学术投稿

流式细胞术检测中性粒细胞产生活性氧方法学探讨

蔡辉;姜丽娜;李柏青

关键词:中性粒细胞, 流式细胞术, 活性氧, 双氢罗丹明123, 2′, 7′-二氯荧光素二乙酸酯
摘要:目的:建立用流式细胞术检测人外周血中性粒细胞(polymorphonuclear cells,PMN)产生活性氧(reactive oxygen species,ROS)的方法.方法:健康人外周全血或用Percoll分离的PMN,加探荧光针双氢罗丹明123(DHR123)或2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)作用15 min,再加佛波醇酯(phorbo 12-myristate 13-acetate,PMA)于37 ℃作用5~90 min后,用流式细胞仪检测PMN内的罗丹明123(rhodamine 123,RHO)或氧化型二氯荧光素(dichlorofluorecin,DCF)的荧光强度,以反映PMN内ROS产生的水平.结果:以DHR123为荧光探针时,PMA刺激全血或分离PMN产生ROS的时间动力学相似,在37 ℃作用5~60 min ROS量呈递增趋势,且在60 min左右达到峰值,60~90 min时渐下降.以DCFH-DA为荧光探针时,PMA刺激全血PMN产生ROS,在37 ℃作用5 min时反应生成ROS量达到峰值,随后出现明显递减趋势,而PMA刺激分离PMN产生ROS在5~30 min逐渐增高并在60~90 min达平台期.实验中还发现甲醛试剂可以降低RHO的荧光强度.结论:采用流式细胞术检测PMN产生ROS是一种简便、可靠、稳定的方法.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 老年人结肠癌伴急性肠梗阻37例诊治分析

    目的:探讨老年人结肠癌伴急性肠梗阻的有效诊治方法.方法:对37例老年人结肠癌伴急性肠梗阻行急诊手术治疗,其中一期肠切除吻合22例;一期切除吻合、近端结肠造瘘8例;近端结肠造瘘、二期手术切除吻合5例;Hartmann手术2例.结果:37例均治愈,无围手术期死亡.术后吻合口瘘1例,切口感染3例,肺部感染1例, 腹腔感染1例.结论:早期诊断和加强围手术期处理,正确把握手术适应证,结肠癌并急性肠梗阻行一期切除吻合是安全可行的.

    作者:杨功安;王宜轩;蒋磊;孙发缔 刊期: 2010年第06期

  • 临床护理路径在病毒性脑炎患儿护理中的应用

    目的:探讨临床护理路径(clinical nursing pathway,CNP)对病毒性脑炎患儿护理质量的影响.方法:将119例病毒性脑炎患儿随机分为CNP组(59例)和对照组(60例).对照组采用一般的护理方法,CNP组采用CNP护理方法.结果:CNP组患儿及家长的满意度高于对照组(P<0.001),并且CNP组的护理缺陷低于对照组(P<0.05).结论:CNP的程序化和标准化能使护理由被动变为主动,使患儿获得较佳的护理服务,提高临床护理质量.

    作者:戴芳 刊期: 2010年第06期

  • HA与CAG方案治疗老年人急性非淋巴细胞白血病疗效比较

    目的:观察三尖杉酯碱+阿糖胞苷(HA)与阿克拉霉素+阿糖胞苷+重组人粒细胞集落刺激因子(CAG)方案治疗老年人急性非淋巴细胞白血病(acute non-lymphocytic leukemia,ANLL)的疗效.方法:将32例老年人ANLL患者随机均分为HA与CAG方案组,比较两组患者的疗效.结果:CAG方案组患者的完全缓解率为56.3%, HA方案组为43.8%,两组总有效率分别为68.8%和62.5%,差异无统计学意义(P>0.05).结论:CAG化疗方案比HA方案更适于老年ANLL患者,值得临床推广使用.

    作者:冯玉虎;黄明;郑顶运 刊期: 2010年第06期

  • 131I治疗甲状腺功能亢进症合并肝功能损害71例疗效观察

    目的:探讨放射性131I治疗甲状腺功能亢进症(甲亢)合并肝功能损害的临床价值.方法:对71例甲亢合并肝功能损害患者的临床资料进行回顾性分析.结果:131I治疗后甲状腺激素水平和肝功能各项指标均明显改善,与治疗前差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01).治疗后6个月,59例甲亢治愈,61例肝功能完全恢复正常,10例肝功能指标明显下降,5例出现甲状腺功能减退症.结论:131I是甲亢合并肝功能损害安全有效的治疗方法.

