学术投稿

诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

郭茂娟;姜希娟;马东明;范英昌

关键词:骨髓间充质干细胞, 诱导分化, 丹酚酸B, 5-氮胞苷
摘要:目的 观察乳鼠心肌细胞条件培养液、SalB 、5-氮胞苷(5-aza)及SalB联合5-aza体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的作用及其机制.方法 分离培养及鉴定大鼠MSCs,培养乳鼠心肌细胞,收集条件培养液对其进行分组诱导:①SalB(终浓度为250 μg/L),②5-aza组(终浓度为10 μg/L),③SalB联合5-aza组(终浓度分别为250 μg/L与10 μmol/L),④乳鼠心肌细胞条件培养液,⑤未加诱导剂的阴性对照组.选取MSCs进行诱导,诱导周期为4 w.倒置相差显微镜下观察细胞的生长情况及形态变化,免疫细胞化学法鉴定心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)表达,实时荧光定量RT-PCR法检测心肌早期基因NKX2.5、GATA-4 mRNA的相对表达量.结果 细胞形态学显示,诱导后的MSCs体积增大,增殖减慢,并出现肌管样结构;免疫细胞化学结果显示,诱导后的MSCs表达心肌特异性蛋白cTnT,与5-aza组相比,SalB组和条件培养液两组蛋白表达较低,SalB联合5-aza组蛋白表达升高;实时荧光定量RT-PCR结果显示除阴性对照组外,其他四组表达心肌分化早期基因,SalB联合5-aza组诱导后的MSCs的心肌早期分化基因表达明显高于其他三组.结论 SalB联合5-aza诱导MSCs表达心肌特异性肌钙蛋白cTnT;上调心肌早期基因NKX2.5、GATA-4mRNA的表达,证实其能够向心肌细胞分化能力;条件培养液不能上调心肌细胞的早期基因和蛋白,不能诱导其分化.
中国老年学杂志相关文献
  • TRAIL与DDP联合应用对急性淋巴细胞白血病细胞增殖作用的影响

    目的 探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与顺铂(DDP)联合应用抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的可能机制.方法 以重组载体pACCMV-TRAIL转染人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,Western印迹检测细胞中TRAIL蛋白表达情况,以及单独或联合应用TRAIL及DDP处理的各组白血病细胞中,凋亡相关蛋白caspase-3、NF-κB和survivin表达水平的变化.结果 DDP组及联合用药组明显抑制了survivin蛋白的表达,DDP组、TRAIL转染组及联合用药组细胞caspase-3表达上调,核因子(NF)-κB表达下降,且联合用药组作用强于单独用药组.结论 TRAIL和DDP可通过caspase、NF-κB途径抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖,同时DDP通过对survivin的调节发挥对TRAIL的协同作用.

    作者:毕林涛;高长斌;卢振霞;宿晓云 刊期: 2009年第09期

  • 1 000例老年人颈部包块细针穿刺细胞病理学和临床分析

    目的 探讨细针穿刺细胞学(FNAC)检查老年人颈部包块的细胞学特点及临床应用价值.方法 对2003~2008年5年内我院门诊1 000例老年人颈部包块穿刺细胞学检查进行回顾性分析.结果 在1 000例老年患者中,淋巴结结核531例,各类肿瘤422例,非特殊性淋巴结炎20例,未能明确诊断27例.全部病例行FNAC检查(1 000例),973例明确诊断(97.3%;973/1 000),诊断符合率84.8%(825/973).531例颈部淋巴结结核,于5年间依次为10例(1.9%)、63例(11.9%)、85例(16.0%)、153例(28.7%)、220例(41.5%).422例各类肿瘤中穿刺细胞学检查可明确诊断305例,诊断率73.3%.结论 (1)老年人颈部包块的细针穿刺细胞学检查,操作简便安全,可作为颈部淋巴结结核的重要诊断依据,并为各类肿瘤的临床快速筛选提供了依据,减少不必要的淋巴结切除.(2)老年人颈部淋巴结结核呈逐年增长趋势.

