迟素敏；朱运龙；顾建文；杜亮；王复周
血浆中分子物质(MMS)是分子量在300～5000 Dalton之间的一类多肽.有实验证明:肾衰患者血浆MMS在体外可抑制大鼠膈肌切片、肾皮质、大脑皮质和人类红细胞对葡萄糖的摄取,可抑制腺苷酸环化酶、Na+-K+ATP酶的活性.MMS影响机体多种酶的活性及膜的物质转运,势必会导致心肌的电生理特性及心肌舒缩能力的变化,甚至出现尿毒症性心肌病.本实验目的在于观察MMS对心肌舒缩能力的影响,为肾衰患者的心功能改变及治疗提供理论基础.
作者：王桂兰；崔存德；孙贻华；张慧 刊期： 2001年第02期
目的:观察家免心肌缺血/再灌注(I/R)损伤时心肌细胞核膜核苷三磷酸酶(NTPase)动力学及mRNA出核转运的变化.方法:制备家兔离体心脏I/R模型,密度梯度离心法制备心肌细胞核膜,按Tiffany等的方法测定NT-Pase活性及muRNA的转运率.结果:心肌细胞核膜NTPase在以ATP或GTP为底物时,与对照组比较,I/R组大反应速率(Vmax)分别降低26%及22%(P＜0.01).Km值分别升高54%及72%(P＜0.01);而缺血组Vmax及Km值较对照组无明显差异.以ATP或GTP启动反应时I/R组10 min内心肌细胞核mRNA转出率分别较对照组降低27%及32%(P＜0.01);而缺血组与对照组相比并无显著性差异(P＞0.05).结论:心肌缺血/再灌注损伤时,心肌细胞核膜受损,核膜上NTPase活性降低,导致细胞核膜mRNA出核受阻,从而可能影响蛋白质的合成表达.
作者：夏春芳；刘乃奎；扬军；庞永正；霍勇；唐朝枢 刊期： 2001年第02期
目的:建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素(GH)和催乳素(PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定(RIA)法;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用.方法:用氯胺-T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定.结果:用该方法测定急性低氧(0.5 h)时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高(P＜0.05),血浆则相反:7 km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量(P＜0.01);而5 km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异.结论:本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌.
作者：张颖沙；杜继曾；许宁一；吴雁 刊期： 2001年第02期
目的:研究葛根素(Pue)对缺氧缺糖(OGD)、谷氨酸钠(Glu)或反式-氨基-环戊基-1,3-二羧酸(trans-ACPD)引起的体外培养大鼠星形胶质细胞损伤的保护作用.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞LDH漏出,用3-氧-甲基[1-3H]-D-葡萄糖摄取法测定细胞体积.结果:缺氧缺糖5 h、Glu 0.5 mmol/L或trans-ACPD 1 mmol/L作用星形胶质细胞1 h,细胞体积及LDH漏出明显增加;当细胞在缺氧缺糖、Glu或trans-ACPD损伤的同时,加Pue 0.1mmol/L,能明显减少细胞的体积及LDH的漏出.结论:Pue对OGD、谷氨酸或trans-ACPD致大鼠星形胶质细胞损伤有保护作用.
作者：董丽萍；韩明；袁芳；徐立新；王天佑 刊期： 2001年第02期
目的:观察NO前体L-精氨酸(L-Arg)微量注入大鼠延髓腹面降压区(VSMd)对心血管活动的影响及其和L-谷氨酸(L-Glu)降压作用的关系.方法:采用延髓腹外侧部微量注射法,以整体灌流肾为模型观察与NO有关的药物对心血管活动的影响.结果:①VSMd内微量注入L-Arg,动脉血压(AP)呈剂量依赖性升高,肾灌流压(PPK)与AP同步上升,与注入生理盐水对照,差异均具有显著意义,但L-Arg对心率无显著影响;②预先在VSMd内注入甲基蓝可取消L-Arg的升压、升PPK作用;③VSMd内注入L-Glu,AP下降.如预先注入L-Arg后5 min再注入L-Glu,L-Glu的降压效应被衰减,其衰减程度依赖于L-Arg剂量.结论:VSMd内的L-Arg-NO通路参与延髓心血管中枢对AP的调控,其机制之一可能是通过cGMP抑制VSMd内的谷氨酸能神经突触.
