郑炎;石慧娟;刘泳冬;韩安家
目的 探讨Survivin基因对人大肠癌细胞HT29增殖及凋亡的影响.方法 以脂质体Lip-2000为载体,用针对Survivin特异靶点的siRNA转染人大肠癌细胞HT29后,应用免疫细胞化学SP法、Western blot技术检测Survivin蛋白表达变化;采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞技术检测细胞凋亡.结果 免疫细胞化学结果:正常对照组、脂质体对照组及阴性错配对照组中Survivin均呈细胞质强阳性表达,Survivin-siRNA组细胞质呈弱阳性表达;Western blot检测结果:Survivin-siRNA组细胞的蛋白条带亮度明显低于正常对照组、脂质体对照组和阴性错配对照组;MTT检测结果:与阴性错配对照组相比,Survivin-siRNA组细胞生长出现明显的抑制(P<0.05).不同时段(24、48、72 h)肿瘤细胞增殖抑制率之间差异有显著性(P<0.05);流式细胞术检测结果 显示Survivin-siRNA组细胞凋亡比例显著高于空白对照组及阴性错配对照组(P<0.01).方法 Survivin基因参与调控大肠癌细胞的增殖和凋亡,Survivin有望成为大肠癌基因治疗的新靶点.
作者:盛文文;陆娜娜;尹玉;曹立宇 刊期: 2013年第04期
患者男性,20岁,反复腹泻半年,加重2周伴少量脓血.体检:肝、脾肋下未触及,全腹无压痛,无包块,无肌紧张,肠鸣音正常,双下肢不肿.实验室检查:大便常规+OB:OB(±);大便培养+药敏:未培养出病菌;余均正常.B超:肝、胆、脾、胰正常.
作者:王庆梅;李邦松 刊期: 2013年第04期
目的 探讨癌基因胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 3,IMP3)和胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中表达的预后意义.方法 采用免疫组化SP法对92例HCC及其癌旁良性组织中IMP3及IGF2的表达进行检测,结合临床生物学指标及生存时间进行统计学分析.结果 HCC组织中IMP3和IGF2阳性率均明显高于癌旁组织(P均<0.01);IMP3表达与组织分化程度、是否转移、ACJJ分期、门脉癌栓及Ki-67表达均密切相关;IGF2的表达与肿瘤组织学分级和Ki-67蛋白表达相关(P均<0.05).IMP3与IGF2表达呈显著正相关(rs=0.265,P<0.05).生存分析显示,IMP3阳性表达的患者总生存期明显低于不表达的患者(Log-rank=16.854,P=0.000);IMP3和IGF2同时表达与二者单独表达的患者生存期差异有统计学意义(P=0.000和0.008).进一步分析证明IMP3是HCC生存期的独立影响因素(HR:0.473,95%CI:0.270~0.829,P=0.009).结论 联合检测HCC组织中IMP3和IGF2的表达对其诊断及预后有一定的价值,二者可能成为HCC生物标记中的新指标.
作者:林黎娟;张锦辉;王研;刘树森;林贞花 刊期: 2013年第04期
Bench mark VENTANA是一台由Roche公司推出的集免疫组化和cifsh分子染色的全自动高端染色仪器,全自动免疫组化仪现已在各大医院广泛应用[1].免疫组化与cifsh分子染色是现代临床病理治疗及预后治疗综合评分的重要指标,由于Bench mark VENTANA具有全智能化优点,制片结果清晰判定的稳定化更使其脱颖而出.实际工作中机器使用过程中会发现一些问题,本文就关于延长Bench mark VENTANA空气滤清器使用寿命的改进方法做如下介绍.
作者:叶明;姬文莉;赵峰;卫小朋;陈矫 刊期: 2013年第04期
患者43岁,停经4个月后阴道持续流血12天,偶尔乏力.妇科检查:阴道内可见暗褐色血迹,子宫前位,稍小质软;实验室检查:阴道分泌物检查WBC细胞(0~2个),RBC细胞(++),未发现滴虫、孢子、菌丝;粪便检查、尿液检查HCG均(-),超声检查子宫腔内可见一25 mm×13 mm大小稍强回声团,考虑为子宫内膜息肉可能.初步诊断:阴道流血待查,考虑子宫内膜息肉可能.行诊断性刮宫术.
