皖湘;孙自敏;刘会兰;耿良权;王兴兵;丁凯阳;童娟;汤宝林;王祖贻
目的 重组质粒转染HeLa细胞以探讨Grim-19表达水平的变化对HeLa细胞中端粒酶活性的影响.方法 将重组质粒p3×flag-myc-cmv-24-Grim-19(简写Grim-19)通过脂质体转染至HeLa细胞,48 h后通过Western blot检测Grim-19、htert、P16、P21的表达情况,同时检测HeLa细胞衰老和端粒酶活性.结果 转染后可见flag的表达及htert的表达降低及P16、P21的表达升高,细胞衰老增加,增殖减弱及端粒酶活性的降低.结论 在子宫颈癌细胞株HeLa中Grim-19具有调控端粒酶活性和细胞衰老的作用.
作者:杨霞;王青元;朱靖;冯定庆;朱园园;周颖;凌斌 刊期: 2012年第10期
回顾性分析异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的适应证、治疗时机、移植物的选择、移植预处理方案的选择和移植疗效.22例患者中21例获得造血重建,1例非血缘脐血移植(UCBT)未获得植入的成人患者,于非血缘脐血移植(UCBT)后38 d进行母亲HLA4/6相合的外周血联合骨髓造血干细胞移植解救治疗获得植入.22例中死亡3例,无1例复发.MDS患者何时进行Allo-HSCT需依据国际预后积分系统(IPSS )对患者分组,评分属于高危组的患者宜在疾病确诊后尽早进行移植,而低危组的患者可在其他药物治疗效果不佳的时候进行;不仅可选择血缘关系的骨髓移植(BMT)和外周血造血干细胞移植(PBSCT),也可进行非血缘人类白细胞共同抗原(HLA)不全相合的UCBT;移植预处理如采用减低强度的方案(RIC)并不影响移植效果.
作者:皖湘;孙自敏;刘会兰;耿良权;王兴兵;丁凯阳;童娟;汤宝林;王祖贻 刊期: 2012年第10期
目的 探讨Graves病甲状腺功能亢进症(简称甲亢)131I治疗前后甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平的变化及与早发甲状腺功能减退症(简称早发甲减)发生的关系.方法 对81例Graves病患者131I治疗前依据TGAb、TPOAb水平分为阳性组(A组,46例)和阴性组(B组,35例),分别检测治疗前与治疗后6个月FT3、FT4、促甲状腺激素(TSH)、TGAb、TPOAb水平.结果 A组治疗前后TGAb、TPOAb抗体水平无明显变化(P>0.05),早发甲减发生率47.8%;B组治疗后较治疗前TGAb、TPOAb水平明显升高(P<0.01),早发甲减发生率22.9%,两组131I治疗后早发甲减发生率有统计学意义(P<0.05).早发甲减患者TSH水平与TGAb、TPOAb呈显著正相关(r=0.405,0.378,P=0.026,0.035),与甲状腺大小有一定的相关性(r=0.366,P=0.051).结论 治疗前高水平的TGAb、TPOAb早发甲减发生率明显增高,尤其是甲状腺较小者.TGAb、TPOAb阴性者131I治疗后抗体水平升高,其机制有待进一步临床观察.
作者:李春燕;李素梅;方星星;王菊梅;荆春艳;姜妍芳;金晓毛;任安;陈超;董林 刊期: 2012年第10期
83例肝癌患者的95个病灶接受经皮肝穿射频消融(RFA)治疗,行超声造影检查评估经皮RFA的疗效,并随访其复发情况.RFA治疗后,<3 cm的病灶完全消融率95.4%,≥3 cm的病灶完全消融率76.9%;单个病灶的完全消融率87.7%,多发病灶的完全消融率71.4%.RFA治疗肝癌的完全消融率与病灶的大小有关.
作者:刘力;隋秀芳;叶显俊;刘卫勇;葛勇胜 刊期: 2012年第10期
目的 探讨维生素D类似物EB1089对肝癌细胞株增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 体外培养肝癌细胞株MHCC97H,用不同浓度的EB1089分别培养不同的时间段.用四唑蓝比色实验(MTT)检测细胞的存活和生长,用流式细胞仪检测细胞的凋亡,用Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力,用RT-PCR方法检测雌激素受体α(ERα)、核转录因子p65(NF-κB p65)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA的表达.结果 EB1089可以抑制肝癌细胞株的增殖,诱导肝癌细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞的侵袭迁移.同时,EB1089增加MHCC97H细胞中ERα mRNA表达,下调NF-κB p65和 MMP-9 mRNA表达.结论 EB1089可能通过ERα途径抑制肝癌细胞株的增殖、侵袭迁移能力,诱导其凋亡.
