学术投稿

ALK基因FISH检测失败的补救方法

许洁;陈洁;张科平;骆新兰;朱小兰;庄恒国;刘艳辉

关键词:FISH, ALK, 石蜡组织
摘要:随着分子病理学和个体化靶向治疗的发展, FISH技术作为分子诊断的主要工具,应用越来越广泛和普及。 FISH技术由于其具有检测ALK变异体类型的全面性,经FDA批准,用于临床非小细胞肺癌靶向用药人群的筛选。肺穿刺石蜡组织标本经过几轮切片(常规HE、免疫组化、EGFR突变检测),所剩组织只能切出为数不多的适合FISH (切片可计数细胞>50个)实验的切片,如果FISH实验失败,几乎不可能重新切片;外院会诊的病例也存在无法重新获得白片的情况。因此,作者直接将FISH实验失败的片子重新处理,加探针,得到比较满意的结果,现介绍如下。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 《临床与实验病理学杂志》2014年第30卷总目次索引

    作者: 刊期: 2014年第12期

  • 食管鳞状细胞癌组织中Periostin、VEGF的表达及意义

    目的:探讨Periostin、VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测130例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中Periostin、VEGF蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌组织中Periostin和VEGF的阳性率明显高于正常食管黏膜组织(P<0.05)。 Periostin表达与食管鳞状细胞癌浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。 VEGF表达与食管鳞状细胞癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。 Periostin与VEGF表达呈正相关(P<0.05),66例食管鳞状细胞癌患者获得临床随访资料,随访时间1~48个月,Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Peri-ostin阳性组患者的生存率明显低于 Periostin阴性组( P<0.05), VEGF阳性组患者的生存率明显低于 VEGF 阴性组( P <0.05)。结论 Periostin与VEGF表达密切相关,联合检测Periostin、VEGF可作为判定食管鳞状细胞癌侵袭、转移能力的客观指标,对食管鳞状细胞癌的预后判断具有重要意义。

    作者:李超;徐小玲;王玲;秦珊;朱于启 刊期: 2014年第12期

  • 超薄切片自动染色机应用体会

    随着超微病理技术的快速发展,超薄切片自动染色机已逐步取代传统超薄切片的双面染色手工工艺。大庆油田总医院病理科自2003年开始使用超薄切片自动染色机,不仅加快了实验进程,而且规范了染色结果,现介绍如下。

    作者:李博 刊期: 2014年第12期

  • 不能确定恶性潜能的子宫平滑肌肿瘤2例临床病理分析

    目的:探讨不能确定恶性潜能的子宫平滑肌肿瘤( smooth muscle tumor of uncertain malignant potential, STUMP)的临床病理学特征、诊断及预后。方法观察2例STUMP的临床病理学特征,并复习相关文献。结果患者年龄分别为48、49岁;肿瘤边界清楚,质地细腻;镜检:肿瘤细胞呈梭形、无异型,编织状排列,核分裂象罕见(0~1个/10 HPF),灶性区存在凝固性肿瘤坏死;免疫表型:肿瘤细胞p16、p53均(+);随访:1例于术后6个月发现腹壁转移,1例术后随访2年未见复发或转移。结论 STUMP的病理学改变介于良性平滑肌瘤与恶性平滑肌肉瘤之间,依据一般应用的标准难以确定良恶性,其具有复发风险,术后需密切随访。

    作者:牛多山;杨杰;姚丰;陈海玲 刊期: 2014年第12期

  • 桥本甲状腺炎伴不典型细胞与乳头状癌的鉴别诊断

    目的:探讨桥本甲状腺炎伴不典型细胞与甲状腺乳头状癌( papillary thyroid carcinoma,PTC)的鉴别诊断。方法收集桥本甲状腺炎153例,分为桥本甲状腺炎伴不典型细胞组(32例)、桥本甲状腺炎伴PTC组(49例)、桥本甲状腺炎对照组(72例)。采用HE及免疫组化法分析各组间的差异。结果桥本甲状腺炎伴不典型细胞与PTC有形态学差异。伴PTC组Galec-tin-3、CK19阳性率高于伴不典型细胞组,CD56阳性率低于伴不典型细胞组,差异均有统计学意义。 Ki-67阳性率在伴不典型细胞组与伴PTC组之间差异无显著性,但与对照组之间差异有统计学意义。结论以组织形态学特征为基础,联合应用CD56、CK19、Galectin-3、Ki-67可有效鉴别桥本甲状腺炎伴不典型细胞与PTC。

