学术投稿

CIK细胞在荷瘤鼠体内的肿瘤靶向性与安全性

刘霞;胡奇婵;王涛;黄睿;崔静;王丽;杨举伦

关键词:CIK细胞, 细胞载体, 靶向性, 肿瘤治疗
摘要:目的:探讨CIK细胞对肿瘤组织的靶向性及其在荷瘤鼠体内的运行轨迹和对主要脏器的影响。方法分离制备人CIK细胞,采用体外Transwell迁移试验观察CIK细胞对人乳腺癌细胞MDA-MB-435的靶向迁移效应;以该细胞系接种BALB/c裸鼠建立乳腺癌移植瘤模型,尾静脉注射DiI标记的CIK细胞,应用活体成像和病理学检查观察CIK细胞运行轨迹及对主要脏器的影响。结果 CIK细胞在体外培养14~20天时,细胞增殖达到高峰,CD3+CD56+ T细胞的比例也达到高值。体外Tr-answell迁移实验显示,随着肿瘤细胞上清液浓度的增加,CIK细胞的迁移数量也随之增多。荷瘤裸鼠尾静脉注射DiI标记的CIK细胞后,活体成像显示肿瘤组织24 h开始出现荧光信号,48 h达到强;HE和免疫组化染色结果显示,注射后6 h肿瘤周围开始聚集CIK细胞,48 h多,第14天时肿瘤部位仍有CIK细胞存在,各脏器均未发现由CIK细胞导致的病理组织学损伤。结论 CIK细胞在体内外对肿瘤组织均具有靶向性,对正常组织有安全性,可作为一种有潜力的细胞载体应用于肿瘤的靶向治疗。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 肺复合型大细胞神经内分泌癌1例并文献复习

    目的:探讨肺复合型大细胞神经内分泌癌的临床病理特点、诊断和鉴别诊断。方法回顾性分析1例肺复合型大细胞神经内分泌癌的临床病理和免疫表型特征。结果患者男性,46岁。临床表现为右肺上叶见一肿物,大小4.5 cm ×4.5 cm ×4 cm,切面呈灰黄色,质韧。光镜下见肿瘤细胞较大,胞质量中等到丰富,核仁明显,呈器官样巢、菊形团排列,并伴有鳞状细胞癌成分。免疫表型:肿瘤组织表达CgA、Syn、CD56,其中鳞状细胞癌成分表达CK5/6、p63。结论肺复合型大细胞神经内分泌癌是肺的少见肿瘤之一,为肺大细胞神经内分泌癌的一种,确诊主要依靠病理组织学检查及免疫组化染色,预后差。

    作者:黄文勇;徐晓;黎水仙;钱坤;黎美仁;汪亮亮;欧阳斌燊;胡佳莉;李婷 刊期: 2014年第04期

  • 幼儿腹膜后伴腺体分化的恶性周围神经鞘膜瘤1例

    患者女性,1岁1个月,3个月前洗澡时发现左下腹部无痛性质硬包块,近期包块增大明显,并伴有腹泻,无发热、呕吐。体检:腹部膨隆,软,无压痛及反跳痛,左下腹部触及一6 cm ×6 cm ×3 cm大小包块,位置固定,质硬,无压痛,肝脾肋下未触及,余无异常。 CT检查示中下腹部腹膜后间隙有一巨大肿瘤,97 mm ×87 mm大小,中心部分液化坏死伴钙化,包绕腹主动脉、下腔静脉及双侧输尿管,至双肾轻度积水,推压腹膜后及腹腔结构,考虑为恶性肿瘤,以神经母细胞瘤或生殖细胞瘤可能性大。 CT增强扫描示:腹膜后巨大占位,考虑为恶性肿瘤,以神经母细胞瘤可能性大或生殖细胞瘤,腹膜后被包围。骨髓穿刺术见少量原始及幼稚淋巴细胞。腹部B超示:腹腔内探及一102 mm ×93 mm ×65 mm大小的不均质低回声,边界尚清,似有包膜。生化检查:β-HCG 0.138 mIU/ml,癌胚抗原CEA 6.50 ng/ml,NSE 24.24 ng/ml。尿多巴胺2990.0μg/24 h,血多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素正常。术中见中下腹膜后有一4.5 cm ×3.5 cm ×2 cm大小肿块,打开侧腹膜、右侧腹膜后发现肿块与右肾、右侧肾动静脉、右侧输尿管,左侧腹膜后,左侧输尿管,上部囊壁与十二指肠水平段、降结肠肠系膜、肠系膜血管,前壁与空肠及回肠系膜、肠系膜血管,后壁与下腔静脉、腹主动脉及神经纤维融合粘连。