作者:张培荣;廖子龙;邹亚芝 刊期: 2013年第04期
液基薄层细胞制片能在载体上均匀地分布一层很薄的细胞,克服了传统巴氏涂片技术存在的材料太厚、细胞重叠、背景模糊和染色不佳等问题,且同一标本可重复制片,更利于病理细胞准确的诊断和筛查[1].该技术有助于对异常细胞的筛查,提高子宫颈病变筛查的敏感度和特异性[2];更容易使早期癌不断地被发现、晚期癌的发生率大幅下降、子宫颈癌的病死率降低.因其仪器及配套耗材的成本高昂,严重限制该项技术在基层医疗机构中的推广应用[3].国产的液基薄层细胞制片装置近些年不断的推陈出新,基于其制片原理主要有膜式法、离心法和自然沉降法.选择一种效果良好,成本较低,又易于掌握的液基细胞制片方法,既能服务于患者,又有利于病理诊断工作.因此,本文采用一种新的捕获法液基薄层细胞制片技术与市面上存在的膜式法、离心法和自然沉降法液基薄层细胞制片技术进行性能的比对研究.
作者:欧陵斌;杨晓斌;柏彬;鲁君艳;朱宏健 刊期: 2013年第04期
目的 探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测药物作用前后HCC细胞株中3-OST-2甲基化的状态改变;采用实时荧光定量RT-PCR法检测3-OST-2和UHRF1 mRNA的表达变化;采用细胞爬片免疫组化法检测UHRF1蛋白表达.结果 3-OST-2在HCC细胞株中呈完全甲基化状态,5-Aza-dC或TSA均能部分逆转3-OST-2甲基化,其mRNA表达分别增加2.7倍和4.9倍,两种药物联合处理后,3-OST-2甲基化被完全逆转,其mRNA表达增加9.1倍.5-Aza-dC或TSA均能降低UHRF1 mRNA和蛋白的表达,TSA比5-Aza-dC疗效更好(P<0.01),两种药物联用具有协同作用(P<0.01).结论 启动子甲基化和组蛋白修饰共同导致3-OST-2基因表达降低.5-Aza-dC和TSA单独作用均能部分逆转3-OST-2甲基化,增加其mRNA表达,抑制核蛋白UHRF1表达可能是其中机制之一.
作者:姚树哲;陈海燕;张晓莹;盛燕;周庚寅;张翠娟 刊期: 2013年第04期
例1,男性,65岁,因腹膜后巨大肿瘤4个月余入院.查体:各项体检无明显阳性特征,无畏寒、发热、恶心、呕吐,精神睡眠可,大小便正常,体重下降5 kg.CT示:腹膜后可见一大小15 cm×15 cm×10 cm肿物,肿物密度不均匀,呈不均匀强化,中央低密度区未见强化;周围肠管组织被推挤,肿物周围见较多扭曲粗大血管组织.患者于2个月前在中山大学附属第一医院行手术治疗,手术所见:患者无腹水,左下腹部至盆腔腹膜后可及一巨大实性肿物,大小18 cm×15 cm×15 cm,边界尚清,肿物将膀胱推向右下方,肿物部分侵及左侧输尿管,造成左肾积水.因术中出血量较多,止血后行肿瘤部分切除.
