学术投稿

pcDNA3.1-HIF-1α重组质粒的构建及其初步鉴定

刘荣福;占鹏程;李博安

关键词:HIF-1α, 重组质粒, 构建, 鉴定
摘要:目的 探讨HIF-1 α与前列腺癌发病机制之间相关性提供研究工具.方法 采用Trizol法裂解细胞,提取HIF-1 α且以该RNA为模板逆转录为cDNA,然后行PCB处理扩增HIF-1 α基因功能片段区域,克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,转化至大肠杆菌DH-5 α,小提质粒,酶切凝胶电泳鉴定,序列测定,经鉴定为正确序列后中抽质粒,采用Fugene试剂转染至前列腺癌细胞PC-3,经G418筛选,建立稳定表达HIF-1 α的前列腺癌细胞系pcDNA3-1-HIF-1 α-PC-3,采用Western印迹鉴定重组质粒的表达.结果 PCR扩增基因片段大小为2.89 kb,克隆至真核载体pcDNA3.1,酶切凝胶电泳可见两个条带,大小大约为5.3 kb和2.89 kb,与预期的大小相符合,序列测定与Cenbank公布的一致,Western印迹验证其在细胞内能表达.结论 重组质粒pcDNA3.1-HIF-1 α能够在前列腺癌PC-3表达,构建成功,为研究HW-1α与前列腺癌提供了一个工具.
中国老年学杂志相关文献
  • 辽西高血压高发地区人群脉压与脑卒中的相关性

    目的 研究辽宁省彰武县农村人群脉压等血压相关指标与脑卒中的关系.方法 应用随机抽样的方法 对辽宁省彰武县5 208人进行一般情况、血压、脑卒中患病情况的调查并进行统计学分析.结果 脑卒中组与非卒中组按照脉压水平分级后,其组间差别有显著意义(P<0.01),脑卒中组男女脉压分布趋势一致.30岁后各年龄组按照脉压水平分级后,脑卒中组与非卒中组组间差异明显(P<0.05).收缩压、舒张压、脉压、平均动脉压两组间均存在显著差异(P<0.01).随脉压的增大,脑卒中OR值增加.结论 此地区人群脑卒中患病率与脉压具有明显的相关性,而且患病危险性随脉压增高而增加.不同性别间无明显差别.

    作者:薛维爽;张俊湖;滕伟禹;王海龙;时景璞;付凌雨;李辉;董卫;董亚珞;周波;李继光 刊期: 2011年第10期

  • 基于DcR3的树突细胞疫苗对CD8+T细胞的免疫抑制效应

    目的 研究诱骗受体3(decoy receptor3,DcR3)修饰的树突细胞(DC)疫苗对CD8<'+>T细胞的免疫抑制效应.方法 将含有DcR3全长cDNA的重组腺病毒转染小鼠DC,制备DcR3基因修饰的DC疫苗,并与同种异体的CD8<'+>T细胞共培养,分析CD8<'+>T细胞的增殖和细胞因子分泌情况.结果 重组DcR3腺病毒能成功转染DC,并能抑制同种异体的CD8<'+>T细胞的增殖和细胞因子的分泌.结论 重组DcR3腺病毒转染的DC对CD8<'+>T细胞具有免疫抑制效应,为自身免疫性疾病的治疗提供了理论基础.

    作者:李树法;向菲;李海英;黎姗姗;梁愿;张敏 刊期: 2011年第10期

  • 运动和尼尔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨矿盐含量的影响

    目的 观察运动和尼尔雌醇(CCE<,3>)联合应用对去卵巢大鼠骨矿盐含量的影响.方法 将健康4月龄雌性SD大鼠40只随机分成5组:正常对照组;假去卵巢组;去卵巢组;去卵巢+CCE<,3>组;去卵巢+CCE<,3>+运动组,每组8只.去卵巢+CCE<,3>组和去卵巢+CCE<,3>+运动组大鼠于去卵巢手术后第2天开始给予CCE<,3>灌胃,0.5 mg/kg,1次/w,持续11w.去卵巢+CCE3+运动组大鼠于去卵巢术后第7天开始运动训练,每周5 d,每日连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10 w.结果 去卵巢组大鼠骨干重、骨干重/体重、骨灰重、骨灰重/体重、骨灰重/骨干重(%)均低于假去卵巢组(P<0.01);去卵巢+CCE<,3>组大鼠骨干重、骨干重/体重、骨灰重、骨灰重/体重、骨灰重/骨干重(%)等指标虽然较去卵巢组增加,但仍低于假去卵巢组(P<0.01);CCE<,3>与运动联合应用后,上述各指标均回升(P<0.01),并且基本恢复到对照组水平.结论 运动可加强CCE<,3>抗去卵巢大鼠骨矿盐丢失的作用.

