学术投稿

大容量天然人源单链抗体库的构建及抗乙型肝炎病毒PreS1单链抗体的淘选

盛辉;苑春莉;张志超;胡学军;迟宝荣

关键词:单链抗体, 肝炎病毒, 乙型, 肝炎表面抗原, 细菌噬菌体, 抗体库
摘要:目的:从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒PreS1的单链抗体.方法:以60例健康供者的外周血淋巴细胞为来源,构建了1010人源天然单链抗体库,并以PreS1抗原肽进行淘选.3轮淘选后,单克隆经ELISA检测,富集的特异性单克隆经E.coli HB2151表达后进行Western检测并测序.结果:3轮淘选之后,噬菌体的投入/产出比提高了100倍.抗原抗体反应结果显示,A410=1.0的抗PreS1的单链抗体得到富集.Western结果显示其插入的单链抗体片段正确.该抗体基因序列的DNAPLOT软件分析结果进一步表明该抗体是人抗体,其VH属于VH1亚族,Vλ属于Vλ1亚族.结论:这一技术是获得全人源化抗PreS1的单链抗体的有效途径,同时为基因工程抗体用于临床治疗乙型肝炎奠定基础.
吉林大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 月经周期性室性早搏1例

    1 临床资料 患者,女性,37岁.2年来每月行经时均感心悸、头昏、多梦,易出汗,无心前区疼痛,时有面色潮红,月经干净后上述症状消失.

    作者:张学志;崔晓明 刊期: 2004年第05期

  • TNP-470和MMC联合应用对鼠结肠癌生长和肝转移的作用

    目的:研究O-(氨乙酰-氨甲酰基)烟曲霉醇(TNP-470)和丝裂霉素(MMC)联合应用对结肠癌生长和肝转移的抑制作用.方法:建立裸鼠结肠癌的原位生长和肝转移模型,随机分为对照组、TNP-470组、MMC组及联合用药组(TNP-470+MMC).结果:4个组瘤重分别为(499±247)、(478±180)、(275±80)和(255±65)mg,肝转移率分别为87.5%、25.0%、75.0%和12.5%,与对照组比较联合用药组抑制作用明显(P<0.01),且治疗后各组裸鼠活动良好,无明显体重减轻.结论:TNP-470与MMC联合应用对结肠癌的生长及肝转移的抑制有协同作用,且未加重TNP-470引起的体重减轻等毒副作用.

    作者:所剑;徐越超;金洪娟 刊期: 2004年第05期

  • 低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞DNA裂解适应性反应的剂量率效应

    目的:观察低剂量辐射诱导胸腺细胞DNA裂解适应性反应的剂量率效应.方法:用X射线照射Kunming雄性小鼠,其诱导剂量(D1)及其后攻击剂量(D2)分别是75 mGy和1.5 Gy,D1剂量率为6.25、12.5、25、50、100和200 mGy·min-1,D2剂量率为287 mGy·min-1,D1 和D2间隔6 h.通过荧光分光光度计检测DNA裂解断片的变化.结果:D2组胸腺细胞DNA裂解率明显高于假照组(P<0.001);当D1剂量率为6.25、12.5和25 mGy·min-1,D1+D2组DNA裂解率明显低于D2组(P<0.05或P<0.01).结论:当D1在75 mGy,剂量率为6.25~25 mGy·min-1;D2为1.5 Gy,剂量率为287 mGy·min-1;D1和D2间隔6 h,可在全身照射条件下诱导小鼠胸腺细胞DNA裂解的适应性反应.

    作者:刘淑春;吕喆;王珍琦;刘扬;刘光伟;龚守良 刊期: 2004年第05期

  • 红景天醇提取物对老龄小鼠肝细胞过氧化脂质及其凋亡的影响

    目的:观察红景天醇提取物对肝细胞凋亡测定的作用.方法:肝脏和血清过氧化脂质(LPO)测定分别采用硫代巴比妥酸法及磷钨酸法,细胞周期及细胞凋亡测定采用流式细胞术.结果:红景天醇提取物显著降低小鼠肝及血清LPO含量,同时使细胞的高凋亡率显著下降.结论:红景天醇提取物具有抗肝细胞脂质过氧化及细胞凋亡的作用.