    作者:辛精卫;孔红;张文杰 刊期: 2009年第09期

  • 依达拉奉抑制血管性痴呆大鼠脑组织环氧化酶-2与NF-κB的表达

    目的 观察依达拉奉对血管性痴呆(VD)大鼠行为学和脑组织环氧化酶-2(COX-2)、核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨依达拉奉对VD脑保护作用机制.方法 Wistar大鼠随机分为:正常组、假手术组、痴呆模型组(模型组)、依达拉奉治疗组(治疗组).水迷宫和穿梭箱实验检测行为学特征;免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测大鼠脑组织COX-2、NF-κB的表达,用图象分析仪测定光密度(OD)值.结果 治疗组大鼠的前后两次跳台实验的检测结果差异显著(P<0.01),治疗组的行为学症状较模型组明显改善.NF-κBp65和COX-2阳性细胞百分率治疗组较正常组、假手术组明显增高(P<0.01),较模型组明显降低(P<0.01),NF-κBp65和COX-2 OD值,治疗组较正常组、假手术组明显降低(P<0.01),较模型组明显增高(P<0.01).结论 依达拉奉能明显改善VD大鼠的行为学症状、降低大鼠脑组织NF-κBp65和COX-2表达,依达拉奉能够通过抑制大鼠脑组织NF-κBp65和COX-2表达途径发挥其脑保护作用.

    作者:蔡志友;晏勇;张骏;晏宁;王咏龙;吴芳;黄华;张建刚 刊期: 2009年第09期

  • 复方苦参注射液联合化疗治疗老年中晚期非小细胞肺癌的疗效观察

    老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者,因发现时多数是晚期,已失去手术机会,因此姑息性化疗尤为重要.由于老年器官功能减退对化疗的耐受性较差,第三代化疗药物单药化疗方案能让患者受益,但不如联合化疗方案.因此,为了提高疗效及降低化疗副反应,本研究应用含铂的第三代化疗方案与复方苦参注射液联合治疗老年中晚期NSCLC,取得了较好疗效.

    作者:许淼;张丽萍 刊期: 2009年第09期

  • 卒中单元模式对糖尿病脑梗死早期疗效的影响

    糖尿病(DM)是脑梗死的一个重要危险因素,其合并脑梗死的相对危险程度是非DM患者的2~3倍.循证医学表明[1],目前所有缺血性卒中的治疗中,卒中单元是为有效的方法.卒中单元概念的提出和完善为卒中病人的管理和治疗提供了全新模式.尤其对DM合并脑梗死患者,卒中单元内多学科密切配合,合理控制血糖,系统治疗,在降低脑卒中患者的病死率、致残率、提高存活者的生存质量方面发挥重要作用.本文拟对卒中单元治疗模式与传统的治疗模式进行比较、评价和分析.

    作者:刘莉莉;苏吉亮;高荣慧;赵桂梅 刊期: 2009年第09期

  • 葡萄籽提取物对缺血再灌注导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用

    目的 探讨葡萄籽提取物(Grape seed extract proanthocyanidin,GSPE)对缺血再灌注(I/R)导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用.方法 分离培养24月龄Wistar雄性大鼠的原代肾小管上皮细胞,第3代后,将细胞分为对照组、10 μmol/L Antimycin A处理组、GSPE干预组以及Antimysin A+GSPE 组.Anexin V/PI染色,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡情况,定量PCR和Western印迹法分别检测Caspase-3mRNA和蛋白表达水平,化学发光法检测细胞Capsase-3活性及过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.激光共聚焦检测细胞内活性氧(ROS)的浓度.结果 (1)衰老大鼠肾小管细胞经Antimycin A处理后,凋亡率增高,Caspase-3,MDA,ROS明显增加,SOD下降;(2)经GSPE干预后,其凋亡情况明显好转,caspase-3、MDA、ROS明显降低.SOD含量部分恢复(P<0.05).结论 老年大鼠肾小管细胞在I/R损伤时,ROS 堆积,线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡.GSPE可清除ROS从而达到抑制肾小管上皮细胞凋亡、减轻I/R损伤的作用.