    作者:宋冰;张兆强 刊期: 2011年第10期

  • 益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝的疗效

    目的 探讨益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝的临床疗效.方法 选择122例酒精性脂肪肝门诊患者,随机分为治疗组和对照组,在常规治疗基础上分别应用益肝乐胶囊和葵花护肝片,疗程均为3个月.治疗前及治疗开始后每2 w详细记录患者临床症状、体征及化验指标.结果 治疗组在降低ALT、AST、γ-GT作用方面明显优于对照组(P<0.05).治疗组临床症状、体征也有明显改善,与对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论 益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝有良好的疗效.

    作者:吕建楠;李殿云;张永贵 刊期: 2011年第10期

  • 老年心脏病患者术后延迟机械通气危险因素分析及处理

    老年人因其特殊生理特点,身体重要器官代偿能力差,手术耐受性差,因此心脏病术后并发症明显增多,术后延迟机械通气严重影响病人预后[1,2].了解导致术后延迟机械通气的危险因素,可以从多个角度加以预防,能够降低术后延迟机械通气的发生率,改善病人预后.

    作者:谢艾妮;董念国;张凯伦 刊期: 2011年第10期

  • 脂微球前列腺素E1对老年糖尿病肾病患者血液流变学的影响

    目的 观察脂微球前列腺素E<,1>(Lipo-PGE<,1>)对老年糖尿病肾病患者血液流变学的影响.方法 老年糖尿病肾病(DN)患者60例,随机分为治疗组和对照组,每组30例,对照组采用常规降糖、降压2w,治疗组在常规治疗基础上应用Lipo-PGE<,1> 10μg加入0.9%NaCl 20 ml静脉10 min推入,1次/d,疗程2w.分别于治疗前、后行血液流变学检测.结果 与对照组及治疗前相比,治疗组的全血黏度(高切、中切、低切)、血浆黏度、血沉方程K值、红细胞电泳时间、红细胞比容、红细胞刚性指数、红细胞变形指数和聚集指数、纤维蛋白原等指标均显著下降(P<0.05).结论 Lipo-PGE<,1>可显著改善老年DN患者的血液流变学状态和微循环状态.

    作者:丁红;王宗谦;闵睿 刊期: 2011年第10期

  • mB7-1修饰的B16细胞体外诱导免疫效应

    目的 探讨mB7-1基因修饰的B16细胞的体外抗瘤效应.方法 提取小鼠脾细胞mRNA,PCR法获得mB7-1片段,与pcDNA3连接,并进行酶切鉴定及测序.重组质粒经脂质体介导转染鼠B16细胞,检测基因表达,MTT法检测CTL杀伤作用.结果 完成mB7-1-pcDNA3重组载体连接及鉴定,基因测序与GenBank一致,并转染至B16细胞,检测到基因表达.经mB7-1修饰B16细胞可诱导淋巴细胞产生明显抑瘤效应.结论 应用本文方法 可获得mB7-1修饰B16细胞系,为研究其抗瘸效应莫定了基础.

    作者:金洪娟;王权;所剑 刊期: 2011年第10期

  • AGEs对糖尿病大鼠骨质疏松的作用机制

    目的 探讨AGEs对骨质疏松症的作用机制.方法 取SD大鼠腹腔内注射STZ诱导建立糖尿病骨质疏松动物模型,观察AGEs血清学、骨密度、骨组织中BMP-2基因、骨密度及骨代谢的变化.结果 糖尿病大鼠BMD、生物力学指标、骨组织形态计量学反映成骨活性的参数均降低,AGEs水平较正常对照组明显升高(P<0.05).糖尿病组BMP-2 mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组明显降低.血清AGEs与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,相关系数分别为-0.715(P<0.05)、-0.621(P<0.05).结论 糖尿病大鼠血清AGEs含量显著增高,与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,AGEs和BMP-2均参与了糖尿病骨质疏松的发生发展.