    作者:肖学文;张兰凤;李伟松;肖海;范钦和 刊期: 2014年第04期

  • 肝癌细胞系L2不同途径接种造模的比较

    目的:比较大鼠肝癌细胞系L2肝、脾原位接种肝细胞癌( hepatocellular carcinoma, HCC)发生及侵袭转移情况,筛选理想的L2 HCC肺转移动物模型。方法将20只7周龄雌性BALB/cA裸鼠随机分为2组,应用肝癌细胞系L2分别对2组小鼠进行肝、脾原位接种造模,观察裸鼠存活率,HCC的发生与侵袭转移率以及肿瘤病理学特点。结果肝原位接种组肝成瘤率100%,肿瘤呈结节膨胀性生长,与周围肝组织和腹壁侵袭粘连明显,肺转移率为60%,未见脾转移;脾原位接种组脾成瘤率78%,肝转移率67%,肿瘤亦呈结节膨胀性生长,与周围组织和腹壁也有侵袭粘连,肺转移率11%,明显低于肝接种组( P<0.05)。镜下肺门淋巴结转移率为33%。结论肝癌细胞系L2肝、脾原位接种均易成瘤且有肺转移发生,其中肝原位接种动物模型更适用于HCC肺转移机制及体内药物干预等实验分析。

    作者:刘勇;唐红;罗霞;阮思蓓;张元;唐明希 刊期: 2014年第04期

  • EGFR基因20外显子突变与非小细胞肺癌

    目前有关非小细胞肺癌( non-small cell lung carcinoma, NSCLC)中EGFR突变研究为广泛。经典的EGFR突变,如19外显子的框内缺失及21外显子L858R点突变,对表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂( epidermal growth factor recep-tor tyrosine kinase inhibitors, EGFR-TKIs)治疗敏感。20外显子的插入突变占EGFR突变的4%,患者常对EGFR-TKIs可用的大剂量耐药。现就EGFR20外显子的基因结构及临床意义进行综述。

    作者:陈瑚;余英豪 刊期: 2014年第04期

  • GS环保型试剂在病理技术工作中的应用体会

    病理组织标本的处理是病理技术中的关键,直接决定常规制片、特殊染色、免疫组化、原位杂交、PCR等一系列检测的结果。一直以来,病理工作者均采用10%中性福尔马林作为组织样本的固定液,用二甲苯对组织进行透明处理,这两种试剂不仅污染环境,且对病理工作者的身心健康危害严重。因此,寻找一种既可以替代甲醛和二甲苯固定和处理组织样本又对人体和环境没有危害的试剂显得非常必要。作者采用GS环保型组织固定及脱水试剂代替传统试剂做了初步的、短期的实验,主要包括组织处理后的石蜡包埋、HE染色、免疫组化染色以及Masson、PAMS、PAS等特殊染色。

    作者:易红梅;李艳春;钟仁华;陈志鸿 刊期: 2014年第04期

  • 胃肠道透明细胞肉瘤临床病理分析并文献复习

    目的:探讨胃肠道透明细胞肉瘤( clear cell sarcoma of the gastrointestinal tract, CCS-GI)的临床病理特征及遗传学特点。方法对1例CCS-GI进行组织学观察、免疫组化染色、荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization, FISH)检测,并复习相关文献。结果患者女性,因“腹痛1周”入院,CT检查示右半结肠肿瘤,肉眼观察结肠黏膜面可见一溃疡型肿块,切面灰白、实性、质嫩,侵及全层。镜下见中等大小的圆形或卵圆形肿瘤细胞呈片状排列,肿瘤细胞间可见散在分布的破骨细胞样多核巨细胞。肿瘤细胞S-100蛋白弥漫阳性,HMB-45、Melan-A、CD117、CD1a及PCK均阴性。 FISH检测结果示74%的肿瘤细胞存在EWSR1基因易位。结论 CCS-GI是一种特殊类型的胃肠道肿瘤,具有独特的组织学、免疫表型、超微结构及遗传学特征,该类肿瘤中的胃肠道透明细胞肉瘤样肿瘤亚型是否为一个独立的病变实体,尚需增加病例量进一步研究,包括细胞遗传学和分子生物学的相关研究。