    作者:洪权;肖博晗;魏日胞;汪杨;刘晓峦;冯哲;陈香美 刊期: 2009年第09期

  • C-12多肿瘤标志物蛋白芯片对老年肺癌的诊断价值

    目的 探讨多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统(C-12)在老年肺癌诊断中的临床应用价值.方法 采用C-12检测135例老年肺癌患者(肺癌组)、150例肺良性病变患者(肺良性病变组)、154例无肺部病变及其他肿瘤患者(对照组)12种肿瘤标志物水平.结果 肺癌组C-12检测阳性率明显高于肺良性病变组(P<0.001)和对照组(P<0.001).肺癌组糖类抗原19-9(CA199)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原242(CA242)、血清铁蛋白(ferritin)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)阳性率明显高于肺良性病变组(P均<0.001)和对照组(P均<0.001).肺癌组CA199、CEA、CA242、β-HCG、CA125、CA153水平较肺良性病变组明显升高(P<0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01)和对照组(P<0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01).在单项肿瘤标志物检测中,以CEA敏感性高,为46.90%.CA199、CEA、CA242、CA125、CA153联合检测、C-12检测敏感性较单项检测明显提高,分别为65.93%和66.67%.5项联合检测的特异性(94.74%vs 81.32%)、有效性(85.88%vs 81.32%)、5项联合检测阳性预测值(84.76%vs 70.87%)较C-12检测均提高.结论 肺癌组CA199、CEA、CA242、β-HCG、CA125、 CA153水平较肺良性病变组和对照组明显升高.C-12检测对诊断老年肺癌有较高的临床应用价值,CA199、CEA、CA242、CA125、 CA153联合检测可能是诊断老年肺癌更优化的组合.

    作者:张湘瑜;王艳姣 刊期: 2009年第09期

  • 胼胝体变性的CT和MRI分析(附4例报告)

    胼胝体变性临床少见,大多为中老年长期嗜酒者,笔者遇到4例,其病史、临床表现及影像学表现较典型.

    作者:苑丽萍;张丽萍 刊期: 2009年第09期

  • 汶川地震前后绵阳灾区老年人心理健康状况

    目的 探讨地震前后绵阳灾区老年人的认知效能、情绪体验、自我评价、人际交往、适应能力等心理健康状况的变化.方法 对比震前4个月四川绵阳77名老年人和震后6个月绵阳77位老年人的心理健康水平.结果 地震后绵阳灾区老年群体的心理健康总分低于地震前(t总=2.39,P<0.05),其情绪体验、适应能力维度得分皆低于震前(t情绪体验=3.22,P<0.01;t适应能力=2.57,P<0.05).女性老年人心理健康总分、情绪体验和适应能力维度得分低于震前(t总=3.49,P<0.05;t情绪体验=3.87,P<0.05;t适应能力=4.15,P<0.05 );60~69岁组老年人,心理健康水平明显低于震前(t总=3.02,P<0.01);除人际交往一项外,其余维度低于震前(t认知效能=2.69,P<0.01;t情绪体验=3.53,P<0.01;t自我评价=2.22,P<0.05;t适应能力=2.67,P<0.01).结论 震后6个月,老年灾民的心理健康水平显著下降,适应能力减弱,感受较多负性情绪.女性老年人、60~69岁的老年灾民心理更容易受到影响.

