田茗源；王林辉；余刚；罗红池；李昱
目的 比较两种不同的凝胶层析纯化方法对人轮状病毒(Rotavirus,RV)的纯化效果及其对病毒抗原性和免疫原性的影响.方法 病毒收获液经超滤浓缩后,分别采用Q Sepharose Fast Flow(QFF)离子交换层析和Sepharose 4 Fast Flow (4FF)凝胶过滤层析纯化,采用A群轮状病毒诊断试剂盒(胶体金)检测纯化病毒的抗原性;电镜观察病毒的形态;荧光灶法测定病毒纯化前后的感染性滴度;双抗体夹心ELISA法测定抗原含量;Lowry法测定纯化前后样品的蛋白含量;SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化的病毒蛋白;纯化病毒经灭活后,PAGE分析病毒的核酸带型,免疫小鼠,检测纯化病毒的免疫原性.结果 QFF洗脱峰1和4FF洗脱峰1为RV抗原阳性,电镜观察可见完整的、大小约70 nm的RV颗粒;经QFF和4FF层析纯化后,病毒的感染性滴度分别为7.10和4.50 lgCCID50/ml,终抗原同收率分别为65.3％和11.8％,病毒液总蛋白去除率分别为99.68％和99.52％;SDS-PAGE分析显示,经QFF和4FF纯化的样品未见明显杂蛋白条带,且特异性良好;纯化病毒灭活后,病毒基因组带型未发生改变,且保持了良好的抗原性和免疫原性.结论 两种凝胶层析方法均能纯化人轮状病毒,综合比较,QFF离子交换层析纯化效果优于4FF凝胶过滤层析.
作者：杨星；吴晋元；易山；李鸿；张光明；郜岩；贾琴；赵晓南；孙茂盛 刊期： 2012年第06期
目的 对佛山市南海区首例B群流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病例的流行病学特点进行调查分析,为进一步完善流脑防控策略与措施提供科学依据.方法 查阅病例病案,访视病例家属及其他相关知情人,并进行病例的流行病学个案调查.结果 患儿邱某某,男性,1岁2个月,于2011年7月11日开始发病,因发热、皮疹就诊并住院治疗,经抗感染、对症支持治疗后好转出院;发病前无与同类患者接触史;家庭居住条件和卫生环境一般;实验室检测证实,该病例为B群脑膜炎奈瑟菌感染;药敏试验显示,病原菌株对替卡西林、哌拉西林、美罗培南、亚胺培南、氨曲南、头孢吡肟、头孢哌酮、头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星等均敏感,对复方新诺明、庆大霉素不敏感,对丁胺卡那霉素耐药;经采取综合预防控制措施,未出现二代病例.结论 该病例确诊为佛山市南海区首例B群流脑病例,预防控制B群流脑的关键是采取以加强病原学检测、敏感药物使用为重点的综合防控措施.
作者：曾鸿；陈妙芬；吕海韵；梁洁雅 刊期： 2012年第06期
目的 探讨慢性脑血流灌注不足对老龄大鼠海马组织CA1区ABCA1的表达及血清中总胆固醇(Total cholesterod,TC)和高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)含量的影响.方法 采用持久性双侧颈总动脉结扎法(Permanent occlusion of bilateral common carotid arteries,2VO)致老龄大鼠脑血流灌注不足,术后不同时间采用免疫组化法检测大鼠海马组织CA1区ABCA1的表达,全自动生化分析仪检测大鼠血清中HDL和TC的水平.结果 术后1周,大鼠海马组织CA1区ABCA1表达阳性的细胞数与假手术组相比明显减少(P＜0.01);术后2周,ABCA1阳性细胞数逐渐增多;术后3周,ABCA1阳性细胞数明显增加,数量多,分布广(P＜0.01);术后4周,ABCA1阳性细胞数又开始下降(P＜0.01).术后2周,与假手术组相比,大鼠血清中HDL和TC含量显著升高(P＜0.05),随着缺血时间的延长,又逐渐降低,术后4周与术后2周相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ABCA1和HDL、TC在血管性痴呆模型大鼠海马和血清中呈动态表达,推测ABCA1在血管性痴呆中发挥了保护作用.
