王万铁;徐正行;林丽娜;王卫;李东;王宗敏
目的和方法:用直流电损毁大鼠双侧蓝斑,观察膀胱及各内脏组织的出血性变化.结果:完全损毁双侧蓝斑可恒定地引起严重的膀胱出血,并伴有其它脏器不规律性发生的充血或轻微出血.部分损毁双侧蓝斑亦可引起多脏器轻微的充血和出血,但膀胱出血不再恒定发生.切除肾上腺减轻应激反应,或应用组织胺H2受体拮抗剂,对完全损毁双侧蓝斑引起的膀胱出血或其它脏器的组织学出血性变化无明显影响.结论:损毁大鼠双侧蓝斑引起的多脏器出血并非由手术应激引起;也与组织胺H2受体无关,其机制有待进一步研究.
作者:王继江;袁文俊;杭建良;王伟忠;陈宜张 刊期: 2001年第02期
目的:研制一种微机控制的大鼠多功能行为训练检测系统-梯度电压自动驱动大鼠及微机适时显示,记录和分析实验结果.方法:采用仿windows界面,以Turbo C2.0编制,利用TC直接对硬件端口操作,完成信号的采集,处理和对实验仪器的控制.结果:本系统实现了:①梯度电压自动驱动;②声,光,电不同条件刺激;③多路径自动设置;④所测数据建立数据库以SAS软件处理其结果.结论:本系统自动化程度高,操作简便,数据处理科学、准确,尤其是还可用于听觉、视觉等特殊鼠记忆模型的建立.
作者:朱启文;匡保平;任其伟;汤浩 刊期: 2001年第02期
随着心血管治疗药物与技术方法的进步,冠心病患者的生活质量有所改善,但是晚期冠心病(endstage coronary heart disease)患者对于常规药物治疗反应较差,而且由于病人年龄偏大或冠状动脉的弥漫性病变等原因而不适于进行传统的心肌血管重建术,如冠状动脉搭桥术(coronary artery bypass graft,CABG)和经皮穿刺冠状动脉腔内血管成型术( Per-cutaneous transluminal coronary agioplasty, PTCA)等,因此如何改善晚期冠心病患者的生活质量已经成为当今医学界的重要课题.
作者:刘秀华;田牛 刊期: 2001年第02期
目的:观察家免心肌缺血/再灌注(I/R)损伤时心肌细胞核膜核苷三磷酸酶(NTPase)动力学及mRNA出核转运的变化.方法:制备家兔离体心脏I/R模型,密度梯度离心法制备心肌细胞核膜,按Tiffany等的方法测定NT-Pase活性及muRNA的转运率.结果:心肌细胞核膜NTPase在以ATP或GTP为底物时,与对照组比较,I/R组大反应速率(Vmax)分别降低26%及22%(P<0.01).Km值分别升高54%及72%(P<0.01);而缺血组Vmax及Km值较对照组无明显差异.以ATP或GTP启动反应时I/R组10 min内心肌细胞核mRNA转出率分别较对照组降低27%及32%(P<0.01);而缺血组与对照组相比并无显著性差异(P>0.05).结论:心肌缺血/再灌注损伤时,心肌细胞核膜受损,核膜上NTPase活性降低,导致细胞核膜mRNA出核受阻,从而可能影响蛋白质的合成表达.
作者:夏春芳;刘乃奎;扬军;庞永正;霍勇;唐朝枢 刊期: 2001年第02期
机体对低氧的应激反应与适应主要是通过对有关低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRG)的调控实现的,HRG参与低氧的感受、低氧信号的传导及生理反应等.近年来对低氧反应基因的研究主要是关于己知基因的调控序列、调控环节及生物学功能的研究,尚未有新的、有明确生物学意义的低氧反应候选基因被发现.因此,我们采用DD-PCR技术,观察低氧大鼠脑皮层细胞在低氧时基因的差异表达,以期了解中枢神经系统在低氧过程中可能参与的相关基因.
作者:马子敏;谢印芝;杨谊;范明;尹昭云 刊期: 2001年第02期
目的和方法:用常规离体血管灌流方法,观察钠尿肽家族新成员C型钠尿肽(CNP)对家兔腹主静脉及腹主动脉的作用及其作用机制.结果:CNP在10-10~10-6mol/L浓度范围内对家兔静脉及动脉均呈剂量依赖性的舒张效应.其对静脉的作用与硝酸甘油(NTG)相似,且扩血管作用无ANP强,以腹主动脉为对象分别施加阿托品(10-7mol/L),酚妥拉明(20μg)或消炎痛(20μg)等均不影响CNP的舒血管作用,优降糖和心得安可明显降低CNP对腹主动脉的舒张作用.CNP在基础状态下提前加入不抑制NE的缩血管反应.结论:CNP可能是一种静脉系统的扩张剂,同时亦是调节动脉张力的选择性调节肽,CNP舒血管作用机制至少有两途径:一是与K+-ATP通道的开放有关,二是与激活β受体有关.