    作者:王婷;杨惠琴;李娟;韩布新 刊期: 2009年第09期

  • 老年非外伤性多椎体压缩骨折的高场强MRI影像分析

    骨质疏松是非外伤性脊柱椎体压缩性骨折常见的原因,尤其是绝经后的妇女及老年人多见.其次为转移性骨肿瘤,常规影像学上常难以鉴别,特别是原发骨质疏松骨折合并有原发肿瘤病史者,因此明确病因,准确评价椎体压缩骨折的范围及程度,对于临床治疗特别是指导椎体成形术具有重要意义.

    作者:唐少虎;申艳光;韩向君 刊期: 2009年第09期

  • 尾加压素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

    目的 观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响.方法 采用体外培养大鼠VSMC,将不同浓度UⅡ与VSMC孵育不同时间,应用MTT法检测VSMC增殖,流式细胞仪检测VSMC凋亡.结果 体外培养的大鼠VSMC在浓度为(0、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L) 的UⅡ培养液中孵育24 h后,其A值分别为0.457±0.072,0.531±0.065,0.568±0.094,0.614±0.102,0.676±0.048,0.754±0.093;细胞凋亡率分别为2.20%±0.46%,2.80%±0.86%,7.79%±1.70%,13.31%±2.57%,18.71%±1.39%,23.32%±2.88%;表明UⅡ呈浓度依赖性诱导大鼠VSMC增殖和凋亡.在终浓度为10-7mol/L UⅡ的培养液中分别孵育0、6、12、24、48、72 h后,其A值分别为0.499±0.062,0.558±0.081,0.629±0.114,0.685±0.061,0.715±0.131,0.803±0.097;细胞凋亡率分别为1.74%±0.42%,2.36%±0.86%,9.88%±1.45%,16.50%±1.68%,23.14%±2.33%,26.09%±1.66%;表明UⅡ呈时间依赖性诱导大鼠VSMC增殖和凋亡.结论 UⅡ可以诱导VSMC增殖与凋亡,这一双重作用可能是UⅡ参与血管重塑性疾病的作用机制之一.

    作者:高宇;黄丽红;高长斌 刊期: 2009年第09期

  • 支气管灌洗在老年吸入性肺炎的临床应用

    吸入性肺炎多见于机体抵抗力降低的老年患者,炎症吸收缓慢,病情多危重,且可短时间内多次再发,甚可导致呼吸衰竭,严重影响患者的生活质量.临床上多以单纯药物治疗,但效果欠佳且病情容易反复,我科近年采用纤维支气管镜(纤支镜)引导下局部支气管灌洗治疗,明显改善患者的病情及预后,疗效显著,现报道如下.

    作者:叶贤伟;张湘燕;冯端兴;许梅;冯玉麟 刊期: 2009年第09期

  • 肺缺血-再灌注氧化应激反应对超微结构的影响及川芎嗪的作用

    目的 探讨川芎嗪对肺缺血-再灌注(IR)损伤超微结构的影响及其机制.方法 采用在体兔单侧肺左肺门持续性阻断1 h,再灌注1,3,5 h IR损伤的动物模型.90只兔随机分为3组:(1)对照组:对兔进行假手术,不发生缺血;(2)IR组:缺血1 h,分别再灌注1,3,5 h.(3)TMP组:缺血前1 h静脉滴注射川芎嗪60 mg/kg,其余同IR组.测定各组血浆1,3,5 h末血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量.常规电镜制片、染色,观察肺组织超微结构的变化.结果 与对照组相比IR组各时相血浆MDA含量显著升高(P<0.01),SOD显著降低(P<0.05);与IR组相比川芎嗪能减轻MDA的升高(P<0.05,P<0.01),而使SOD升高(P<0.01).电镜下见对照组:肺微小动脉内皮结构、毛细血管内皮细胞及肺泡上皮细胞结构正常;IR组肺微小动脉内皮细胞损伤明显,线粒体水肿、空泡变性.肺毛细血管腔内多形核白细胞(PMN)堵塞,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛脱失,细胞内板层小体疏松肿大;TMP组肺微小动脉内皮结构基本正常,个别线粒体轻度水肿,无空泡变性,毛细血管腔内PMN少,堵塞相对较轻,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛少许脱落.结论 川芎嗪通过抑制氧自由基的作用,明显改善肺IR肺组织超微结构的改变,从而对IR肺组织有保护作用.