    作者:张洪艳;胡营营;陈晋明;支全;徐斌;张杰 刊期: 2014年第12期

  • 腮腺非皮脂腺淋巴腺瘤2例并文献复习

    目的:探讨非皮脂腺淋巴腺瘤( nonsebaceous lymphadenoma, NSL)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法分析2例NSL的临床病理学特征、组织学形态及免疫表型并复习相关文献。结果2例NSL均为成年女性。镜检:肿瘤主要由上皮成分及间质增生的淋巴组织混合形成,与周围腮腺组织界限清楚,由纤维结缔组织分隔,间质内可见增生的淋巴滤泡。上皮成分可由囊腔、实性岛状、梁状或腺管样结构组成,其中囊腔及腺管样结构由两种细胞成分构成,腔面细胞及外层细胞,囊腔内含伊红不定形物及偶见的泡沫细胞,上皮细胞无皮脂腺分化,形态温和,无非典型性,未见核分裂象。其中1例见完整的纤维被膜包绕整个肿瘤,被膜下见窦结构。免疫表型:上皮细胞CK(AE1/AE3)和CK7阳性,囊腔、腺管样结构的外层细胞p63、CK34βE12和CK5/6阳性。结论 NSL是一种罕见的涎腺良性肿瘤,位于淋巴结内的病变报道较少,组织学结构的多样性使其易与一些涎腺病变相混淆,与一些恶性肿瘤的鉴别尤为重要。

    作者:吴琼;李皖云;武世伍;周蕾;欧玉荣 刊期: 2014年第12期

  • 结直肠癌中TAZ和β-catenin的表达及意义

    目的:观察TAZ和β-catenin蛋白在结直肠癌中的表达,探讨二者与结直肠癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化EnVision两步法检测168例结直肠癌组织和30例正常肠黏膜组织中TAZ和β-catenin的表达。结果结直肠癌组织中TAZ的阳性率显著高于正常肠黏膜组织(P<0.01),其表达与病理学分级、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),TAZ阳性组的5年生存率显著低于TAZ阴性组( P<0.05);结直肠癌组织中β-catenin异常表达率显著高于正常肠黏膜组织( P<0.01),其异常表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);β-catenin异常表达组的5年生存率显著低于β-catenin正常表达组(P<0.05);结直肠癌中TAZ阳性表达和β-catenin异常表达呈正相关(P<0.01)。结论 TAZ表达增高和β-catenin异常表达在结直肠癌发生、发展中具有重要作用,检测TAZ和β-catenin的表达可作为判断结直肠癌的生物学行为和判断预后的指标。

    作者:吴健;范钦和 刊期: 2014年第12期

  • 通过单细胞测序发现结肠癌双系起源的新型癌基因--SLC12 A5

    单细胞测序是一种为划定遗传关系和个性化癌症管理确认重要驱动基因的功能强大的工具。本研究运用单细胞测序分析1例结肠癌。群体遗传学分析确定了肿瘤群体中两个独立的克隆。作为早期致癌事件的大部分肿瘤克隆包含APC和TP 53基因突变,然而少数克隆却包含CDC27和PABPC1基因的优势突变。 APC和TP53基因突变在少数克隆中的缺失说明这两个克隆来自两个细胞起源。对于另外21例整个组织外显子测序并检查其体细胞突变的等位基因频谱,揭示了结肠癌克隆起源具有异质性。该研究确定SLC12A5基因的突变,显示其在单细胞水平的高频突变,然而群体水平上却呈低频突变。 SLC12A5突变的功能特征揭示其在结肠癌中潜在的致癌作用。该研究提供了结肠癌单细胞水平上第一个广谱外显子组的证据,支持结肠癌双系克隆起源以及人群中的低频突变可能发挥的重要促癌作用。

    作者:张俊(摘译);许春伟(摘译);张博(审校) 刊期: 2014年第12期

  • 胃癌组织中TSLC1的表达及临床意义

    目的:探讨肺癌肿瘤抑制物1(tumor suppressor in lung cancer 1, TSLC1)蛋白表达与胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化法检测TSLC1蛋白在20例正常胃黏膜、30例胃上皮内瘤变和50例胃癌组织中的表达,并复习相关文献。结果TSLC1在胃癌中的阳性率为14.00%,低于胃上皮内瘤变(46.67%)及正常胃黏膜(95.00%)( P<0.05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变中的表达低于低级别上皮内瘤变及正常胃黏膜( P<0.05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变及胃癌组织中的表达差异无显著性(P>0.05)。胃癌中 TSLC1表达与淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05)。结论 TSLC1表达与胃癌的发生、发展有关,可能为胃癌的防治提供新方向。