    作者:宋祥福;张静春;吴晓辉 刊期: 2004年第05期

  • 芪冬颐心口服液对麻醉犬血流动力学及心肌缺血的影响

    目的:观察芪冬颐心口服液(QDYX)对正常犬血流动力学和心肌耗氧量的影响,及对急性心肌梗死犬的影响.方法:采用麻醉开胸犬,测定心脏血流动力学和心肌氧代谢参数,并结扎犬左冠状动脉前降支(LAD)复制急性心肌梗死模型,测定心肌梗死面积及血清酶学变化.结果:1.0、2.0 g·kg-1 QDYX可降低冠脉阻力,增加冠脉流量,减少心肌耗氧量,缩小心肌梗死面积,降低血清肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)活性.结论:QDYX能降低冠脉阻力,增加冠脉流量,减少心肌耗氧量,对缺血心肌具有保护作用.

    作者:王秋静;吕文伟;路航;刘芬;杨世杰;华玉强;季淑霞 刊期: 2004年第05期

  • 溶栓素产品纯度的检测

    目的:检测经工业生产工艺生产的溶栓素样品的纯度.方法:采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱检测溶栓素的纯度,采用质谱检测溶栓素产品中小分子和赋形剂成分.结果:溶栓素在3种电泳凝胶都呈单带,溶栓素高效液相色谱的主峰积分面积达98.6%,经质谱表征可见众多小分子信号峰.结论:尽管溶栓素样品中存在众多小分子,但按照目前新药申报要求,已经达到新药申报标准.

    作者:程熠;洪敏;张云龙;李奇 刊期: 2004年第05期

  • 补血活血中药对口腔扁平苔藓患者TNF-α及sTNFRⅠ、Ⅱ水平的调节

    口腔扁平苔藓(OLP)是一种病因不明的自身免疫性疾病.TNF-α及sTNFRⅠ、Ⅱ作为免疫系统的重要调节因子,是重要的促炎症因子,与OLP的病理过程有关.为此,本文作者选用了补血活血中药,对26例OLP患者进行治疗,并以临床上治疗OLP较常用的药物雷公藤多甙片为对照,观察其对TNF-α、sTNFRⅠ、Ⅱ水平的调节,为临床用药提供依据.

    作者:郭兮惠;俞亚琴;万英明;贾涵;史苍柏 刊期: 2004年第05期

  • 椎动脉V1段的形态学特点及其临床意义

    目的:探讨椎动脉V1段的形态学特点,为下颈部手术和椎动脉血管内治疗提供解剖学基础.方法:对42具(84侧)动脉灌注红色乳胶的成人尸体观测椎动脉V1段的起始、走行、长度、外径及进入横突孔的位置.结果:84侧中2侧左椎动脉起源于主动脉弓(2.4%);17侧起源于前上象限(20.7%),65侧起源于后上象限(79.3%);弯曲走行30侧(35.7%);椎动脉V1段的长度(mm):左侧37.8±4.9,右侧 36.4±5.7;直径(mm):左侧曲行组4.72±0.37,左侧直行组4.25±0.35,右侧曲行组4.35±0.41,右侧直行组3.95±0.38.结论:椎动脉V1段的形态变异较大,但起始和入横突孔处位置相对比较稳定.

    作者:杨玉辉;吕衡发;刘景臣;高忠礼 刊期: 2004年第05期

  • 细胞间黏附分子异常表达与喉癌生物学特性的关系

    目的:研究喉癌组织中细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule-1 ,ICAM-1)的表达与喉癌侵袭力的关系.方法:采用免疫组化技术对52例喉癌组织ICAM-1的表达进行检测,并进行统计学分析.结果:ICAM-1的异常表达随着喉癌的临床分期及癌组织病理分级递增呈下降趋势(P<0.05).结论:ICAM-1的缺乏易使癌细胞侵润及转移,故喉癌组织中的ICAM-1在肿瘤浸润过程中起关键作用,可作为病理诊断及判断预后的指标.

    作者:辛丁;滕博;李巍;许亚辉;吴东辉 刊期: 2004年第05期

  • 静脉穿刺置管在临床血液透析建立血管通路中的应用

    目的:探讨静脉穿刺置管建立血管通路应用于临床血液透析的有效性和安全性.方法:总结198例静脉穿刺置管在血液透析中的使用情况和并发症,检测其透析前后血清尿素氮(BUN),计算尿素下降率(URR)及尿素清除指数(Kt/V),以50例同期应用动静脉内瘘的血液透析病例为对照,比较其透析效果.结果:静脉置管一次性成功194例,成功率为97.9%.与置管相关的主要并发症为血肿6例(3.0%),感染11例(5.6%),血栓栓塞23例(11.6%).静脉置管在血液透析中血流量充分(>190 mL·min-1),透析后BUN均下降45%以上,透析前后的BUN、URR、Kt/V等检测值与动静脉内瘘组比较差异无显著性(P>0.05).结论:静脉穿刺置管建立血液透析通路是一种快捷、安全、有效的方法.