    作者:王晓杨;毛宇飞;张波;王方岩;郝茂林;方周溪;王万铁 刊期: 2009年第09期

  • 老年与青壮年首次抑郁发作临床特征的对比分析

    老年抑郁症包括原发性(含青年或成年期发病、老年期发病)和老年期各种继发性抑郁,在临床上老年抑郁症常常表现出症状的不典型性和预后较差性.本文对老年抑郁症(60岁以上首次抑郁发作患者)和青壮年时首次抑郁发作患者在临床症状、疗效及预后等相关因素方面进行对比分析,进一步探讨老年抑郁症的临床特征.

    作者:张凤芝;蔡芳;陶治平 刊期: 2009年第09期

  • 维生素E对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响

    目的 探讨维生素E用于防治绝经后女性中枢神经系统退行性疾病的作用及机制.方法 采用自然衰老雌性大鼠为动物模型,实验组每日注射维生素E 5 mg/kg(小剂量组)、15 mg/kg (中剂量组)、60 mg/kg(大剂量组)(n=8).采用放免法检测血清雌激素含量,用免疫组化法观察维生素E对海马芳香化酶表达的影响,并与成年大鼠(对照组)对比观察.结果 老年对照组较成年对照组雌激素水平下降,中、大剂量组血清雌激素水平回升(P<0.05),海马芳香化酶表达阳性细胞数目多、表达强,大剂量组呈强阳性.结论 一定剂量维生素E不仅可以提高血中雌激素水平,而且可以通过增强海马芳香化酶的表达使局部雌激素浓度增加而发挥其神经保护作用.

    作者:孔亚坤;耿秀琴;尹俊杰;姚兰春;周艳红;郭献山 刊期: 2009年第09期

  • 社会家庭因素与老年人生命质量的相关性研究

    目的 分析社会家庭因素对老年人生命质量的影响.方法 抽样调查北京城区1 847例老年人,并且进行躯体健康、心理健康、认知能力、生活活动能力和生活满意度等健康相关生命质量评估.结果 居住情况、婚姻状况和家庭关系对生命质量的影响有统计学差异,对各维度的影响不同,抑郁症状患病率:独居(24.3%)>同住(12.5%),无配偶(18.6%)>有配偶(11.3%),家庭不和睦(37.3%)>和睦(12.9%),家人不尊敬(52.5%)>尊敬(12.9%),不讲心里话(19.7%)>讲心里话(11.9%);认知功能异常患病率:无配偶(23.4%)>有配偶(11.3%),家庭不和睦(26.9%)>和睦(14.9%),家人不尊敬(40.0%)>尊敬(14.8%),不讲心里话(25.3%)>讲心里话(12.2%);生活能力依赖患病率:无配偶(48.7%)>有配偶(26.7%),家人不尊敬(52.5%)>尊敬(33.6%),不讲心里话(49.8%)>讲心里话(29.0%).结论 社会家庭因素是影响老年人生命质量的重要因素.

