数由107.00±8.19下降至78.67±3.06、61.67±3.06、42.67±3.512、24.33±2.517、10.33±3.215、9.00±2.65;Transwell侵袭实验结果显示穿过基膜的细胞个数由127.67±8.02下降至102.33 ±4.51、87.33±7.10、73.00±4.58、57.33±2.52、39.00±3.61、37.33±2.52,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Bufalin可以抑制食管鳞状细胞癌中FAK的活化,提示Bufalin可能是通过下调FAK来抑制食管鳞状细胞癌EMT过程及食管癌的迁移及侵袭.
作者：刘雪姣；岳萌；张玲玲；贾迎；刘月平 刊期： 2016年第08期
目的 探讨原发性腹膜透明细胞癌的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断.方法 采用免疫组化法对1例原发性腹膜透明细胞癌进行检测,并复习相关文献.结果 患者女性,39岁,大网膜肿物,子宫及双侧附件未见明显异常.镜下见肿瘤细胞呈实性片状、管囊状、乳头状和腺管状排列,伴出血、坏死,核分裂易见.高倍镜下见肿瘤主要由透明细胞、嗜酸性细胞和鞋钉样细胞构成.免疫表型:肿瘤细胞CK7、CEA、CA125、PAX-8、HNF1-β和Ber-EP4均阳性,CK20、CK5/6、CR、MC、CDX-2、WT-1、TTF-1、ER、PR、Villin、vimentin、CD10和CD15均阴性,Ki-67增殖指数约70％.结论 原发性腹膜透明细胞癌是非常罕见的苗勒系统肿瘤,具有特征性的形态学及免疫表型,在排除转移性卵巢或子宫透明细胞癌后方可确诊.此外,还需与浆液性腺癌、子宫内膜样癌、恶性间皮瘤、卵黄囊瘤等进行鉴别.
作者：陈燕坪；卢建平；陈宝珍；张红；陈刚 刊期： 2016年第08期
患者女性,43岁.因发现左侧乳腺无痛性肿物7天入院.B超示左侧乳腺内菲匀质低回声结节(BI-RADSⅣa类).外科检查:双侧乳腺对称,乳头无抬高、内陷及溢液;双乳皮肤无红肿及破溃,左侧乳腺内上象限可触及一质硬区,大小3 cm ×2 cm,边界不清,质略硬,活动度较差,双侧腋窝未触及肿大淋巴结.临床诊断:乳腺肿物.患者完善相关检查后行左侧乳腺肿物切除术,术中切除肿物送快速冷冻病理检查,结果示乳腺导管内乳头状瘤,局部考虑恶变伴鳞化.遂行乳腺癌改良根治术,标本送病理检查.
作者：刘洪博；王文智；邱雷；刘艳彩；刘学刚 刊期： 2016年第08期
目的 分析LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响,初步探讨LASS2/TMSG-1基因的作用机制.方法 运用脂质体转染法将前期已构建好并冷冻保存的PcDNA3-TMSG-1质粒通过脂质体转染法瞬时转染入95D细胞(高转移潜能,LASS2/TMSG-1低表达),使外源性LASS2/TMSG-1基因在细胞内过表达即LASS2/TMSG-1过表达组,同时设立转染空白质粒的空白对照组和未转染质粒的阴性对照组.应用体外侵袭及迁移实验检测人肺癌95D细胞侵袭及迁移能力的变化;应用qRT-PCR和Western blot法检测LASS2/TMSG-1 mRNA及蛋白的表达;应用Western blot法检测ATP6L、MMP-2及MMP-9在细胞中的表达水平;应用明胶酶谱法检测肿瘤细胞中MMP-2及MMP-9的活性;使用比色法检测细胞中V-ATPase的活性;使用BCECF H+敏感探针检测细胞外H+浓度的变化.结果 LASS2/TMSG-1过表达组细胞的LASS2/TMSG-1表达水平明显升高,而ATP6L表达水平下降,其V-ATPase活性及细胞外H+浓度降低,与空白对照组和阴性对照组相比差异均具有统计学意义(P ＜0.05);MMP-2、MMP-9的表达及活性均降低,与其他两组相比差异有统计学意义(P＜0.05);并且LASS2/TMSG-1过表达组细胞的体外侵袭及迁移能力明显低于其他两组(P＜0.05).结论 LASS2/TMSG-1可能通过结合ATP6L亚基抑制V-ATPase活性,改变细胞外H+浓度,影响MMP-2、MMP-9的表达及活性,进而改变肿瘤细胞的体外侵袭迁移能力等生物学行为.