作者：王晶；潘敬运；贾秉钧 刊期： 2001年第02期
近年来,肝移植的开展及肝门阻断术的临床应用越来越广泛,但在肝移植或肝门阻断再开放过程中始终存在着缺血/再灌注损伤,而且是导致术后肝功能不全的一个重要因素.以往实验证实,氧自由基(oxygen free radicals, OFR )在肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia/reperfusion injury, HIRI)中起重要的介导作用.而一氧化氮(nitric oxide, NO)在HIRI中起何作用,目前国外尚无一致的意见:国内未见详细报道.
作者：王万铁；徐正行；林丽娜；王卫；李东；王宗敏 刊期： 2001年第02期
高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化尚未见报道.本文观察CBS基因在不同组织中的表达活性及其在As时的变化规律.
作者：郑斌；韩梅；温进坤 刊期： 2001年第02期
目的和方法:构建含人β2肾上腺素能受体(β2-AR)基因的重组腺病毒(rAd)和腺相关病毒(rAAV),并感染体外培养的心肌细胞,检测目的基因在心肌细胞内的表达.结果:RT-PCR检测结果显示感染的心肌细胞均表达人β2-AR mRNA;western印迹杂交显示感染的心肌细胞可表达人β2-AR蛋白;放射性配基检测表明两种重组病毒感染的心肌细胞的β-AR密度无明显差异(P＞0.05),但均高于对照组(P＜0.01).结论:腺相关病毒(AAV)载体与腺病毒载体均可有效的转染心肌细胞并使目的基因表达.
作者：高文谦；李小鹰；吴小兵；裴雪涛；李梁 刊期： 2001年第02期
目的:了解乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对人垂体腺瘤细胞增殖的影响.方法:将Ach作用于体外培养的人垂体腺瘤细胞,测定MTT反应A值和3H-TdR参入量及用流式细胞仪测定细胞周期.结果:10-7～10-5mol/L Ach可剂量依赖性地使MTT反应A值和3H-TdR参入量降低,使垂体腺瘤G1期细胞比例增加(P＜0.01),并可被阿托品阻断.结论:Ach在体外能明显抑制培养的人垂体腺瘤细胞的增殖,这种作用是通过Ach受体来实现的.
作者：迟素敏；朱运龙；顾建文；杜亮；王复周 刊期： 2001年第02期
目的:测定左、右单侧去窦弓神经、双侧去窦弓神经、双侧去主动脉神经和双侧去窦神经后清醒大鼠动脉压力感受反射敏感性改变.方法:用改良的Smyth方法测定动脉压力感受反射敏感性;急慢性实验分别在手术后1 d、21 d进行,以比较其代偿功能.结果:去窦弓神经后大鼠动脉压力感受反射敏感性显著下降;左右单侧间有显著性差异,并有明显的相互代偿;去主动脉神经后的动脉压力感受反射敏感性的下降比去窦神经明显,且前者无明显代偿而后者有明显代偿.结论:对动脉压力感受反射敏感性来说,右侧窦弓神经的作用比左侧重要,但代偿能力相当;且主动脉神经的作用比窦神经重要,其代偿能力也显著优于窦神经.
作者：刘卫；赵晓民；赵志春；殷明；苏定冯 刊期： 2001年第02期
随着心血管治疗药物与技术方法的进步,冠心病患者的生活质量有所改善,但是晚期冠心病(endstage coronary heart disease)患者对于常规药物治疗反应较差,而且由于病人年龄偏大或冠状动脉的弥漫性病变等原因而不适于进行传统的心肌血管重建术,如冠状动脉搭桥术(coronary artery bypass graft,CABG)和经皮穿刺冠状动脉腔内血管成型术( Per-cutaneous transluminal coronary agioplasty, PTCA)等,因此如何改善晚期冠心病患者的生活质量已经成为当今医学界的重要课题.