    作者:黄会粉;刘倩;步宏;陈敏;陈卉娇;林英英;张红英 刊期: 2014年第04期

  • 胃肝样腺癌临床病理、免疫表型及预后分析

    目的:探讨胃肝样腺癌( hepatoid adenocarcinoma of stomach, HAS)的临床病理、免疫表型及预后特征。方法采用免疫组化SP法对5例HAS进行染色,观察Glypican-3、AFP、Hepatocyte、CEA等表达及患者的临床资料、病理组织形态学,并复习相关文献。结果5例 HAS患者平均年龄62岁,其中男性4例(4/5),3例治疗前血清AFP均升高(3/3)。肿瘤由肝样分化区伴或不伴普通腺癌区组成,肝样分化区似典型肝细胞癌( hepatocellular carcinoma, HCC)的组织学特点。免疫表型:肝样分化区Glypican-3、AFP、Hepatocyte呈不同程度阳性,而CEA一般为阴性。5例HAS中伴胃周淋巴结转移者3例、肝转移者2例、卵巢转移者1例。随访6~21个月,其中4例死亡,死亡患者平均生存期12个月。结论 HAS 是一种少见的特殊类型胃癌,组织学形态及免疫表型与HCC 相似,常有血清AFP 升高,易转移,预后及临床疗效较普通型胃腺癌差,应予以重视。

    作者:贾静;陈剑;王华;郑杰;高菲;石雪迎 刊期: 2014年第04期

  • 胃癌组织中RKIP基因启动子甲基化及蛋白表达

    目的:探讨胃癌组织中RKIP基因启动子甲基化及蛋白的表达,分析RKIP基因启动子甲基化及蛋白表达与胃癌生物学行为的关系。方法采用甲基化特异性PCR( methylation-specific PCR, MSP)技术和免疫组化SP法检测45例胃癌组织、21例癌旁胃黏膜组织中RKIP基因启动子甲基化及蛋白的表达。结果胃癌及癌旁胃黏膜组织中RKIP基因启动子的甲基化阳性率分别为48.89%和4.8%(P<0.05);RKIP蛋白在胃癌及癌旁胃黏膜组织中的阳性率分别为42.22%和90.48%(P<0.05);RKIP基因启动子甲基化及蛋白的表达分别与胃癌的分化程度及淋巴结转移有关( P<0.05)。 RKIP基因启动子甲基化与蛋白表达呈明显负相关(P<0.05)。结论 RKIP基因启动子的异常甲基化是引起蛋白表达缺失的原因之一,RKIP蛋白表达缺失与胃癌的发生、发展有关。

    作者:李冬霞;张慧;汤正;武辉;李巧香 刊期: 2014年第04期

  • 结直肠癌中Bmi-1、p14 ARF和Mdm2的表达及临床意义

    目的:探讨Bmi-1、p14 ARF和Mdm2在结直肠癌中的表达及其与各临床病理参数的关系。方法应用免疫组化EliVision两步法检测125例结直肠癌和20例正常结直肠组织中Bmi-1、p14ARF和Mdm2的表达。结果(1)Bmi-1和Mdm2在结直肠癌中的阳性率(56.8%和62.4%)明显高于正常结直肠组织(20.0%和15.0%),p14ARF在结直肠癌中的阳性率(47.2%)明显低于正常结直肠组织(75.0%)(P<0.05)。(2)Bmi-1表达与浆膜侵犯、淋巴结转移、临床分期密切相关,p14ARF表达与浆膜侵犯、临床分期密切相关,Mdm2表达与组织分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P<0.05)。(3)在结直肠癌中,Bmi-1和Mdm2表达与p14 ARF表达均呈负相关( P<0.05)。结论 Bmi-1、p14 ARF和Mdm2的异常表达参与结直肠癌的发生、发展及转移,可作为评价结直肠癌生物学行为的参考指标,并为临床治疗提供新靶点。

