学术投稿

透射电镜超薄切片染色铅污染的补救方法

张丽芳;姚梅宏;曲利娟;曾德华

关键词:超薄切片, 稀硝酸, 铅污染, 透射电镜
摘要:超薄切片染色是透射电镜样本制备的关键步骤,铅污染在日常工作中并不少见[1],可直接影响电镜观察.本文现介绍一种有效消除铅污染的补救方法,报道如下.1 材料与方法铜网镊夹于铜网边缘,浸入200 ml 0.05‰~0.06‰稀硝酸溶液中漂洗15~20 s,污染严重者可适当延长漂洗时间5~10s;再用蒸馏水漂洗5s×3次,滤纸吸干铜网,电镜观察.2 结果超薄切片中黑色致密的圆形或不定形颗粒经稀硝酸处理后被消除,组织切片未见破损、脱落;细胞微细结构保存好,反差明显(图1、2).
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 散发性肾脏血管母细胞瘤1例并文献复习

    目的 探讨散发性肾脏血管母细胞瘤(haemangioblastoma,HB)的临床病理学特征.方法 对1例肾脏HB进行光镜观察及免疫组化标记,并复习相关文献.结果 HB由肿瘤性间质细胞和丰富的毛细血管构成,间质细胞卵圆形或多角形,胞质丰富、空泡状,核圆形、卵圆形,呈透明细胞形态,部分间质细胞胞质内见脂质空泡,核分裂象罕见.免疫表型:间质细胞vimentin、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、Inhibin-α、S-100蛋白均阳性,CK-pan呈灶阳性,Ki-67增殖指数约1%,CD34、FⅧRAg、CD31、HMB-45、Syn、CD56、CgA、NSE、desmin、EMA、D2-40均阴性.结论 HB是一种多见于中枢神经系统的良性肿瘤,罕见于肾脏,易误诊,对其识别非常重要,可以避免临床过度治疗.

    作者:康锶鹏;姚丽青;郑智勇;齐兴峰 刊期: 2014年第07期

  • 炎性假瘤样滤泡树突细胞肉瘤6例临床病理特征及预后分析

    目的 探讨炎性假瘤样滤泡树突细胞肉瘤(inflammatory pseudotumor-like follicular dendrtic cell sarcoma,IPT-like FDCS)的临床病理学特征.方法 回顾性分析6例IPT-like FDCS的临床病理资料、免疫表型及EBER原位杂交结果,并追踪患者预后.结果 6例IPT-like FDCS中女性4例,男性2例,年龄40~78岁,平均62.3岁.临床表现无特异性,4例患者为体检时发现,1例患者有腹胀、消瘦症状,1例患者有腰背部疼痛症状.3例患者肿瘤位于脾脏,2例位于肝脏,1例位于腹膜后.肿瘤直径3.5~14 cm(平均7.8 cm),肿瘤通常与周围组织分界较清晰.肿瘤组织由圆形、卵圆形及梭形细胞组成,细胞异型性不明显,呈编织状、漩涡状或席纹状排列,其间见多量炎细胞混杂.免疫表型:肿瘤细胞表达CD21/35、vimentin及Clusterin.EBER原位杂交显示瘤细胞散在阳性.所有患者均经手术完整切除肿瘤,术后随访3~48个月,6例中5例患者无瘤生存,1例患者随访4年后(无复发和转移)失访.结论 IPT-likeFDCS是一种好发于女性的少见低度恶性肿瘤,常见的发病部位是脾脏和肝脏,与EB病毒感染有关,其生物学行为相对惰性,手术完整切除肿瘤是佳治疗方式.

    作者:向春香;王建军;吴楠;余波;夏春;何燕;马捷;石群立 刊期: 2014年第07期

  • 子宫颈癌组织中AEG-1表达与微血管生成的关系

    目的 观察AEG-1在子宫颈癌组织中的表达及与微血管生成的关系.方法 采用免疫组化MaxVision法检测40例子宫颈癌、10例慢性子宫颈炎组织中AEG-1、NF-κB p65、VEGF蛋白的表达,采用Image-Pro 6.0软件检测蛋白表达的平均光密度(mean density,MD).采用肿瘤微血管内皮标志物(CD34)结合Weinner计数法检测子宫颈癌组织新生的微血管密度(microvascular density,MVD).结果 子宫颈癌组织中AEG-1呈高表达,其与子宫颈癌的淋巴结转移和脉管浸润密切相关(P<0.05),与子宫颈癌的组织学类型、肿瘤大小、分化程度、宫旁浸润及患者年龄无关.AEG-1表达与NF-κB p65、VEGF蛋白表达呈正相关.结论 AEG-1在子宫颈癌组织中的表达与肿瘤MVD呈正相关,其可能促进子宫颈癌的微血管生成.

