王晶；潘敬运；贾秉钧
目的:建立4月龄人胎肝组织选择性表达基因EST库,为研究胚胎肝组织特异表达基因提供有力的工具.方法:采用表达性差异显示分析(representational difference analysis, RDA)技术建立4月龄人胎肝组织选择性表达基因EST库,并测定部分克隆核苷酸序列,以竞争PCR检测代表性基因的差异表达.结果与结论:以珠蛋白家族基因为标志,所建差减cDNA文库中α-珠蛋白家族基因的表达频率较未差减cDNA文库增高7倍,同时该文库也含有多种与肝生长密切相关的基因,表明RDA技术确是研究差异表达基因的有效手段,所建EST库富集胎肝特异表达基因.部分克隆序列分析获得2种未报道序列,其中一株含有丝/苏氨酸激酶结构域,表明可望从此库中分离具有重要未知功能的新基因.
作者：许望翔；魏汉东；汪思应；杨晓明 刊期： 2001年第02期
既往研究表明,神经细胞死亡容易坏死而较少发生凋亡,1994年,Ratan等培养神经细胞发现有大量神经元发生凋亡,但其凋亡机制尚不清楚.本实验采用氧化应激方法作用于原代培养的新生大鼠大脑皮质神经元,并进行凋亡指标的检测,以对其凋亡机制进行探讨.
作者：于如同；高立达；官鹏；毛伯镛；姜曙；孙兵 刊期： 2001年第02期
青龙藤(Biondia henriyi,BH)为萝科青龙藤属植物,具有活血舒筋,理气祛风的功能:主治跌打损伤、下肢冷痛、风湿手足麻木、牙痛.在其它实验中我们发现青龙藤提取物可以刺激胰岛β细胞单位放电增加,促进胰岛素分泌,使糖尿病模型大鼠血浆中的胰岛素水平由(18.8±2.3)mu/L升高到(43.2±3.5)mu/L.已知当血糖浓度升高,胰岛β细胞膜上KATP通道关闭,引起胰岛素分泌.为探讨作用机制,用记录小白鼠胰岛β细胞膜上的KATP通道电流为指标,观察对KATP通道的影响.
作者：杨蔚；黄民；车笛；王绍；欧阳明 刊期： 2001年第02期
目的:测定左、右单侧去窦弓神经、双侧去窦弓神经、双侧去主动脉神经和双侧去窦神经后清醒大鼠动脉压力感受反射敏感性改变.方法:用改良的Smyth方法测定动脉压力感受反射敏感性;急慢性实验分别在手术后1 d、21 d进行,以比较其代偿功能.结果:去窦弓神经后大鼠动脉压力感受反射敏感性显著下降;左右单侧间有显著性差异,并有明显的相互代偿;去主动脉神经后的动脉压力感受反射敏感性的下降比去窦神经明显,且前者无明显代偿而后者有明显代偿.结论:对动脉压力感受反射敏感性来说,右侧窦弓神经的作用比左侧重要,但代偿能力相当;且主动脉神经的作用比窦神经重要,其代偿能力也显著优于窦神经.
作者：刘卫；赵晓民；赵志春；殷明；苏定冯 刊期： 2001年第02期
近年来,肝移植的开展及肝门阻断术的临床应用越来越广泛,但在肝移植或肝门阻断再开放过程中始终存在着缺血/再灌注损伤,而且是导致术后肝功能不全的一个重要因素.以往实验证实,氧自由基(oxygen free radicals, OFR )在肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia/reperfusion injury, HIRI)中起重要的介导作用.而一氧化氮(nitric oxide, NO)在HIRI中起何作用,目前国外尚无一致的意见:国内未见详细报道.
作者：王万铁；徐正行；林丽娜；王卫；李东；王宗敏 刊期： 2001年第02期
机体对低氧的应激反应与适应主要是通过对有关低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRG)的调控实现的,HRG参与低氧的感受、低氧信号的传导及生理反应等.近年来对低氧反应基因的研究主要是关于己知基因的调控序列、调控环节及生物学功能的研究,尚未有新的、有明确生物学意义的低氧反应候选基因被发现.因此,我们采用DD-PCR技术,观察低氧大鼠脑皮层细胞在低氧时基因的差异表达,以期了解中枢神经系统在低氧过程中可能参与的相关基因.
