朱志强；姚寒晖；吴杨；邵峰；柏亚平；宁忠良；梁伟
回顾性分析10例全腹腔镜远端胃癌根治切除、残胃十二指肠三角吻合病例的临床资料。10例患者均成功实施了全腹腔镜远端胃癌根治切除(D2)、残胃十二指肠三角吻合,手术时间(173±32) min；三角吻合操作时间(25±11) min；术中出血(95±36) ml；淋巴结清扫数目(25±13)枚/例；肿瘤距上切缘(6.5±1.8)cm、距下切缘(4.5±1.6)cm,术后病理结果未见切缘癌残留。首次下床活动时间(1.7±0.6) d,肛门排气时间(3.4±1.6) d,进流质饮食时间(4.0±1.5) d,术后住院时间(7.0±1.0) d。全组未出现呼吸道感染、肠梗阻、吻合口出血、吻合口狭窄、吻合口瘘等并发症。残胃十二指肠三角吻合技术操作安全简便,在全腹腔镜远端胃癌根治术中能提供良好的腹腔内胃十二指肠吻合效果。
作者：朱志强；姚寒晖；吴杨；邵峰；柏亚平；宁忠良；梁伟 刊期： 2013年第11期
目的探讨改良快速顺序诱导(RSI)气管插管期间应激反应的影响。方法将60例择期行胃癌、结直肠癌根治术患者按全麻诱导方法不同随机均分为两组：改良RSI组和常规RSI组。记录两组患者麻醉诱导前(T1)、麻醉诱导后2 min(T2)、气管插管后1 min (T3)、气管插管后5 min (T4)患者的心率( HR)、平均动脉压( MAP)、血脉搏氧饱和度(SPO2)、动脉血氧分压( PaO2)和动脉血二氧化碳分压(PaCO2)，并于T1、T3、T4相应时点抽取静脉血样，测定血浆皮质醇和血糖的浓度。结果与T1时点比较，常规RSI组在T2时点MAP、HR明显下降(P<0.05)，而改良RSI组在T2时点MAP、HR无明显下降，差异无统计学意义；与T2时点比较，常规 RSI 组在 T3时点 MAP、HR 明显升高( P <0.05)，而改良RSI组在T3时点MAP、HR无明显升高；两组患者PaCO2和SPO2无明显改变；与改良 RSI组比较，常规RSI组PaO2在T2时点明显升高(P<0.05)，但麻醉诱导时间明显延长(P<0.05)，两组血浆皮质醇及血糖浓度各时点比较无明显升高。结论改良的RSI与常规的RSI比较血流动力学更平稳，气管插管应激反应轻。
作者：徐四七；王胜斌；檀彧庆；居霞；胡胜红；徐煌 刊期： 2013年第11期
目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx(pEGFP-N1-HBx)真核表达质粒,并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法以HBV Dimer为模板,PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx。将该质粒转染肝胚瘤细胞株HepG2,以RT-PCR法及荧光显微镜观察其表达情况,再通过基因共转染等技术研究 HBx 蛋白对HBV复制的影响。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR法检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx 质粒在 HepG2细胞中能够表达；质粒pEGFP-N1-HBx与pHBV48-X0共转染后,HepG2细胞上清液HBV-DNA、HBsAg和HBeAg分泌显著增多。结论HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功；HBx蛋白能够促进HBV复制及抗原分泌。
作者：杨凯；管世鹤；孙蓓蓓；潘颖；吴园园；王爱华 刊期： 2013年第11期
目的构建中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)基因真核表达质粒并转染小鼠神经瘤细胞系(N2A),建立稳定表达MANF的细胞系,并观察MANF对内质网(ER)应激诱导细胞凋亡的影响。方法将MANF基因克隆至pEGFP-C2载体中,经酶切、聚合酶链式反应(PCR)、测序检测其构建的正确性,脂质体转染法将重组质粒转染入N2A细胞,经 G418(500μg/ml)连续筛选,获得稳定表达MANF的神经细胞系。细胞免疫荧光法观察MANF的定位,蛋白质印迹法(Western blot)和反转录PCR法(RT-PCR)鉴定稳转细胞系中MANF的蛋白和基因表达水平。