    作者:马丽娜;汤哲;关绍晨;方向华;吴晓光;刁丽君;刘洪军;孙菲 刊期: 2009年第09期

  • 月见草油与维生素E对衰老模型小鼠骨丢失的影响

    目的 观察月见草油和维生素E对D-半乳糖致衰老小鼠骨丢失的预防作用,从骨代谢方面探讨其可能的机制.方法 40只8周龄昆明雌性小鼠随机分为4组:青年对照组,衰老模型组,维生素E组,月见草油组,每组10只,以颈背部皮下注射半乳糖1 000 mg·kg-1·d-1造成亚急性衰老模型,并预防灌胃用药6 w,观察月见草油和维生素E对小鼠骨丢失时骨量、骨长度、骨有机质、骨钙、磷等骨矿物质以及血清骨代谢相关酶活性的影响. 结果 D-半乳糖可使小鼠骨量、骨长度、骨有机质减少(P<0.05),血清碱性磷酸酶(AKP)活性下降(P<0.01);同时给药月见草油和维生素E分别能使骨量、骨长度、骨矿物质及骨有机质得到恢复(P<0.05或P<0.01)并提高血清AKP活性(P<0.01),月见草油还能有效抑制抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活性(P<0.05).结论 D-半乳糖可导致小鼠骨丢失,月见草油和维生素E均可预防衰老模型小鼠骨丢失,而其机制可能与成骨细胞、破骨细胞活性的调控有关.

    作者:张益嘉;吴铁;崔燎;苏华;李响;袁红江 刊期: 2009年第09期

  • 金莲花黄酮对人乳腺癌细胞作用的研究

    目的 探讨金莲花黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞增殖抑制作用及对端粒酶活性的影响.方法 不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24 h,以CCK-8法检测细胞增殖抑制作用、流式细胞术检测端粒酶活性.结果 9.516、6.344、3.172、1.586、0.793 mg/ml 5个不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24 h,对细胞增值的抑制率依次为17%、28%、48%、50%、55%.各实验组A490与对照组比较差异均显著(P<0.05,P<0.01),且用药浓度与抑制率呈正相关;端粒酶活性均有不同程度降低、且端粒酶活性与用药浓度成正比.结论 金莲花黄酮对MCF-7细胞有明显抑制作用并降低端粒酶活性.

    作者:孙黎;刘芳;刘华;罗强;安芳 刊期: 2009年第09期

  • 超声介导微泡造影剂对人脐静脉血管内皮细胞膜作用的研究

    目的 探讨超声介导微泡造影剂(MBCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)膜的作用.方法 向两皿HUVEC中加入MBCA(商品名:SonoVue),用超声辐照,辐照后立即取一皿细胞送电镜室进行SEMS观察.另一皿细胞继续培养24 h后进行SEMS观察.结果 超声介导SonoVue可使HUVEC细胞膜的形态和结构发生明显异常改变.约23%细胞的细胞膜可见大小不等、数量不一的小孔.细胞继续培养24 h后再进行SEMS观察,发现细胞膜的形态未见小孔样结构改变.结论 超声介导SonoVue可使HUVEC细胞膜产生可逆性的小孔.

    作者:刘玉凤;任卫东;唐力;陈昕;马春艳;刘跃华 刊期: 2009年第09期

  • 胸腔镜在非小细胞肺癌TNM分期的临床应用

    目的 探讨胸腔镜在非小细胞肺癌TNM分期的临床应用.方法 本组61例手术前诊断的非小细胞肺癌,3例患者术前诊断Ⅳ期,选择化疗.其余58例应用电视胸腔镜(VATS)进行胸腔内淋巴结活检并术中送冰冻病理,进行术中分期,相应采取胸腔镜手术,胸腔镜辅助小切口肺叶切除,胸腔镜辅助开胸手术.对病理类型、淋巴结清除总数、淋巴结病理阳性数、术前术后TNM分期等指标进行观察和分析.结果 58例行VATS手术检查:胸腔镜微创手术2例;VATS小切口肺叶切除34例;VATS辅助全肺切除18例;VATS辅助袖式切除4例.术中共活检淋巴结数目139枚,病理阳性数目39枚.术前术后的TNM分期存在显著性差异(P<0.01).结论 术前胸腔镜胸内淋巴结活检,可进行术中分期,能正确选择治疗对策.在肺癌的诊断治疗中是一种更准确的补充手段.

    作者:董新伟;赵松 刊期: 2009年第09期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