张伯伟；邢培清；郭如华；赵磊；方建华
目的观察和了解重组人干扰素α2b(以下简称rhIFN-α2b)工程菌的生物学性质,保证产品质量稳定. 方法通过对rhIFN-α2b工程菌的微生物学、分子生物学和免疫学检测,全面了解工程菌的性质.结果 rhIFN-α2b工程菌呈现典型的大肠杆菌形态,在甘油中可以贮存1年,在冻干条件下可以保存2年,其生物学特性比较稳定.结论 rhIFN-α2b工程菌生物学特性稳定不变.
作者：郭桥；张春丽；石晓丽；陈云声；郭德本 刊期： 2002年第05期
目的观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对烧伤创面愈合的治疗作用.方法选择浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤病例共920例,分别用bFGF治疗其烧伤创面,用药剂量为144U/cm2.观察伤后8d(浅Ⅱ度)和15d(深Ⅱ度)创面愈合率,以及创面完全愈合时间.结果 8d愈合率总体治疗组为77.6%±24.4%,对照组为51.7%±26.4%;完全愈合时间总体治疗组为9.6±2.4d,对照组为12.6±2.9d.15d愈合率总体治疗组为75.2%±26.3%,对照组为53.3%±25.4%;完全愈合时间总体治疗组为17.5±4.5d,对照组为21.9±5.5d.结论 bFGF具有明显的促进Ⅱ度烧伤创面愈合的作用.
作者：郭立君；李校堃；许华；姚成灿 刊期： 2002年第05期
目前,人用鼠源单抗的生产方法一般分为体内法和体外法2种.体内法即腹水法.尽管腹水中抗体浓度比较高(2～10mg/ml),但由于所用的BALB/c小鼠必须达到SPF级,繁殖、饲养BALB/c小鼠及生产腹水、纯化抗体的厂房必须符合GMP要求,WHO及我国对体内法生产的人用鼠源单克隆抗体的质检项目繁多,要求严格,因此限制了体内法在人用鼠源单抗生产领域的应用.由于体外法(杂交瘤细胞体外培养法)的产品纯度高,可以避免鼠类病毒的污染,简化质检项目,操作具有可控制性,适用于大规模工业生产,因此是人用鼠源单抗生产方式的主要发展方向.
作者：王祥斌；孔健 刊期： 2002年第05期
生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备,用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品.包括疫苗、血清、血液制品、细胞因子、单克隆抗体体外免疫诊断制品等.
作者：雷殿良 刊期： 2002年第05期
目的检测抗感染重组合异种骨(ARBX)产品的生物相容性,确保ARBX产品在临床上安全、有效.方法根据卫生部制定的<生物材料和制品的生物学评价标准>及<相关生物材料和制品的企业标准Q/JGY001-94>,进行了ARBX急性毒性试验、过敏性试验、热原试验、骨内埋植试验、肌内埋植试验、溶血试验及细胞毒性试验.结果 ARBX未引起小鼠急性毒性反应、豚鼠过敏反应及家兔热原反应.在兔骨内和小鼠肌内埋植,既未产生纤维包膜,也未引起淋巴细胞及炎性细胞浸润.对家兔红细胞溶血率为1.2%,无溶血现象.体外细胞毒性反应指标R=0.25/0,无细胞毒性.结论 ARBX的生物相容性符合国家规定的生物材料和制品的生物学标准及企业标准,可试用于临床治疗相关疾病.
作者：袁志；胡蕴玉；赵玉珍；孟国林；孙梁；吕荣；白建萍；王哲 刊期： 2002年第05期
目的从感染HTLV-1的中国患者外周血单核细胞(PBMCs)中扩增编码HTLV-1核心蛋白P24的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达.方法提取感染者PBMCs基因组DNA,应用巢式PCR方法扩增出HTLV-1核心蛋白P24的cDNA并测序,与pGEX-20T载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中表达,采用ELISA和Western blot分析重组蛋白活性.结果 HTLV-1核心蛋白P24基因序列高度保守,构建重组载体后,在大肠杆菌中表达的重组蛋白,经检测具有较强的抗原活性.结论成功地表达了HTLV-1型病毒的核心蛋白P24基因,为国产诊断试剂和疫苗的研发打下了基础.
作者：张春涛；尹红章；李秀华；宋爱京；李德富；夏宁邵；张军 刊期： 2002年第05期
目的构建含HIV-1表面糖蛋白基因的真核表达质粒,并在Hela细胞内表达.方法在核酸疫苗载体质粒pVAX1中插入gp120基因,构建真核表达质粒pVAXGP.在体外用脂质体法将重组质粒转染Hela细胞,并用间接免疫荧光试验、免疫印迹试验和Dot-ELISA对表达产物进行检测.结果间接免疫荧光试验结果显示,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光.免疫印迹试验和Dot-ELISA结果均显示,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的gp120蛋白.结论已成功地构建了真核表达质粒,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性.