作者:盛茂林;许戈良;荚卫东;任维华;刘文斌;张传海;周腾 刊期: 2012年第10期
选取402例服用拉米夫定后出现乙型肝炎病毒(HBV)DNA反弹的慢性乙型肝炎 (CHB) 患者血清样品,应用荧光PCR法定性检测YMDD变异情况.402例中有309例(76.87%)检测出YMDD变异,其中120例为YVDD变异,74例为YIDD变异,115例为YVDD+YIDD联合变异;309例YMDD变异患者中同时检测出变异株与野生株占69.26%(214/309),仅检测出变异株占30.74% (95/309).另外,93例为YMDD野生型阳性.
作者:方立庆;张振华;梁佳佳;杨玥;孙丙虎;张黄醒;赵小苗;张亚飞;李旭 刊期: 2012年第10期
目的 探讨3.0T磁共振动态增强(DCE-MRI)及弥散加权成像(DWI)在前列腺癌(PCa)疾病诊断中的应用价值,以及各参数与前列腺特异性抗原(PSA)相关性分析.方法 回顾性分析行前列腺MRI检查的患者62例,所有病例均以病理学诊断为金标准,研究对象均行MR常规、DCE-MRI及DWI检查.分析前列腺增生(BPH)及PCa的DCE-MRI信号变化、时间-信号强度曲线(TIC)特征及各参数相对值、表观扩散系数(ADC)值的变化情况,并利用SPSS软件进行各参数与PSA相关性分析.结果 BPH及PCa的平均达峰时间(Tmax)、大增强斜率(MSI)及信号增强率(SER)分别为(82 903.45±26 594.31) ms vs (69 073.56±17 438.00) ms、(188.31±36.86)vs(215.69±59.66)、(109.14±13.78) vs (121.71±20.82),两者间比较差异有统计学意义(P<0.05);BPH的TIC多表现为Ⅰ型或Ⅱ型,PCa的TIC多表现Ⅲ型,两者间比较差异有统计学意义(P<0.05).BPH与PCa平均ADC值及指数化表观扩散系数(EADC)值分别为(1.0±0.24)×10-3 mm2/s vs (0.7±0.22)×10-3 mm2/s、(0.36±0.09)×10-3 mm2/s vs(0.49±0.09)×10-3 mm2/s,两者间比较差异有统计学意义(P<0.05).DCE-MRI对PCa诊断的敏感性、特异性、准确性分别为63%、89%、74%,DWI对PCa诊断的敏感性、特异性、准确性分别为77.8%、82.9%、80.7%,两种检查方法相结合诊断PCa的敏感性、特异性、准确性分别为94%、85%、94%.PSA与ADC呈明显负相关.结论 DCE-MRI及DWI对PCa有很好的诊断价值,联合应用可明显提高PCa的诊断及鉴别诊断率.ADC值有助于对PCa的生物学特性进行初步评估.
作者:潘云雷;张辉;李祖银;周芳芳;孟晓梅 刊期: 2012年第10期
采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞系,第5、10、15天拍照,观察干细胞球的生成.悬浮培养第5天可以开始观察到悬浮细胞球形成,细胞球形成效率为(0.6±0.5)%,第10天时细胞球形成效率为(2.4±1.2)%,比第5天时明显增多,培养第15天时细胞球形成效率达到(3.8±1.8)%,MCF-7悬浮成球细胞中侧群细胞(SP) 细胞含量为(3.9±1.4)%,高于常规培养的MCF-7贴壁细胞(1.1±0.5)%(P<0.05),采用无血清悬浮细胞聚球培养法可以从MCF-7细胞系中简便、高效地富集乳腺癌干细胞.
作者:孙鑫;李平;张梅;张锋利;单建国 刊期: 2012年第10期
回顾性分析36例HELLP综合征的实验室指标、临床表现及母婴并发症,其中Ⅰ型HELLP综合征22例,Ⅱ型HELLP综合征14例,Ⅰ型HELLP综合征天门冬氨酸转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)数值高于Ⅱ型,并发弥漫性血管内凝血(DIC)和胎儿生长受限(FGR)的概率高于Ⅱ型.Ⅰ型HELLP综合征的病情较Ⅱ型严重,PLT计数减少可增加母婴并发症的发生率.