在稳定转染细胞系中,分别用4μg/ml衣霉素(TM)处理16 h和10μmol/L β淀粉样蛋白(Aβ)处理24 h诱导ER应激,Western blot法检测CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达和 Caspase-3的激活情况。结果构建的 pEGFP-C2-MANF质粒经酶切测序等鉴定确定构建成功,经G418抗性筛选出稳定转染 MANF 的 N2A 细胞系,RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光法证明稳转细胞中MANF的基因和蛋白水平均高表达,并且MANF的细胞定位准确。诱导ER应激后,MANF能显著抑制CHOP的表达和Caspase-3的激活。结论成功建立稳定表达MANF的神经细胞系,并且发现MANF可以抑制ER应激诱导的神经细胞凋亡。
作者：陈滢；李成锦；杨文；程里；安然；都建；沈玉君；冯利杰；沈玉先 刊期： 2013年第11期
目的观察不同浓度维生素C(Vit C)对膀胱癌T-24细胞增殖和凋亡的影响,并了解其可能的机制。方法使用不同浓度Vit C干预体外培养的膀胱癌T-24细胞,然后通过缩胆囊素八肽(CCK-8)检测T-24细胞增殖情况,用流式细胞术检测细胞周期的变化及其凋亡率结果,RT-PCR法检测Survivin mRNA、Caspase-3 mRNA的表达。结果400μg/ml Vit C可将T-24细胞阻滞于S期,诱导其凋亡并且下调Sur-vivin mRNA 的表达、上调 Caspase-3 mRNA 的表达。4、40μg/ml的Vit C对人膀胱癌T-24细胞无明显抑制增殖作用,而400μg/ml Vit C对人膀胱癌T-24细胞增殖有显著抑制作用。结论400μg/ml Vit C可抑制T-24细胞增殖、诱导其凋亡,其机制可能与下调Survivin mRNA表达、上调Caspase-3 mRNA表达有关。
作者：刘升学；孙文国；白先忠；覃展偶；张天禹 刊期： 2013年第11期
目的观察慢性束缚应激对小鼠下丘脑腹内侧核(VMH)烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐(NADPH)氧化酶表达及活性氧(ROS)氧化应激损伤的影响。方法实验分为对照组和慢性束缚应激组,每周记录小鼠24 h摄食量和体重变化,用二氢乙啡啶(DHE)染色法检测 VMH ROS 的生成,HE 染色观察 VMH 形态学变化,免疫组化检测 VMH NOX2、p47phox 和 RAC1的表达,Western blot法检测下丘脑PKCα、NOX2、p47phox和RAC1的表达。结果与对照组比较,慢性束缚应激能明显降低小鼠24 h摄食量和体重；DHE染色结果显示,慢性束缚应激能明显增加小鼠VMH神经元ROS的生成；HE染色结果显示,慢性束缚应激能明显导致VMH神经元损伤；免疫组化和蛋白印迹结果显示,与对照组比较,慢性束缚应激小鼠VMH神经元PKCα、NOX2、p47phox和RAC1的表达明显增加。结论慢性束缚应激可导致小鼠VMH神经元损伤,其机制可能与增加VMH神经元NAD-PH氧化酶介导的ROS生成增多有关。
作者：王玉婵；武汪洋；李卫平；尹艳艳；孙立；熊莉；李维祖 刊期： 2013年第11期
目的观察 miR-451与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集25例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR法检测miR-451及MIF mRNA的相对表达水平,分析其相关性并探讨与胃癌相关临床因素的关系。结果miR-451在胃癌组织中明显低表达(P<0.01),而MIF mRNA在胃癌组织中明显高表达(P<0.01),在胃癌组织中,miR-451与 MIF mRNA 表达呈显著负相关( P <0.01),miR-451及 MIF mRNA 与胃癌的分化程度、TNM 分期、浸润深度及淋巴结转移相关(P <0.01)。结论miR-451及MIF mRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,miR-451可能通过抑制MIF负向调控了胃癌的发生、发展作用。
作者：汪伟；孙晓娜；张玉峰；党中勤；牛学恩；刘晓峰 刊期： 2013年第11期