作者：江文正；金宁一；李子健；金洪涛；王宏；韩文瑜 刊期： 2002年第05期
目的研究狂犬病疫苗和干扰素组成的联合制剂的免疫原性和暴露后的治疗作用.方法将人用精制Vero细胞狂犬病疫苗(PVCRV)和基因工程干扰素(rHuIFNs)按一定比例配制成联合制剂,进行安全和效力试验,以PVCRV-HuIFNs和PVCRV分别免疫小鼠,在第1针免疫后9和18d,采用快速免疫荧光灶抑制试验,检测小鼠中和抗体水平,用MTT法检测特异的细胞毒作用(CTLs).一定剂量的狂犬病病毒标准攻击株(CVS)肌肉感染小鼠后,分别用PVCRV-HuIFNs和PVCRV在0、3和7d皮内免疫感染小鼠,分别在末次免疫的第7和21d进行CTLs试验,并在30d内观察小鼠发病和死亡情况.结果联合制剂安全有效,效价高于单一疫苗,在暴露前诱导的中和抗体水平与单一疫苗比较差异有显著意义;在暴露前后激发的CTL,联合制剂均高于单一疫苗,差异有显著意义.结论联合制剂可用于狂犬病暴露后的免疫治疗.
作者：邹勇；宋继萍；吕宏亮；李武平；段招军；侯云德 刊期： 2002年第05期
目的标定白喉抗体国家标准品.方法使用白喉抗体国际标准品,3个实验室均采用血凝方法协作标定白喉抗体国家标准品.再用此标准品与国家参考品进行比较,测定50批样品.结果各项检测指标均达到国家标准品要求,效价为0.9HAU/支.检测50批样品,38批比国家参考品测定值高2倍,6批高4倍,6批结果相同.结论完成了白喉抗体标准品的升级换代.
作者：侯继锋；卢连玉；程雅琴；朱晓川；何勤 刊期： 2002年第05期
目的研制基因工程胰高血糖素.方法利用pCYB1表达载体,亚克隆胰高血糖素基因后转化于BL21(DE3)菌种,并对阳性克隆的质粒进行DNA测序.检测不同条件下,IPTG诱导胰高血糖素-intein-几丁质结合结构域(CBD)组成的融合蛋白表达量,确定工程菌表达适条件.利用几丁质结合柱进行亲和层析,在DTT作用下由intein在柱上进行自我切割,纯化胰高血糖素.SDS-PAGE检测融合蛋白表达量,SDS-PAGE在Tris-Tricine缓冲系统中电泳检测纯度,Lowry法检测蛋白质含量,Western blot检测免疫原性,升血糖实验检测活性并进行N-末端测序.结果 DNA测序显示表达产物基因序列正确,纯化胰高血糖素具有免疫原性和生物学活性,N-端15个氨基酸与天然产品相同,电泳呈单一谱带,产率为1.25mg/L.结论获得分泌胰高血糖素基因工程菌,适于快速大规模生产.
作者：母敬郁；母凯平；相世和；陈岚；潘风香；王峤；李俐；杨翰仪；Vettai Ananthanarayanan 刊期： 2002年第05期
目的制备特异性抗人心肌肌钙蛋白1(cTnI)多克隆抗体.方法用人cTnI免疫家兔,制备抗人cTnI多克隆抗体,采用膜渗滤亲和层析法吸附掉与骨骼肌肌钙蛋白1(sTnI)有交叉反应的多抗,制备特异性抗cTnI多克隆抗体.结果抗体经槽式对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验证明对cTnI具有高度特异性,与sTnI无交叉反应.结论为应用一步夹心酶联免疫吸附法检测cTnI奠定了基础.
作者：魏景艳；钱丽娜；芦杰；马兴刚；罗贵民；赵虹；郑德明；杨绍娟；贾润英；张桂珍；王维忠；董玉杰；严玉清；张莉 刊期： 2002年第05期
目的研究丙氨酸氨基转移酶参考品活性浓度的定值.方法用IFCC推荐的方法测定该酶活性浓度,从9个厂家生产的试剂盒中选择3种,首先进行实际K值的测定,然后对该参考品定值. 结果瓶间变异CV小于1.0%.丙氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品为201±4.9U/L.结论该定值对于本品的试用和认证是有价值的.