作者:曲皖君;张婉莹;周颖;陈玲 刊期: 2012年第10期
目的 探讨孕前体重和孕期增重对新生儿出生体重及身长等的影响,为降低巨大儿发生率、减少妊娠并发症提供临床资料.方法 用自编问卷调查929例足月单胎产妇的孕前体重和孕期增重,随访至分娩.记录新生儿出生体重、身长、头围、胸径等体检数据,运用SPSS软件分析孕前体重、孕期增重与新生儿出生体重等的关系.结果 ①孕前低体重组新生儿出生体重、身长、头围、胸径、巨大儿发生率均明显低于理想体重组和超重组(P<0.05).② 孕期增重过多组巨大儿发生率、头围、胸径均明显大于增重不足和增重正常组(P<0.01),而3组间新生儿出生体重,身长两两比较差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),即孕期增重越多新生儿出生体重越大,身长越长.③ 孕前低体重和正常体重的孕妇随着孕期增重过多,其新生儿出生体重、身长、头围、胸径明显增大.结论 孕前体重,孕期增重均与新生儿出生体重及身长等发育指标有关.孕妇应根据自身条件注意调整孕期的增重范围,以便获得良好的妊娠结局.
作者:杜秋菊;李李;韩艳萍;张倩;张琳;博庆丽;赵奇红;王缨 刊期: 2012年第10期
目的 采用重组人血管内皮抑制素(恩度)联合经典化疗方案治疗临床分期Ⅲ期以上的恶性肿瘤,观察用药后的疗效及毒副作用.方法 经过病理组织切片检查确诊为恶性肿瘤的患者117例,采用恩度联合无交叉耐药的化疗药物方案治疗,联合用药2周期后评价疗效与不良反应,评估患者治疗开始到无疾病进展时间的生活质量.结果 117例患者在完成联合治疗后按照有关标准进行有效性与安全性评价,其中完全缓解12例,部分缓解30例,疾病稳定58例,疾病进展17例;客观有效率为35.8%,疾病控制率为85.4%.结论 晚期恶性肿瘤患者低下的生活质量得以改善和稳定,且恩度联合化疗使用的毒性低,值得临床上推广应用,但远期疗效仍需进一步观察.
作者:刘梁;戈伟;唐甜;丁万军;石薇;郑永法 刊期: 2012年第10期
目的 探讨对氧磷酶1(PON1)192和55位点的基因多态性与2型糖尿病视网膜病变(DR)关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测184例不同程度视网膜病变的2型糖尿病(T2DM)患者和136例健康对照者(NGT) PON1 Q192R和L55M的多态性.结果 PON1Q192R基因在DR组QQ基因型及Q等位基因频率高于NDR组,差异有统计学意义(P<0.05).但NGT与T2DM比较以及非增殖期糖尿病视网膜病变(NPDR)与增殖期糖尿病视网膜病变(PDR)比较,差异无统计学意义.PON1L55M基因在各组间的分布差异无统计学意义.结论 PON1Q192R基因多态性可能与DR的发生有关,但与DR的严重程度无关,Q等位基因是DR的独立危险因素,PON1L55M基因多态性与DR无显著相关性.
作者:郑雨钱;雷远;龚健杨;钟兴;潘天荣 刊期: 2012年第10期
用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化,并给予瑞舒伐他汀建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中硒的含量.正常组、高脂组和治疗组硒在肝脏组织中含量分别为3.307 5、2.139 1 和1.928 6 mg/kg.给予瑞舒伐他汀治疗后,瑞舒伐他汀组肝脏硒含量比高脂组硒平均含量下降9.84%.
作者:吴允凯;杨信尊;李静;陈悦然;韦文美;顾志红;汪渊 刊期: 2012年第10期
目的 探讨切缘阳性的宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ)患者后继治疗方式的选择,以及分析切缘阳性的影响因素对患者的重要作用.方法 比较78例非保守组与150例保守组宫颈内、外切缘阳性患者的组织病理学结果,同时,将保守组中切缘阳性患者的影响因素进行单因素和多因素分析.结果 ① 非保守组中,宫颈内外切缘阳性的患者发生残余病灶率比较差异有统计学意义(P=0.015).保守组中,宫颈外切缘阳性和宫颈内切缘阳性的患者复发率比较,差异有统计学意义(P=0.038).非保守组与保守组,宫颈外切缘阳性与宫颈内切缘阳性患者复发率比较差异有统计学意义(P=0.037).② 保守组中,单因素分析:是否绝经、宫颈外观、不同手术方式的切缘阳性率比较,差异均有统计学意义.结论 密切随访的宫颈外切缘阳性的CINⅢ患者可仅行宫颈锥切术;绝经后、宫颈病变严重程度、宫颈环形电切术(LEEP)是宫颈切缘阳性的高危因素.
