于如同；高立达；官鹏；毛伯镛；姜曙；孙兵
目的和方法:构建含人β2肾上腺素能受体(β2-AR)基因的重组腺病毒(rAd)和腺相关病毒(rAAV),并感染体外培养的心肌细胞,检测目的基因在心肌细胞内的表达.结果:RT-PCR检测结果显示感染的心肌细胞均表达人β2-AR mRNA;western印迹杂交显示感染的心肌细胞可表达人β2-AR蛋白;放射性配基检测表明两种重组病毒感染的心肌细胞的β-AR密度无明显差异(P＞0.05),但均高于对照组(P＜0.01).结论:腺相关病毒(AAV)载体与腺病毒载体均可有效的转染心肌细胞并使目的基因表达.
作者：高文谦；李小鹰；吴小兵；裴雪涛；李梁 刊期： 2001年第02期
机体对低氧的应激反应与适应主要是通过对有关低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRG)的调控实现的,HRG参与低氧的感受、低氧信号的传导及生理反应等.近年来对低氧反应基因的研究主要是关于己知基因的调控序列、调控环节及生物学功能的研究,尚未有新的、有明确生物学意义的低氧反应候选基因被发现.因此,我们采用DD-PCR技术,观察低氧大鼠脑皮层细胞在低氧时基因的差异表达,以期了解中枢神经系统在低氧过程中可能参与的相关基因.
作者：马子敏；谢印芝；杨谊；范明；尹昭云 刊期： 2001年第02期
目的:为探索性构建全新型重组人B7-PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N-末端分别缺失34和16个氨基酸的人B7-1和B7-2基因胞外区,并构建含此基因的重组质粒.方法:根据B7-1和B7-2基因序列设计合成可扩增B7-1和B7-2 cDNA的特异性引物,用RT-PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7-1和B7-2 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析.结果和结论:从Raji细胞中扩增出预期的624和675bp的B7-1和B7-2 cDNA,将其克隆至pGEM-T载体中,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证,为进一步构建人B7-PE40外毒素融合蛋白奠定了基础.
作者：张惠丽；奚永志；孔繁华；陈汝光；屠敏；刘楠 刊期： 2001年第02期
目的:研究葛根素(Pue)对缺氧缺糖(OGD)、谷氨酸钠(Glu)或反式-氨基-环戊基-1,3-二羧酸(trans-ACPD)引起的体外培养大鼠星形胶质细胞损伤的保护作用.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞LDH漏出,用3-氧-甲基[1-3H]-D-葡萄糖摄取法测定细胞体积.结果:缺氧缺糖5 h、Glu 0.5 mmol/L或trans-ACPD 1 mmol/L作用星形胶质细胞1 h,细胞体积及LDH漏出明显增加;当细胞在缺氧缺糖、Glu或trans-ACPD损伤的同时,加Pue 0.1mmol/L,能明显减少细胞的体积及LDH的漏出.结论:Pue对OGD、谷氨酸或trans-ACPD致大鼠星形胶质细胞损伤有保护作用.
作者：董丽萍；韩明；袁芳；徐立新；王天佑 刊期： 2001年第02期
目的:探讨淀粉样β蛋白(Aβ1-40)和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体(GluR)功能的影响.方法:采用Promega试剂盒提取3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA,并将50 nl(50ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞.注射后的卵母细胞在(19±1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达.这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录.超氧阴离子自由基(SAFRs)和Aβ1-40于记录前12 h、24 h、96 h分别加入孵育液.结果:爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和5-羟色胺受体.Aβ-40对表达的GluR有抑制效应,其程度依作用时间和浓度而异.20 nmol/LAβ1-40作用24 h对表达的GluR功能无影响.与SAFRs共同孵育时,20 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR功能有明显影响,60 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR有明显抑制效应(降低21%,P＜0.05),而60 nmol/LAβ-40作用24 h下降达52%.维生素E对这些效应有拮抗作用.结论:自由基和Aβ对GluR具有抑制效应,该效应能被维生素E拮抗.Aβ可能通过抑制受体功能在AD病理生理学中起作用.