作者：刘秀华；田牛 刊期： 2001年第02期
目的和方法:采用高效液相色谱-电化学检测法,分析7 d-6°头低位卧床模拟微重力,40～60℃热应激及其复合因素作用下人外周血中单胺类递质的含量,研究模拟微重力对热应激时人外周血中单胺类递质含量的影响,以探讨航天热应激的人体反应机理.结果:①模拟微重力单一因素暴露后,5-HT,NE,E含量与对照组相比均无显著变化(P＞0.05);②热应激单一因素暴露:40℃,50℃,60℃热应激时,与对照组相比,5-HT含量均显著降低(P＜0.01),而NE,E含量,在40℃热应激时无显著变化(P＞0.05),50℃,60℃热应激时均显著增加(P＜0.001);③热应激与模拟微重力复合因素暴露时,与对照组相比,5-HT含量显著降低(P＜0.01),而NE,E含量均无显著变化(P＞0.05).与热应激单一因素暴露组相比,50℃,60℃热应激时,NE,E含量均显著降低(P＜0.001),5-HT的含量则无显著变化(P＞0.05).结论:模拟微重力可使热诱导的NE,E含量显著降低,而对热应激引起的5-HT含量降低无显著影响.模拟微重力引起热应激时NE,E含量显著降低的变化,可能在航天热应激的人体反应机理中起重要的作用.
作者：陈晓萍；虞学军；常绍勇；费锦学 刊期： 2001年第02期
目的:探讨大鼠脑干听觉诱发电位(BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)生后发育模式的异同.方法:在同一批新生SD纯种大鼠连续10周同时观察BAEP和MLR生后发育的变化.结果:BAEP和MLR分别在生后14 d和17 d出现;BAEP各波峰潜伏期(PL)随鼠龄增长而递减,生后3～4周是PL缩短的主要时期,I波PL在生后29 d达成年值,其余各波PL在生后70 d全部达成年值;首次出现的MLR,其Pb和Na两波PL已达成年值,而Pa、Nb和Pb波PL也随鼠龄增长而缩短,但生后20～23 d很快就达成年值;BAEP的I、Ⅲ、Ⅳ波和MLR的Nb、Pb波波幅在生后3～4周期间迅速递增,且峰值明显大于成年值,然后逐渐回降.结论:大鼠MLR和BAEP生后发育的模式基本相同,但MLR各波PL较早达成年值.
作者：何斯纯；林兴会；周卓妍；周丽丽；李善民 刊期： 2001年第02期
目的和方法:在大鼠不均匀牵张膈肌标本(INSMP)上,用传统的微电极胞内记录方法.研究MTX对大鼠膈肌膈神经突触传递的影响.结果:①浴槽给予MTX(10μg/L),18.0 min后,串刺激神经突然不能产生串终板电位(EPP).随后,突触后膜开始逐渐去极化,大去极化27.0 mV.62.7 min后小终板电位(mEPP)频率逐渐增高,到70.3 min达到高频率,比给药前增加了32倍.这种高频的MEPP可以持续20～30 min;②提前20 min浴槽给予20μmol/L的L-型Ca2+通道阻断剂异搏定(Veranpamil),然后给于MTX(10 μg/L,78.5 min后串刺激神经不能产生串EPP,与单给MTX相比时间明显延长(P＜0.001).而突触后膜大去极化幅度、mEPP频率增高时间及高频率与单给MTX相比没有明显区别.结论:MTX对神经肌接头突触传递的阻断作用首先表现在神经纤维不能兴奋,这种作用可以部分被L-型Ca2+通道阻断剂Verapamil所对抗.随后出现突触后膜去极化、mEPP频率显著增高,Verapamil对此没有明显对抗作用.
作者：李立君；刘传缋 刊期： 2001年第02期
目的:为探索性构建全新型重组人B7-PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N-末端分别缺失34和16个氨基酸的人B7-1和B7-2基因胞外区,并构建含此基因的重组质粒.方法:根据B7-1和B7-2基因序列设计合成可扩增B7-1和B7-2 cDNA的特异性引物,用RT-PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7-1和B7-2 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析.结果和结论:从Raji细胞中扩增出预期的624和675bp的B7-1和B7-2 cDNA,将其克隆至pGEM-T载体中,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证,为进一步构建人B7-PE40外毒素融合蛋白奠定了基础.