    作者:刘恒超;李卫鹏;申勇;胡永全;王明明 刊期: 2010年第06期

  • 曲马多超前镇痛对经肛门手术实施全凭静脉麻醉的影响

    目的:观察曲马多超前镇痛用于全凭静脉麻醉下经肛门手术的麻醉安全性和术后镇痛的效果.方法:将60例ASA Ⅰ~Ⅱ级在全凭静脉麻醉下经肛门手术病例随机分成A、B两组,每组30例.A组芬太尼3 μg/kg、丙泊芬2~3 mg/kg诱导,以丙泊酚6~10 mg·kg-1·h-1持续输注维持麻醉.B组诱导前静脉给予曲马多1.5~2 mg/kg,3~5 min后以芬太尼1.5 μg/kg、丙泊芬2~3 mg/kg诱导麻醉,维持麻醉同A组.采用疼痛视觉模拟评分法(VAS)对患者出室前以及术后8 h内疼痛和镇静进行评分并记录恶心、呕吐等不良反应.结果:两组均顺利完成手术,A组麻醉后需用血管活性药物者9例,B组麻醉后需使用血管活性药物者1例,明显少于A组(P<0.01).B组出室前及术后6 h内镇痛效果优于A组,VAS显著低于A组(P<0.05~P<0.01).结论:曲马多超前镇痛在经肛门手术静脉全麻中运用,术后6 h内具有较好的镇痛效果,可减少术中芬太尼的用量至1.5 μg/kg,具有一定的临床价值.

    作者:顾明红;李浪平;朱婵;李传明;邵逸 刊期: 2010年第06期

  • 乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞的原代培养

    目的:探讨一种简便、可靠的乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞培养方法.方法:以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁分离法收集、培养乳鼠心肌细胞和成纤维细胞.普通光学显微镜观察心肌细胞和成纤维细胞的基本特征及生长特性的变化.结果:心肌细胞12 h基本贴壁、1~3天形成细胞簇并出现同步搏动,心肌细胞纯度为93%;心肌成纤维细胞第3~6代细胞生长良好,纯度达98%以上.结论:建立的乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞体外培养方法是成熟、可靠的.

    作者:张乃菊;陈天平;祝晓光 刊期: 2010年第06期

  • 护理监测对膝部骨折术后康复训练的效果观察

    目的:探讨护理监测下的康复训练对膝部骨折术后膝关节功能恢复的影响.方法:将60例膝部骨折患者随机均分为治疗组和对照组.治疗组患者在接受护理监测下进行康复训练,对照组为门诊随访患者.结果:膝关节功能评定和HSS评分治疗组均优于对照组(P<0.05和P<0.01).结论:在护理监测下的康复训练效果明显优于无护理监测的康复患者.

    作者:陈剑青;严文琴;李小六 刊期: 2010年第06期

  • 吸氧器湿化液医院感染现状及解决途径

    氧疗是临床常用的护理技术及抢救治疗手段[1].氧气湿化液的使用可避免干燥的氧气对呼吸道黏膜的刺激,提高氧疗效果和患者的舒适度[2].但是,由于结构设计上的原因,传统的吸氧器难以根本解决细菌污染问题,是呼吸道医院感染的潜在传播源.

    作者:高人焘 刊期: 2010年第06期

  • 手足口病肺部并发症的X线影像表现分析

    目的:探讨儿童手足口病肺部并发症的X线影像表现特点.方法:对64例临床诊断为手足口病患儿的胸部X线CR片进行分析.结果:64例中,肺部X线表现正常22例;异常42例,其中有37例肺纹理模糊、肺纹理间散在斑点状及斑片状致密影,肺叶实变1例,肺毛玻璃样变4例.结论:手足口病出现肺部并发症胸片X线片上有明显异常表现,能了解肺部并发症的程度并指导临床治疗.

    作者:陈亚明;李猛;刘连城;吴追文;马进 刊期: 2010年第06期

  • 食管癌研究现状综述

    食管癌是我国常见的消化道肿瘤,在全国恶性肿瘤死亡总数中占22.34%,仅次于胃癌,居第二位.现就近几年食管癌的研究现状作一综述.1 病因 至今食管癌病因不明,一般认为其发病与食物粗糙、饮食过快、饮酒、吸烟、精神作用、遗传以及食管炎等因素关系密切.