作者:程敏;赵卫东;李青;王晓丽;金夏;夏咏梅 刊期: 2012年第10期
目的 构建点突变型低氧诱导因子-1α(HIF-1α)慢病毒载体,并检测其在常氧条件下的抗降解作用.方法 根据人的HIF-1α基因(NM_001530),对其全长编码区序列进行如下定点突变:803位天冬酰胺突变成丙氨酸,564位脯氨酸突变成丙氨酸,402位脯氨酸突变成丙氨酸.设计并合成3对引物用以导入变异点.PCR扩增序列片段,然后将目的 基因PCR产物连接到载体pEGFP-N1上,构建真核表达载体pEGFP-N1-mutant/HIF-1α.PacI和AscI酶切鉴定后,用LR重组系统将目的 序列重组到慢病毒载体plenti6.3V5-DEST上,构建慢病毒载体Lenti-MT(突变型HIF-1α)及Lenti-WT(野生型HIF-1α).将Lenti-MT、Lenti-WT及Lenti-LacZ(对照组)转染293T细胞后,采用qPCR检测目的 基因的表达.转染后的细胞在低氧条件下(2% O2)培养48 h,然后常氧条件下培养48 h,采用Western blot检测HIF-1α蛋白在不同氧浓度条件下的表达情况.结果 与WT测序结果对比表明MT已被完成.酶切结果证明已成功构建pEGFP-N1-mutant/HIF-1α.qPCR结果显示Lenti-MT组目的 基因表达高于Lenti-WT组,且差异具有统计学意义.低氧条件下,HIF-1α在WT组和MT组中的蛋白表达差异无统计学意义.但常氧条件下培养48 h后,WT组目的 蛋白的表达显著下降,而MT组变化不大.上述结果表明MT具有明显的抗降解作用.结论 成功构建了突变型HIF-1α,慢病毒载体在常氧条件下,Lenti-MT具有显著的抗降解作用.
作者:王彦梅;何家才;邹多宏;朱思姮 刊期: 2012年第10期
目的 探讨射频消融靶区内不同区域灭活效果的差异.方法 36副新鲜离体猪肺分为6个消融时间组进行射频消融,消融过程中记录消融中心区、射频针的中心针针尖区、边缘针针尖区、中心针与边缘针针尖连线的中间区的温度变化,消融结束后在4个消融区域及对照区采集标本,分别HE染色和Annexin V-FITC/PI标记(流式细胞术),计算在不同消融时间作用下不同区域的校正细胞死亡率.结果 消融区域的校正细胞死亡率高于对照区域(P<0.05);在完全消融前,消融中心区的校正细胞死亡率高于3个消融边缘区(P<0.05);在短时间消融组(5~15 min),射频针的中心针针尖区与边缘针针尖区的校正细胞死亡率均高于中心针与边缘针针尖连线的中间区(P<0.05);而在消融时间达到20 min后,3个边缘消融区消融效果的差异无统计学意义;在完全消融前,各消融区域的校正细胞死亡率会随着时间的延长而增加;当消融时间达到30 min时,4个消融区域消融效果的差异无统计学意义,均可达到完全消融.结论 在完全消融前,消融中心区的消融效果要优于消融边缘区;消融边缘区之间在短时间消融时存在消融效果的差异,这种差异会在达到一定的消融时间后消失;给予足够的消融时间,消融靶区可达到完全消融.