作者：徐晓艳；伊日贵；李秀霞；于慧玲；李时荣 刊期： 2016年第08期
目的 探讨顺铂(DDP)分别联合雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)对裸鼠肺腺癌A549细胞原位移植瘤的生长抑制作用和相关机制.方法 采用RT-PCR、免疫组化SP法检测经药物作用后裸鼠移植瘤中mTOR、LC3-Ⅱ及Bax基因和蛋白水平的表达.结果 mTOR mRNA在DDP+RAPA组、DDP+3-MA组的表达量显著低于空白组和DDP组(P＜0.05);LC3-ⅡmRNA在DDP+ RAPA组表达量显著高于其它组(P＜0.05);Bax mRNA的表达量在DDP+3-MA组的相对表达量显著高于其它组(P＜0.05).mTOR蛋白在DDP+ RAPA组、DDP+ 3-MA组的表达强度显著低于空白组和DDP组(P＜O.05);LC3-Ⅱ蛋白在DDP+ RAPA组的表达显著高于其它组(P ＜0.05);Bax蛋白在DDP+ 3-MA组的表达强度显著高于其它组(P＜0.05).治疗后空白组、DDP组、DDP+ RAPA组及DDP+ 3-MA组对裸鼠肿瘤的抑制率分别为0、36.5％、43.9％、55.0％.结论 DDP联合RAPA或3-MA均可以明显抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长,并且抑制作用均大于单独使用DDP.
作者：卜静；张艳；杜芸；赵银环；王蕊；纪晓坤；吴娟；吴家宁 刊期： 2016年第08期
人体标本与动物标本的组织处理,以及不同动物脏器的处理程序,已有过一些报道,但说法不一[1-4].本文取材小白鼠不同脏器组织,分别用改良的“常规送检标本通用脱水程序”与“小标本脱水程序”处理,并比较这两种程序处理的小白鼠各脏器在常规制片、免疫组化片中的差异,现介绍如下.
作者：郑伟；刘亚军；陈倩倩 刊期： 2016年第08期
目的 探讨结直肠颗粒细胞瘤(granular cell tumor,GCT)的临床及病理学特点.方法 回顾性分析8例结直肠GCT患者的临床特征、肠镜表现、肿瘤形态学特点、免疫表型特征、治疗及预后.结果 8例结直肠GCT中男性居多,平均发病年龄51.2岁.4例腹泻,2例便秘,2例无症状;肿瘤直径2 ～13 mm,平均6 mm;6处病灶位于近端结肠,3处病灶位于直肠.6例肿瘤行内镜下切除术,1例行腹腔镜下锲形切除术,1例为活检咬除.治疗后随访时间2个月～5年(中位数23个月),均未见肿瘤复发和转移的证据.结论 结直肠GCT内镜下大多表现为黏膜隆起,免疫组化染色可明确诊断,内镜下切除疗效满意.
作者：林海君；余晶晶；林琪；毛建山 刊期： 2016年第08期
目的 探索豚鼠前列腺的Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)的原代分离、培养及鉴定方法.方法 无菌条件下分离出前列腺组织,采用酶消化法分离细胞,将细胞悬液接种于含干细胞因子的DMEM培养基中进行培养.倒置显微镜下观察细胞贴壁和形态,用酪氨酸蛋白激酶受体c-Kit特异性抗体标记细胞,免疫荧光法鉴定.结果 培养24 h后的细胞贴壁良好,可见胞体为梭形,有2个或多个突起.随着培养时间的增长,突起彼此相互连接形成网络结构.该类细胞c-Kit抗体荧光染色阳性.结论 用酶消化法可成功分离和培养成年豚鼠前列腺ICCs,可用于前列腺ICCs的电生理学研究.