    作者:阳帅;胡华;王晓瑜;赵强;张小丽 刊期: 2014年第12期

  • AIRE基因与重症肌无力、胸腺瘤关系的研究进展

    自身免疫调节因子( autoimmune regulator, AIRE)是一种具有转录活化潜能的结合蛋白,该基因在生理状态之下可能对维持自身免疫耐受起关键作用。重症肌无力患者中有75%胸腺异常,其中15%表现为胸腺瘤。95%胸腺瘤中AIRE基因表达缺失,该文对AIRE基因、重症肌无力及胸腺瘤之间的关系作一综述。

    作者:郑神英;田云霄 刊期: 2014年第12期

  • 姜黄素对miR-21靶控的信号转导蛋白K-ras的影响

    目的:探讨姜黄素对miR-21靶控的信号转导蛋白K-ras的影响。方法18只SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组和姜黄素组,每组6只。除对照组外,模型组和姜黄素组用二乙基亚硝胺( DENA)连续灌胃18周,姜黄素组于第9周用姜黄素灌胃,每周2次,连续10周;对照组先用生理盐水灌胃8周,9~18周用生理盐水+0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。应用qRT-PCR技术检测miR-21的表达;Western blot法检测K-ras蛋白的表达。结果肝癌模型组miR-21基因的相对表达量较正常对照组明显增加( P<0.05);姜黄素组miR-21基因相对表达量较肝癌模型组明显降低( P<0.05),与对照组相比表达量增加,差异有统计学意义( P<0.05);与对照组相比,模型组和姜黄素组肝癌组织中K-ras蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),姜黄素组大鼠肝癌组织中K-ras蛋白相对表达量较模型组均明显降低( P <0.05)。Pearson相关分析显示,实验各组K-ras蛋白及miR-21的表达量均呈正相关( P<0.05)。结论姜黄素可能通过调控miR-21靶控的信号转导子K-ras蛋白表达促进肝癌的发生、发展及侵袭转移,对肝癌生物靶向治疗及预后判断具有潜在临床应用价值。

    作者:高建芝;王永玲;李佳;姬翔;韦立新 刊期: 2014年第12期

  • FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变1级与2级鉴别诊断中的实用价值

    目的:采用FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变( cervical intraepithelial neoplasia, CIN)不能明确1级或2级(CIN1/2)病变组织中的扩增,探讨其在CIN分级中的临床病理实用意义。方法选取子宫颈组织标本42例,其中正常子宫颈鳞状上皮20例,CIN1/2级22例(其中初步诊断1级8例,2级14例)。采用FISH技术检测石蜡包埋组织中TERC基因的扩增情况。结果正常子宫颈鳞状上皮中TERC基因无扩增,CIN1/2级组织中TERC基因的扩增率为22.7%(5/22),77.3%(17/22)的TERC基因无扩增;其中初步诊断1级8例,1例TERC基因扩增;初步诊断2级14例,4例TERC基因扩增,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在石蜡包埋组织切片难以确定CIN1/2级时,应用FISH技术进行TERC基因检测,TERC基因扩增者可考虑为CIN2级,建议临床积极处理;无扩增者,考虑为CIN1级,可保守处理;FISH技术具有临床病理实用价值。

    作者:何春年;荀文娟;徐名堂;徐翠清;赵焕芬;张秀智;陈琛 刊期: 2014年第12期

  • 统计学符号书写要求

    作者: 刊期: 2014年第12期

  • 前列腺疾病的免疫组化诊断

    前列腺疾病的诊断在很大程度上依赖穿刺标本的病理学检查,而免疫组化染色在其病理辅助诊断中占有重要地位,病理医师对免疫组化的依赖性很高。近年来前列腺肿瘤的生物学标志物不断涌现,如何选择合适标志物、合理应用鸡尾酒抗体(双标、三标)以及应用免疫组化检查解决前列腺疾病诊断中的难题,是日常病理工作经常遇到的问题,本文现对这些问题逐一进行讨论。

    作者:余英豪;李慧明 刊期: 2014年第12期

  • 正交设计试验在免疫组化检测琥珀酸脱氢酶条件优化中的应用

    免疫组化染色已成为病理学临床诊断和研究中不可缺少的重要技术之一,其染色是否成功受抗原修复、一抗浓度、孵育时间、温度等因素的影响。在实际工作中,检测一些新抗体时需从众多影响因素的不同水平去摸索佳的检测条件,费时费力。为了减少实验次数和劳动量,降低实验成本,本文将正交设计试验引入免疫组化检测条件优化实验中,运用免疫组化法检测琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase, SDH)在胃肠道间质瘤中的表达,探讨该方法的可行性,以便于寻找一种经济、简易、可行的免疫组化检测条件优化方法。