作者：马子敏；谢印芝；杨谊；范明；尹昭云 刊期： 2001年第02期
目的:探讨淀粉样β蛋白(Aβ1-40)和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体(GluR)功能的影响.方法:采用Promega试剂盒提取3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA,并将50 nl(50ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞.注射后的卵母细胞在(19±1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达.这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录.超氧阴离子自由基(SAFRs)和Aβ1-40于记录前12 h、24 h、96 h分别加入孵育液.结果:爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和5-羟色胺受体.Aβ-40对表达的GluR有抑制效应,其程度依作用时间和浓度而异.20 nmol/LAβ1-40作用24 h对表达的GluR功能无影响.与SAFRs共同孵育时,20 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR功能有明显影响,60 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR有明显抑制效应(降低21%,P＜0.05),而60 nmol/LAβ-40作用24 h下降达52%.维生素E对这些效应有拮抗作用.结论:自由基和Aβ对GluR具有抑制效应,该效应能被维生素E拮抗.Aβ可能通过抑制受体功能在AD病理生理学中起作用.
作者：黄福南；张炳烈；李文彬；崔旭；韩志涛；房征宁 刊期： 2001年第02期
目的:了解乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对人垂体腺瘤细胞增殖的影响.方法:将Ach作用于体外培养的人垂体腺瘤细胞,测定MTT反应A值和3H-TdR参入量及用流式细胞仪测定细胞周期.结果:10-7～10-5mol/L Ach可剂量依赖性地使MTT反应A值和3H-TdR参入量降低,使垂体腺瘤G1期细胞比例增加(P＜0.01),并可被阿托品阻断.结论:Ach在体外能明显抑制培养的人垂体腺瘤细胞的增殖,这种作用是通过Ach受体来实现的.
作者：迟素敏；朱运龙；顾建文；杜亮；王复周 刊期： 2001年第02期
目的:研究缺血预处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响.方法:往置入腹主动脉的Swan-Ganz导管气囊内注气造成兔腰髓缺血模型.将实验兔分为假手术组、缺血组和预处理组.应用反相高效液相色谱方法(reverse phaseHPLC),对缺血再灌注后不同时间点腰髓组织中磷酸腺苷(ATP、ADP、AMP)的含量进行检测.结果:和假手术组相比,缺血组兔再灌注后各时间点腰髓组织ATP含量有明显下降(P＜0.01).与缺血组相应时间点相比,预处理组兔再灌注后腰髓组织ATP含量有明显提高(P＜0.01).结论:缺血预处理可显著提高缺血再灌注后兔脊髓组织ATP含量,这可能是缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用的机制之一.
作者：蒙革；朱朗标；余翼飞；廖杰；赵玉兰 刊期： 2001年第02期
目的:建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素(GH)和催乳素(PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定(RIA)法;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用.方法:用氯胺-T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定.结果:用该方法测定急性低氧(0.5 h)时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高(P＜0.05),血浆则相反:7 km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量(P＜0.01);而5 km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异.结论:本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌.
作者：张颖沙；杜继曾；许宁一；吴雁 刊期： 2001年第02期
目的与方法:在离体海马脑片上观察人参皂甙对谷氨酸兴奋性毒性的拮抗作用,在培养的神经细胞和胶质细胞上分别观察人参皂甙对模拟缺血时谷氨酸释放和摄取的影响,以证明人参皂甙抗缺氧缺血性脑损伤与减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用有关.结果:在人工脑脊液中导入谷氨酸(1 mmol/L)20 min,引起大鼠海马脑片OPS降低直至消失,恢复正常人工脑脊液灌流1 h后OPS难以恢复.而使用人参皂甙可促进海马脑片OPS的恢复,作用以20μg/ml剂量组好.在培养的小鼠皮质神经元和胶质细胞,模拟缺血时神经元谷氨酸释放量达对照的数倍,而胶质细胞对谷氨酸的摄取显著减少.使用人参皂甙(20μg/m1)可明显抑制神经元谷氨酸的释放,并促进胶质细胞对谷氨酸的摄取.结论:人参皂甙减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用可能是其抗缺氧缺血性脑损伤的重要机制.