    作者:薛昊罡;冷冰;马恩元;蒋维海;崔双;单广宇;苗婷婷 刊期: 2011年第10期

  • 经食管床行弓上吻合治疗老年中下段食管癌42例分析

    研究显示,食管癌的发病率随年龄增长而增加,50岁以后食管癌发病明显上升,65~70岁达高峰,70岁以后发病率下降.由于老年人一般身体素质较差、免疫力低下,患有食道癌的同时可能合并多种脏器的疾病,如糖尿病、心脑血管疾病及呼吸系统疾病等,为术后带来严重的后果.因此如何选择手术方式,减轻手术创伤,减少对术后心肺功能的影响是手术前值得慎重考虑的问题.食管癌手术切除后多应用吻合器行食管胃弓上吻合术,但目前大多数弓上水平的器械吻合均采用主动脉弓前方式,经弓后食管床行弓上吻合应用较少<'[1]>.本文近年来采用左侧开胸食管胃弓上吻合术治疗中、下段食管癌,取得满意效果.

    作者:郎贤平;王晓东;黄波 刊期: 2011年第10期

  • 不同年龄组大鼠抑郁症模型评价

    目的 观察年龄对抑郁模型大鼠行为及生化方面的影响.方法 选取SD雄性大鼠,按照年龄分为幼年、成年和中年,采用慢性轻度不可预见性应激刺激与孤养相结合的方法 建立抑郁症动物模型,运用开野法(Open-Field)与糖水消耗量评定大鼠行为学改变,用比色法测量大鼠海马区单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,用酶联免疫吸附法检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量.结果 与对照组相比,各组模型组糖水消耗量与OpeIl-Field得分均下降(P<0.05),成年抑郁组比幼年抑郁组均下降(P<0.05),中年抑郁组比成年抑郁组均下降(P<0.05);MAO活性与CRH、ACTH、CORT含量,模型组比对照组均升高(P<0.05),中年抑郁组比幼年抑郁组、成年抑郁组均升高(P<0.05),成年抑郁组与幼年抑郁组没有显著性变化(P>0.05).结论 刺激强度相等条件下,年龄的增长与抑部模型大鼠行为学指标呈负相关,与生化指标呈正相关.

    作者:董海影;兴桂华;张晓杰 刊期: 2011年第10期

  • 天麻素治疗更年期女性功能性消化不良39例

    功能性消化不良(FD)是胃肠道非器质性病变,主要表现为餐后上腹胀、上腹痛、早饱及上腹烧灼感等,在以焦虑或抑郁为特点的更年期妇女有较高的发病率[1].更年期激素水平紊乱[2],尤其是焦虑、抑郁等精神心理障碍是防治本病的关键因素[3],临床抗焦虑或抗抑郁药物治疗常能获得较好疗效[4],但目前主要为化学药物.本研究对更年期女性FD确诊病例在常规西医抑酸、促胃肠动力药物治疗的基础上,联合具改善中枢神经功能作用的中药提取物天麻素治疗[5],取得较好效果.1 石河子大学药学院

    作者:景富春;谭勇 刊期: 2011年第10期

  • 脑缺血和阿尔茨海默病

    阿尔茨海默病(AD)是导致老年人发病和死亡的重要原因<'[1]>.大量的研究表明,血管性的危险因素是中老年意识下降的重要原因,且患过急性脑卒中的病例中继发AD的概率极高.很多危险因素对于AD和缺血性脑卒中是交叉的,常见的有高龄、高血压、糖尿病、高胆固醇血症、吸烟、心肌梗死、房颤、ApoE4等位基因等<'[2-4]>.