作者：黄福南；张炳烈；李文彬；崔旭；韩志涛；房征宁 刊期： 2001年第02期
目的:建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素(GH)和催乳素(PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定(RIA)法;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用.方法:用氯胺-T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定.结果:用该方法测定急性低氧(0.5 h)时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高(P＜0.05),血浆则相反:7 km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量(P＜0.01);而5 km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异.结论:本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌.
作者：张颖沙；杜继曾；许宁一；吴雁 刊期： 2001年第02期
目的:观察NO前体L-精氨酸(L-Arg)微量注入大鼠延髓腹面降压区(VSMd)对心血管活动的影响及其和L-谷氨酸(L-Glu)降压作用的关系.方法:采用延髓腹外侧部微量注射法,以整体灌流肾为模型观察与NO有关的药物对心血管活动的影响.结果:①VSMd内微量注入L-Arg,动脉血压(AP)呈剂量依赖性升高,肾灌流压(PPK)与AP同步上升,与注入生理盐水对照,差异均具有显著意义,但L-Arg对心率无显著影响;②预先在VSMd内注入甲基蓝可取消L-Arg的升压、升PPK作用;③VSMd内注入L-Glu,AP下降.如预先注入L-Arg后5 min再注入L-Glu,L-Glu的降压效应被衰减,其衰减程度依赖于L-Arg剂量.结论:VSMd内的L-Arg-NO通路参与延髓心血管中枢对AP的调控,其机制之一可能是通过cGMP抑制VSMd内的谷氨酸能神经突触.
作者：王晶；潘敬运；贾秉钧 刊期： 2001年第02期
目的:提供一种比较简易的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型制备方法.方法:对Zea Longa线栓法进行改进,并与Zea Longa法从rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等三个方面进行对比研究.结果:我们改进的线栓法与Zea Longa法相比,在rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等方面,两者之间无显著性差异(t检验,P＞0.05).结论:改进线栓法建立的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型也同样可靠、稳定,且较Zea Longa法易操作.
作者：曹勇军；程彦斌 刊期： 2001年第02期
目的和方法:用常规离体血管灌流方法,观察钠尿肽家族新成员C型钠尿肽(CNP)对家兔腹主静脉及腹主动脉的作用及其作用机制.结果:CNP在10-10～10-6mol/L浓度范围内对家兔静脉及动脉均呈剂量依赖性的舒张效应.其对静脉的作用与硝酸甘油(NTG)相似,且扩血管作用无ANP强,以腹主动脉为对象分别施加阿托品(10-7mol/L),酚妥拉明(20μg)或消炎痛(20μg)等均不影响CNP的舒血管作用,优降糖和心得安可明显降低CNP对腹主动脉的舒张作用.CNP在基础状态下提前加入不抑制NE的缩血管反应.结论:CNP可能是一种静脉系统的扩张剂,同时亦是调节动脉张力的选择性调节肽,CNP舒血管作用机制至少有两途径:一是与K+-ATP通道的开放有关,二是与激活β受体有关.
作者：王跃民；裴建明；朱妙章；臧益民；李明哲；牛国保；施溥涛 刊期： 2001年第02期
已经证明,缺硒(Se)是导致克山病的基本原因,但另外的研究进一步发现,单纯缺Se并不能完全解释克山病的许多流行病学特点.研究发现:克山病病区水、土、粮食及人群的血清、头发中除低Se外,还常伴有镉(Cd)含量较高,因而推测:高Cd是导致克山病心肌损害的重要协同因素,为进一步证实上述观点,本研究在高Cd条件下培养大鼠心肌细胞,并以细胞内微电极技术对其生物电活动进行定量测定,为进一步阐明克山病心肌细胞损害的机理提供实验依据.
作者：段耀奎；曹文华；王福顺；张德利 刊期： 2001年第02期
血浆中分子物质(MMS)是分子量在300～5000 Dalton之间的一类多肽.有实验证明:肾衰患者血浆MMS在体外可抑制大鼠膈肌切片、肾皮质、大脑皮质和人类红细胞对葡萄糖的摄取,可抑制腺苷酸环化酶、Na+-K+ATP酶的活性.MMS影响机体多种酶的活性及膜的物质转运,势必会导致心肌的电生理特性及心肌舒缩能力的变化,甚至出现尿毒症性心肌病.本实验目的在于观察MMS对心肌舒缩能力的影响,为肾衰患者的心功能改变及治疗提供理论基础.