    作者:姚冬颖;朱晓燕 刊期: 2014年第04期

  • 脑膜血管瘤病2例临床病理分析

    目的:探讨脑膜血管瘤病( meningioangiomatosis, MA)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断,提高MA的认识及诊断水平。方法对2例MA进行HE和免疫组化EnVision两步法染色,结合临床及影像学特征观察及分析,并复习相关文献。结果2例均为青少年男性,以癫痫及头痛为主要症状,CT或MRI检查发现病灶,病变位于额叶及顶叶。镜下见软脑膜上皮细胞或成纤维样细胞沿脑膜血管间隙侵入大脑皮质,围绕血管生长,周围微血管增生及散在钙化灶或砂砾体形成。免疫表型:梭形细胞vimentin阳性,EMA局灶阳性,Ki-67增殖指数<1%,胶质细胞GFAP阳性,神经元NF和Syn阳性。结论 MA是一种较罕见的颅内良性增生性瘤样病变,临床以癫痫及头痛为主要症状,影像学无特异性改变,免疫表型对诊断意义不大,外科手术切除为首选治疗方法。

    作者:马强;方三高;李艳青;曾英;罗清雅;肖华亮 刊期: 2014年第04期

  • 人Midkine基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

    目的:构建人Midkine( MK)基因RNA干扰( RNA interference, RNAi)慢病毒载体并鉴定,为其体内外实验研究提供基础。方法设计针对人MK基因序列的4条RNAi靶点序列,分别与慢病毒载体进行连接,获得GV115-MK-1、GV115-MK-2、GV115-MK-3和GV115-MK-4质粒,转染感受态细菌,经PCR及测序技术的鉴定,然后与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染293T细胞,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。4种病毒载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后,用RT-PCR检测MK mRNA的表达。结果 PCR和测序检测结果证实,插入的MK RNAi核苷酸序列正确,共转染293T细胞后可见大量绿色荧光。浓缩病毒后测定其滴度分别为6×108、5×108、5×108和6×108 TU/ml。感染 MDA-MB-231细胞后, RT-PCR 检测结果表明, GV115-MK-1干扰效果明显,MK基因敲减效率达87.2%( P<0.05)。结论成功构建人MK RNAi慢病毒表达载体,并可有效抑制MDA-MB-231细胞MK基因的表达。

    作者:王庆苓;张鹏 刊期: 2014年第04期

  • 局部复发性鼻咽癌的临床病理学特征

    目的:探讨局部复发性鼻咽癌的临床病理学特征。方法收集46例局部复发性鼻咽癌和63例原发性鼻咽癌活检组织,行HE染色、免疫组化、EBERs原位杂交检测。结果局部复发性鼻咽癌中p63和CK5/6的强阳性表达率均高于原发性鼻咽癌(P=0.005和P=0.026);Ki-67的强阳性表达率差异无显著性(P=0.387);组织坏死、炎性渗出和间质促纤维增生明显;畸形瘤巨细胞多见,癌细胞鳞状分化程度更高。5例复发性鼻咽癌细胞EBERs原位杂交和LMP-1免疫组化标记均为阴性。结论(1)局部复发性鼻咽癌有2个复发间歇高峰,即2~5年和9~11年。(2)局部复发性鼻咽癌细胞p63和CK5/6强阳性表达率、鳞状分化程度更高,侵袭性更强。(3)10.87%(5/46)的局部复发性鼻咽癌细胞EBERs原位杂交和LMP-1免疫组化标记均为阴性。

    作者:雍娟娟;吴秋良;宗永生;侯景辉;梁建中;匡亚玲;奚少彦;卢佳斌 刊期: 2014年第04期

  • CIK细胞在荷瘤鼠体内的肿瘤靶向性与安全性

    目的:探讨CIK细胞对肿瘤组织的靶向性及其在荷瘤鼠体内的运行轨迹和对主要脏器的影响。方法分离制备人CIK细胞,采用体外Transwell迁移试验观察CIK细胞对人乳腺癌细胞MDA-MB-435的靶向迁移效应;以该细胞系接种BALB/c裸鼠建立乳腺癌移植瘤模型,尾静脉注射DiI标记的CIK细胞,应用活体成像和病理学检查观察CIK细胞运行轨迹及对主要脏器的影响。结果 CIK细胞在体外培养14~20天时,细胞增殖达到高峰,CD3+CD56+ T细胞的比例也达到高值。体外Tr-answell迁移实验显示,随着肿瘤细胞上清液浓度的增加,CIK细胞的迁移数量也随之增多。荷瘤裸鼠尾静脉注射DiI标记的CIK细胞后,活体成像显示肿瘤组织24 h开始出现荧光信号,48 h达到强;HE和免疫组化染色结果显示,注射后6 h肿瘤周围开始聚集CIK细胞,48 h多,第14天时肿瘤部位仍有CIK细胞存在,各脏器均未发现由CIK细胞导致的病理组织学损伤。结论 CIK细胞在体内外对肿瘤组织均具有靶向性,对正常组织有安全性,可作为一种有潜力的细胞载体应用于肿瘤的靶向治疗。