    作者:张婷 刊期: 2011年第10期

  • 血浆脑钠肽结合组织多普勒超声对老年左室肥厚患者的鉴别诊断价值

    目的 探讨血浆脑钠肽(BNP)结合组织多普勒超声对老年高血压性肥厚型心肌病(HHCME)、肥厚型心肌病(HCM)和高血压性心脏病(或高血压性左室肥厚,H-LVH)鉴别诊断的价值.方法 分析比较年龄均>60岁的HHCME(29例)、HCM(25例)、H-LVH(34例)患者的一般临床特征、心电图、超声心动图及血浆BNP的差异.其中心脏超声指标有左房内径(LAd),室间隔厚度(IVST),左室后壁厚度(LNPWT),左室舒张末内径(LVEDd),左室射血分数(LVEF),主动脉瓣钙化,收缩期二尖瓣前叶向前运动(SAM)现象,E峰/A峰,E峰/E'峰.结果 三组患者年龄、性别组成、心率比较,差异无统计学意义(P均>0.05);HHCME组高血压病史较HCM组长(P<0.05),但二者血压水平无显著性差异(P>0.05);H-LVH组的房性心律失常及室性心律失常明显少于另两组(P<0.05).HHCME组中LVEF、E/A<1的例数、E/E'、BNP大于HCM组、H-LVH组(P<0.05),其中E/E'与BNP有较好的相关性(r=0.62,P<0.05).HCM组中LAd、IVST、SAM例数大于HHCME组、H-LVH组(JP<0.05).H-LVH组中LVEDd、主动脉瓣钙化例数大于HHCME组、HCM组(P<0.05),其中IVST与LVPWT有较好的相关性(r=0.77,P<0.05).结论 血浆BNP结合组织多普勒对老年左室肥厚患者的鉴别具有重要的价值,HHCME组舒张功能明显减退,老年HCM组也有舒张功能不全,而老年H-LVH组舒张功能尚可,其中HHCME组的血浆BNP明显升高,可能是诊断HHCME的独立标志物.

    作者:邓敏;顾翔;陈勇;张旭东;马勇;周炳元;鲍正宇;陈军;何胜虎 刊期: 2011年第10期

  • 46~80岁男性左心房内径参考值与地理环境的因子分析

    目的 通过探讨男性左心房内径与地理环境的关系,拟定46~80岁男性左心房内径参考值的标准.方法 收集了全国205个单位8 226例健康46~80岁男性左心房内径参考值资料,运用相关分析法分析左心房内径参考值与地理环境之间的相关性,多元线性回归和因子分析两种方法 分别建立模型,然后通过T检验选取优模型,得出其与地理环境的关系.结果 左心房内径参考值与地理环境之间有很显著的相关性,用因子分析的方法 比较出一个优的回归方程:Y=28.07-0.000 087 72X<,1>-0.000 060 27X<,2>+0.000 844 9X<,3>+0.011 99X<,4>+0.000 129 5X<,5>+0.027 21X<,6>+0.495X<,7>±2.88.Y是46~80岁男性左心房内径参考值(mm),X<,1>是海拔高度(m)、X<,2>是年日照时数(h)、X<,3>是年平均气沮(℃),X<,4>是年平均相对湿度(%)、X<,5>是年降水量(mm)、X<,6>是气温年较差(℃)、X<,7>是年平均风速(m/s),2.88是剩余标准差.并通过克里格(Kriging)插值法精确地内插出中国46~80岁男性左心房内径参考值的地理分布图.结论 如果想要获得某地的46~80岁男性左心房内径参考值,可以通过方程计算得出结果,从地理分布图也可得到中国任何地方46~80岁男性左心房内径的参考值.

    作者:井静;葛淼;向思亭;王欣;张亚平;闫燕春 刊期: 2011年第10期

  • 青海地区老年精神障碍特征及相关因素

    目的 研究青海地区老年精神障碍患者疾病特征及相关因素.方法 将青海省第三人民医院1998~2008年295例不小于60岁的住院精神障碍患者的临床资料进行整理,分析其疾病特征及相关因素.结果 青海地区老年精神障碍患者疾病特征为器质性精神障碍(29.2%)、精神分裂症(27.1%)、心境障碍(25.4%)、神经症(8.8%)、应激障碍(5.4%)、酒精所致精神障碍(2.7%)及与文化相关精神障碍(1.4%).男性、高血压、缺氧及饮酒是导致器质性精神障碍和酒精所致精神障碍的主要原因.女性、低文化及边远地域是应激障碍和与文化相关精神障碍的重要社会因素.结论 青海地区老年性精神障碍以器质性精神障碍居多.高原性疾病、生活习俗及区域文化是主要的影响因素.应予重视和预防保健.

