学术投稿

正交设计试验在免疫组化检测琥珀酸脱氢酶条件优化中的应用

张炜明;贡其星;宋国新;平国强;王聪

关键词:正交设计, 免疫组织化学, 优化
摘要:免疫组化染色已成为病理学临床诊断和研究中不可缺少的重要技术之一,其染色是否成功受抗原修复、一抗浓度、孵育时间、温度等因素的影响。在实际工作中,检测一些新抗体时需从众多影响因素的不同水平去摸索佳的检测条件,费时费力。为了减少实验次数和劳动量,降低实验成本,本文将正交设计试验引入免疫组化检测条件优化实验中,运用免疫组化法检测琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase, SDH)在胃肠道间质瘤中的表达,探讨该方法的可行性,以便于寻找一种经济、简易、可行的免疫组化检测条件优化方法。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • PTEN在糖尿病肾病患者足细胞损伤中的作用

    目的:探讨磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B( phosphoinositide 3 kinese/protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路抑制因子PTEN与糖尿病肾病( diabetic nephropathy, DN)患者足细胞损伤的关系。方法收集30例DN患者和10例健康志愿者的24 h尿标本,采用酶联免疫吸附实验( enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测患者尿液中足盂蛋白( podocalyxin, PCX)的水平;肾活检组织进行形态学观察,根据肾小球病变将DN患者分为3组,免疫组化法检测各组肾小球内p-Akt和PTEN的表达。结果 DN患者尿液中PCX的水平明显高于健康对照组,并随肾小球病变加重其水平逐渐上升;p-Akt和PTEN在DN患者肾小球的表达有所上调,但随着肾小球病变的加重其表达逐渐减少;DN患者尿液中PCX水平与PTEN表达呈负相关,与24 h尿蛋白呈正相关。结论 PTEN表达下调可能通过改变Akt的活化状态,从而在DN患者足细胞损伤中发挥一定作用。

    作者:邢玲玲;傅淑霞;杨林;姚芳;王建荣;于连英;刘青娟 刊期: 2014年第12期

  • 外显子测序识别脑干胶质瘤体细胞获得性功能PPM1 D基因突变

    发生于脑干和丘脑的胶质瘤是一类毁灭性肿瘤,难以通过手术切除。为确定这些肿瘤的遗传和表观遗传学背景,作者对14例脑干胶质瘤( BSGs)和12例丘脑胶质瘤病例进行外显子组测序。同时该团队通过针对性突变分析对另外24例该类肿瘤及45例脑胶质瘤进行全基因组甲基化谱进行分析。这项研究发现肿瘤特异性突变PPM1D,该突变编码野生型p53蛋白诱导的蛋白磷酸酶1D(WIP1),其在37.5%的脑干胶质瘤中存在标志性的H3F3A基因突变导致编码第27号染色体使赖氨酸转换为甲硫氨酸。脑干胶质瘤中PPM1D基因突变和TP53基因突变互斥抑制并且在体外实验中可以衰减p53蛋白活化。 PPM1D基因突变能够缩短外显子6来增强PPM1D抑制DNA损伤反应的检验CHK2蛋白激活的能力。这些研究结果表明PPM1D可以作为体细胞突变常用的靶点以及脑干胶质瘤治疗中的潜在靶点。