    作者:宋恩霖;王茂梅;熊秀娟;朱静;俞薇薇 刊期: 2014年第07期

  • 胎盘部位滋养细胞肿瘤临床病理观察

    目的 探讨胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor,PSTT)的临床病理特征与鉴别诊断.方法 对9例PSTT的临床、超声、组织学形态和免疫表型进行分析,并结合随访资料复习相关文献.结果 9例PSTT患者均为女性,年龄22~ 38岁.临床均表现为妊娠2~6个月阴道不规则流血,尿妊娠试验阳性,8例子宫增大;7例行子宫全切,2例仅行肿瘤消融术+化疗.光镜下瘤细胞主要为中间型滋养细胞,可见单核和多核两种形态.两种细胞分布无规律,有明显嗜血管倾向,但血管结构仍存在.肿瘤浸润平滑肌生长,间质中有广泛的纤维蛋白样物质沉积.广谱CK和hPL弥漫性阳性(9/9),β-hCG散在阳性(9/9),inhibin-α (4/9)、PLAP(2/9)部分阳性,vimentin、p63均呈阴性,Ki-67增殖指数10%~40%.随访3个月~10年,3例失访,6例未发现复发及死亡.结论 PSTT是一种极少见的滋养细胞肿瘤,综合临床检查、形态学特征并结合免疫表型,有助于PSTT的诊断及与其它滋养细胞疾病的鉴别,对临床治疗有指导意义.

    作者:张江宇;李荔;陈文静;李嘉蔚;杜维;冯晓冬;郜红艺 刊期: 2014年第07期

  • 甲状腺癌肺静脉转移突入心房1例

    患者女性,77岁,胸闷、气短1年,近来加重,遂来我院检查.患者3年前发现甲状腺肿物,于外院行手术切除术,术后病理报告:左右甲状腺及峡部恶性肿瘤,结合免疫组化结果考虑为滤泡癌+乳头状癌,病变不典型,建议进一步会诊复议诊断.入院后行病理检查见右颈内静脉见癌栓(图1),心脏扇扫显示左房占位,CT示肺内多数小点状阴影,考虑甲状腺癌转移,行左心房肿物切除术.术中见左房内肿物与房壁无关,肿物由肺静脉内长出,另见肺静脉内多发肿物.术中将左房内肿物送快速病理检查.

    作者:高爽;肖明明;侯慧;任秋华;郑静;魏少忠;景士兵 刊期: 2014年第07期

  • 透射电镜超薄切片染色铅污染的补救方法

    超薄切片染色是透射电镜样本制备的关键步骤,铅污染在日常工作中并不少见[1],可直接影响电镜观察.本文现介绍一种有效消除铅污染的补救方法,报道如下.1 材料与方法铜网镊夹于铜网边缘,浸入200 ml 0.05‰~0.06‰稀硝酸溶液中漂洗15~20 s,污染严重者可适当延长漂洗时间5~10s;再用蒸馏水漂洗5s×3次,滤纸吸干铜网,电镜观察.2 结果超薄切片中黑色致密的圆形或不定形颗粒经稀硝酸处理后被消除,组织切片未见破损、脱落;细胞微细结构保存好,反差明显(图1、2).

    作者:张丽芳;姚梅宏;曲利娟;曾德华 刊期: 2014年第07期

  • 成人腹腔树突状纤维黏液脂肪瘤1例

    患者男性,38岁,因左侧腹部隐痛7天,加重16 h入院.查体:体温(T)36.8 ℃,脉搏(P) 100次/min,呼吸(R)20次/min,血压(BP) 153/105 mmHg.专科情况:神志清楚,营养中等.全身浅表淋巴结无肿大及压痛,心肺无阳性体征.腹部平坦,软,全腹压痛,以左下腹明显,有反跳痛,未触及腹部包块,肝脾肋下未触及,移动性浊音阳性,肠鸣音正常.辅助检查腹部彩超示:左下腹不均质回声(左下腹探及98 mm×48mm的不均质回声,似有包膜);脂肪肝声像、双肾结石声像、腹水声像、化验检查均未见异常.CT扫描示:左侧中下腹部见大小10 cm ×6 cm不规则软组织块影,密度不均,增强后见明显不均强化,内见无强化区,肿块与部分小肠分界不清,肝下缘见弧形稍高密度影,肝脏、胆囊、双肾及膀胱正常(图1).腹腔内见积液.腹膜后未见肿大淋巴结.术中探查:扪及腹部囊性肿块,大小10 cm×6 cm,蒂部位于左上腹部大网膜.