作者：姜正林；陈益人；周纯；施建生；段树民 刊期： 2001年第02期
目的:探讨N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的可能作用.方法:以改良的Kreb's液灌流新生SD大鼠离体延髓脑片,记录与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动(respi-ratory rhythmical discharge activity, RRDA),在灌流中给予兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂,观察其对RRDA的影响.结果:使用非NMDA受体激动剂海人酸(KA)后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长,NMDA受体激动剂NMDA对呼吸活动则没有明显影响;相应的拮抗剂6-氰基-7-硝基喹恶啉土卫四(DNQX)和2-氨基磷酸戊酸(AP5)均可使放电频率和积分幅值明显降低,吸气时间显著缩短,但DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短.结论:在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用.
作者：潘秉兴；吴中海；张少华 刊期： 2001年第02期
目的:研究非等渗压浓度对血管内皮细胞NO合成酶活性的影响,并探索其发生机制.方法:使血管内皮细胞暴露于低渗(205 mOsm)或高渗透压(410 mOsm)培养液,用Griess法测定NO合成酶(NOS)活性,以Northem blotting观测细胞iNOS和eNOS基因表达的变化.结果:非等渗压浓度可使血管内皮细胞中NOS活性显著升高.细胞NOS活性变化具有明显的时间效应规律,低渗透压浓度效应产生的效应早于高渗透压浓度,且低渗透压浓度的影响较高渗透压浓度更为明显.Dexamethasone对这种非等渗透压诱导的NOS活性没有明显作用,给予cycloheximide,不影响非等渗压诱导的这种差异.Nothern blot分析表明:非等渗压浓度不诱导iNOS基因表达,而使eNOSmRNA表达增加.结论:非等渗透压浓度诱导血管内皮细胞NOS活性升高,eNOS基因表达增强是其主要机制之一.
作者：钱令嘉；Axel Goedecke；Jungen Schrader 刊期： 2001年第02期
目的:观察家免心肌缺血/再灌注(I/R)损伤时心肌细胞核膜核苷三磷酸酶(NTPase)动力学及mRNA出核转运的变化.方法:制备家兔离体心脏I/R模型,密度梯度离心法制备心肌细胞核膜,按Tiffany等的方法测定NT-Pase活性及muRNA的转运率.结果:心肌细胞核膜NTPase在以ATP或GTP为底物时,与对照组比较,I/R组大反应速率(Vmax)分别降低26%及22%(P＜0.01).Km值分别升高54%及72%(P＜0.01);而缺血组Vmax及Km值较对照组无明显差异.以ATP或GTP启动反应时I/R组10 min内心肌细胞核mRNA转出率分别较对照组降低27%及32%(P＜0.01);而缺血组与对照组相比并无显著性差异(P＞0.05).结论:心肌缺血/再灌注损伤时,心肌细胞核膜受损,核膜上NTPase活性降低,导致细胞核膜mRNA出核受阻,从而可能影响蛋白质的合成表达.
作者：夏春芳；刘乃奎；扬军；庞永正；霍勇；唐朝枢 刊期： 2001年第02期
利钾尿肽(kaliuretic peptide,KP)是近年发现的与心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)源于同一前体的具有20个氨基酸的生物活性多肽.它不仅具有和心钠素一样的利尿、舒张血管、抑制肾素一血管紧张素系统的作用,还具有抑制心肌Na+-K+-ATP酶的作用,在调节机体血压和高血压发病中有重要意义.我们近的研究发现,自发性高血压大鼠(spontaueouslyhypertensive rat,SHR)循环血液内的KP水平显著高于正常对照组Wistar-Kyoto大鼠(WKY).但其原因尚未明了.本研究的目的在于探讨KP及ANP在SHR大鼠肾内的降解代谢情况,以期探讨SHR循环血液中KP和ANP升高的原因.
作者：曾强；庞永正；王培勇；唐朝枢 刊期： 2001年第02期
目的:研究葛根素(Pue)对缺氧缺糖(OGD)、谷氨酸钠(Glu)或反式-氨基-环戊基-1,3-二羧酸(trans-ACPD)引起的体外培养大鼠星形胶质细胞损伤的保护作用.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞LDH漏出,用3-氧-甲基[1-3H]-D-葡萄糖摄取法测定细胞体积.结果:缺氧缺糖5 h、Glu 0.5 mmol/L或trans-ACPD 1 mmol/L作用星形胶质细胞1 h,细胞体积及LDH漏出明显增加;当细胞在缺氧缺糖、Glu或trans-ACPD损伤的同时,加Pue 0.1mmol/L,能明显减少细胞的体积及LDH的漏出.结论:Pue对OGD、谷氨酸或trans-ACPD致大鼠星形胶质细胞损伤有保护作用.