    作者:王晶晶;许春伟(摘译);张博(审校) 刊期: 2014年第12期

  • 姜黄素对miR-21靶控的信号转导蛋白K-ras的影响

    目的:探讨姜黄素对miR-21靶控的信号转导蛋白K-ras的影响。方法18只SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组和姜黄素组,每组6只。除对照组外,模型组和姜黄素组用二乙基亚硝胺( DENA)连续灌胃18周,姜黄素组于第9周用姜黄素灌胃,每周2次,连续10周;对照组先用生理盐水灌胃8周,9~18周用生理盐水+0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。应用qRT-PCR技术检测miR-21的表达;Western blot法检测K-ras蛋白的表达。结果肝癌模型组miR-21基因的相对表达量较正常对照组明显增加( P<0.05);姜黄素组miR-21基因相对表达量较肝癌模型组明显降低( P<0.05),与对照组相比表达量增加,差异有统计学意义( P<0.05);与对照组相比,模型组和姜黄素组肝癌组织中K-ras蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),姜黄素组大鼠肝癌组织中K-ras蛋白相对表达量较模型组均明显降低( P <0.05)。Pearson相关分析显示,实验各组K-ras蛋白及miR-21的表达量均呈正相关( P<0.05)。结论姜黄素可能通过调控miR-21靶控的信号转导子K-ras蛋白表达促进肝癌的发生、发展及侵袭转移,对肝癌生物靶向治疗及预后判断具有潜在临床应用价值。

    作者:高建芝;王永玲;李佳;姬翔;韦立新 刊期: 2014年第12期

  • 食管鳞状细胞癌组织中Periostin、VEGF的表达及意义

    目的:探讨Periostin、VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测130例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中Periostin、VEGF蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌组织中Periostin和VEGF的阳性率明显高于正常食管黏膜组织(P<0.05)。 Periostin表达与食管鳞状细胞癌浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。 VEGF表达与食管鳞状细胞癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。 Periostin与VEGF表达呈正相关(P<0.05),66例食管鳞状细胞癌患者获得临床随访资料,随访时间1~48个月,Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Peri-ostin阳性组患者的生存率明显低于 Periostin阴性组( P<0.05), VEGF阳性组患者的生存率明显低于 VEGF 阴性组( P <0.05)。结论 Periostin与VEGF表达密切相关,联合检测Periostin、VEGF可作为判定食管鳞状细胞癌侵袭、转移能力的客观指标,对食管鳞状细胞癌的预后判断具有重要意义。

    作者:李超;徐小玲;王玲;秦珊;朱于启 刊期: 2014年第12期

  • 胃浆细胞瘤1例并文献复习

    目的:探讨胃浆细胞瘤的临床病理特点、免疫表型及鉴别诊断。方法回顾性分析1例胃浆细胞瘤的临床病理学特征并复习相关文献。结果患者无特异性临床表现, CT、MRI等影像学检查可辅助诊断,确诊依赖于病理学检查。免疫表型:瘤细胞表达 CK、CD38、CD138、CD79a、CK8/18、CK8、CAM5.2、Ki-67,不表达EMA、CK20、CgA、Syn、CD3、CD20、κ及CEA。结论胃浆细胞瘤是一种罕见的恶性肿瘤,CT、MRI及免疫组化检查有助于诊断。病理诊断上应与低分化腺癌、浆细胞肉芽肿、原发性恶性淋巴瘤、转移性癌等相鉴别。

    作者:苏丽丽 刊期: 2014年第12期

  • 敬告作者

    本刊编辑部收到作者的投稿后,经初审符合本刊征稿内容者,编辑部将及时发回执,注明稿件编号并通知作者缴纳稿件处理费;对通过专家审核的稿件,在进行文字和撰写规范编辑加工后,发送“退修意见单”给第一作者;如作者的修回稿符合退修要求,则进入待用状态。编辑部将根据各期中心内容遴选稿件,并在排版后用E-mail发送校对样稿和缴纳版面费通知。编辑部咨询电话:0551-65161102,投稿邮箱:lcsybl@163. com。

    作者: 刊期: 2014年第12期

  • 胎盘组织HMGB1免疫组化染色条件的优化

    研究显示,HMGB1作为晚期炎症介质,在感染性早产孕妇的血清、胎盘等中的表达明显升高[1]。胎盘组织内细胞丰富,尤其是红细胞、炎细胞等,对HMGB1的免疫组化染色干扰较大。本文旨在从抗原修复、消除非特异性染色方面优化HMGB1的免疫组化染色。