    作者:刘霞;胡奇婵;王涛;黄睿;崔静;王丽;杨举伦 刊期: 2014年第04期

  • 神经母细胞瘤中间变性淋巴瘤激酶基因改变

    目的:观察国内儿童散发性神经母细胞瘤( neuroblastoma, NB)中间变性淋巴瘤激酶( anaplastic lymphoma kinase, ALK)的表达,探讨其在NB发生、发展中的作用。方法应用荧光原位杂交法( fluorescence in situ hybridization, FISH)检测56例ALK蛋白异常表达的NB中ALK基因的表达。结果 FISH检测显示56例NB中ALK基因46例为正常,10例为异常,其中9例为ALK增多(16%),1例为扩增(1.8%)。结论 ALK基因是NB一个主要的易感基因,国内儿童ALK基因异常的发生率与国外文献报道相近,其有可能成为治疗NB的主要靶点之一。

    作者:殷敏智;陈洁枫;沈萍;马靖;张忠德 刊期: 2014年第04期

  • 乳腺分泌基质的癌

    1临床资料本次读片资料由复旦大学附属肿瘤医院病理科提供,通讯读片号B5-7。患者女性,50岁,体检发现右侧乳肿块1年余。体检:右乳外上象限肿块,大径约3.0 cm,质地偏硬,边界欠清,活动欠佳,腋下未及肿大淋巴结。行右乳改良根治术。

    作者:钟芳芳;水若鸿;杨文涛 刊期: 2014年第04期

  • 常见编辑规范

    1常见缩写:小时( h),分钟( min),秒( s),转/分( r/min),“周”和“天”不用英文缩写。2标点符号不能位于行首,英文无“《》、;~”符号。3超过三位的阿拉伯数字,以小数点为起点,分别向前向后每三位空一个字符,如:4532,231456,0.23456。

    作者: 刊期: 2014年第04期

  • 论文修改注意事项

    作者: 刊期: 2014年第04期

  • 肠系膜纤维瘤病2例临床病理分析

    目的:探讨肠系膜纤维瘤病( mesenteric fibromatosis, MF)的临床病理学特征、鉴别诊断、治疗及预后。方法对2例MF进行临床资料分析、光镜观察及免疫组化标记,并复习相关文献。结果2例患者肿瘤均位于小肠系膜,与周围组织界限不清,无明显包膜,切面灰白、灰红色,实性,质韧。镜下见肿瘤由增生的梭形纤维母细胞和胶原纤维组成,呈平行状、波浪状或束状交错排列,细胞形态较一致,核分裂象少见,无明显异型性。肿瘤向肠壁肌层及周围脂肪组织呈浸润性生长。免疫表型:肿瘤细胞 vimentin、β-catenin 均阳性, SMA 局灶阳性,而 CK ( AE1/AE3)、desmin、S-100、CD34、CD117、DOG1、S-100和ALK1均阴性。结论 MF是一种罕见的纤维组织增生性病变,具有局部浸润和术后复发的生物学特性。临床表现及影像学检查无特征性,易与其他原发胃肠道肿瘤混淆。其诊断及鉴别诊断主要依靠病理检查及免疫表型。手术切除是治疗MF的主要方法。

    作者:高金莉;张明智 刊期: 2014年第04期

  • 液基细胞学沉降法在儿童支气管肺泡灌洗液中的应用

    液基细胞学在非妇科疾病中广泛应用,有助于疾病的诊断[1]。其在儿童支气管肺泡灌洗液中通过各种染色方法观察细胞类型和细胞成分,可为肺部多种疾病的诊断和治疗提供理论依据[2]。本文回顾性分析524例肺泡灌洗液标本检查结果,现对液基细胞学沉降法操作体会介绍如下。

    作者:熊枫;黄慧;黄志娜;曾华;杨文萍;章高平 刊期: 2014年第04期

  • 敬告作者

    敬请作者严格按照本刊退修通知单中意见作出相应修改并作修改答复,如有不同意见也可写出说明材料并发回。欢迎您修改时参阅并引用本刊相关文献。

    作者: 刊期: 2014年第04期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会