血管内皮生长因子重组DNA的构建及体外表达

贾晓晶；刘丽；龚守良；刘树铮

关键词：血管内皮生长因子, 基因表达, 质粒

摘要：目的:以质粒PCNDA3.0为载体,研究血管内皮生长因子(VEGF)目的基因在体外真核细胞中的表达.方法:将编码人可溶性VEGF165的目的基因克隆于带有CMV启动子/增强子的PCNDA3.0载体上,重组为PCNDA3.0-VEGF165质粒载体.直接以质粒DNA形式应用脂质体介导的方法转染人脐静脉内皮细胞ECV304,收取细胞上清,用ELISA和Western blot方法检测上清中VEGF165可溶性表达产物.结果:VEGF165基因在CMV启动子/增强子的调控下,可在ECV304细胞高效表达,且在转染后72 h表达量明显高于转染后48 h的表达.结论:以质粒PCNDA3.0为载体,VEGF165基因可以在体外真核细胞中表达,为治疗缺血性疾病提供一个新的基因治疗途径.

吉林大学学报（医学版）杂志相关文献

宫颈妊娠保守治疗体会(附二例报告)

1临床资料病例1患者,39岁,孕2产1.1984年行剖宫产分娩1次.既往月经规律,本次停经40 d后出现恶心、呕吐来本院就诊,诊断为早孕.于停经47 d阴道流血少许,于停经第50天时来本院门诊部计生科行人流术.术前查尿绒毛膜促性腺激素(HCG)阴性,彩超提示:子宫前位,10.5 cm×5.5 cm,宫内可见节育器、8.7 cm×1.5 cm条状液性暗区,形状欠规整,子宫前壁欠光滑.因人流术中出血多(约600 m1),立即停止吸宫,同时宫颈注射催产素及麦角,静点止血药物并急诊入院观察.入院后阴道流血渐减缓,给予消炎止血治疗3 d.再行彩超检查:子宫前位,8.8 cm×5.6 cm,宫颈内可见8.1 cm×6.4 cm实质不均质回声区,子宫前壁回声欠均匀.

作者：周佰霞；胡玉兰；张晔；刘淑红刊期： 2002年第01期
肺癌患者根治性全肺切除术后并发症和死亡危险因l素分析

目的:确定和评估全肺切除术后并发症和死亡危险因素.方法:回顾分析1984年6月-2000年6月246例根治性全肺切除术肺癌病例资料,评估术后30d医院内病死率及危险因素.结果:246例中手术死亡18例(7.3%),发生并发症52例(61.80%).结论:病人的年龄、重度吸烟、围手术期的输液管理、肺感染、终止机械通气失败及复合并发症是手术死亡主要的相关危险因素.

作者：刘国津；张宏；王晓军；王凯忠；袁霞刊期： 2002年第01期
万古霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞影响的实验研究

目的:通过内耳器官离体培养技术来观察万古霉素对体外培养耳蜗毛细胞的影响,探讨万古霉素耳毒性.方法:选用生后2～4 d的昆明小鼠做为实验对象,应用鼠尾胶包埋法离体培养耳蜗基底膜,通过若单明-鬼笔环太染色技术定量观察不同浓度的万古霉素对耳蜗毛细胞的影响.结果:给予万古霉素后的离体耳蜗内、外毛细胞未发生坏死和缺失,毛细胞密度与正常对照组无差别.结论:万古霉素对体外培养的小鼠耳蜗毛细胞无损伤作用.