    作者:李梅;孙亚军;赵小辉;吴建农 刊期: 2014年第12期

  • 乳头状肾细胞癌30例临床病理分析

    目的:探讨乳头状肾细胞癌( papillary renal cell carci-noma, PRCC)的临床病理学特征。方法回顾性分析30例PRCC的临床资料、病理组织学及免疫表型特征,并进行随访。结果男性24例,女性6例,平均年龄55.8岁(22~82岁)。肿瘤平均直径5.2 cm(1.7~11.5 cm)。17例行根治性肾切除术,2例行肾输尿管全长切除术,11例行保留肾单位手术,病理分期:pT1aN0M0者10例,pT1bN0M0者8例, pT2aN0M0者9例, pT2bN0M0者1例, pT3bN0M0者1例, pT2aN1M0者1例;Fuhrman分级:Ⅰ级7例,Ⅱ级12例,Ⅲ级9例,Ⅳ级2例。免疫表型:26例弥漫性表达CK7,21例表达P504s,19例表达vimentin。30例PRCC均获得随访,随访时间为7~72个月,5例因病变转移死亡;1例肺转移,行靶向治疗,存活至今;其余24例均无瘤生存。结论 PRCC是一种特殊形态的少见肾癌类型,主要通过病理检查进行诊断,治疗首选手术切除,Ⅰ型预后较好。

    作者:曲渊 刊期: 2014年第12期

  • 统计学符号书写要求

    作者: 刊期: 2014年第12期

  • 腮腺低度恶性筛状囊腺癌3例临床病理分析

    目的:探讨涎腺低度恶性筛状囊腺癌( low-grade crib-riform cystadenocarcinoma, LGCCC)的临床病理特征、诊断和鉴别诊断、治疗及预后。方法对3例LGCCC的形态学和免疫表型进行分析并复习相关文献。结果(1)3例LGC-CC中2例为女性,1例为男性。年龄分别为51、60、65岁,肿物均发生在腮腺。组织学特征与乳腺不典型增生至低级别导管原位癌相似,由多个囊及邻近的导管内增生构成,囊内及导管内增生的导管上皮呈筛状、微乳头状和实性结构。(2)免疫表型:肿瘤细胞CK(AE1/AE3)、S-100均弥漫阳性, CEA、EMA部分腔内细胞阳性;癌巢周围细胞示肌上皮标志物如 p63、SMA、Calponin、CK5/6呈连续的阳性。结论LGCCC临床罕见,确诊需依靠病理学及免疫组化检查,应注意与其它良恶性肿瘤鉴别诊断。

    作者:杨宣琴;李静;步鹏;解立武 刊期: 2014年第12期

  • 胃癌组织中TSLC1的表达及临床意义

    目的:探讨肺癌肿瘤抑制物1(tumor suppressor in lung cancer 1, TSLC1)蛋白表达与胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化法检测TSLC1蛋白在20例正常胃黏膜、30例胃上皮内瘤变和50例胃癌组织中的表达,并复习相关文献。结果TSLC1在胃癌中的阳性率为14.00%,低于胃上皮内瘤变(46.67%)及正常胃黏膜(95.00%)( P<0.05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变中的表达低于低级别上皮内瘤变及正常胃黏膜( P<0.05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变及胃癌组织中的表达差异无显著性(P>0.05)。胃癌中 TSLC1表达与淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05)。结论 TSLC1表达与胃癌的发生、发展有关,可能为胃癌的防治提供新方向。

    作者:阳帅;胡华;王晓瑜;赵强;张小丽 刊期: 2014年第12期

  • 敬告作者

    作者收到编辑部的退修意见后,请按修改意见认真修改。稿件修改处宜采用不同颜色字体标识,以便编辑和审稿专家查看。修改完成后,请对专家审稿意见逐条说明修改情况,有异议者,可说明理由。