作者：张惠丽；奚永志；孔繁华；陈汝光；屠敏；刘楠 刊期： 2001年第02期
目的:研究非等渗压浓度对血管内皮细胞NO合成酶活性的影响,并探索其发生机制.方法:使血管内皮细胞暴露于低渗(205 mOsm)或高渗透压(410 mOsm)培养液,用Griess法测定NO合成酶(NOS)活性,以Northem blotting观测细胞iNOS和eNOS基因表达的变化.结果:非等渗压浓度可使血管内皮细胞中NOS活性显著升高.细胞NOS活性变化具有明显的时间效应规律,低渗透压浓度效应产生的效应早于高渗透压浓度,且低渗透压浓度的影响较高渗透压浓度更为明显.Dexamethasone对这种非等渗透压诱导的NOS活性没有明显作用,给予cycloheximide,不影响非等渗压诱导的这种差异.Nothern blot分析表明:非等渗压浓度不诱导iNOS基因表达,而使eNOSmRNA表达增加.结论:非等渗透压浓度诱导血管内皮细胞NOS活性升高,eNOS基因表达增强是其主要机制之一.
作者：钱令嘉；Axel Goedecke；Jungen Schrader 刊期： 2001年第02期
已经证明,缺硒(Se)是导致克山病的基本原因,但另外的研究进一步发现,单纯缺Se并不能完全解释克山病的许多流行病学特点.研究发现:克山病病区水、土、粮食及人群的血清、头发中除低Se外,还常伴有镉(Cd)含量较高,因而推测:高Cd是导致克山病心肌损害的重要协同因素,为进一步证实上述观点,本研究在高Cd条件下培养大鼠心肌细胞,并以细胞内微电极技术对其生物电活动进行定量测定,为进一步阐明克山病心肌细胞损害的机理提供实验依据.
作者：段耀奎；曹文华；王福顺；张德利 刊期： 2001年第02期
目的:建立4月龄人胎肝组织选择性表达基因EST库,为研究胚胎肝组织特异表达基因提供有力的工具.方法:采用表达性差异显示分析(representational difference analysis, RDA)技术建立4月龄人胎肝组织选择性表达基因EST库,并测定部分克隆核苷酸序列,以竞争PCR检测代表性基因的差异表达.结果与结论:以珠蛋白家族基因为标志,所建差减cDNA文库中α-珠蛋白家族基因的表达频率较未差减cDNA文库增高7倍,同时该文库也含有多种与肝生长密切相关的基因,表明RDA技术确是研究差异表达基因的有效手段,所建EST库富集胎肝特异表达基因.部分克隆序列分析获得2种未报道序列,其中一株含有丝/苏氨酸激酶结构域,表明可望从此库中分离具有重要未知功能的新基因.
作者：许望翔；魏汉东；汪思应；杨晓明 刊期： 2001年第02期
目的:探讨淀粉样β蛋白(Aβ1-40)和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体(GluR)功能的影响.方法:采用Promega试剂盒提取3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA,并将50 nl(50ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞.注射后的卵母细胞在(19±1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达.这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录.超氧阴离子自由基(SAFRs)和Aβ1-40于记录前12 h、24 h、96 h分别加入孵育液.结果:爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和5-羟色胺受体.Aβ-40对表达的GluR有抑制效应,其程度依作用时间和浓度而异.20 nmol/LAβ1-40作用24 h对表达的GluR功能无影响.与SAFRs共同孵育时,20 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR功能有明显影响,60 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR有明显抑制效应(降低21%,P＜0.05),而60 nmol/LAβ-40作用24 h下降达52%.维生素E对这些效应有拮抗作用.结论:自由基和Aβ对GluR具有抑制效应,该效应能被维生素E拮抗.Aβ可能通过抑制受体功能在AD病理生理学中起作用.
作者：黄福南；张炳烈；李文彬；崔旭；韩志涛；房征宁 刊期： 2001年第02期
机体对低氧的应激反应与适应主要是通过对有关低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRG)的调控实现的,HRG参与低氧的感受、低氧信号的传导及生理反应等.近年来对低氧反应基因的研究主要是关于己知基因的调控序列、调控环节及生物学功能的研究,尚未有新的、有明确生物学意义的低氧反应候选基因被发现.因此,我们采用DD-PCR技术,观察低氧大鼠脑皮层细胞在低氧时基因的差异表达,以期了解中枢神经系统在低氧过程中可能参与的相关基因.
作者：马子敏；谢印芝；杨谊；范明；尹昭云 刊期： 2001年第02期
中国应用生理学杂志
主管:
主办：中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