作者：李勇；孟泽；史利宁；黄宇烽；张春妮 刊期： 2002年第05期
目的观察冻干水痘减毒活疫苗的稳定性.方法将样品分别放37℃、22℃、8℃、-15℃及-70℃,不同时间取出,采用蚀斑形成单位(PFU)分别测定样品毒力滴度.结果 -15℃以下保存5年或8℃保存92周,疫苗滴度仍很稳定,8℃保存100～124周滴度缓慢下降,但仍保持在规程规定的标准以上.22℃保存30周滴度不变.37℃(模拟长期老化试验)保存1周,滴度下降不超过一个对数指数.37℃保存4周,病毒滴度下降缓慢.结论水痘减毒活疫苗稳定性良好.
作者：王连成；李莉；徐秀凤；闫素志；哈秀杰；王文忠；南一范 刊期： 2002年第05期
目的比较规模化与传统法制备培养基在脊髓灰质炎(脊灰)疫苗生产中对细胞产量、细胞使用率和病毒滴度的影响.方法随机抽取5批不同方法制备的培养基,进行细胞产量、使用率、病毒滴度的平行试验.结果规模化制备的培养基可提高细胞产量33%,提高细胞使用率29.8%,提高病毒滴度0.3个常用对数值,并使细胞污染率降低24%;结论规模化制备培养基质量均一,批间差异小,优于传统制备法.
作者：张丽旌；孙明波；李国良；段可谦；徐其武；黄成；沈伟；李卫东 刊期： 2002年第05期
目的以MRC-5人二倍体细胞为基质,建立制备Oka株水痘减毒活疫苗的生产工艺. 方法 Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上培养,收获细胞,经冻融,超声波,纯化,澄清, 冻干等工序,生产8批疫苗,按规程要求进行检定. 结果各项指标全部合格,制品质量稳定,37℃ 7d热稳定性良好, 儿童免疫后抗体阳转率为92.7%. 结论工艺流程合理,制品质量符合WHO规程要求, 免疫后副反应甚微, 免疫原性良好.
作者：徐建军；王宪明；殷月娣；沈谊清；张英；王亮；王树巧；陈志慧 刊期： 2002年第05期
目的构建隐孢子虫CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,观察其在Hela细胞中的表达.方法用Xho I和EcoR I从pMD18-T-15/60中酶切得到CP 15/60基因,将其插入真核表达载体pCR3.1(+)的Xho I和EcoR I位点,构建CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15/60基因的转录,ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性.结果酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-15/60,外源CP15/60基因能在转染细胞中有效转录,经检测表达产物具有良好的生物活性.结论已成功地构建了pcDNA3.1-15/60真核表达载体,并在Hela细胞中具有良好的表达.
作者：何宏轩；张西臣；欧阳红生；尹继刚；李建华；杨举 刊期： 2002年第05期
目的分析重组HIV-1-P24抗原,以便研制HIV-抗体诊断试剂.方法以纯化重组P24为包被抗原,应用ELISA检测HIV-Ab国家参比品和正常人血清.结果 20份阳性HIV-Ab检出阳性19份,符合率为95%;20份阴性HIV-Ab检出阴性18份,符合率为90%;50份正常人血清检测结果均为阴性.结论所研制的重组P24抗原具有较高的特异性和敏感性,可用于制备HIV抗体诊断试剂.
作者：陈伟；陈克金；朱华松；余模松 刊期： 2002年第05期
近年来,对鸡抗体研究较多,现已证明用病原体免疫母鸡可诱发机体产生特异性抗体,但用重组酵母乙肝疫苗刺激母鸡诱发免疫应答的研究还未见报道.为此本实验采用重组酵母乙肝疫苗免疫母鸡,观察其血清特异性抗体变化及其诱发体液免疫应答水平及免疫应答持久性.
作者：徐燕萍；湛学军；杨淑华；谢大泽；胡昕 刊期： 2002年第05期
水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性传染病,主要发生于儿童,也是严重危害儿童键康的传染病之一.我国是水痘流行较为严重的国家,易感者接触后90%的儿童可发病.水痘的危害性不仅在于发生水痘疱疹,还在于感染后的并发症甚至病毒长期潜伏于脊神经后跟神经节内,多年后发生带状疱疹.
作者：王立成 刊期： 2002年第05期
丙型肝炎主要经血液传播,目前尚没有特殊的预防和治疗方法.我国<献血法>规定,献血者的血液必须经过包括抗-HCV在内的初复检合格后方可用于临床,然而,抗-HCV的出现为HCV感染后的6～12周(窗口期),所以,献血者抗-HCV检测阴性者不能排除携带HCV的可能.此时通过HCV核心抗原(HCV C抗原)的检测可提高检出率,降低HCV漏检的风险.作者采用美国强生公司HCV C抗原检测试剂对1100份无偿献血者血样进行检测,报告如下.
作者：张伯伟；邢培清；郭如华；赵磊；方建华 刊期： 2002年第05期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