    作者: 刊期: 2014年第12期

  • 糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达

    目的:探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。

    作者:朱琳;郝军;赵松;赵雪;陈宁;郑书深;段惠军 刊期: 2014年第12期

  • 桥本甲状腺炎伴不典型细胞与乳头状癌的鉴别诊断

    目的:探讨桥本甲状腺炎伴不典型细胞与甲状腺乳头状癌( papillary thyroid carcinoma,PTC)的鉴别诊断。方法收集桥本甲状腺炎153例,分为桥本甲状腺炎伴不典型细胞组(32例)、桥本甲状腺炎伴PTC组(49例)、桥本甲状腺炎对照组(72例)。采用HE及免疫组化法分析各组间的差异。结果桥本甲状腺炎伴不典型细胞与PTC有形态学差异。伴PTC组Galec-tin-3、CK19阳性率高于伴不典型细胞组,CD56阳性率低于伴不典型细胞组,差异均有统计学意义。 Ki-67阳性率在伴不典型细胞组与伴PTC组之间差异无显著性,但与对照组之间差异有统计学意义。结论以组织形态学特征为基础,联合应用CD56、CK19、Galectin-3、Ki-67可有效鉴别桥本甲状腺炎伴不典型细胞与PTC。

    作者:张洪艳;胡营营;陈晋明;支全;徐斌;张杰 刊期: 2014年第12期

  • 通过单细胞测序发现结肠癌双系起源的新型癌基因--SLC12 A5

    单细胞测序是一种为划定遗传关系和个性化癌症管理确认重要驱动基因的功能强大的工具。本研究运用单细胞测序分析1例结肠癌。群体遗传学分析确定了肿瘤群体中两个独立的克隆。作为早期致癌事件的大部分肿瘤克隆包含APC和TP 53基因突变,然而少数克隆却包含CDC27和PABPC1基因的优势突变。 APC和TP53基因突变在少数克隆中的缺失说明这两个克隆来自两个细胞起源。对于另外21例整个组织外显子测序并检查其体细胞突变的等位基因频谱,揭示了结肠癌克隆起源具有异质性。该研究确定SLC12A5基因的突变,显示其在单细胞水平的高频突变,然而群体水平上却呈低频突变。 SLC12A5突变的功能特征揭示其在结肠癌中潜在的致癌作用。该研究提供了结肠癌单细胞水平上第一个广谱外显子组的证据,支持结肠癌双系克隆起源以及人群中的低频突变可能发挥的重要促癌作用。

    作者:张俊(摘译);许春伟(摘译);张博(审校) 刊期: 2014年第12期

  • 正交设计试验在免疫组化检测琥珀酸脱氢酶条件优化中的应用

    免疫组化染色已成为病理学临床诊断和研究中不可缺少的重要技术之一,其染色是否成功受抗原修复、一抗浓度、孵育时间、温度等因素的影响。在实际工作中,检测一些新抗体时需从众多影响因素的不同水平去摸索佳的检测条件,费时费力。为了减少实验次数和劳动量,降低实验成本,本文将正交设计试验引入免疫组化检测条件优化实验中,运用免疫组化法检测琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase, SDH)在胃肠道间质瘤中的表达,探讨该方法的可行性,以便于寻找一种经济、简易、可行的免疫组化检测条件优化方法。

    作者:张炜明;贡其星;宋国新;平国强;王聪 刊期: 2014年第12期

  • 淀粉样变性肾病31例临床病理学分析

    目的:探讨淀粉样变性肾病( amyloid nephropathy, ANP)的临床病理学特征。方法回顾性分析31例ANP的临床病理资料,并复习相关文献。结果31例ANP占同期全部肾脏穿刺活检的1.19%(31/2603),其中女性15例,男性16例。年龄36~77岁,平均(61.28±10.95)岁。临床分期:单纯蛋白尿期4例(12.90%),肾病综合征期21例(67.74%),肾功能衰竭期6例(19.35%)。镜下见淀粉样物质主要沉积于肾小球系膜区、毛细血管基膜和小动脉壁,严重时可沉积于肾小管基膜和肾间质。高锰酸钾氧化刚果红染色示:AL型27例,AA型4例。免疫荧光检测部分病例可见免疫球蛋白及补体程度较弱的沉积,部分为阴性。 AL型ANP免疫组化标记示免疫球蛋白轻链κ和λ不同程度表达,其中以λ轻链多见。电镜下在系膜区及毛细血管壁上皮下可见淀粉样纤维。结论 ANP好发于中老年肾病患者,临床表现有时缺乏特异性,肾组织穿刺活检病理学检查是确诊的唯一方法。对疑似病例应尽早行肾脏穿刺活检,以便早期诊断及治疗。