    作者:张炜明;贡其星;宋国新;平国强;王聪 刊期: 2014年第12期

  • 器官移植受体发生 EBV阳性的皮肤黏膜溃疡:一种局限性惰性移植后淋巴组织增殖性疾病

    Epstein-Barr 病毒( EBV )阳性的皮肤黏膜溃疡( EBV MCU)是在老人或医源性免疫受损患者中发生的一种B细胞淋巴组织增殖性疾病,尚未见发生于实体器官移植受者的报道。作者在70例EBV阳性移植后淋巴组织增殖性疾病( PTLD)患者中发现7例EBV阳性MCU。包括5例肾脏、1例心脏和1例肺脏移植,其中男性5例。患者中位年龄61岁,4例发生于口腔黏膜,3例发生于胃肠道。溃疡病变发生前患者接受免疫抑制治疗0.6~13年。溃疡由炎症细胞和多形性或单形性大细胞增生,破坏皮肤黏膜而形成。5例中可见Reed-Sternberg样细胞。所有病例CD20、CD30阳性,原位杂交EBER结果阳性。3例近期患者被诊断为EBV阳性MCU,4例患者前期被诊断为单形性大细胞PTLD(n=3)和多形性 PTLD ( n =1)。所有患者血液 EBV DNA 均阴性(<1000拷贝数/ml),而在诊断或随访的44例移植患者中有35例发生系统性 PTLD ( P <0.001)。所有 EBV 阳性MCU患者通过减少免疫抑制剂用量(7/7),调整免疫抑制剂用量(2/7),和联用利妥昔单抗(3/7)等使皮损得到治愈。目前5例存活:其中4例身体健康,1例在等待肾移植手术;另2例分别在EBV阳性MCU治愈后的3年和5年死亡。未发现EBV阳性MCU复发或其他PTLD。

    作者:胡舜摘(摘译);余英豪(审校) 刊期: 2014年第12期

  • 乳头状肾细胞癌30例临床病理分析

    目的:探讨乳头状肾细胞癌( papillary renal cell carci-noma, PRCC)的临床病理学特征。方法回顾性分析30例PRCC的临床资料、病理组织学及免疫表型特征,并进行随访。结果男性24例,女性6例,平均年龄55.8岁(22~82岁)。肿瘤平均直径5.2 cm(1.7~11.5 cm)。17例行根治性肾切除术,2例行肾输尿管全长切除术,11例行保留肾单位手术,病理分期:pT1aN0M0者10例,pT1bN0M0者8例, pT2aN0M0者9例, pT2bN0M0者1例, pT3bN0M0者1例, pT2aN1M0者1例;Fuhrman分级:Ⅰ级7例,Ⅱ级12例,Ⅲ级9例,Ⅳ级2例。免疫表型:26例弥漫性表达CK7,21例表达P504s,19例表达vimentin。30例PRCC均获得随访,随访时间为7~72个月,5例因病变转移死亡;1例肺转移,行靶向治疗,存活至今;其余24例均无瘤生存。结论 PRCC是一种特殊形态的少见肾癌类型,主要通过病理检查进行诊断,治疗首选手术切除,Ⅰ型预后较好。

    作者:曲渊 刊期: 2014年第12期

  • 胎盘组织HMGB1免疫组化染色条件的优化

    研究显示,HMGB1作为晚期炎症介质,在感染性早产孕妇的血清、胎盘等中的表达明显升高[1]。胎盘组织内细胞丰富,尤其是红细胞、炎细胞等,对HMGB1的免疫组化染色干扰较大。本文旨在从抗原修复、消除非特异性染色方面优化HMGB1的免疫组化染色。

    作者:李梅;孙亚军;赵小辉;吴建农 刊期: 2014年第12期

  • 糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达

    目的:探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。

    作者:朱琳;郝军;赵松;赵雪;陈宁;郑书深;段惠军 刊期: 2014年第12期

  • 非小细胞肺癌中DLL4蛋白的表达及其临床意义

    目的:探讨DLL4蛋白在非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达及其与临床病理参数、患者生存预后之间的关系。方法采用免疫组化法检测 DLL4蛋白在89例 NSCLC 组织和癌旁正常肺组织中的表达。结果89例NSCLC中,52例DLL4蛋白高表达,高表达的阳性率为58.4%,明显高于癌旁正常肺组织,差异具有统计学意义( P<0.05)。此外,DLL4蛋白高表达与TNM分期(P=0.01078)显著相关。 Kaplan-Meier生存分析显示,DLL4蛋白在NSCLC组织中表达水平越高其总生存时间越短。结论 DLL4蛋白高表达与NSCLC进展和不良预后显著相关,因此,DLL4蛋白的表达水平可作为预测NSCLC患者预后的临床指标。

    作者:陈梅莉;钱震东;叶元滋;张妍蓓 刊期: 2014年第12期

临床与实验病理学杂志

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主管:

主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会