林瑞新；杨淑莉；房学东；宫路路；张研
目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8 mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定.结果:目的包涵体蛋白经过3次4 mol·L-1尿素洗涤,6 mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP.结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体.
作者：李毅；郭学军；杨涛；冯书章；孙宏晨 刊期： 2011年第02期
目的:探讨三氧化二砷(ATO)对T315I突变的伊马替尼(IM)耐药慢性粒细胞白血病(CML)细胞株KBM5R细胞周期的影响,为对抗CML患者的IM耐药性提供理论依据.方法:选择野生型KBM5细胞作为T315I点突变KBM5R细胞的阴性对照组,根据是否经过ATO处理将实验分为KBM5R细胞空白对照组、KBM5R细胞ATO处理组、KBM5细胞空白对照组和KBM5细胞ATO处理组.应用MTT法检测IM和ATO作用后KBM5和KBM5R细胞的增殖活性;流式细胞术检测ATO作用后KBM5和KBM5R细胞周期的变化;Western blotting法检测ATO作用后KBM5和KBM5R细胞周期调节相关蛋白P21和P27表达的变化.结果:IM作用后耐药组KBM5R细胞IC50与野生型KBM5细胞比较明显增高(P<0.01);不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 μmol·L-1)ATO于不同时间点(24、48、72和96 h)作用于KBM5和KBM5R细胞,与空白对照组比较,ATO处理组细胞均表现为显著的增殖抑制,且随药物浓度增加或作用时间延长细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05);在相同的药物浓度和时间点,ATO对KBM5R细胞的增殖抑制作用强于野生型KBM5细胞(P<0.05);2.0、4.0和8.0 μmol· L-1 ATO作用细胞48 h后,KBM5和KBM5R细胞周期中G2/M期细胞所占比例均随药物剂量的增加而增加,且相同药物浓度时KBM5R细胞周期中G2/M期细胞所占比例与KBM5细胞比较差异无统计学意义(P>0.05);ATO作用KBM5和KBM5R细胞48 h后,2.0、4.0和8.0 μmol·L-1 ATO处理组与空白对照组比较细胞内P21和P27蛋白表达均增加,且随药物剂量增加而增加.结论:ATO通过上调P21和P27蛋白水平使KBM5R细胞周期阻滞于G2/M期,细胞周期阻滞是ATO抑制T315I点突变细胞株KBM5R增殖的原因之一.
作者：李小丰；刘秋菊；李景贺；王秀丽；沈卫章；卢爱萍；郏博；陈鹏 刊期： 2011年第02期
目的:建立利用第12胸椎形态学指标判定国人性别的方法并对其判定效果进行评价.方法:应用腹部CT图像重建三维模型,在第12胸椎模型的7个测量面测量25项指标,并计算出4个比值指标;筛选其中有性别差异的项,建立性别判定的方程式并评价其判别效果.结果:29个指标(24项长度指标和4项比值指标)中有27项的性别差异具有统计学意义 (P<0.05),其判别准确率为56.3%～89.2%;有8项指标判别准确率为80%及以上;判别率高的指标为椎骨下表面矢状位长(iVL),达89.2%.应用逐步判别分析法分析,得到一判别准确率达到90.8%的判别方程:Y=2.98×iBDsm+1.97×PH+3.37×BHp+3.27×sVL/BHa-32.80(mean centroids=-7.69).结论:第12胸椎的形态学指标对判定中国人性别具有可行性和较高的准确性.
作者：郭明；侯伟斌；周建英；井月；李幼琼 刊期： 2011年第02期
血栓闭塞性脉管炎(TAO)是一种累及中小动静脉的阶段性闭塞性炎症疾病.腰交感神经切除术(LS) 通过使动脉痉挛逆转、改善肢体缺血状态、缓解疼痛、促进溃疡愈合成为TAO主要的外科治疗方法,虽然LS有70余年的历史,但手术作用仍有争议.本文作者对LS治疗TAO的现状和并发症的防治做一综述.
作者：张阳；孙思翘；赵文光；王嘉桔 刊期： 2011年第02期
目的:建立检测大鼠神经激肽1(NK1)受体mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法,为检测大鼠NK1受体基因表达提供有效的手段.方法:提取大鼠中脑总RNA,扩增NK1受体基因片段,将其克隆入pMD-18T载体,制作NK1受体标准品质粒;应用SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料,对连续稀释的标准品质粒进行实时PCR分析,评价所建立方法的检测灵敏度;对PCR产物进行溶解曲线分析评价其特异性.结果:成功构建NK1受体标准品质粒,经酶切及测序鉴定,目的片段已插入pMD-18T载体;所建立的实时定量PCR方法的低检测限度均为每反应102个拷贝,在每反应102～109拷贝范围内,荧光信号达到设定阈值所经历的循环数(Ct值)与起始模板浓度具有良好的线性关系,r=0.999.结论:所建立的检测大鼠NK1受体mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法具有敏感性高、特异性强和线性范围广等特点,适用于对大鼠各种组织NK1受体的大量样本检测.