作者：王桂兰；崔存德；孙贻华；张慧 刊期： 2001年第02期
高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化尚未见报道.本文观察CBS基因在不同组织中的表达活性及其在As时的变化规律.
作者：郑斌；韩梅；温进坤 刊期： 2001年第02期
青龙藤(Biondia henriyi,BH)为萝科青龙藤属植物,具有活血舒筋,理气祛风的功能:主治跌打损伤、下肢冷痛、风湿手足麻木、牙痛.在其它实验中我们发现青龙藤提取物可以刺激胰岛β细胞单位放电增加,促进胰岛素分泌,使糖尿病模型大鼠血浆中的胰岛素水平由(18.8±2.3)mu/L升高到(43.2±3.5)mu/L.已知当血糖浓度升高,胰岛β细胞膜上KATP通道关闭,引起胰岛素分泌.为探讨作用机制,用记录小白鼠胰岛β细胞膜上的KATP通道电流为指标,观察对KATP通道的影响.
作者：杨蔚；黄民；车笛；王绍；欧阳明 刊期： 2001年第02期
目的:研究肺循环对慢性缺氧的适应机理.方法:在4 300m的高度捕捉到高原适应动物鼠兔,带到2 260 m的高度并和10只Wistar大鼠在模拟4 300m和5000 m高度的低压仓内进行了肺动脉压的测定,观察肺组织学和组织免疫化学的改变.结果:在2 260 m,鼠兔的Ppa明显低于Wistar大鼠,二者分别为(1.5±0@07)kPa和(2.9±1.1)kPa(P＜0.01).随着海拔高度的增加,鼠兔的Ppa上升不明显,而Wistar大鼠增加显著.左右心室比重鼠兔为0.22,而Wistar大鼠为0.45.鼠兔的Hb,Hct和2.3-DPG均低于大鼠.大鼠肺小血管周围可见肥大细胞(7.1±0.33)mm2,免疫组化染色mast cell typtase颗粒呈阳性,鼠兔未发现肥大细胞及此种免疫反应.肺小动脉中层较鼠兔厚,分别为27.21%和9.22%,壁的厚度和Ppa有很好的(r=0.763).结论:鼠兔无低氧性肺血管收缩,是一种遗传性适应.大鼠肥大细胞通过激活某些生长因子,在肺血管的再建过程中可能起一定作用.
作者：陈秋红 刊期： 2001年第02期
目的:探讨大鼠脑干听觉诱发电位(BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)生后发育模式的异同.方法:在同一批新生SD纯种大鼠连续10周同时观察BAEP和MLR生后发育的变化.结果:BAEP和MLR分别在生后14 d和17 d出现;BAEP各波峰潜伏期(PL)随鼠龄增长而递减,生后3～4周是PL缩短的主要时期,I波PL在生后29 d达成年值,其余各波PL在生后70 d全部达成年值;首次出现的MLR,其Pb和Na两波PL已达成年值,而Pa、Nb和Pb波PL也随鼠龄增长而缩短,但生后20～23 d很快就达成年值;BAEP的I、Ⅲ、Ⅳ波和MLR的Nb、Pb波波幅在生后3～4周期间迅速递增,且峰值明显大于成年值,然后逐渐回降.结论:大鼠MLR和BAEP生后发育的模式基本相同,但MLR各波PL较早达成年值.
作者：何斯纯；林兴会；周卓妍；周丽丽；李善民 刊期： 2001年第02期
目的:研究缺血预处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响.方法:往置入腹主动脉的Swan-Ganz导管气囊内注气造成兔腰髓缺血模型.将实验兔分为假手术组、缺血组和预处理组.应用反相高效液相色谱方法(reverse phaseHPLC),对缺血再灌注后不同时间点腰髓组织中磷酸腺苷(ATP、ADP、AMP)的含量进行检测.结果:和假手术组相比,缺血组兔再灌注后各时间点腰髓组织ATP含量有明显下降(P＜0.01).与缺血组相应时间点相比,预处理组兔再灌注后腰髓组织ATP含量有明显提高(P＜0.01).结论:缺血预处理可显著提高缺血再灌注后兔脊髓组织ATP含量,这可能是缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用的机制之一.