作者：金昕；任丽丽；王苹；丁大连；杜宝东刊期： 2002年第01期
COX模型在乳腺癌病人预后评估中的应用

目的:排除混杂因素,进一步探讨乳腺癌病人术后5年的生存情况及各预后因素的作用.方法:收集本院与加拿大拉瓦尔大学圣@萨可门医院1 002例乳腺癌病人的资料,包括自然状况及预后因素(经历史性队列调查获得),应用COX模型,通过调整后的风险比率(Adjusted hazard ra-tio,AHR)定量评估各预后因素的作用.结果:调整混杂因素后,两医院乳腺癌病人的死亡率非常接近(AHR=0.9,P=0.5024);年龄因素对死亡率的影响差异无显著性(AHR=0.8,P=0.2097);肿瘤大直径超过2.0 cm的乳腺癌病人的死亡风险约为肿瘤大直径小于2.0 cm的乳腺癌病人的2倍(AHR=2.2,P=0.0001);淋巴结有转移病人的死亡风险约为无淋巴结转移病人的3倍(AHR=3.0,P=0.0001).结论:在调整混杂因素干扰后,两医院乳腺癌病人的死亡率仍非常接近,肿瘤大小与淋巴结转移个数是重要的预后因素.

作者：盖学良；付彤；王志新；雅克·布里松刊期： 2002年第01期
癌基因c-fOS和c-jun在肝细胞型肝癌中的表达及临床意义

目的:研究癌基因c-fos和c-jun在肝细胞型肝癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化技术检测10例正常肝组织、23例癌旁异型增生肝组织和31例肝细胞型肝癌组织的癌基因c-fos和c-jun表达,并对两者相关性进行分析.结果:在正常组织中c-fos和c-jun弱表达或不表达;在癌旁异型增生肝组织中c-fos和c-jun的阳性例数分别为15(65.2%)和14(60.9%),染色强度与正常肝组织相比差异有显著性(P＜0.05);在肝细胞型肝癌中c-fos和c-jun阳性例数分别为17(54.8%)和16(51.9%).c-fos和c-jun表达水平与癌组织分化程度有关(P＜0.05),而且二种癌基因在肝细胞型肝癌中表达的协同性较强.结论:c-fos和c-jun癌基因的异常表达可能在肝细胞型肝癌的发生发展中起重要作用;c-fos和c-jun表达水平与肝细胞型肝癌的分化程度有关,可作为判定肝细胞型肝癌恶性程度的重要指标之一.

作者：张颖超；韩喜春；贾明库；王禹刊期： 2002年第01期
西比灵对癫痫鼠点燃效应及氨基酸变化影响的实验研究

目的:研究西比灵对癫痫鼠点燃效应及相应氨基酸变化的影响.方法:用大鼠杏仁核快速点燃方法观察西比灵对点燃效应的影响,并采用高效液相色谱法测定应用西比灵后颞叶皮层及海马组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLu)的含量.结果:西比灵有减弱点燃效应、升高GABA含量及降低GLu含量的作用.结论:西比灵有辅助抗癫痫作用.

作者：林卫红；张淑琴；黄民刊期： 2002年第01期
预防性应用无环鸟苷对潜伏感染单纯疱疹病毒活化的抑制作用

目的:证实预防性应用无环鸟苷(ACV)能够抑制潜伏单纯疱疹病毒的激活.方法:用Balb/c小鼠建立潜伏感染模型,紫外线B照射激活病毒,照射前开始予ACV口服,停药1 d后处死动物检测活化病毒.结果:治疗组30例中无一例检出活化病毒,而对照组30例中有12例检测出活化病毒(P＜0.01).结论:预防性应用ACV特异作用于病毒激活期,能有效地抑制病毒活化.

作者：郝倩；张岩；贺冰；徐杰刊期： 2002年第01期
5α-还原酶mRNA在Wistar大鼠附睾内的随龄表达研究

目的:观察附睾内5α-还原酶(Ⅱ型)mRNA的表达是否随年龄增长而改变.方法:采用斑点杂交的方法,用cDNA探针检测附睾中Ⅱ型酶mRNA的表达量.结果:在附睾头、体、尾部,5α-还原酶(Ⅱ型)mRNA的表达量于青春期前(21 d)、青春期(42 d)、成龄(91 d)差异均无显著性.结论:年龄增长对附睾内5α-还原酶(Ⅱ型)mRNA的表达没有影响.