作者：王林辉；田茗源；余刚；罗红池；李昱 刊期： 2012年第06期
目的 优化b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)的发酵工艺,以提高Hib荚膜多糖的产率.方法 通过考察初始pH值和葡萄糖浓度对培养液菌体浓度(A550值)及多糖产率的影响,优化摇瓶培养条件;通过考察溶氧百分比、恒定pH值及补加葡萄糖对Hib生长和多糖产率的影响,优化20L发酵罐的培养条件.以优化的发酵工艺连续进行3批Hib发酵,考察优化发酵工艺的稳定性.结果 优化的摇瓶培养条件为:初始pH值为7.2,初始葡萄糖浓度为6g/L.优化的发酵工艺为:溶氧百分比控制在20％,控制pH值恒定为7.2,于接种后5h开始补加200 g/L葡萄糖,速率为3ml/min.与优化前相比,Hib对数生长期由8h延长至10 b左右,菌体终浓度(A550值)由1.5提高至3.4,Hib荚膜多糖产率由63 mg/L提高至96 mg/L.以优化的发酵工艺培养的3批Hib培养物菌体终浓度(A550值)在3.3～3.7之间,多糖产率在92～98 mg／L之间,稳定性较好.结论 优化的发酵工艺可延长Hib对数生长期、促进菌体生长、提高荚膜多糖产率.
作者：李贵凡；李秀梅；魏文进；路福平 刊期： 2012年第06期
目的 在毕赤酵母中表达人溶菌酶( Human lysozyme,hLY)-人碱性成纤维细胞生长因子(Human basic fibroblast growth factor,hbFGF)融合基因,并分析融合蛋白的hLY活性.方法 从人全血中提取总RNA,以其为模板,采用RT-PCR法扩增编码hLY成熟肽的cDNA.利用重叠PCR技术将hly基因与hbfgf基因融合,中间引入凝血酶识别位点序列;将融合基因克隆至载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-hly-thr-hbfgf.电转化毕赤酵母GS115,通过G418抗性筛选高拷贝重组子GS／hly-thrhbfgf,甲醇诱导表达融合蛋白,Bradford法测定重组子发酵液上清中总蛋白含量,改良舒加法检测融合蛋白hHLY-THR-hbFGF的hLY活性.结果 获得的融合基因序列与理论序列一致;经PCR鉴定,融合基因hly-thr-hbfgf已整合入GS115基因组内;表达的融合蛋白相对分子质量约为33 000,发酵液上清中总蛋白含量为196.20 mg/L,融合蛋白的hLY活性为40 U/ml.结论 已成功地在毕赤酵母GS115中表达了具有hLY活性的hHLY-THR-hbFGF融合蛋白.
作者：韦敬土；刘晓彤；邬敏辰；唐存多 刊期： 2012年第06期
目的 调查甲型H1N1流感(简称甲流)流行期间长春市孕妇流感发病情况与甲流疫苗接种意愿.方法 以2009年8月～2010年3月在长春市60个社区卫生服务中心进行围产期保健并建卡的7 080名孕妇为目标人群,根据孕期构成比,分别随机抽取32名孕早期、73名孕中期和75名孕晚期孕妇为调查对象,采用问卷调查法,于2010年3月15～18日通过电话调查该人群急性上呼吸道感染罹患情况、甲流疫苗免费接种政策知晓情况、接种意愿及不愿接种的原因.结果 共获取了179名孕妇的基本信息,其中有12.85％的孕妇愿意接种甲流疫苗,教育程度及高危情况对孕妇接种甲流疫苗的意愿有显著影响(P＜0.001);孕妇对甲流疫苗免费接种信息的知晓途径主要来源于社区防保医生告知(41.73％);不愿意接种甲流疫苗的孕妇主要是担心疫苗的安全性;39.75％不愿意接种甲流疫苗的孕妇表示甲型H1N1流感再次出现高峰期时愿意接种.结论 本次调查结果具有代表性,为今后采取有针对性的干预措施和干预渠道提供了依据,也为下一步重点人群疫苗接种的需求和预算提供了参考.