    作者:隋燕霞;蒋娜;解立怡;赵东利 刊期: 2014年第12期

  • 颞下颌关节滑膜肉瘤1例

    患者女性,48岁,因“左侧颞下颌疼痛不适5个月,加重伴肿胀半个月”入院。5个月前自觉左侧颞下颌关节疼痛不适,不伴发热,行抗炎治疗,效果不佳,近半个月来发现左侧颞下颌关节处肿胀,压痛,咀嚼时疼痛明显,张口受限,开口度约1.0 cm。查体:左侧颞部肿胀,皮肤无充血红肿,无破口。左耳前骨性饱满隆起,压痛明显,张口时压痛加重,通过外耳道有压痛。 CT检查示:左侧颞下颌关节髁突广泛不规则骨质破坏,密度不均匀,可见斑块状低密度影,关节间隙增宽,髁突向外下移位,周围软组织高密度影(图1)。 PET检查示:右侧颈部及双肺可见转移瘤。手术所见:左侧髁突骨质破坏至髁突颈部,肿物质地呈鱼肉状,界限不清,向前、下、内扩展,内界至蝶骨翼突外板,上界至颅底,外界至关节,关节囊完整,无明显破坏。术中快速冷冻病理检查提示腺癌浸润。遂行肿物切除术。

    作者:刘艳丽;张文;赵慧玲;刘琳;刘亮;刘爽 刊期: 2014年第12期

  • 软骨样脂肪瘤1例

    患者男性,47岁,右前臂肘关节外侧有一肿物10余年,无压痛,可活动,生长缓慢。 CT示右侧肘关节外侧皮下脂肪间隙见一类圆形稍低密度软组织肿块影,大小45 mm ×63 mm;密度不均匀,内有脂肪密度影、细小点状钙化及纤细分隔;肿块边缘清晰,相邻肌肉略受压移位,邻近皮肤无增厚。诊断:脂肪肉瘤?(图1)。术中见肿物位于皮下浅筋膜内,大小8 cm ×7 cm ×5 cm,境界清楚,切面灰黄色有砂砬感,质地中等。

    作者:张兰凤;肖学文;叶薇;范钦和 刊期: 2014年第12期

  • 肝细胞性肝癌中SOX9的表达及临床意义

    目的:探讨蛋白质分子生物标志物SOX9在肝细胞性肝癌( hepatocellular carcinoma, HCC )组织中的表达及与HCC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测65例原发性HCC组织及36例癌旁非肿瘤组织中SOX9蛋白的表达,分析SOX9蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤数目、分化程度、TNM分期、有无门静脉癌栓、有无肝硬化及生存率等临床病理学特征之间的关系。结果 SOX9在HCC中的阳性率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义( P<0.01)。 HCC组织中SOX9表达与肿瘤分化程度( P<0.05)、门静脉有无癌栓( P<0.05)、TNM分期(P<0.01)有相关性,而与患者的年龄、性别、肿瘤大直径、肿瘤数目及有无肝硬化无相关性( P>0.05)。 Kap-lan-Meier生存分析显示:SOX9高表达患者5年生存率显著低于SOX9低表达者( P<0.05)。 Cox多因素回归分析证实SOX9高表达是影响HCC患者预后的独立因素( P<0.05)。结论 SOX9蛋白表达与HCC的分化程度、门静脉有无癌栓及临床分期有关,且是影响预后的独立因素。

    作者:王巾帼;屠世晔;沈旭辉;陈国夫 刊期: 2014年第12期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会