作者:郑炎;石慧娟;刘泳冬;韩安家 刊期: 2013年第04期
目的 探讨液泡型ATP酶C亚基ATP6V0C在不同转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达及其意义.方法 采用半定量RT-PCR、荧光实时定量RT-PCR和Western blot法检测ATP6V0C在人不同转移潜能前列腺癌细胞系PC-3M-1E8、PC-3M(高转移潜能)和PC-3M-2B4、PC-3(低转移潜能)中的表达.结果 ATP6V0C在PC-3M-1E8、PC-3M细胞系中的mRNA及蛋白表达量均明显高于在PC-3M-2B4、PC-3细胞系中的表达,其中,ATP6V0C在PC-3M-1E8中的表达高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 ATP6V0C在高转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达明显高于低转移潜能人前列腺癌细胞系,证明其和肿瘤的转移密切相关,有可能成为判断人前列腺癌侵袭和转移的重要指标及治疗前列腺癌的新靶点.
作者:邹鹏程;徐晓艳;张梦雪;由江峰;裴斐 刊期: 2013年第04期
远细胞(telocyte,TC)是近年来新发现并命名的一种间质细胞,因其与Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)形态相似,曾被称为Cajal样间质细胞(interstitial Cajal-like cells,ICLC).TC独特的突起结构被称为远足(telopodes),远足很细且极其长,呈念珠形.现已发现,多种形态学及免疫组化染色可以观察或标记远细胞.TC存在于人体内的多种空腔及实质性器官,如心脏、胃肠道、乳腺肺和支气管等.TC因其分布、存在的位置及独有的结构,目前推测其可能具有机械支持、引导组织形成与修复、参与细胞的再生与更新、免疫监视、神经传递等生理作用.
作者:赵冰;周霞;王瑞安 刊期: 2013年第04期
例1女性,59岁.因反复关节肿痛近40年,加重1年入院.体检:二尖瓣面容,口唇稍紫绀,双肺呼吸音清,心界向左扩大.二尖瓣听诊区可闻及舒张期隆隆样杂音,主动脉瓣第一听诊区及第二听诊区可闻及3/6收缩期杂音及舒张期杂音.心脏彩超示“风湿性心脏病,二尖瓣中度狭窄并轻度关闭不全,主动脉瓣重度狭窄并中度关闭不全,三尖瓣轻度返流,肺动脉高压(轻度),左室腔内占位性团块”.心电图示:窦性心律,右心房肥大,左心房、左心室肥大,ST-T波改变.胸片示:肺淤血,肺无实变,可见胸膜影像增厚,主动脉结轻凸钙化,左心室增大.在全麻体外循环下行二尖瓣、主动脉瓣置换+左室探查术.术中所见:二尖瓣叶增厚,卷曲,交界粘连,前乳头肌一绒毛状肿物,直径约1.5 cm.主动脉瓣增厚缩短.三尖瓣环扩大.切除二尖瓣、主动脉瓣及左心室肿物.瓣膜及肿物送病理检查.
作者:刘建英;张真路 刊期: 2013年第04期
目的 探讨胚胎性横纹肌肉瘤(embryonal rhabdomyosarcoma,ERMS)的临床病理特征,提高其诊断及鉴别诊断水平.方法 对2例小儿ERMS进行临床资料及病理形态学观察,结合免疫表型进行分析并复习相关文献.结果 例1男婴,左侧耳道持续性流脓伴发热1周,CT示:左侧外耳道、中耳及乳突内见高密度充填影;例2女婴,发现右侧外鼻部灰白色肿物5个月.2例均行手术切除,镜下例1见异形增生的细胞,胞质红染,呈短梭形、球拍样,伴少量淋巴细胞、单核细胞浸润;例2致密的纤维组织中见灶状分布的异形小圆细胞.免疫表型:2例desmin均阳性,1例Myogenin阳性,Ki-67增殖指数60%~80%.结论 耳鼻部ERMS临床表现缺乏特征性,病理学诊断有困难,当瘤细胞分化差或未分化时可结合免疫表型来鉴别诊断.