作者：杨晓智；陶育晖；徐鑫 刊期： 2012年第06期
目的 探讨狂犬病病毒( Rabies virus,RV )aG株在原代鸡胚成纤维细胞上的传代适应性.方法 将RV北京株固定毒10aG株豚鼠脑毒种在鸡胚成纤维细胞上连续传代培养,显微镜观察细胞的形态变化,ELISA检测各代次收获液中的病毒量,取11、21、31代病毒收获液,小鼠脑内毒力测定法检测病毒滴度.利用正交试验筛选适病毒培养条件,以筛选的佳比例接种病毒,绘制病毒生长曲线,并进行特异性及免疫原性检测.结果 狂犬病病毒aG株感染鸡胚成纤维细胞未观察到明显的细胞病变效应,随着传代次数的增加,病毒含量呈上升趋势,11、21、31代病毒收获液的滴度分别为4.0、7.7和7.17 LogLD50/ml;多次传代后,适培养条件为细胞浓度150×104个／ml、接种比例1∶500、血清浓度2％、收获时间为5 d;病毒连续收获3次后,细胞开始脱落,经检测其病毒滴度可达7.0 logLD50／ml以上,中和指数可达8 500,第21代病毒制备成的试制疫苗效价为2.0 IU/ml.结论 RV北京株固定毒10 aG株豚鼠脑毒种可适应于鸡胚细胞培养,为鸡胚细胞狂犬病疫苗的研究奠定了基础.
作者：王远征；卫江波；张国强；王伟伟；马昱；史雨舟 刊期： 2012年第06期
目的 构建携带绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)标签和hNK4基因的重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP,并检测其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响.方法 以pcDNA3／hNK4质粒为模板,采用高保真DNA聚合酶扩增hNK4基因,克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-hNK4,穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5-hNK4-EGFP,经Pac Ⅰ酶切线性化后转染AD-293细胞进行包装,获得重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP,经4轮扩增后,测定病毒滴度;将重组腺病毒感染AD-293细胞,采用RT-PCR及Western blot法检测感染细胞中NK4基因的转录及蛋白的表达;MTT法检测Ad5-hNK4-EGFP对肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)诱导的MDA-MB-231细胞增殖的影响.结果 重组腺病毒质粒pAd5-hNK4-EGFP经Pac Ⅰ酶切鉴定证明构建正确;经包装及4轮扩增后,重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP的滴度可达1.5×1011 PFU／ml;经RT-PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的NK4基因能够在AD-293细胞中表达;HGF可促进MDA-MB-231细胞增殖,而Ad5-hNK4-EGFP可拮抗HGF诱导的MDA-MB-231细胞增殖.结论 成功构建了表达hNK4基因的重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP,其可拮抗HGF诱导的MDA-MB-231细胞的增殖,为进一步深入研究HGF和NK4的功能、相互作用及作用机制奠定了基础,也为乳腺癌的靶向基因治疗提供了一个新的靶点.
作者：匡文斌；成凤；秦晓林；范晓卿；王秦；董晋豫；梁勤东；涂植光 刊期： 2012年第06期
目的 构建携带结核分枝杆菌PPE68基因的重组卡介苗(BCG),并检测其诱导小鼠的免疫应答情况.方法 将带有分枝杆菌复制子OriM的穿梭质粒pBudCE4.1/PPE68/OriM电转化入BCG中,PCR鉴定重组BCG.用鉴定正确的PPE68/OriM重组BCG免疫BALB／c小鼠,每2周免疫1次,共3次,末次免疫后2周采血,分离血清,检测血清中IgG2a、IFNγ和IL-12水平;取脾、肺,分离脾淋巴细胞,检测经特异性蛋白刺激后淋巴细胞的增殖水平;进行脾CD4+和CD8+T淋巴细胞计数,计算CD4+/CD8+比值;检测脾、肺荷菌量并观察组织病理变化.结果 PPE68／OriM重组BCG经PCR鉴定构建正确;其免疫小鼠后,可诱导小鼠血清中IgG2a、IFNγ和IL--12水平显著增加(P＜0.05),脾淋巴细胞增殖显著(P＜0.05),CD4+和CD8+T细胞百分比增加,CD4+／CD8+T细胞比值降低,脾、肺均无菌落生长且未见明显病理改变.结论 成功构建了PPE68基因重组BCG,其免疫BALB/c小鼠能明显提高小鼠的Th1型免疫效应,有利于机体抗结核菌感染.