    作者:阿怀红 刊期: 2011年第10期

  • 行冠脉造影老年患者212例脉压、脉压指数与冠状动脉病变的关系

    高血压在冠心病的发生发展中起较大作用,且血压水平与冠心病发病率有密切关系.另外,有研究<'[1-3]>表明动脉脉压(主动脉脉压、肱动脉脉压)能够反映动脉弹性情况,与收缩压(SBP)和舒张压(DBP)相比能够更好地预测心血管事件的发生.但脉压(PP)本身具有一定的可变性,脉压指数(PPI)能够同时反映血管的固有和动态的顺应性,并且变化幅度小于PP<'[4]>.本研究通过24 h监测行冠脉造影的老年住院患者血压取其平均值,探讨肱动脉PP、PPI与冠状动脉关系.

    作者:陈静;朱峻;林源;黄之杰;段玉琴 刊期: 2011年第10期

  • 遗传基因与帕金森病相关性的研究进展

    帕金森病(PD)已成为人们普遍关注的社会问题,也是当今社会及未来要挑战的公共卫生事业.尽管进行了有关环境毒素和基因突变等复杂证据的相关研究,但PD的病因一直没有得到准确的解释.回顾近年来PD发病机制的研究进展,在遗传基因方面取得了很多成就.从基因角度看,混合基因致病而形成的家族性PD,包括已确定的11种编码基因突变的,线粒体蛋白(PARK2,DJ-1,PINK1),泛素羟基末端水解酶(UCH-L1),α-突触核蛋白(SNCA)和其他没有确切定义的蛋白[1,2].目前有研究表明,遗传因素在某种情况下也参与了PD的形成.约有5%~10%的PD病人具有家族性遗传[3].也因此,遗传因素在PD病因与发病机制中的作用日益受到重视.

    作者:封华;刘承伟 刊期: 2011年第10期

  • 沙棘提取物对糖尿病ICR小鼠血糖及氧化功能的影响

    目的 探讨沙棘提取物对链脲佐菌素致糖尿病(DM)小鼠血糖及氧化功能的影响.方法 腹腔一次性注射链脲佐菌素150 mg/kg制备DM小鼠模型,治疗组分别按沙棘提取物50、100、150 mg/kg每天灌胃1次,模型组和正常对照组则以等体积蒸馏水灌胃,同时观察小鼠血糖、采水量、采食量、24 h尿量.4 W后,分别测定血清和肝组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 与DM模型组ICR小鼠比较,沙棘提取物各组DM小鼠血糖显著降低,血清和肝组织SOD、CSH-Px、NOS活性明显提高、而MDA含量明显降低,体重下降和多饮多食症状得到改善.结论 沙棘提取物有降低血糖作用,能减轻DM小鼠肝组织氧化损伤,其机制可能与提高氧化酶活性、清除自由基、减少氧化应激有关.

    作者:杨桂珍;穆景阳;梁军;张志宁;陈健茂;王晓东;吴璟 刊期: 2011年第10期

  • YKL-40——一个新的心血管生物标志物

    自从弗雷明翰心脏研究结果报道C-反应蛋白(CRP)作为心血管生物标志物后,人们相继开展了许多有关心血管疾病标志物的研究.至今,CRP仍被认为是敏感的非特异的炎症标志物,但是研究还发现了一些新的炎症标志物,例如白介素(IL)-18、基质金属蛋白酶-9、脂联素和CD40配体<'[1]>.几丁质酶-3样蛋白-1(chtinase-3-like-1 protein,YKL-40)是与心血管疾病相关的另一种新的炎症标志物,参与内皮功能障碍和新生血管形成,并且可能直接参与动脉粥样硬化的过程,从而导致心血管疾病.

    作者:宗同岩;蔡九英;宋晓坤;占育 刊期: 2011年第10期

  • 消痰化瘀抗纤方药物血清对HSC增殖的影响

    目的 探讨消痰化瘀抗纤方药物血清对HSC增殖的影响.方法 正常大鼠血清和药物血清干预传代培养的HSC-T6细胞24 h,MTT法检测不同浓度药物血清不同时间段对HSC生长增殖的影响.结果 抗纤方高(13.5倍)、中(4.5倍)、低(1.5倍)剂量组药物血清能明显抑制HSC增殖(P<0.05);当高剂量组作用72 h时,抑制作用强,抑制率为21.73%,且增殖抑制率与剂量呈正相关.结论 抗纤方药物血清可显著抑制HSC的体外增殖,而且无明显的细胞毒性作用.

    作者:兰咏梅;韩涛;王佳蕾 刊期: 2011年第10期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