作者:徐红艳;黄慧;杨文萍 刊期: 2013年第04期
目的 检测microRNA-155(miR-155)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中、患者血清中的含量,探讨其作为PDAC血清学诊断标志物的可能性.方法 应用荧光实时定量PCR法检测miR-155在20对PDAC组织和癌旁组织、70例PDAC患者和40例健康人血清、10对荷人PDAC小鼠和对照组小鼠血清及6株PDAC细胞株和其培养上清中的含量.结果 实验结果 显示,PDAC组织中miR-155表达高于癌旁胰腺组织(P=0.005);并且miR-155在PDAC患者血清中表达量高于健康对照组(P=0.004);在荷人PDAC小鼠血清中miR-155含量高于对照组小鼠(P=0.012);同时,6株PDAC细胞株miR-155的表达存在差异(P=0.000),miR-155在细胞内和在其培养上清中的表达具有高度一致性(r=0.628,P=0.005).结论 miR-155在PDAC组织和患者血清中表达上调,提示其可能是PDAC血清学的潜在标志物.
作者:赵晨燕;张晶;余党会;陈颖;史敏;刘清华;倪灿荣;朱明华 刊期: 2013年第04期
目的 探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性.方法 (1)用激光扫描共聚焦显微技术对病理性瘢痕和瘢痕癌进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记;(2)提取DNA,检测病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子的突变;(3)采用免疫组化SP法检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中MAPK、Cyclin D1蛋白的表达;(4)采用原位杂交技术检测3组组织中MAPK mRNA、Cyclin D1 mRNA的表达.结果 (1)免疫荧光双标记K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈较弱荧光为弱阳性,在瘢痕癌组织中呈较强荧光为强阳性;(2)在病理性瘢痕和瘢痕癌中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变;(3)MAPK和Cyclin D1的蛋白及mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性.瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)Ras、MAPK、Cyclin D1基因的高表达与瘢痕癌的发生密切相关,各种基因共同发挥了协同作用;(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与瘢痕癌的发生无相关性.
作者:郭瑞珍;王海青;欧小波 刊期: 2013年第04期
目的 探讨EBER原位杂交和免疫组化EnVision两步法在检测不同类型霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)中EBV的表达和意义.方法 收集68例不同类型HL标本(结节硬化型38例、混合细胞型18例、淋巴细胞丰富型7例、淋巴细胞消减型5例),石蜡切片后,分别采用EBER原位杂交法检测EBV编码的mRNA(epstein barr encoded RNAs1,EBER1)以及免疫组化EnVision两步法检测EBV潜伏膜蛋白1(laten mbmbrane proteins,LMP1)在不同类型HL中的表达.结果 68例标本中,免疫组化EnVision两步法检测结果 总阳性率为36%(25/68),其中结节硬化型为23%(9/38),混合细胞型为66%(12/18),淋巴细胞丰富型和淋巴细胞消减型分别为28%(2/7)和40%(2/5);原位杂交检测结果 总阳性率为55%(38/68),其中结节硬化型为42%(16/38),混合细胞型为88%(16/18),淋巴细胞丰富型和淋巴细胞消减型分别为42%(3/7)和60%(3/5).结论 在对不同类型HL的EBV检测中,EBER原位杂交方法 比免疫组化EnVision两步法检出率更高,定位更清晰,同时也更具特异性和敏感性.
作者:许文兵;倪仰鹏;刘祖宏;黄绮国;陈宋钦 刊期: 2013年第04期
目的 探讨内淋巴囊肿瘤(endolymphatic sac tumor,ELST)的临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断.方法 应用常规病理、免疫组化SP法对1例ELST进行观察并复习相关文献.结果 患者主要表现为左耳道流血水伴听力下降及左侧面瘫;MRI示左侧内耳、中耳、外耳道及颞骨岩部、桥小脑角池广泛占位,并伴有脑干、小脑半球、左侧颞叶受压;组织学示瘤细胞呈乳头状-腺样排列,被覆单层立方或矮柱状上皮,细胞异型性不明显.乳头轴心为纤维血管组织,局部呈硬化改变.部分腺腔扩张,内含胶样分泌物,形似甲状腺滤泡;免疫组化标记CK阳性.结论 ELST是一种罕见的内淋巴囊源性低级别腺癌.