作者：王静娴；徐蕾；何永林；张壮苗；董志玲；冯鑫；杨春 刊期： 2012年第06期
宫颈癌是导致妇女死亡的第2大癌症.人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染是导致宫颈癌发生的主要原因.HPV是一种具有严格种属特异性、无包膜、双链闭环小型DNA病毒,根据其致病力的强弱,可分为高危型和低危型.在我国,除HPV16、18为常见类型外,HPV31型也是一种发病率较高的类型.本文对HPV31流行病学概况、感染细胞及增值过程、主要蛋白作用机制及其他致癌因素等方面作一综述.
作者：张凝 刊期： 2012年第06期
目的 建立长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)的分离纯化方法.方法 将LR31GF-1毕赤酵母工程菌接种至30 L发酵罐进行高密度发酵,发酵液经离心、超滤浓缩后,采用SPSepharose FF阳离子交换层析、Phenyl SepharoseFF疏水层析、S-100凝胶过滤层析和DEAE Sepharose FF层析对发酵上清液中的表达产物进行分离纯化,测定蛋白浓度,计算蛋白收率,并分析纯化样品的浓度.采用MTT法检测各步纯化样品促NIH-3T3细胞增殖的活性.结果 纯化LR3IGF-1的蛋白总收率为28％,RP-HPLC纯度可达95％以上.随着纯化过程中样品纯度的增加,LR3IGF-1的活性也相应增强,各纯化步骤基本不影响LR3IGF-1的生物活性.结论 初步建立了LR3IGF-1的分离纯化工艺,其简便有效,为LR3IGF-1的规模化生产奠定了基础.
作者：张文明；洪静；林殿海；孙天玮；梁军；黄国团 刊期： 2012年第06期
阪崎肠杆菌( Enterobactor sakazakii,ES)是近年来新发现的一种食源性条件致病菌,主要引起婴幼儿疾病.目前对该菌检测技术的研究除传统的生化检测方法之外,主要集中在分子生物学检测技术上.本文对ES检测技术的研究进展作一综述.
作者：马卫静；李克生；杜惠芬 刊期： 2012年第06期
目的 原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性.方法 采用PCR从甲型副伤寒沙门菌( CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21( DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经分子筛和亲和层析纯化后,免疫BALB／c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中抗BtuB IgG抗体效价,并用小绝对致死剂量活菌攻毒,计算小鼠的保护率.结果 重组原核表达质粒pET-30a-btuB经双酶切和测序证实构建正确;重组蛋白的相对分子质量约为67 000,表达量约为菌体总蛋白的25％,主要以包涵体形式表达;纯化的重组蛋白纯度大于90％,可与鼠抗His-Tag单抗特异性结合;纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠可获得高效价的抗BtuB IgG抗体,且可获得60％的保护率.结论 成功原核表达并纯化了甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,重组蛋白免疫原性良好,并能够为小鼠提供一定的保护作用.
作者：王斌；李娜；董晓宇；梁昊宇；陈翠萍；陈薇；曾明 刊期： 2012年第06期
目的 筛选并制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体检测用标准病毒候选株,规范EV71中和抗体检测方法.方法 通过对亲本株与非亲本株交叉中和试验,进行相应的几何平均滴度(GMT)比较,从10株EV71毒株中筛选出具有理想亲本中和能力、又具有较广泛交叉中和作用的毒株.筛选出的毒株按《中国药典》三部(2010版)相关要求,冷冻干燥后制备1批符合我国疾病流行特征的标准病毒候选株,联合3家实验室对候选株的病毒滴度进行协作标定,并初步应用于人血清样品的检测.结果 筛选出交叉中和能力强、分离、传代背景清晰的EV71V03株(523-07T)作为候选病毒株;制备的候选病毒株分装精确度、水分含量、无菌检查、支原体检查、其他外源因子检查等项目均符合《中国药典》三部(2010版)相关要求;经联合标定,候选毒株的平均病毒滴度为4.83 lgTCID50/ml(95％ CI:4.53～5.12 lgTCID50/ml),变异系数为3.16％;应用候选毒株和中和抗体定值标准品检测EV71自然感染人血清样品,可将实验室间检测差异由4.4倍降至1.6倍.结论 初步筛选出的候选株EV71／523-07T株具有理想的亲本株中和作用,又具有较广泛的交叉中和特性,有望成为EV71中和抗体检测的标准毒株候选株.