目的探讨母鼠孕期和哺乳期经水摄入双酚 A (BPA)对子代未成年期体重的影响。方法将妊娠的ICR母鼠随机分成 BPA 低、中、高剂量组(2.2829、22.8290、228.2900μg/L)、空白对照组和溶剂对照组；母鼠自妊娠第0天(GD 0)至仔鼠出生后第21天( PND 21)经饮水暴露BPA,孕期每3 d记录1次母鼠体重,仔鼠体重在哺乳期每3 d记录1次,断乳后至PND 42期间每周记录1次。结果各BPA暴露组母鼠孕期体重、窝平均仔鼠数及断乳前仔鼠平均体重与对照组相比差异均无统计学意义；PND 42时BPA高剂量组仔鼠体重与对照组相比显著增加(P<0.05)；PND 28~PND 42时各组雌性仔鼠体重均无明显差异；PND 35时中、高剂量组及PND 42时BPA各组雄性仔鼠体重与对照组相比均显著增加(P<0.05,P<0.01),以PND 42时高剂量组增加更为显著。结论母鼠孕期及哺乳期暴露较低剂量BPA对子代未成年期的体重有一定影响,而且对雄性子代影响更明显。
作者：李云；房魏；李美玲；沈彤 刊期： 2013年第11期
80例临床拟诊或确诊冠心病患者行双源CT(DSCT)冠状动脉成像(CCTA),并②1周内行单光子发射计算机断层成像(SPECT)心肌灌注显像(MPI)对照,分析DSCT诊断冠状动脉狭窄性病变与其相应供血心肌节段有无灌注异常的相关性。结果显示：① CCTA诊断无狭窄51例(955段)、轻度狭窄5例(29段)、中度狭窄9例(27段)、重度狭窄13例(16段)、闭塞2例(3段)。②以MPI为诊断心肌缺血的金标准,CCTA狭窄50%和75%为截断值时,其诊断心肌灌注异常的敏感度分别为77.27%和63.64%,特异度为87.39%和98.28%；阳性预测值为70.83%和93.33%；阴性预测值为91.07%和87.75%；准确性为85.00%和88.75%。且DSCT与SPECT两者检查具有显著相关性(P<0.01)。
作者：李文佳；江勇；李治；宋巍；吕梁 刊期： 2013年第11期
目的描述孕期乙型肝炎病毒(HBV)携带者和HBV宫内感染的新生儿HBV标志物的检测情况,分析孕期母体携带HBV与子代HBV宫内感染之间的关系,评估孕晚期注射乙肝免疫球蛋白预防新生儿HBV宫内感染的效果。方法在产前常规检查中,应用酶联免疫吸附试验检测合肥地区3415例孕妇的血清HBV标志物,将114例HBV携带孕妇作为研究对象；在孕妇产后采集新生儿脐带血,检测HBV标志物。采用字2检验分析孕期不同HBV感染状况和孕晚期是否注射乙肝免疫球蛋白与新生儿宫内感染 HBV之间的关系。结果共计检测了3415例孕妇,HBV携带率为3.34%(114/3415)。在112例HBV携带孕妇所分娩的112例活产新生儿中,有33例新生儿发生了HBV宫内感染,感染率为29.46%。3种常见的孕期HBV感染类型的孕妇其新生儿发生宫内HBV感染的发生率差异无统计学意义。有乙肝免疫球蛋白(HBIG)接种史的孕妇所分娩的新生儿HBV宫内感染发生率(13.16%)明显低于无HBIG接种史的孕妇所分娩的新生儿(37.83%),差异有统计学意义(X2=7.36, P<0.01)。结论合肥地区孕妇 HBV 携带率较低；孕妇HBeAg阳性可能是HBV宫内感染的危险因素；孕晚期注射HBIG能有效降低子代HBV宫内感染的发生率。
作者：盛敏玲；潘健；高婷；方益荣；张国庆；张志华；吴娟；郝加虎 刊期： 2013年第11期
目的调查上海市普陀区变应性鼻炎(AR)患者的吸入性变应原特点,为AR的诊治提供临床参考。方法利用15种标准化皮肤点刺液对631例疑似AR的患者进行皮肤点刺试验(SPT),将诊断为AR的355例患者分为4个年龄段(3~17岁,18~39岁,40~59岁,≥60岁),分析致敏的变应原特点。结果屋尘螨和粉尘螨为常见的变应原,阳性率分别为49.9%和49.8%；65.4%的AR患者对≥3种变应原过敏,18~39岁的AR患者对多种变应原过敏的比例高(71.2%),≥60岁的AR患者对多种变应原过敏的比例低(40.7%),差异有统计学意义(X2=10.839, P =0.013)；粉尘螨和屋尘螨SPT结果呈正相关(rs >0.600,P<0.01)；粉尘螨和屋尘螨SPT反应程度与过敏的变应原种类数呈正相关(rs >0.300,P<0.05)。结论粉尘螨和屋尘螨是引起AR的重要致敏原,机体对尘螨过强的超敏反应可能会增加其他变应原致敏的风险。
作者：庞权；白素娟；金姝；闫佩毅；周玉贞；唐颖；冯会杰；杨杨；周焕；李文秀 刊期： 2013年第11期