    作者:高峰 刊期: 2010年第06期

  • 湿性愈合法在慢性伤口愈合中的应用观察

    目的:探讨湿性愈合法在慢性伤口愈合中的应用方法及效果.方法:将96例慢性伤口患者随机均分为两组.治疗组除使用翻身床垫、做好皮肤保洁、加强营养支持等常规护理外,给予溃疡粉、溃疡糊敷于创面,溃疡贴、透明贴、泡沫敷料、银离子敷料等湿性敷料覆盖伤口;对照组除常规护理外,伤口处涂擦碘酊,渗液多时给予红外线灯烤创面,纱布换药.统计分析两组治疗1个疗程(14天)的有效率和3个疗程的愈合时间.结果:与对照组比较,治疗组愈合时间明显缩短,治疗有效率明显高于对照组(P<0.01).结论:湿性愈合法治疗慢性伤口效果确切,疗程短,值得临床推广.

    作者:郑普春;陈晓云;李宁 刊期: 2010年第06期

  • RNase P体外靶定切割人巨细胞病毒UL54 mRNA片段研究

    目的:观察大肠埃希菌Rnase P催化亚基M1 RNA 在细胞外水平上对人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)DNA 聚合酶UL54 mRNA的切割效果,探讨核酶作为新型抗病毒制剂的应用前景.方法:针对HCMV UL54 mRNA设计特异性的外部引导序列(external guide sequences,EGSs)EGS-T6,观察其引导M1 RNA特异的细胞外切割活性.结果:在EGS-T6 引导下,大肠埃希菌Rnase P 催化亚基M1 RNA 在细胞外可特异地对靶mRNA 进行有效切割.结论:EGS-T6具备引导M1 RNA 对UL54 mRNA 特异切割的能力,可发展成一种新型抗病毒制剂.

    作者:吕静竹;李月琴;周天鸿 刊期: 2010年第06期

  • 孪生姐妹患成人先天性巨输尿管症1例

    患者系孪生姐妹,35岁.均因反复腰痛、血尿、尿路感染为主要表现于2004年7月至2005年3月就诊我院.均行B超、尿路平片(KUB)+静脉尿路造影术(IVU)、膀胱镜检查+输尿管插管逆行造影.

    作者:李博;顾恒 刊期: 2010年第06期

  • 鲍曼不动杆菌108株β-内酰胺酶检测及耐药分析

    目的:分析鲍曼不动杆菌的医院感染分布特点、产β-内酰胺酶情况和耐药性.方法:对临床送检标本中分离出的108株引起医院感染的鲍曼不动杆菌分布及药敏结果进行回顾性分析,并分别采用硝基头孢噻吩纸片法、双纸片协同法、三维试验检测β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶.结果:鲍曼不动杆菌在重症监护治疗病房、神经外科的检出率分别为63.89%、11.11%;感染部位以呼吸道和手术切口为主,分别为77.78%和12.96%.该菌对临床常用抗生素有不同程度的耐药,发现多重耐药菌96株(88.89%).108株鲍曼不动杆菌中共检出产ESBLs 11株,阳性率为10.19%;头孢菌素酶78株,阳性率为72.22%;产β-内酰胺酶阳性率为100.00%.结论:鲍曼不动杆菌是医院感染重要的条件致病菌,其对抗生素耐药率高,且多重耐药.产β-内酰胺酶为鲍曼不动杆菌耐药的主要原因之一.临床要重视合理使用抗生素,减少多重耐药菌株的产生.

    作者:郭普;乔艳;李峰;郑晶;沈继龙 刊期: 2010年第06期

  • 人白细胞介素23 p19亚基基因的克隆和序列分析

    目的:克隆人白细胞介素-23(IL-23) p19亚基基因.方法:分离健康成年人外周血单个核细胞,常规培养后用脂多糖至终浓度为100 ng/ml刺激增殖12 h,收集细胞并提取细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增人IL-23 p19 cDNA编码基因,克隆至pMD18-T载体,PCR鉴定后进行序列测定.结果:RT-PCR产物电泳结果显示所扩增的基因为734 bp,基因测序显示其序列与GenBank报道的人IL-23 p19基因序列完全一致.结论:成功地克隆了人IL-23 p19cDNA编码基因.