作者：毛群颖；郭增兵；郝春生；于丹；高帆；董承红；安文琪；高强；谢忠平；李秀玲；梁争论 刊期： 2012年第06期
目的 在大肠杆菌中表达4Aβ1-15,并进行纯化.方法 以重组质粒pcDNA3.1-s4Aβ1-15为模板,PCR扩增1-2Aβ1-15基因,并克隆至pQE30a原核表达载体中,构建重组表达质粒pQE30a-2Aβ1-15,再以其为模板,扩增2-2Aβ1-15基因,克隆人pQE30a-2Aβ1-5质粒中,构建重组原核表达质粒pQE30a-4Aβ1-15,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白.结果 重组表达质粒pQE30a-4Aβ1-15经双酶切和测序证明构建正确;表达的目的蛋白相对分子质量约为18 000,主要以可溶形式表达,表达量约占上清液总蛋白的40％,可与鼠抗人Aβ40单抗特异性结合;纯化后基本除去了杂蛋白.结论 成功构建了重组原核表达质粒pQE30a-4Aβ1-15,表达并纯化了His6-4Aβ1-15融合蛋白,为阿尔茨海默病基因工程疫苗的研究奠定了基础.
作者：方萌；李旺；程聪；邵帅 刊期： 2012年第06期
目的 比较不同方法测定疫苗中游离甲醛残留量的差异.方法 采用不同方法测定0.25～100 μg/ml标准甲醛溶液,绘制反应曲线,初步确定各种方法的线性范围,通过重复测定,计算相关系数,对标准曲线的线性范围进行验证;分析制品中铝佐剂、离心及添加物对检测结果的影响,并对方法的适用性进行验证.结果 品红亚硫酸法(《中国药典》)的线性范围为25～100 μg/ml,改良乙酰丙酮法与乙酰丙酮法(Sinovac)的线性范围为0.25 ～ 100 μg/ml,乙酰丙酮法(Crucell)、乙酰丙酮法( Pasteur)和盐酸苯肼法(MSD)的线性范围为0.25～50 μg/ml,各方法标准曲线的相关系数为0.994～1.000.品红亚硫酸法测定未离心的含铝佐剂样品的回收率在18.06％ ～76.00％之间,测定离心后的含铝佐剂样品的回收率在17.19％ ～ 75.95％之间;乙酰丙酮法测定未离心的含铝佐剂样品的回收率在88.28％ ～ 103.21％之间,测定离心后的含铝佐剂样品的同收率在95.43％ ～102.78％之间;盐酸苯肼法测定未离心的含铝佐剂样品的回收率在99.27％ ～ 117.74％之间,测定离心后的含铝佐剂样品的回收率在100.55％ ～ 119.40％之间.各方法测定含添加物样品的回收率在94.68％ ～ 101.86％之间.改良乙酰丙酮法(412 nm)测定含甲醛疫苗的回收率在100.84％ ～ 105.88％之间,变异系数在0.28％ ～3.08％之间.结论 改良乙酰丙酮法操作简便,灵敏度高,线性范围广,结果准确可靠,适用于疫苗中游离甲醛残留量的测定.
作者：何鹏；洪小栩；李志刚；宋俐霏；梁争论；；陈伟；胡忠玉 刊期： 2012年第06期
目的 探讨质粒型和腺相关病毒两种转基因载体对家兔关节软骨细胞中GAPDH、B2M、18S rRNA和TUBB内参基因mRNA转录水平的影响.方法 将携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EFGP)报告基因的质粒型载体pcDNA6.2-EGFP和腺相关病毒载体AAV2-EGFP分别转染至体外培养的家兔关节软骨细胞中,荧光显微镜观测转染后关节软骨细胞中EGFP的表达,实时PCR技术检测两各组关节软骨细胞中GAPDH、B2M、18S rRNA和TUBB基因mRNA转录水平的变化.结果 转染48 h后,两组转基因关节软骨细胞中均可见明显的绿色荧光;与正常对照组相比,4个内参基因在两组转基因细胞内的转录水平均下调,其中GAPDH和TUBB基因下调较小,腺相关病毒载体对转基因的影响小.结论 腺相关病毒载体对关节软骨细胞中内参基因表达的影响低于质粒型载体,表明腺相关病毒对关节软骨细胞本身影响较小;GAPDH和TUBB基因可作为实验的内参基因校正目的基因的表达量.