作者：姚刚；满玉红；毛西京；于挺敏 刊期： 2011年第02期
目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据.方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型.术后第2周末处死各组大鼠.采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平.结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生.免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05).模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01).结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的.
作者：曲萌；王丹；李才；李相军；苗春生；李蕴潜 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 本院2005年3月-2010年7月间收治急性病毒性心肌炎73例,男性46例,女性27例,年龄18～23岁,均符合1999年全国心肌炎心肌病专题研讨会制定的诊断标准,排除其他心脏疾病、甲亢及精神因素.其中束支传导阻滞13例,1例为完全性左束支传导阻滞;室性早搏21例;心电广泛性ST-T改变17例.有11例既往患该病,其中7例已反复发病数次,且治疗效果不佳,医生接诊后行X胸片、心电图、心脏彩超、心肌酶及肌钙蛋白Ⅰ检查.
作者：姜利杰；祝雁 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料肝肿瘤患者60例,男性33例,女性27例,年龄23～72岁,平均(54±12.8)岁,病灶直径6～93mm.1.2 检查方法 采用东芝Toshiba Aplio彩色多普勒超声显像仪,探头中心频率3.5 MHz,机械指数0.07～0.10.造影剂使用SonoVue(Bracco,Italy),造影微泡为磷脂包裹的六氟化硫(SF6).
作者：李国政；苑敏；丰立忠；吴子芳；刘增强；刘丽艳 刊期： 2011年第02期
目的:探讨性传播疾病(STD)门诊无症状女性患者血清单纯疱疹病毒2型(HSV2)的感染情况,为预防和控制生殖器疱疹传播提供依据.方法:STD门诊732例女性患者分为无症状组(n=355)、疑似生殖器疱疹(GH)组(n=132)及不典型症状组(n=245),同时设健康对照组(n=260),采用ELISA法检测血清HSV2抗体.结果:无症状组患者HSV2抗体检出阳性率为55.8%(198/355);疑似GH组、不典型症状组及健康对照组HSV2抗体检出阳性率分别为62.9%(83/132)、57.1%(145/245)和11.9%(31/260).无症状组HSV2抗体检出阳性率显著高于健康对照组(P<0.05),但与疑似GH组和不典型症状组比较差异无统计学意义(P>0.05).在355例无症状的患者中,STD患者HSV2感染率显著高于非STD患者(P<0.05),本组感染HSV2的患者主要以20～40岁为主.结论:STD门诊女性HSV2隐性感染的比率较高,HSV2隐性感染在STD患者中更常见.
作者：钟淑霞；李珊山；刘鹤松；郑华；邢甄月；宋洋 刊期： 2011年第02期
目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据.方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况.结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达.而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达.结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段.
作者：周杨；朱建国；唐小春；闫森；宋娜；张明军；李莉；欧阳红生；逄大欣 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 2008年1月-2010年6月在本院行腹腔镜辅助子宫切除术(LAVH)患者203例,其中常规方法手术98例(常规组),行改良式手术105例(改良组),同时随机选择同时期的子宫全切开腹手术110例作为对照组(开腹组).常规组患者年龄38～57岁,平均47岁;生育2胎以上者31例,1胎者67例;有剖宫产史者15例,子宫肌瘤者48例(48.98%),子宫腺肌症26例(26.53%),子宫内膜异位症12例(12.24%),子宫内膜异常增生5例(5.11%),其他7例(7.14%).
作者：刘恩令；糜若然 刊期： 2011年第02期
1 资料与方法1.1 菌种来源 收集2008年6月-2010年6月本院门诊及住院患者送检的脓液、尿液、血液、胸腹水、胆汁和各种穿刺液等标本,分离的革兰阴性杆菌共280株,其中非发酵革兰阴性杆菌127株.
作者：包东武；满永宏 刊期： 2011年第02期
目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响.方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时 PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%.实时 PCR方法检测结果显示,siRNA 重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05).MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强.结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用.
作者：吕强；唐亮；李建华；宫鹏涛；徐晓芳；田甜；李泽中；雒伟伟；邢沈阳；张西臣；高久春 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 2009年3月-2010年3月在本院门诊就诊的睡眠障碍患者122例,均符合<中国精神疾病分类方案与诊断标准>(CCND-2-R)中关于睡眠障碍的诊断标准,其中男性76例,女性46例,年龄22～73岁,平均年龄(45.2±5.4)岁,病程1～15个月.所有患者每晚入睡困难,每晚醒2次以上,每晚总睡眠时间＜6 h,伴有睡眠不深、多梦等睡眠障碍表现,白天困倦、工作效率下降.所有患者均无心、肺、肾等功能障碍及严重基础性疾病,无服用抗精神病药物病史,无酒石酸唑吡坦片用药禁忌,排除妊娠期或哺乳期妇女.
作者：樊文萍 刊期： 2011年第02期
短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)是脑血管病的一种,发病急、恢复快,一般不留任何后遗症,但有少部分TIA短期内可发展至脑梗死.本文作者通过对100例TIA发展至脑梗死患者的临床资料进行了分析,探讨由TIA发展至脑梗死的相关因素.