    作者:张兰凤;肖学文;李伟松;范钦和 刊期: 2014年第07期

  • 以乳头状结构为主的网状型支持-间质细胞肿瘤2例

    目的 网状型是支持-间质细胞肿瘤(Sertoli-Leydig cell tumor,SLCT)中的少见亚型,而以乳头状结构为主的网状型SLCT罕见,探讨其临床病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 观察2例以乳头状结构为主的网状型SLCT的临床病理学特征,并复习相关文献.结果 例1,18岁,以雄激素增高症状就诊,同时伴有血浆AFP升高;例2,7岁,以下腹痛就诊.B超检查均显示以囊性为主的混合性回声.2例肿瘤大体均呈囊性,囊壁附灰白淡黄色乳头状物.镜下乳头大小不等,部分呈复杂分支结构;乳头被覆形态单一的单层或多层细胞,胞质稀少,透亮,细胞核圆;乳头轴心伴有明显的玻璃样变性.乳头的被覆细胞表达Calretenin、CK(AE1/AE3)及WT-1,部分表达vimentin,但不表达α-inhibin、EMA,而与其移行的支持小管以及周围的Leydig细胞则同时表达α-inhibin及Calretenin;例1还表达ER、PR及AFP.2例曾分别被误诊为浆液性乳头状腺癌及幼年性颗粒细胞瘤.随访时间分别为36个月及7个月,均无病生存.结论 当网状型SLCT以乳头状结构为主时,诊断十分困难.但该型肿瘤有其独特的临床病理特点,可与多种卵巢肿瘤鉴别.

    作者:成宇帆;师晓莉;卿松;于宝华;杨文涛 刊期: 2014年第07期

  • 软组织肌上皮瘤/混合瘤6例临床病理学分析

    目的 探讨软组织肌上皮瘤/混合瘤(myoepithelioma/mixed tumour of soft tissue,MMT)的临床病理学特征、免疫表型、鉴别诊断及预后.方法 采用免疫组化EnVision两步法对6例MMT进行免疫组化染色,并复习相关文献.结果 6例MMT中男性3例,女性3例,年龄11~63岁,平均44岁.肿瘤直径2~17.5 cm,平均6.5 cm.免疫表型:75% (3/4)表达CK,100%(4/4)表达vimentin,66.7%(2/3)表达S-100,50% (2/4)表达GFAP,100%(3/3)表达EMA,(0/4)不表达SMA.6例MMT随访时间5~ 10年,3例局部复发,1例复发且发生肺转移,所有患者均存活.结论 临床上,MMT通常表现为无痛性肿块,持续数周至数年,偶有局部疼痛.多发生于成人,男女比例大致相同.肿瘤境界清楚,绝大多数肿瘤位于四肢皮下或深部的筋膜下软组织.组织学上,MMT类似于涎腺的多形性腺瘤,含有不同比例的上皮和(或)肌上皮成分,间质玻璃样变或为软骨黏液样.大部分MMT为良性行为,但少数可局部复发和转移,导致死亡.

    作者:张学东;陈士超;杜然;张仁亚;姜慧峰;朱维娜 刊期: 2014年第07期

  • CEP17异常对评判乳腺癌HER-2基因扩增状态的影响

    目的 探讨使用乳腺癌双色荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测CEP17(17p11.1-q11.1)探针拷贝数与HER-2基因扩增间的关系,分析CEP17异常对乳腺癌HER-2基因扩增状态评判的影响.方法 收集742例乳腺癌HER-2基因扩增标本,采用双色FISH技术及免疫组化法检测并进行回顾性分析.结果 742例乳腺癌HER-2 FISH检测结果显示,11例(1.48%) HER-2探针信号数>6个,但由于CEP17探针信号数异常而被判定为基因扩增阴性.结论 乳腺癌组织中真正17号染色体多倍体的比例极其稀少;FISH检测的CEP17信号数不等同于真正17号染色体的数目,临床有一定比例的HER-2 FISH结果阴性的患者错失佳治疗机会.