作者：李应龙；马路平；王江平；王勤章 刊期： 2016年第08期
患者女性,29岁,因左侧卵巢未成熟性畸胎瘤术后化疗1个疗程后于2016年1月19日入院.患者平素月经规则,2015年1 1月在外院行腹腔镜下左侧卵巢畸胎瘤剔除术,术后病理报告提示:左侧卵巢未成熟性畸胎瘤Ⅱ级,于2015年12月给予BEP方案化疗.体检:患者一般情况良好,心肺未及异常,腹部平坦,压痛反跳痛阴性,肝脾肋下未触及,移动性浊音阴性,胸片、心电图未见明显异常.术前诊断:(1)左侧卵巢未成熟性畸胎瘤术后;(2)BEP化疗1个疗程后.现行腹腔镜探查术,术中见直肠侧方盆腔腹膜处见一大小0.5cm×0.5 cm及芝麻大菜花样病灶2处,切除后送病理检查.
作者：张文书；杨庆春 刊期： 2016年第08期
目的 分析结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的常见突变类型及其与临床病理指标的关系.方法 对252例CRC石蜡包埋组织进行DNA提取,采用Sanger测序法对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因进行检测,分析各个基因的突变率与临床病理特征的关系,并统计各个基因的突变类型.结果 252例CRC中,KRAS、BRAF、NRAS和PIK3CA突变发生率在性别、年龄、肿瘤部位、病理分期和有无淋巴结转移上差异均无统计学意义(P＞0.05);检测阳性突变共140例(55.5％),其中KRAS 113例(44.8％),NRAS 1例(0.4％),BRAF 19例(7.5％),PIK3CA 28例(11.1％),包括PIK3 CA与KRAS、NRAS、BRAF基因发生双突变21例(8.3％);KRAS的主要突变类型包括G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13D、T20M、A59T、Q61H、Q61L、Q61P;NRAS仅有1例突变为G12D;BRAF的主要突变类型为V600E、D594G、K601E;PIK3CA的主要突变类型包括E542K、E545K、Q546K、Q546P、Q546R、M1043I、H1047R.PIK3CA与KRAS、NRAS、BRAF之间会发生交叉突变,但KRAS、NRAS、BRAF三者之间基本不存在交叉突变.结论 CRC中KRAS阳性突变率居高,PIK3CA次之,BRAF、NRAS突变率低,且PIK3CA常与KRAS、NRAS、BRAF发生交叉突变.对CRC患者行KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA等多基因检测,可正确指导并选择抗EGFR单抗药,从而实现真正意义上的个体化靶向治疗.
作者：刘影；郑细闰；朱亚珍；何青莲；郑广娟 刊期： 2016年第08期
肺部肉芽肿性炎症通常由于肺部感染了特殊的病原微生物或寄生虫形成有相对诊断意义的特征性肉芽肿.常见的病原体有结核杆菌、伤寒杆菌、梅毒螺旋体、真菌等.本文采用过碘酸-Schiff(PAS)染色法、Grocott六胺银染色法、Zie-hl-Neelesn抗酸杆菌染色法,并改良其染色技术,以帮助鉴别这些病原体感染导致的肺部疾病.
作者：叶敏；赵兰香；张杰 刊期： 2016年第08期
目的 探讨肺淋巴瘤样肉芽肿(pulmonary lymphomatiod granulomatosis,PLG)临床病理学特征.方法 回顾性分析5例PLG的临床资料、组织学形态、免疫表型及分子生物学特点,并复习相关文献.结果 5例患者均为男性,年龄7 ～ 74岁,平均36.6岁;其中2例有发热病史;镜下均见中至大量异型淋巴样细胞弥漫浸润,其中3例可见大片凝固性坏死及显著的血管壁异型淋巴样细胞浸润伴纤维素样坏死;免疫表型:异型淋巴样细胞CD20、PAX-5、LMP1均阳性,EBER原位杂交检测显示数量不等的阳性,背景小淋巴细胞CD2、CD3、CD5阳性.依据反应性淋巴细胞背景中EB病毒阳性B细胞的比例,诊断PLG 3级2例,PLG 2级2例,PLG1～2级1例;术后随访时间6～16个月,平均9个月,均无复发和转移.结论 PLG是一种EB病毒相关的B细胞淋巴组织增殖性疾病,成年人居多,症状多样,肺部呈多发或单发病灶.诊断主要依靠病变中大量炎性细胞伴多少不等的中等大至大的异型B淋巴细胞且EB病毒阳性,以及嗜血管现象和灶片状坏死.同时应注意排除肺部炎性疾病和霍奇金淋巴瘤.