作者:陈英凯;吴启玉;黄乃祥 刊期: 2012年第10期
目的 拟构建人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)凝血酶原酶基因RNA干扰慢病毒载体,为调控人FGL2凝血酶原酶表达水平提供有利的工具.方法 根据人FGL2凝血酶原酶基因的mRNA序列选择4条靶序列,设计合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切后的pGCSIL-GFP 载体连接产生FGL2慢病毒载体,采用PCR及测序鉴定,应用Western blot 技术外源性筛选干扰效率高的有效靶序列.用慢病毒包装系统pGCSIL-GFP、pHelper1.0和pHelper2.0共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以系列稀释法测定病毒滴度.结果 PCR扩增和测序结果显示,人FGL2凝血酶原酶核苷酸链序列插入正确,外源性筛选确定一条干扰效率高的有效靶序列.利用筛选确定的有效靶序列,包装产生慢病毒,其浓缩病毒悬液的滴度为1×109 TU/ml.结论 证实实验成功构建了FGL2基因RNA干扰慢病毒载体.
作者:王慧方;郑振中 刊期: 2012年第10期
目的 研究去甲二氢愈创木酸(NDGA)对骨肉瘤MG63细胞株黏附、迁移和侵袭特性的影响,并初步探讨其相关机制.方法 不同浓度的NDGA处理MG63 细胞,用CCK-8法、细胞划痕试验和Transwell小室模型分别测定其黏附力、迁移力和侵袭力,Western blot法检测MG63细胞基质金属酶(MMPs)表达量的变化.结果 NDGA明显抑制骨肉瘤MG63细胞株黏附、迁移和侵袭力(P<0.05);NDGA抑制MG63细胞的黏附、迁移和侵袭力呈剂量依赖性;Western blot检测表明MG63细胞MMP-2和MMP-9 的表达明显下调.结论 NDGA可抑制骨肉瘤MG63细胞的体外黏附,迁移和侵袭,这种抑制效应可能是通过减少骨肿瘤细胞MMP-2和MMP-9的表达来实现.
作者:王京亮;王亮;王小开;金大地 刊期: 2012年第10期
目的 分析中老年人群人体成分与血脂及肝肾功能指标之间的相关性.方法 选择健康体检中心体检者403例,排除严重感染、心肌梗死病史、肝肾功能不全、肿瘤病史及无法独自站立检查者等.通过Biospace Inbody 720人体成分分析仪进行人体成分测定,主要包括:体质指数(BMI)、矿物质、蛋白质、体脂肪、腹围、臀围及内脏脂肪区域(VFA)等指标.同时收集血清测定血脂及肝肾功能相关指标.结果 BMI、体脂肪、腹围、臀围及VFA不受性别影响.BMI、体脂肪、腹围、臀围及VFA与总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)呈正相关,与高密度脂蛋白(HDL)呈负相关;剔除年龄、性别因素后,对人体成分与血脂各项指标进行偏相关分析,上述指标仍具有统计学意义(P<0.01).BMI、腹围、臀围及VFA与谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)呈正相关;剔除年龄、性别因素后,人体成分结果仍与ALT和AST具有良好的相关性,但相关系数有所减小(P<0.01);人体成分各项指标与肌酐(Cr)有良好的相关性.结论 中老年人体成分与血脂、肝肾功能水平是密切相关的.通过对人体成分的分析,可早期发现人体成分的异常,指导中老年人群健康的生活方式,尽早预测、发现营养相关性疾病,协助临床上的诊断.
作者:唐芸;张宝;管石侠;蒋建华 刊期: 2012年第10期
目的 探讨伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶(NOS )阳性神经元及乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性神经元的改变.方法 20只SD大鼠随机均分为假手术组与SAP组,用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法制作大鼠SAP模型.24 h后,测定假手术组与SAP组小肠推进比、结肠蠕动频率、粪便含水量、胰腺病理评分及结肠蠕动频率与NOS、ChAT表达比例相关性分析.制备结肠黏膜下神经节全层标本,运用免疫荧光技术观察两组黏膜下神经节,NOS阳性神经元及ChAT阳性神经元的改变.结果 与假手术组相比,SAP组结肠蠕动频率减慢(P<0.01)、小肠推进比减少(P<0.01)、粪便含水量降低(P<0.01),胰腺病理评分增高(P<0.01),其结肠黏膜下神经节中ChAT阳性神经元表达下调(43.85%±13.58% vs 16.27%±6.97%,P<0.05),但NOS阳性神经元无明显改变(22.49%±5.14% vs 24.36%±4.79%,P>0.05).相关性分析显示ChAT阳性神经元与结肠蠕动频率呈正相关(r=0.738,P<0.01).结论 SAP伴有胃肠动力障碍,其发病机制可能与ChAT阳性神经元或其他神经元的重塑有关.
作者:林中;袁园;李小玲;程晓雯;张诚;郑清华 刊期: 2012年第10期