作者：董丽萍；韩明；袁芳；徐立新；王天佑 刊期： 2001年第02期
目的和方法:采用高效液相色谱-电化学检测法,分析7 d-6°头低位卧床模拟微重力,40～60℃热应激及其复合因素作用下人外周血中单胺类递质的含量,研究模拟微重力对热应激时人外周血中单胺类递质含量的影响,以探讨航天热应激的人体反应机理.结果:①模拟微重力单一因素暴露后,5-HT,NE,E含量与对照组相比均无显著变化(P＞0.05);②热应激单一因素暴露:40℃,50℃,60℃热应激时,与对照组相比,5-HT含量均显著降低(P＜0.01),而NE,E含量,在40℃热应激时无显著变化(P＞0.05),50℃,60℃热应激时均显著增加(P＜0.001);③热应激与模拟微重力复合因素暴露时,与对照组相比,5-HT含量显著降低(P＜0.01),而NE,E含量均无显著变化(P＞0.05).与热应激单一因素暴露组相比,50℃,60℃热应激时,NE,E含量均显著降低(P＜0.001),5-HT的含量则无显著变化(P＞0.05).结论:模拟微重力可使热诱导的NE,E含量显著降低,而对热应激引起的5-HT含量降低无显著影响.模拟微重力引起热应激时NE,E含量显著降低的变化,可能在航天热应激的人体反应机理中起重要的作用.
作者：陈晓萍；虞学军；常绍勇；费锦学 刊期： 2001年第02期
目的和方法:用常规离体血管灌流方法,观察钠尿肽家族新成员C型钠尿肽(CNP)对家兔腹主静脉及腹主动脉的作用及其作用机制.结果:CNP在10-10～10-6mol/L浓度范围内对家兔静脉及动脉均呈剂量依赖性的舒张效应.其对静脉的作用与硝酸甘油(NTG)相似,且扩血管作用无ANP强,以腹主动脉为对象分别施加阿托品(10-7mol/L),酚妥拉明(20μg)或消炎痛(20μg)等均不影响CNP的舒血管作用,优降糖和心得安可明显降低CNP对腹主动脉的舒张作用.CNP在基础状态下提前加入不抑制NE的缩血管反应.结论:CNP可能是一种静脉系统的扩张剂,同时亦是调节动脉张力的选择性调节肽,CNP舒血管作用机制至少有两途径:一是与K+-ATP通道的开放有关,二是与激活β受体有关.
作者：王跃民；裴建明；朱妙章；臧益民；李明哲；牛国保；施溥涛 刊期： 2001年第02期
高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化尚未见报道.本文观察CBS基因在不同组织中的表达活性及其在As时的变化规律.
作者：郑斌；韩梅；温进坤 刊期： 2001年第02期
目的:研究肺循环对慢性缺氧的适应机理.方法:在4 300m的高度捕捉到高原适应动物鼠兔,带到2 260 m的高度并和10只Wistar大鼠在模拟4 300m和5000 m高度的低压仓内进行了肺动脉压的测定,观察肺组织学和组织免疫化学的改变.结果:在2 260 m,鼠兔的Ppa明显低于Wistar大鼠,二者分别为(1.5±0@07)kPa和(2.9±1.1)kPa(P＜0.01).随着海拔高度的增加,鼠兔的Ppa上升不明显,而Wistar大鼠增加显著.左右心室比重鼠兔为0.22,而Wistar大鼠为0.45.鼠兔的Hb,Hct和2.3-DPG均低于大鼠.大鼠肺小血管周围可见肥大细胞(7.1±0.33)mm2,免疫组化染色mast cell typtase颗粒呈阳性,鼠兔未发现肥大细胞及此种免疫反应.肺小动脉中层较鼠兔厚,分别为27.21%和9.22%,壁的厚度和Ppa有很好的(r=0.763).结论:鼠兔无低氧性肺血管收缩,是一种遗传性适应.大鼠肥大细胞通过激活某些生长因子,在肺血管的再建过程中可能起一定作用.
作者：陈秋红 刊期： 2001年第02期
中国应用生理学杂志
主管:
主办：中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