作者：杨春蓉；郑晓丹；胡余昌；周小鸽 刊期： 2016年第08期
胃癌是发病率及病死率较高的一种恶性肿瘤,其发生、发展是多种因素作用的复杂过程.新的胃癌分子分型中的EBV相关胃癌(Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma,EBVaGC)与EBV感染有关.近年研究发现,ARID1A(AT-rich interactive domain containing protein 1A)基因和PIK3CA(phosphatidy-linositol 3-kinase catalytic alpha)基因在EBVaGC中的突变率较高,其可能与EBV感染和胃癌的发生有一定关系.该文就近年来ARID1A和PIK3CA在EBV相关胃癌中的研究进展作一综述.
作者：李红；谈顺；林香桃 刊期： 2016年第08期
目的 检测胃癌组织中HER-2蛋白表达水平和基因扩增情况,定量分析HER-2表达和分布特征的异质性,探讨其在判读中的影响.方法 应用免疫组化检测并观察胃癌组织中HER-2蛋白表达水平及分布特征,应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测HER-2基因扩增情况,并运用欧式距离等进行统计学处理.结果 373例胃癌手术切除标本中HER-2蛋白阳性率(3+)为12.33％,与基因扩增情况显著相关(P＜0.001).98例有HER-2蛋白表达的标本总异质性、组内异质性及组间异质性大小差异均有统计学意义(P值分别为0.025、0.001、0.040);组内异质性大小明显低于组间异质性.根据标准判读为HER-2蛋白为2+及3+的病例异质性大,1+病例小.HER-2蛋白表达分布较均一的病例近乎为零,而同时具有阴阳脸及花斑样特征的病例多.根据标准判读HER-2蛋白为0的病例中,有7例具有明显异质性.结论 胃癌组织中HER-2蛋白表达的异质性较大且类型多样,判读时首先要增加观察视野,选择至少2个组织块进行HER-2蛋白检测;其次无论HER-2蛋白表达水平高低,均需同时检测基因扩增情况,以确保判读结果的准确性,更好的指导临床用药.
作者：王岳君；王娜娜；杨苗苗；韩彪；孟刚 刊期： 2016年第08期
目的 检测神经旁浸润(perineural invasion,PNI)在人贲门胃底癌中的发生情况,探讨其与磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的相关性以及二者对贲门胃底癌预后的影响.方法 检测85例贲门胃底癌组织中PNI的发生及CIP2A的表达,分析PNI与CIP2A表达和贲门胃底癌临床病理特征的关系及其在贲门胃底癌患者预后中的价值.结果 PNI阳性者30例(35.3％),PNI的发生与T分期、癌栓、N分期、TNM分期及CIP2A表达均相关.单因素生存分析显示,贲门胃底癌患者的总生存率与T分期、癌栓、N分期、TNM临床分期、PNI和CIP2A有关(P均＜0.01);PNI阳性组的平均生存期为14.3个月,低于阴性组的48.5个月(P＜0.01).CIP2A阳性组的平均生存期为22.7个月,低于阴性组的45.6个月(P＜0.01).多因素分析显示PNI和CIP2A阳性表达是影响患者总生存率的独立危险因素(P均＜0.01).结论 PNI与贲门胃底癌的进展有关,贲门胃底癌术后检测PNI和CIP2A可以提示患者预后,CIP2A可能在PNI的发生过程中发挥一定的协同作用.
作者：张洪兰；陈昊；张春芳；张昶；齐冬雪；刘华 刊期： 2016年第08期
随着内镜的普及和诊断技术的发展,上消化道癌的早期诊断率不断提高,这主要得益于色素内镜的广泛应用.其中用碘溶液进行内镜下食道黏膜染色,是现在用于早期食管癌及癌前病变诊断的重要方法.目前许多病理科接收的早期食管癌手术标本有的病灶不明显或非常细微,因此,准确地取到病变部位尤为关键.本实验效仿色素内镜的碘染色法,将其运用到病理取材中,取得了良好的效果.
作者：郭鹏；刘虹；邱梦琦；马梅 刊期： 2016年第08期
临床与实验病理学杂志
主管:
主办：安徽医科大学;中华医学会安徽分会