    作者:相学平 刊期: 2014年第07期

  • 乳腺癌组织Slug和Snail细胞核抗原热修复方法的优化

    充分的抗原修复是免疫组化染色效果好坏的重要环节,特别是抗原修复处理方法和抗原修复液的选择[1].抗原修复包括酶修复法和热修复法,胰蛋白酶消化法近年来很少使用[2].石善溶[3]认为从石蜡切片中提取蛋白质时选择适宜的加热条件进行处理,效果良好.高压修复和微波修复是目前常用的两种热修复方法,枸橼酸缓冲液和EDTA缓冲液是常用的两种修复液.为更好的显示细胞核抗原免疫组化结果,本实验拟在石蜡包埋乳腺浸润性导管癌组织切片中,选择不同的热修复方法和修复液,对Slug和Snail两个核蛋白进行免疫组化实验,探讨细胞核抗原的佳修复方法.

    作者:李文琴;万国兴;李锋;梁伟华;李玉聪;李怡晓;杜小明;曹玉文 刊期: 2014年第07期

  • 卵巢浆液性腺癌中Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc的表达及意义

    目的 检测Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc在卵巢浆液性腺癌(ovarian serous adenocarcinoma,OSA)中的表达,探讨其与肿瘤FIGO分期、病理分级、复发的关系.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测60例OSA中β-catenin、c-myc的表达,并进行预后分析.结果 (1)FIGO分期:β-catenin在Ⅲ+Ⅳ组中的表达高于Ⅰ+Ⅱ组(P =0.003);c-myc表达与FIGO分期无关(P=0.069).(2)病理分级:β-catenin的表达与病理分级无关(P =0.817);c-myc在高级别组中的表达高于低级别组(P=0.016).(3)复发:β-catenin、c-myc表达与患者复发均无关(P =0.349,P=0.171).(4)预后分析:β-catenin、c-myc阳性组患者的生存率均低于阴性组(P=0.032,P=0.035).结论 Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc可能在OSA的发生、发展及患者的不良预后中发挥作用,检测其表达可能具有一定的临床意义.

    作者:戴颖青;管群;刘琦;王建军;余波;王建东;石群立 刊期: 2014年第07期

  • 环保型GS试剂在特殊染色中的使用

    现代病理学中免疫组化、细胞及分子生物学技术的应用日益广泛,由于这些技术需要较高的实验条件和昂贵的试剂而难以普及.特殊染色技术以其操作简单、检测快速和成本低廉等优势,在临床病理学诊断中仍具有重要的应用价值.病理实验室的环保问题日益受到关注,甲醛、二甲苯严重影响环境和健康,寻求一种无刺激性气味、无毒无害的替代品已成为病理工作者的迫切愿望.新型环保试剂在常规HE染色中已有出色表现[1,2],本科室在特殊染色中使用新型环保试剂也取得满意效果,现介绍如下.

    作者:信芳杰;管静静;邵世宏;赵涵;计晓彬 刊期: 2014年第07期

  • 源于神经鞘瘤的上皮样血管肉瘤1例并文献复习

    目的 观察源于神经鞘瘤的血管肉瘤临床病理学特征,探讨与神经源性肿瘤相关的血管肉瘤组织学特征及影响预后因素.方法 回顾性分析源于神经鞘瘤上皮样血管肉瘤的临床病理特征、免疫表型、治疗及预后,并复习相关文献.结果 患者男性,右上臂有一无痛性肿块.肿块呈结节样,切面呈囊实性,肿瘤形态呈多形性,可见梭形细胞区域,部分区域细胞丰富,二者截然分界,细胞丰富区见由不规则血管构成的疏松区,并见上皮样细胞成片分布或呈靶环样排列,核分裂象易见.梭形细胞表达S-100蛋白,丰富区域S-100蛋白表达缺失,但表达GFAP,富于血管的肿瘤细胞表达CD34、CD31、FⅧRAg,上皮样细胞表达广谱CK.患者术后接受放疗,随访34个月,未见复发或转移.结论 源于神经鞘瘤的血管肉瘤极为少见,恶性程度高.肿瘤直径(>5cm)、细胞核分裂计数、手术切缘阳性以及伴有I型神经纤维瘸病(neurofibromatosis type 1,NF-1)均为其预后不良因素.

    作者:韩扬;王军臣;符雪莲;华燕菲;史阳 刊期: 2014年第07期

  • 新生儿先天性肺淋巴管扩张症1例并文献复习

    目的 探讨先天性肺淋巴管扩张症(congenital pulmonary lymphangiectasis,CPL)的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断.方法 对1例新生儿CPL尸检组织的病理学特征、免疫表型及临床特点进行观察,并复习相关文献.结果 双肺呈蜂窝状,脏层胸膜下方及肺小叶间隔内、细支气管周围及血管周围见扩张淋巴管,免疫组化标记内皮细胞中D2-40、CD31阳性.患儿因呼吸衰竭死亡.结论 CPL是一种罕见的原发性肺发育不良,结合组织学特征、免疫表型可明确诊断,其预后差,出生后常因呼吸衰竭死亡.