作者：王雪梅；焦玉萌；陈传好 刊期： 2012年第06期
目的 原核表达轮状病毒(Rotavirus,RV)结构蛋白VP6,并初步应用于以VP6为检测抗原检测RV血清抗体的ELISA方法,用于不同型RV免疫后抗体水平的检测.方法 提取TB-Chen株RV基因组RNA,采用RT-PCR法扩增VP6基因,插入表达载体pETL中,构建重组表达质粒pET-VP6,转化E coli BL21(DE3),表达rVP6.表达的rVP6经纯化后,与TB-Chen株(G2P[4]型)、Wa株(G1P[8]型)和SA11株(G3P[2]型)RV分别免疫豚鼠,制备血清抗体,以SA11株血清抗体,经Western blot 鉴定纯化的rVP6,以纯化的rVP6为检测抗原,采用ELISA法检测不同型RV免疫血清抗体.结果 重组表达质粒pET-VP6经双酶切和测序鉴定证明构建正确;表达的rVP6相对分子质量约为45 000,表达量占菌体总蛋白的34.7％:纯化的rVP6纯度达90％以上,蛋白浓度为8.304 μg／μl,可与豚鼠抗RV SA11株血清抗体发生特异性反应;以纯化的rVP6为检测抗原,可检测TB-Chen、Wa、SA11株和抗rVP6的豚鼠免疫血清抗体.结论 成功地在大肠杆菌中表达了rVP6,以具有共同组／亚组抗原特异性的rVP6作为检测抗原,可检测同一组／亚组内不同型的RV血清抗体,为研制以VP6为检测抗原检测RV感染的ELISA试剂盒奠定了基础.
作者：袁静；潘小霞；滕玉梅；姬秋彦；文喻玲；陈元鼎 刊期： 2012年第06期
目的 研究阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制作用.方法 采用双层平板法、琼脂扩散法及液体培养活菌计数法等考察10株阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌的体外抑制效果;分析白色念珠菌的耐酸性;通过琼脂扩散法分析不同pH值的乳酸杆菌发酵上清液对白色念珠菌的抑菌效果;并分析10株乳酸杆菌产酸能力的差异.结果 10株阴道源乳酸杆菌中,ZDY78、ZDY128、ZDY159a、ZDY162a 4株对白色念珠菌的抑制能力较强;白色念珠菌的耐酸能力较强,当发酵上清液的pH≤3.0时,才能观察到明显的抑菌圈;乳酸杆菌的发酵上清液具有抑制白色念珠菌生长的能力,且抑菌效果与培养液中发酵上清所占比例呈正相关;抑菌能力较强的4株乳酸杆菌其产酸能力强于其余6株乳酸杆菌.结论 4株阴道源乳酸杆菌对白色念珠菌具有明显的抑制作用,且与其产酸能力呈正相关.
作者：陈沁；田万红；许恒毅；喻刚；魏华；曾明 刊期： 2012年第06期
目的 建立脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)蚀斑纯化及滴度测定方法.方法 将EMCV系列稀释后接种至单层Veto细胞,覆盖甲基纤维素,出斑后挑取蚀斑进行扩增,收获病毒液.选取5个EMCV原液样品感染Veto细胞进行蚀斑滴度测定,经结晶紫染色计数蚀斑,计算病毒滴度.重复测定5次,验证蚀斑法的精密性,并与微量细胞病变法进行比较.结果 EMCV感染Veto细胞后,约48 h出现边缘整齐直径为0.5～ 1.5mm的蚀斑,经结晶紫染色后,可见清晰透明空斑,边缘清晰.5个EMCV原液样品经蚀斑法测得的病毒滴度在3.16×106～1×107 PFU/ml之间,变异系数为0.88％～2.07％;经微量细胞病变法测得的病毒滴度均大于3.16×107 PFU／ml,变异系数为1.63％～2.90％,表明蚀斑法精密性更好;两种方法经直线回归分析,具有线性相关性(r=0.810,P=0.097).结论 建立了简便直观的EMCV蚀斑纯化方法及精密性良好的蚀斑滴度测定方法,为EMCV的生物学特性及疫苗研究奠定了基础.
作者：岳野；李树香；刘敬；王欣怡；徐静；许丽锋 刊期： 2012年第06期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