    作者:傅耀文;周洪澜;王伟刚 刊期: 2004年第05期

  • 血管紧张素转换酶抑制剂与血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对动脉内膜损伤后增生的影响

    目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)captopril与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的AT1受体拮抗剂valsartan对损伤动脉内膜增生的影响.方法:以兔右颈总动脉内膜剥脱为实验模型,随机分为单纯损伤组、captopril组及valsartan组.captopril组及valsartan组术前1 d至术后14 d分别给予captopril 2 mg·kg-1·d-1与valsarta 10 mg·kg-1·d-1,单纯损伤组不给药.检测各组术前及术后7、14 d血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)、血浆内皮素(ET)水平,并于术后14 d对各组血管内膜厚度及管腔狭窄度行病理形态学观察.结果:captopril组及valsartan组血浆PAI-1、ET水平及内膜的厚度、管腔狭窄度均明显低于单纯损伤组(P<0.05).结论:captopril与valsartan均可抑制动脉损伤后内膜的增生.

    作者:王晔玲;赵利华;张京平;暴淑英 刊期: 2004年第05期

  • 电位滴定法测定深色蔬菜和水果中的维生素C

    目的:用电位滴定法测定深色蔬菜和水果中的维生素C.方法:分别测定9种果蔬样品中维生素C含量,计算其回收率、均值、标准差及变异系数,并与传统氧化-还原滴定法比较.结果:回收率范围在97.5%~103.0%之间,平均回收率为100.2%,平行测定值的变异系数在0.7%~3.7%之间,其准确度及精密度均优于氧化-还原滴定法.结论:电位滴定法操作简便,特异性好,是测定深色蔬菜和水果中维生素C较理想的方法.

    作者:陈秋丽;甘振威;张娅婕;马萱钺 刊期: 2004年第05期

  • 右腋下微创小切口治疗小儿先天性心脏病疗效观察

    目的:观察先天性心脏病患儿经右腋下小切口剖胸体外循环下行心内直视手术病例疗效.方法:117例患儿均采用右侧腋下长约6~10 cm的弧形切口,经第4肋间进胸.补片修补缺损72例,小缺损直接缝合45例.结果:右腋下小切口组患儿与同期经正中剖胸入路组62例患儿相比,心肌阻断时间[分别为(34.3±12.5)和(35.9±16.9)min]、术后呼吸机辅助时间[分别为(6.5±4.1)和(7.2±3.4)h]差异无显著性(P>0.05);而胸液引流量[分别为(187.6±110.0)和(230.6±92.5)mL]、术后住院天数[分别为(8.2±1.3)和(10.5±2.5)d]差异有显著性(P<0.01).结论:右腋下微创小切口剖胸治疗小儿先天性心脏病较常规正中剖胸入路可减少术后胸腔引流量和术后住院天数.

    作者:汪建中;徐路平;王天策;李海滨 刊期: 2004年第05期

  • 纳络酮用于心肺脑复苏24例疗效观察

    心跳呼吸骤停是临床常见急症.据文献报道,心脑肺功能急性衰竭时,患者体内β-内啡呔(β-EP)含量明显升高,加剧心脑肺功能障碍.本文作者观察了β-EP拮抗剂纳络酮在心肺脑复苏(CPC)中的作用,报道如下.

    作者:李婷;吴岩 刊期: 2004年第05期

  • TGFβ1在乳腺癌间质新生血管周细胞中的表达

    目的:研究转化生长因子β(TGFβ1)在乳腺癌周细胞中的表达情况.方法:取50例手术切除乳腺癌新鲜标本,通过免疫组织化学染色、原位杂交技术,同时采用Western印迹法、RT-PCR进行蛋白和mRNA半定量分析,观察TGFβ1在乳腺癌中的表达情况.结果:TGFβ1蛋白质可表达在新生血管周细胞的胞浆中,同时也可表达于乳腺癌癌细胞及新生血管内皮细胞;TGFβ1 mRNA主要表达在血管周细胞的胞浆中,极少数癌细胞呈弱阳性表达.通过Western印迹法进行蛋白定量分析发现,随着血管密度的提高,TGFβ1的蛋白增高(P<0.01).RT-PCR结果显示,随着血管密度的提高,TGFβ1的mRNA增高(P<0.01).结论:TGFβ1通过周细胞参与血管生成.