    作者:侯兴华;金素芬;李春杨 刊期: 2014年第07期

  • 肉芽肿性小叶性乳腺炎33例临床病理分析

    目的 探讨肉芽肿性小叶性乳腺炎(granulomatous lobular mastitis,GLM)的临床病理学特征、诊断及治疗.方法 回顾性分析33例GLM,并复习相关文献.结果 33例患者均为女性,大部分有哺乳史,均以单侧乳房肿块就诊,可伴疼痛、红肿和腋下淋巴结肿大.21例肿块位于左侧乳房,12例位于右侧.肿块直径3.0~ 10.0 cm,平均5.0 cm,质地韧.患者均行手术切除治疗,预后好,术后无复发.结论 GLM是一种少见的局限于乳腺小叶的肉芽肿性病变,临床和病理医师应予以重视,避免误诊、误治.

    作者:廖谦和;安慧敏;郭德超;张立飞 刊期: 2014年第07期

  • 口腔鳞状细胞癌中STING的表达及意义

    目的 探讨干扰素刺激基因(stimulator of interferon genes,STING)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织及其对应癌旁组织中的表达及其临床诊断意义.方法 收集25例OSCC组织及对应癌旁组织,提取组织内mRNA,采用SYBR Green荧光实时定量PCR技术检测组织中STING、TBK-1和IRF-3的表达,并分析正常角朊细胞系和OSCC细胞系中IRF-3的表达.结果 OSCC组织内STING的表达与对应癌旁组织相比显著下降(P =0.014 1);OSCC组织内STING下游基因TBK-1的表达与对应癌旁组织相比显著下降(P =0.030 6);OSCC组织内IRF-3的表达与对应癌旁组织相比显著下降(P=0.0313);OSCC细胞系HSC-3与正常细胞系HaCaT细胞系相比,IRF-3 mRNA表达显著降低(P =0.009 3).结论 STING及其下游基因在OSCC癌灶组织内低表达,下调的STING-TBK-1-IRF-3通路可能与癌症进程有关.

    作者:陈盛;泥艳红;丁亮;黄晓峰 刊期: 2014年第07期

  • 系统性红斑狼疮尸检1例并文献复习

    目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床病理学特征和死亡原因.方法 对1例SLE死者进行尸检,观察其病理组织学和免疫表型特征,探讨该病的临床病理学特征和死亡原因.结果 死者,男童,11岁,因发现双下肢皮疹1周入院,诊断为SLE(活动期),住院期间突发呼吸急促,经抢救无效死亡.尸检发现死者肺脏、肾脏受累,因狼疮性肺炎致急性呼吸衰竭死亡.结论 SLE可造成全身多脏器损害,急性期患者的死亡原因主要是SLE多脏器严重损害和感染,慢性肾功能不全和药物不良反应是SLE远期死亡的主要原因.

    作者:谢飞来;赵铁骑;李华良;郑智勇;余英豪 刊期: 2014年第07期

  • 子宫黏液性平滑肌肉瘤的诊断与鉴别诊断

    子宫黏液性平滑肌肉瘤是子宫平滑肌肉瘤的罕见亚型,因其罕见且形态学较特殊,导致该病变在病理诊断上仍然具有挑战性,该文就子宫黏液性平滑肌肉瘤的诊断标准、鉴别诊断及治疗和预后作一综述.

    作者:张和平;汪勤;解正新 刊期: 2014年第07期

  • HE染色不良的分析与应对方法

    质量上乘的HE染色切片是病理医师作出正确病理诊断的关键.HE染色是一种多步骤、多因素的染色方法,不管是机器还是手工操作,均存在许多影响因素,甚至出现不理想的染色结果,从而导致误诊.本文分析HE染色中容易出现的问题和应对方法,现介绍如下.1 切片污染:染液、组织及盖、载玻片的污染分析:(1)染液污染是由苏木精染液的氧化膜或其它试剂的沉淀物所致.(2)组织污染是由于取材、包埋、裱片时,前后标本相互污染引起.(3)玻片污染是误用了过期涂胶玻片,霉变盖、载玻片,或被其它杂质污染了的盖、载玻片(图1).

    作者:范小莉;胥维勇;杨群;刘翔;何娟;唐倩;高阳雪;陈思熵 刊期: 2014年第07期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会