    作者:骆江坤;方强;齐文娟;王雪梅 刊期: 2010年第06期

  • 有精神病性症状老年期抑郁症临床分析

    目的:分析有精神病性症状老年期抑郁症患者的临床特征.方法:将109例老年期抑郁症首发患者根据是否存在精神病性症状分为有精神病性症状组(A组)15例和无精神病性症状组(B组)94例,并对临床资料进行比较分析.结果:A组自杀行为发生率为53.3%,显著高于B组的24.5%,差异有统计学意义(P<0.05),自杀行为的相对危险度为3.53.妄想内容以罪恶妄想40.0%、被害妄想13.3%、疑病妄想6.7%为多见,其中伴有幻听40.0%;A组联合抗精神病药物治疗为20.0%,高于B组的2.1%(P=0.018).两组近期治疗效果差异无统计学意义(P>0.05).结论:首发老年期抑郁症是否伴有精神病性症状者,在自杀行为、治疗方法上存在差异.

    作者:胡艳琼;肖世富;李冠军;周晓琴 刊期: 2010年第06期

  • 中西医结合治疗三叉神经痛45例

    三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)是指在三叉神经分布区反复发作的阵发性、短暂剧烈的疼痛,又称痫性抽搐.据流行病学统计,其患病率为1.83‰[1].此病严重影响着患者的生活、学习和工作,其病因尚不明确,治疗方法虽多,疗效并不理想.

    作者:钱永斌 刊期: 2010年第06期

  • 护理干预用于便携式弹性输液泵的效果分析

    目的:观察护理干预措施在一次性便携式弹性输液泵应用中的临床效果.方法:观察组30例,每天注药,每3 h观察测量,记录泵柱的长度,计算剩余药量,酌情采取护理措施;对照组30例一次性注入所需药物,给予常规护理措施.比较两组泵注完成的准确性及用药后的不良反应.结果:观察组在泵注时间准确性以及用药所致静脉炎方面均优于对照组(P<0.01和P<0.05).结论:积极有效的护理干预措施使药物能安全、匀速、准确地进入体内,减少了用药后的不良反应,提高了患者满意度,值得在临床上推广.

    作者:宋迪;杨贵丽 刊期: 2010年第06期

  • 结节性甲状腺肿73例临床分析

    目的:探讨结节性甲状腺肿的临床诊断和治疗方法.方法:73例结节性甲状腺肿患者术前均行颈部B超检查,术中及术后病理诊断为结节性甲状腺肿.全部接受手术治疗.结果:73例术后1~3年有11例复发,其中7例经二次手术治疗痊愈,4例未行手术.术后出现声音嘶哑4例,甲状旁腺功能低下5例,经保守治疗后恢复正常.结论:术前颈部彩超检查应为常规检查,对肿瘤较大或有吞咽、呼吸困难者应常规行CT检查;手术方式建议选择近全或次全切除术,尽可能保留正常甲状腺组织,同时保护好喉返神经和甲状旁腺.

    作者:王海;朱兆红;马良龙;姜连春;崔经建 刊期: 2010年第06期

  • 心脏型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死早期诊断中的应用

    目的:探讨心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死(AMI)早期诊断中的价值.方法:将60例AMI患者按发病时间不同分为2组,分别在发病0~3 h、4~6 h内检测H-FABP、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量,计算各项指标的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,并与正常对照组和冠心病心绞痛组进行比较分析.结果:0~3 h及4~6 h AMI组的血浆H-FABP浓度均明显高于正常对照组及冠心病心绞痛组(P<0.01),在发病0~3 h及4~6 h内H-FABP诊断AMI的阳性率分别为67.74%和89.66%均高于cTnI(29.03%、62.07%)和CK-MB(0.00%、58.62%)(P<0.01~P<0.05);0~3 h内H-FABP的阳性预测值及阴性预测值为91.30%和86.84%,CK-MB为0.00%和68.69%;在0~3 h及4~6 h内H-FABP诊断AMI的特异度均为97.06%,cTnI和CK-MB的特异度为98.53%和100.00%.结论:H-FABP较cTnI和CK-MB更具有早期诊断AMI的临床应用价值.

    作者:张效明;张鹏;焦贤春;王廷涛;张俊;汪朝晖 刊期: 2010年第06期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院