作者：刘素环；王忠山；王弘；张家颖刊期： 2002年第01期
肠病性肢端皮炎二例报告

1临床资料病例1患儿,男,3月龄,1995年5月因皮疹2日住本院儿科.患儿于入院前2日出现皮疹,以手足、颈部、四肢首发初起时为小疱疹,疱液初为透明,后变混浊,随后口周、外阴、臀部出现相同皮疹,很快皮疹融合成大片红斑,周围绕以红晕.患部干燥、潮红、剥脱,呈银屑病样外观.病后头发开始脱落,并伴有腹泻.入院时查体:神情淡漠,营养差,秃发,眼睑红肿,眼睑周围皮肤发红,口角流涎,四肢皮肤可见少许疱疹,颈部、手足、外阴部、臀部皮肤可见片状红斑,周围绕以红晕,患部干燥、潮红、剥脱,可见部分鳞屑.呼吸平稳,心肺听诊无异常,神经系统无阳性体征.入院后查血锌(3 mmol@L-1)明显偏低,家庭成员中姨母有类似病史.入院诊断肠病性肢端皮炎.入院后给予葡萄糖酸锌片(每片含锌10mg)70mg,每日3次口服,第2天精神好转,第3天皮疹减轻,1周后皮疹消退.

作者：张柳；潘敏；葛春莲刊期： 2002年第01期
肥厚性心肌病梗阻程度与QT离散度及室性心律失常关系的研究

目的:探讨肥厚性心肌病梗阻程度与QT离散度(QTd)及室性心律失常的关系.方法:肥厚性心肌病患者51例,梗阻型28例,非梗阻型23例,体表心电图分别测定QTd及校正后QT间期(QTc),动态心电图统计室性心律失常类型及程度,多谱勒超声测定左室流出道压力阶差(LVOTG),并比较二组间差异.结果:肥厚梗阻与非梗阻型心肌病静息时QTd分别为(61.2=23.1)ms和(47.0±18.6)ms(P＜0.05),QTc分别为(60.2±24.1)ms和(4 7.2±21.6)ms(P＜0.05),发生Lowns2级以上室性心律失常分别为71.5%和21.7%(P＜0.001),LVOTG分别为(70.1±23.8)mmHg和(13.2±5.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)(P＜0.001);梗阻型心肌病LVOTG与QTc呈正相关(r=0.48,P＜0.05),24 h室性早搏次数与QTc亦有良好相关性(r=0.51,P＜0.01).结论:肥厚性心肌病随左室流出道梗阻程度加重,QTd及室性心律失常程度加重.

作者：王文志；白波；赵林阳；杨平刊期： 2002年第01期
坏死性淋巴结炎12例报告

坏死性淋巴结炎(NHL)是近年才被认识的一种非肿瘤性淋巴结增大性疾病.它是以发热、淋巴结肿大、白细胞减少三大特征为主要临床表现的疾病,临床极易误诊.现将本院收治的12例经病理检查确诊的NHL分析报道如下.

作者：李明子；孙晓坤；吴严刊期： 2002年第01期
血管内皮细胞损伤在周围动脉粥样硬化闭塞症发病中作用的研究

目的:探讨血管内皮细胞(VEC)损伤和肿瘤坏死因子(TNF)在周围动脉粥样硬化闭塞症(PASO)发病中的作用.方法:对50例老年PASO患者进行血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、TNF及外周循环内皮细胞(CEC)进行检查.结果:50例PASO患者均呈现高ET、高TNF、低NO血症,外周循环血内皮细胞数目明显增加(P＜0.01),且同疾病严重程度密切相关.结论:血管内皮损伤及TNF参与了PASO的形成和发展.

作者：彭丽萍；左孟华；王春喜刊期： 2002年第01期
调节肠道菌群预防自发性细菌性腹膜炎的临床观察

自发性细菌性腹膜炎(SBP)是肝硬化腹水病人常见的严重并发症,发生率呈逐渐上升趋势,其原因可能与耐药菌株及异型菌株生成有关.SBP的发生直接影响到肝硬化患者的预后,因此有效的预防对提高肝硬化病人的生存率有重要意义.本文作者对1990-1999年间经内科收治的肝硬化腹水患者1062例进行回顾性对照分析,探讨预防SBP发生的有效措施.