    作者:王医术;李玉林;李一雷;王心蕊;张丽红 刊期: 2004年第05期

  • 大连市2003年食物中毒情况分析

    2003年本市共发生食物中毒20起,中毒人数为538人,无死亡.现将食物中毒资料分析如下.

    作者:孙晓辉;刘小辉 刊期: 2004年第05期

  • 抗抑郁药的神经保护作用及其机制

    应激和抑郁引起以海马为主的中枢神经系统萎缩、海马容量降低.抗抑郁药的慢性治疗通过促进海马细胞增殖和神经元数目增加,抵抗或克服应激诱导的海马神经元萎缩和丢失,实现其神经保护作用.其机制在于抗抑郁药可能作用于调节神经元的生成和存活的特殊的转录因子和靶基因.深入地理解应激和抗抑郁药治疗的细胞和分子机制,对于指导临床用药具有重要的意义.

    作者:王珍琦;刘光伟;龚守良 刊期: 2004年第05期

  • 利用大孔吸附树脂提取西洋参果肉总皂苷

    目的:选择合理的工艺条件分离西洋参果肉总皂苷.方法:西洋参果肉水提取液,经D4020大孔吸附树脂吸附,分别经水洗和70%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,回收乙醇即得西洋参果肉总皂苷.结果:西洋参果肉水提取液15 000 mL,经D4020大孔吸附树脂250 g吸附,用水洗至无色后,继用70%乙醇15 000 mL洗脱,回收乙醇即得西洋参果肉总皂苷.结论:利用大孔吸附树脂提取西洋参果肉总皂苷,产品中总皂苷含量超过50%,是简便、可行的提取方法.

    作者:刘继华;朱涛;卢丹;刘金平;李平亚 刊期: 2004年第05期

  • 苦碟子口服液对小鼠及大鼠学习记忆的影响

    目的:探讨苦碟子口服液(KDZOL)对学习记忆方面的影响.方法:用东莨菪碱破坏小鼠和大鼠的学习记忆,以益智健脑口服液(YZJNOL)为阳性对照药,通过小鼠跳台法、大鼠水迷宫法,观察KDZOL对正常小鼠和大鼠学习记忆的影响及对东莨菪碱所致小鼠和大鼠学习记忆损害的防治作用.结果:对正常小鼠,KDZOL 10、20 g·kg-1组与正常对照组比较,第1天跳台实验的错误次数明显减少,第2天重复测试错误次数及错误发生的潜伏期无明显差异;对东莨菪碱所致学习记忆损害的小鼠,KDZOL 20 g·kg-1组与模型组比较,第1天跳台实验的错误次数、第2天重复测试错误次数及错误发生的潜伏期差异显著,KDZOL10 g·kg-1组与模型组比较,第1天跳台实验的错误次数明显减少;对正常大鼠及东莨菪碱所致学习记忆损害的大鼠,KDZOL各组与模型组比较,大鼠水迷宫学会次数无明显差异.结论:KDZOL能改善正常小鼠及东莨菪碱损害小鼠的学习记忆回避的能力,对正常大鼠及东莨菪碱损害大鼠的空间辨别能力无明显改善.

    作者:谢湘林;周鸣;刘宏雁 刊期: 2004年第05期

  • 腰神经后支的解剖研究及临床应用

    目的:为使用小针刀切断腰神经后支治疗顽固性腰骶部疼痛提供解剖学依据.方法:在尸体上解剖观测腰神经后支及其分支的走行、长度、宽度、分布情况.结果:腰神经后支是在椎间孔处发自腰神经主干,长度为4.46~6.20 mm,宽度为0.73~1.62 mm,自L1至L5逐渐减小;针刀切断腰神经后支主干,入刀点应在通过同序数腰椎棘突中点水平线距后正中线外约22~30 mm处,自上而下与后正中线的距离逐渐增大,垂直进刀深度约34~40 mm.结论:提出了使用小针刀切断腰神经后支治疗顽固性腰骶部疼痛的解剖学依据,提供的有关数据和定位方法有助于提高操作的准确性和安全性.

    作者:高振平;牛松青;王晓慧;张振有 刊期: 2004年第05期

吉林大学学报(医学版)杂志

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主办:吉林大学