作者:杨红军;邓永键;丁彦青 刊期: 2013年第04期
目的 探讨中枢性血管周细胞瘤(haemangiopericytoma,HPC)的临床特点、影像学特征、免疫表型.方法 对4例中枢性HPC患者临床病理资料进行总结分析,随访3~24个月,并复习相关文献.结果 男性2例,女性2例,平均年龄50岁.4例患者均先行肿瘤切除术,其中2例术后行放疗.免疫表型:3例vimentin、CD34、CD99均(+),3例EMA(-)性,1例EMA灶状(+).例3和例4的Ki-67增殖指数分别为灶状5%和10%.随访3~24个月,肿瘤无复发及颅外转移.结论 中枢性HPC发病率极低,其影像学表现与脑膜瘤相似,确诊均需免疫组化标记来证实,但其与脑膜瘤在生物学行为、组织学及治疗预后方面均不同,故中枢性HPC患者术后需进行长期随访,及早发现复发或转移并给予及时处理,可降低患者病死率.
作者:金星一;LIU Nai-jie;刘乃杰;秦治刚;姜成威;李煜;于伟东;赵丛海 刊期: 2013年第04期
胆管癌(cholangiocarcinoma,CCA)是起源于胆管上皮细胞的一种恶性肿瘤,居肝胆恶性肿瘤的第2位,仅次于肝细胞癌,约占消化系统肿瘤的3%.手术切除是治疗CCA有效的方案,但手术切除的关键是要早期发现,由于临床上CCA的早期症状并不明显且CCA的发病率有逐年升高的趋势,故近年来研究其发病机制及如何早期诊断越来越引起学者们的重视.
作者:陈筱莉;文彬 刊期: 2013年第04期
目的 探讨腹壁异位子宫内膜恶变为透明细胞腺癌临床病理特点、诊断及鉴别诊断.方法 对1例腹壁异位子宫内膜恶变为透明细胞腺癌的临床及病理资料进行分析,并复习相关文献.结果 腹壁异位子宫内膜恶变为透明细胞腺癌的形态,与发生在子宫内膜和卵巢等部位的形态学改变相似.肿瘤细胞呈巢状实性或腺样排列,实性区域胞质透亮,伴广泛凝固性坏死.腺样区域腺体拉长及相互连接形成隧道样结构,肿瘤细胞呈鞋钉状,胞质嗜酸性,核大突向腺腔.免疫表型:CK7、CK、CEA(多克隆)、EMA和vimentin均阳性;ER灶性阳性.CEA(单克隆)、PR、CK20、MC、CR、S-100、CK5/6和Moc31均阴性.结论 腹壁异位子宫内膜恶变为透明细胞腺癌非常少见,免疫表型无特异性,确诊主要依靠病史及HE形态特点.需与汗腺来源的腺癌、转移性腺癌和恶性上皮型间皮瘤进行鉴别.
作者:黄艳;谭伟艳;朱亚西;詹焕淼;邓艳红;黄瑞妍;姜泽樱;林汉良 刊期: 2013年第04期
目的 探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对胃癌细胞腹腔种植转移的影响.方法 采用细胞培养,建立裸鼠动物模型.剖腹并行HE染色观察胃癌细胞腹腔种植转移情况,采用RT-PCR和免疫组化SP法检测DS对黏附分子整合素β1 mRNA和蛋白的影响.结果 剖腹观察瘤节数经HE染色证实,DS实验组腹腔种植转移的瘤节数明显少于对照组(P<0.05).RT-PCR技术和免疫组化检测结果 显示,DS实验组大网膜整合素β1 mRNA和蛋白表达与对照组相比均明显降低,P均=0.000.结论 DS抑制胃癌细胞的腹腔种植转移,且伴有整合素β1表达下降.DS可能是通过下调整合素β1 mRNA影响其蛋白的表达进而抑制肿瘤的种植转移,黏附分子整合素β1的mRNA和蛋白表达下降可能是DS抑制胃癌细胞种植转移的机制之一.
作者:赵雪艳;王娟;荣小伟;徐远义 刊期: 2013年第04期