作者：兰汝春；孙长贤；张卫红；刘秀英；王阁刊期： 2002年第01期
肺癌患者血清sIL-2R、IL-6和TNF-α水平的测定及临床意义

目的:探讨血清sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达水平与肺癌诊断、疗效判定及预后的关系.方法:双抗体夹心法测定肺癌患者血清中sIL-2R、IL-6和TNF-α水平,并进行化疗前后对比.结果:肺癌患者sIL-2R、IL-6和TNF-α的生物活性均高于正常对照组,化疗后sIL-2R、IL-6和TNF-α水平较化疗前明显降低,差异有显性著(P＜0.01).结论:sIL-2R、IL-6和TNF-α可作为肺癌诊断、疗效判定及预后评价的辅助性指标.

作者：刘铁梅；赵凤芹；朱光泽；张浩然；谢风刊期： 2002年第01期
带蒂腹横肌瓣转位修复膈缺损的应用解剖

先天性膈疝是新生儿先天性畸形的疾病之一,死亡率较高.对这类严重的畸形,以往曾用很多不同的材料作膈成型的代替物,但效果均不满意.本文作者对新生儿腹横肌及其血供进行了应用解剖学观测,为临床开展此手术提供解剖学依据.

作者：薛延军；李祥鹏；奚林；刘海燕；韩晓红刊期： 2002年第01期
Fas基因与细胞凋亡

Fas基因广泛表达于人体组织中,属于肿瘤坏死因子、神经坏死因子受体超家族,并命名为CD95.Fas蛋白有一段80个氨基酸的序列与细胞凋亡信号传递密切相关,被称为死亡功能区(death domain,DD).Fas配体(Fas Ligand,FasL)或抗Fas单克隆抗体为40 kU的膜蛋白.Fas和FasL共同在淋巴细胞发育、分化和免疫反应调节中起重要的作用,并通过介导细胞凋亡,在自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤发生及在生精细胞凋亡中起重要调控作用.

作者：刘光伟；龚守良刊期： 2002年第01期
根管冲洗针头的改良及临床应用

根管冲洗是根管治疗过程中不可缺少的重要环节,普通的根管冲洗针头由于针尖孔垂直向下,冲洗时药液仅局限在根管下1/3及连通根尖孔处,根管中、上1/3根管壁上的感染物质不易被清除干净.另外如操作不当还可增加药液溢出根尖孔扩散的机会.本文作者在临床实践中研制出多孔注射针头用于根管冲洗,通过2年来的观察,取得了满意的效果,现将结果报道如下.

作者：孙素敏；倪雪岩；王珉燕刊期： 2002年第01期
膀胱癌多重耐药基因表达的研究

目的:从基因水平对膀胱癌多重耐药基因(MDR1)进行研究.方法:用PCR技术对膀胱癌组织及正常膀胱组织进行分析检测.结果:大多数膀胱癌及少数正常膀胱粘膜标本在167 bp处显示MDR1基因异常扩增.结论:随肿瘤分级的增高,MDR1表达率有增高趋势,MDR1基因表达与膀胱癌生物活性密切相关.

作者：赵玉千；郝珊；付耀文；吴长利刊期： 2002年第01期
药物流产不全原因分析及处理方法

目前,药物流产已经成为避孕失败者的首选措施,为了减轻流产妇女的痛苦,提高药物流产的成功率,现结合本院药物流产的观察结果,对药物流产不全及失败的原因以及预防措施进行探讨,现报道如下.

作者：王艳梅；王艳红；金丽雯刊期： 2002年第01期
彩色超声诊断右冠状动脉右室瘘

右冠状动脉右室瘘(Coronary artery fistula inright ventricle,CAF)是一种少见的先天性心血管畸形,由于本病已能够手术治愈,故手术前诊断具有实际意义[1.3].以往诊断依靠造影检查,随着彩色超声诊断仪器的不断更新,诊断水平不断提高,彩超已成为诊断本病首选的无创性检查方法.本院于1995年和2000年收治2例该病患儿,其中1例并发房间隔缺损,均经手术证实,现报道如下.

作者：宋军；高东梅；伊莲花；朱环刊期： 2002年第01期