作者：蒙革；朱朗标；余翼飞；廖杰；赵玉兰 刊期： 2001年第02期
目的:研究黄芪对糖尿病性肾病大鼠心肌脂质过氧化作用及NO水平的影响.方法:雄性Wistar大鼠分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病性肾病组、糖尿病性肾病伴急性肾功能损害组、黄芪治疗组.分别测定各组心肌组织内SOD、GSH-Px、NOS活性及MDA、NO含量.结果:各实验组心肌组织内GSH-Px、SOD活性下降,NOS活性及MDA、NO含量增高,其中以糖尿病性肾病伴急性肾功能损害组明显,黄芪对之有纠正作用.结论:黄芪能抑制糖尿病性肾病心肌脂质过氧作用并降低NO水平,从而对心肌产生保护作用.
作者：陈国荣；刘毅；毛孙忠；李剑敏；郑尘飞 刊期： 2001年第02期
金属硫蛋白(MT)是普遍存在各种生物体内、富含硫基的小分子蛋白,在缺血/再灌注(I/R)损伤中通过清除自由基减轻心肌细胞损伤,同时MT参与预缺血保护(IPC).目前对MT在IPC中的保护作用机制及功效仍无明确研究,本实验以培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模拟缺血/再灌注损伤,检测心肌细胞在IPC处理后24 hMT的含量、脂质过氧化程度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力变化,锌诱导产生的MT作用,并比较MT与抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)的保护作用,初步探讨MT的心肌保护作用机制及应用价值.
作者：金慧英；郁兴明；李法卿；房德兴；李素芹；谭维国；陈华标 刊期： 2001年第02期
目的与方法:在离体海马脑片上观察人参皂甙对谷氨酸兴奋性毒性的拮抗作用,在培养的神经细胞和胶质细胞上分别观察人参皂甙对模拟缺血时谷氨酸释放和摄取的影响,以证明人参皂甙抗缺氧缺血性脑损伤与减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用有关.结果:在人工脑脊液中导入谷氨酸(1 mmol/L)20 min,引起大鼠海马脑片OPS降低直至消失,恢复正常人工脑脊液灌流1 h后OPS难以恢复.而使用人参皂甙可促进海马脑片OPS的恢复,作用以20μg/ml剂量组好.在培养的小鼠皮质神经元和胶质细胞,模拟缺血时神经元谷氨酸释放量达对照的数倍,而胶质细胞对谷氨酸的摄取显著减少.使用人参皂甙(20μg/m1)可明显抑制神经元谷氨酸的释放,并促进胶质细胞对谷氨酸的摄取.结论:人参皂甙减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用可能是其抗缺氧缺血性脑损伤的重要机制.
作者：姜正林；陈益人；周纯；施建生；段树民 刊期： 2001年第02期
目的和方法:用直流电损毁大鼠双侧蓝斑,观察膀胱及各内脏组织的出血性变化.结果:完全损毁双侧蓝斑可恒定地引起严重的膀胱出血,并伴有其它脏器不规律性发生的充血或轻微出血.部分损毁双侧蓝斑亦可引起多脏器轻微的充血和出血,但膀胱出血不再恒定发生.切除肾上腺减轻应激反应,或应用组织胺H2受体拮抗剂,对完全损毁双侧蓝斑引起的膀胱出血或其它脏器的组织学出血性变化无明显影响.结论:损毁大鼠双侧蓝斑引起的多脏器出血并非由手术应激引起;也与组织胺H2受体无关,其机制有待进一步研究.
作者：王继江；袁文俊；杭建良；王伟忠；陈宜张 刊期： 2001年第02期
中国应用生理学杂志
主管:
主办：中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