作者：闫俊杰；韩珂；姚永华 刊期： 2011年第02期
糖尿病可能是肺纤维化发病的高危因素之一,但糖尿病是否为肺纤维化的独立危险因素仍然不明确.本文作者阐述了糖尿病与肺纤维化的关系,着重强调作为糖尿病重要并发症之一的糖尿病肺纤维化已经被忽视,并从组织病理学到分子水平和生物化学改变探讨其潜在机制,旨在提高人们对糖尿病肺并发症的认识.
作者：杨俊玲；赵凤莲；薛倩菲；蔡露 刊期： 2011年第02期
目的:探讨五味子多糖对人甲状腺癌SW579细胞株的生长抑制作用及其机制.方法:48只成年雄性Wistar大鼠分为阴性对照组和药物组,阴性对照组予以生理盐水,药物治疗组予以不同剂量的五味子多糖,分别提取其血清.SW579细胞分为空白组、阴性对照组和药物组.空白组为15%小牛血清的RPMI-1640培养液,阴性对照组细胞加入阴性组大鼠的纯化血清,药物组分别加入不同浓度(100、200 和 400 mg·kg-1)的含药血清,AO/EB荧光染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况,MTT法检测细胞增殖情况,Western blotting检测细胞survivin的表达.结果:流式细胞术结果显示,低、中和高剂量药物组细胞凋亡率为8.63%、35.63%和38.32%,明显高于空白对照组和阴性对照组细胞凋亡率(4.23%和4.10%)(P<0.01),并随剂量增加而增加.阴性对照组细胞生长抑制率为(0.12±0.06)%,低、中和高剂量药物组细胞生长抑制率为(27.51±1.62)%、(34.69±0.79)% 和(45.83±1.33)%,药物组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).Western blotting 检测低、中、高剂量药物组细胞survivin的表达明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01).结论:五味子多糖能有效抑制人甲状腺癌细胞株SW579中survivin基因表达,诱导SW579细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖.
作者：许珂玉；肖建英 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 1998年1月-2004年12月本院收治糖尿病足(diabetic foot,DF)患者96例,均为2型糖尿病患者.其中男性67例,女性29例.年龄41～76岁,平均58.5岁.有糖尿病家族史者28例,有周围神经病变者96例,有血管病变者78例,有肾病及视网膜病变者43例.足病诱因:睡火炕及热水袋取暖或热水洗脚时烫伤;甲沟炎及足部皮肤疱疹感染未予重视;鞋小或皮鞋挤磨伤;修脚时不慎划伤;长期走路磨损及意外足外伤等.足部坏疽共35例,其中足趾坏疽21例(60%).坏疽类型中湿性坏疽21例,干性坏疽9例,混合性坏疽5例 .
作者：韩会民；王树国；陈俊 刊期： 2011年第02期
目的:比较乳腔镜与传统手术方法治疗乳腺疾病的效果,探讨两种方法的优缺点.方法:选取本科经乳腔镜治疗的各类有代表性乳腺疾病手术患者20例,并随机选取本科同期行传统手术治疗的患者100例作为对照,对两组患者美容效果、手术时间、并发症及疗程等进行回顾性研究.结果:与传统手术比较,乳腔镜手术美容效果明显,乳腔镜患者美容满意率(95%)高于而传统手术(34%)(P<0.01);与传统手术比较,乳腔镜手术出血、积液和感染等并发症发生情况差异无统计学意义(P>0.05);但术后疼痛及组织损伤发生率低于传统手术(P<0.01),手术切口明显缩小(P<0.01),疗程缩短(P<0.05);在观察期间恶性肿瘤复发率两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:乳腔镜在乳腺疾病治疗中,美容效果突出,是一种先进的乳腺疾病外科治疗方法.
作者：石爱平；李嗣杰；路璐；宋东；韩冰；李星亮；李万峰；范志民 刊期： 2011年第02期
目的:分离人表皮干细胞(hKSCs),并评价其生物学特性.方法:取包皮环切术的正常皮肤,采用酶消化、快速贴壁筛选法分离hKSCs,采用倒置相差显微镜及透射电镜观察细胞形态,采用细胞免疫组织化学法和间接免疫荧光法检测细胞的分子标志物,利用流式细胞术检测细胞周期.结果:倒置相差显微镜下显示,细胞为多角形,体积小、核大,呈铺路石样排列,形态一致;透射电镜显示,胞质内细胞器稀少,细胞核大,核内具有丰富的异染色质;免疫细胞化学、间接免疫荧光和流式细胞术结果显示,KSCs相对特异性标志物CK15、CK19、P63和CD29呈阳性表达,成纤维特异性标志物Vimentin和表皮终末分化标志物CK10呈阴性表达,RT-PCR结果与上述结果一致;细胞周期检测结果显示,大多数细胞处于G0/G1期,符合hKSCs的慢周期特性.结论:快速贴壁筛选法可分离出纯度较高的hKSCs,可为后续的实验研究提供细胞来源.
作者：马英智；高航；邓方阁；张丽红；李玉林 刊期： 2011年第02期
吉林大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学