目的探讨不同程度的精索静脉曲张(VC)对精液质量和精子非整倍体率的影响及手术后的改善情况。方法34例患者经彩色多普勒超声(CDFI)诊断为VC并按不同曲张程度分为亚临床型(SVC)(n=8)、VC I级(n=13)、VCII级(n=7)和VCⅢ级(n=6)，分析精液指标，应用X、Y、18号染色体探针对其进行多色荧光原位杂交实验，检测精子染色体非整倍体数目。 VC II级和VC Ⅲ级患者行腹腔镜精索静脉高位结扎术，术后3个月复查精液指标及非整倍体数目并与术前比较。结果VC II组与VC Ⅲ组非整倍体率显著高于对照组(P<0.01)；VCII组及VCⅢ组患者行手术治疗后，精子密度、活率、活力均较术前改善(P<0.01)，非整倍体较术前显著下降(P<0.01)；Pearson相关分析显示曲张程度与非整倍体数呈正相关。结论VC导致精子染色体非整倍体增多，手术对VC II级和VC Ⅲ级患者精液质量有较明显改善作用，同时在一定程度上降低了非整倍体率。
作者：王琦；于德新；徐秀民；褚晗；王大明；谢栋栋；王毅；张涛；闵捷；张志强 刊期： 2013年第11期
目的研究多囊卵巢综合征(PCOS)合并不孕症患者的临床特征，并探讨可能影响到患者获得社会支持的因素，从而为治疗提供社会层面的支持，帮助患者改善社会相处和减缓精神紧张。方法采用整群随机抽样的办法抽取在生殖中心就诊的PCOS合并不孕症患者208例。被调查患者在专职调查员的指导下，完成一般资料调查问卷、社会支持量表(SSRS)的填写，使用SPSS 16.0软件进行分析。结果一般资料调查问卷显示：PCOS合并不孕症患者的平均年龄为(26.7±3.2)岁；肥胖率达到19.8%，远高于普通人群的10.0%(P<0.05)。 SSRS分析显示，在文化程度、职业、家庭月平均收入3个方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCOS合并不孕症患者的肥胖率高于普通人群，社会支持评分在不同职业、收入、文化程度人群中存在差异，应该针对不同的人群予以不同的社会帮助。
作者：罗桂英；陈嫦娥；陈媛；辛利红；潘发明 刊期： 2013年第11期
目的构建瑞替普酶(r-PA)融合蛋白的原核表达体系，并研究DsbA、DsbC、pKJE7、pGro7、pTf16等分子伴侣对其复性的影响。方法将r-PA基因克隆到表达载体质粒PET-32a中，通过异丙基硫代半乳糖苷( IPTG)诱导，在宿主菌E. coli BL21中进行表达。在复性时分别添加不同分子伴侣，研究不同分子伴侣对融合蛋白体外复性的影响。结果 SDS-PAGE和Western blot 结果表明 r-PA 融合蛋白正确表达，分子伴侣DsbA、pKJE7、pTf16对融合蛋白的复性有明显效果，体外溶圈实验表明复性后的r-PA具有纤溶活性。结论分子伴侣能有效帮助r-PA融合蛋白的复性。
作者：王伟；邹文艺；范清林；宋礼华 刊期： 2013年第11期
目的观察非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α) mRNA的动态表达,探讨PGC-1α在大鼠NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠42只随机分为高脂组及对照组,高脂组给予高脂饲料喂养,对照组以普通饲料饲养,分批于实验第2、4、8周各处死7只大鼠,检测血清中空腹血糖(FBG)及空腹胰岛素(FINS)并计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI),反转录PCR(RT-PCR)法检测肝脏PGC-1α mRNA表达。结果高脂组大鼠肝脏PGC-1α mRNA表达量在第4周及第8周较同期对照组明显增加(P<0.01),并且随着喂养时间的延长,其值较其前期差异均有统计学意义( P <0.05,P <0.01)。高脂组8周 PGC-1α mRNA水平与FBS、FINS及FI-RI均呈正相关(r=0.618、0.853、0.776,P<0.01)。结论高脂饮食诱导NAFLD大鼠肝组织PGC-1α的表达随着喂养时间的延长逐渐增加,且与胰岛素抵抗密切相关。
作者：蒋建华；管石侠；张宝；唐芸；程靖；侯丽丽；叶良平；徐辉 刊期： 2013年第11期
80例宫腔粘连患者行宫腔镜下粘连分离术后,随机均分为对照组和研究组,对照组术后宫内放置圆形节育器、气囊导尿管,并口服雌孕激素周期治疗,研究组在此基础上术后连续5 d皮下注射重组人生长激素4 U。术后3个月后行宫腔镜检查并取环,了解宫腔形态,并随访子宫内膜厚度及月经改善情况。结果显示：①两组内膜改善情况,研究组内膜增加(1.73±0.83)mm,对照组内膜增加(1.10±0.66) mm,两组比较差异有统计学意义(t=3.73,P<0.01)；②对照组术后再粘连率为45.0%,研究组术后再粘连率为32.5%,两组比较差异无统计学意义；③两组在月经改善情况上差异无统计学意义。表明生长激素具有促进宫腔粘连分离术后子宫内膜生长的作用。
作者：胡银逢；卫兵；宋恩学 刊期： 2013年第11期
回顾性分析应用耳后区皮瓣的不同转移方式修复耳部软组织缺损25例。应用耳软骨打孔转移修复耳甲腔缺损5例；顺行岛状皮瓣修复耳下部缺损7例；反流轴行岛状皮瓣修复耳上部缺损4例；皮下蒂皮瓣修复耳后缺损9例。皮瓣切取范围(1.3 cm×1.2 cm)~(4.6 cm×3.0 cm)，供瓣区直接拉拢缝合或游离植皮修复。术后25例皮瓣均成活良好，切口I期愈合。25例患者随访2~18个月，各皮瓣修复后外形均满意。
作者：李红卫；丁浩；王亚菲；赵永健；赵全 刊期： 2013年第11期
目的探讨男性不育患者精子DNA完整性和染色体畸变的发生率及临床意义。方法精液标本来自正常已育男性及不育患者,以WHO标准行精液分析,根据结果及不育史分为对照组、少精症组、弱精症组、少弱精症组。精子染色质扩散实验分析精子DNA损伤率和荧光原位杂交实验分析精子染色体(18、X、Y)非整倍体率。结果少精症组、弱精症组和少弱精症组精子DNA损伤率对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；不育组的精子染色体(18、X、Y)非整倍体率与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05)；精子DNA损伤率与染色体非整倍体率呈明显正相关(r=0.453, P=0.008)。结论不育患者精子DNA损伤率和染色体非整倍体率较对照组明显升高且呈显著正相关。在减数分裂过程中,精子DNA损伤可能是导致非整倍体精子形成的重要原因之一。
作者：徐秀民；于德新；张志强；谢栋栋；王毅；张涛；陈磊；闵捷；丁德茂；邹慈 刊期： 2013年第11期
目的研究秀丽线虫野生株系N2缺氧时的差异蛋白质,为进行线虫在缺氧环境下的应答机制研究奠定基础。方法同步化培养N2株系的线虫,培养至L4期时物理缺氧10 h(0.2% O2)后,提取总蛋白,采用双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)分离和串联质谱分析,搜索线虫数据库,鉴定蛋白种类并进行分析。并采用突变株系(prdx-2, prdx-3)进行了4、6、8、10、12 h的缺氧实验研究。结果质谱成功鉴定了其中的5个与对照有显著差异的蛋白质(ratio>2.0,P<0.05),包括2个上调( PRDX-2、 PRDX-3)和3个( RPL-7、H28O16.1、VHA-12)下调的蛋白。突变株系的缺氧存活率实验进一步验证了蛋白质组学的结果,也显示了PRDX-2和PRDX-3在抗缺氧中起重要作用。结论蛋白质组学的方法为线虫缺氧的研究提供了有参考价值的数据,缺氧10 h后,线虫中变化的蛋白质与能量、翻译和抗氧化有关,为进一步研究缺氧时的应答机制奠定了基础。
作者：李华玲；孔玲；秦艳；刘丹丹；夏靖；胡竹林；陈文飞 刊期： 2013年第11期
目的检测驱动蛋白重链成员2A(Kif2a)在男性精液中的表达，探讨Kif2a在不育男性精液中表达的意义。方法收集72例新鲜精液样本液化，经过离心等预处理后用TRIzol试剂提取精液RNA并逆转录成cDNA。运用实时荧光定量PCR检测精液中总Kif2a mRNA的量，并选取管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为内参对照。样本依据精液临床检测指标分为异常组和正常组。结果实时定量PCR法检测所得结果显示Kif2a mRNA存在于人类精液中。对Kif2a mRNA进行相对定量分析显示，在精子存活率、精子密度、精子活动率(a+b+c级精子)方面，异常组中 Kif2a mRNA的表达量较正常组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论结合Kif2a在男性异常和正常精液中的差异性表达，其在精子的生成和受孕方面是否存在潜在的影响值得进一步探索。
作者：周浩；董云华；孙杨；李红玲；沈涛；严新民 刊期： 2013年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