作者:王跃民;裴建明;朱妙章;臧益民;李明哲;牛国保;施溥涛 刊期: 2001年第02期
目的:探讨淀粉样β蛋白(Aβ1-40)和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体(GluR)功能的影响.方法:采用Promega试剂盒提取3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA,并将50 nl(50ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞.注射后的卵母细胞在(19±1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达.这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录.超氧阴离子自由基(SAFRs)和Aβ1-40于记录前12 h、24 h、96 h分别加入孵育液.结果:爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和5-羟色胺受体.Aβ-40对表达的GluR有抑制效应,其程度依作用时间和浓度而异.20 nmol/LAβ1-40作用24 h对表达的GluR功能无影响.与SAFRs共同孵育时,20 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR功能有明显影响,60 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR有明显抑制效应(降低21%,P<0.05),而60 nmol/LAβ-40作用24 h下降达52%.维生素E对这些效应有拮抗作用.结论:自由基和Aβ对GluR具有抑制效应,该效应能被维生素E拮抗.Aβ可能通过抑制受体功能在AD病理生理学中起作用.
作者:黄福南;张炳烈;李文彬;崔旭;韩志涛;房征宁 刊期: 2001年第02期
目的:探讨大鼠脑干听觉诱发电位(BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)生后发育模式的异同.方法:在同一批新生SD纯种大鼠连续10周同时观察BAEP和MLR生后发育的变化.结果:BAEP和MLR分别在生后14 d和17 d出现;BAEP各波峰潜伏期(PL)随鼠龄增长而递减,生后3~4周是PL缩短的主要时期,I波PL在生后29 d达成年值,其余各波PL在生后70 d全部达成年值;首次出现的MLR,其Pb和Na两波PL已达成年值,而Pa、Nb和Pb波PL也随鼠龄增长而缩短,但生后20~23 d很快就达成年值;BAEP的I、Ⅲ、Ⅳ波和MLR的Nb、Pb波波幅在生后3~4周期间迅速递增,且峰值明显大于成年值,然后逐渐回降.结论:大鼠MLR和BAEP生后发育的模式基本相同,但MLR各波PL较早达成年值.
作者:何斯纯;林兴会;周卓妍;周丽丽;李善民 刊期: 2001年第02期
目的和方法:在大鼠不均匀牵张膈肌标本(INSMP)上,用传统的微电极胞内记录方法.研究MTX对大鼠膈肌膈神经突触传递的影响.结果:①浴槽给予MTX(10μg/L),18.0 min后,串刺激神经突然不能产生串终板电位(EPP).随后,突触后膜开始逐渐去极化,大去极化27.0 mV.62.7 min后小终板电位(mEPP)频率逐渐增高,到70.3 min达到高频率,比给药前增加了32倍.这种高频的MEPP可以持续20~30 min;②提前20 min浴槽给予20μmol/L的L-型Ca2+通道阻断剂异搏定(Veranpamil),然后给于MTX(10 μg/L,78.5 min后串刺激神经不能产生串EPP,与单给MTX相比时间明显延长(P<0.001).而突触后膜大去极化幅度、mEPP频率增高时间及高频率与单给MTX相比没有明显区别.结论:MTX对神经肌接头突触传递的阻断作用首先表现在神经纤维不能兴奋,这种作用可以部分被L-型Ca2+通道阻断剂Verapamil所对抗.随后出现突触后膜去极化、mEPP频率显著增高,Verapamil对此没有明显对抗作用.
作者:李立君;刘传缋 刊期: 2001年第02期
目的与方法:在离体海马脑片上观察人参皂甙对谷氨酸兴奋性毒性的拮抗作用,在培养的神经细胞和胶质细胞上分别观察人参皂甙对模拟缺血时谷氨酸释放和摄取的影响,以证明人参皂甙抗缺氧缺血性脑损伤与减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用有关.结果:在人工脑脊液中导入谷氨酸(1 mmol/L)20 min,引起大鼠海马脑片OPS降低直至消失,恢复正常人工脑脊液灌流1 h后OPS难以恢复.而使用人参皂甙可促进海马脑片OPS的恢复,作用以20μg/ml剂量组好.在培养的小鼠皮质神经元和胶质细胞,模拟缺血时神经元谷氨酸释放量达对照的数倍,而胶质细胞对谷氨酸的摄取显著减少.使用人参皂甙(20μg/m1)可明显抑制神经元谷氨酸的释放,并促进胶质细胞对谷氨酸的摄取.结论:人参皂甙减少谷氨酸的兴奋性神经毒性作用可能是其抗缺氧缺血性脑损伤的重要机制.
作者:姜正林;陈益人;周纯;施建生;段树民 刊期: 2001年第02期
目的:测定左、右单侧去窦弓神经、双侧去窦弓神经、双侧去主动脉神经和双侧去窦神经后清醒大鼠动脉压力感受反射敏感性改变.方法:用改良的Smyth方法测定动脉压力感受反射敏感性;急慢性实验分别在手术后1 d、21 d进行,以比较其代偿功能.结果:去窦弓神经后大鼠动脉压力感受反射敏感性显著下降;左右单侧间有显著性差异,并有明显的相互代偿;去主动脉神经后的动脉压力感受反射敏感性的下降比去窦神经明显,且前者无明显代偿而后者有明显代偿.结论:对动脉压力感受反射敏感性来说,右侧窦弓神经的作用比左侧重要,但代偿能力相当;且主动脉神经的作用比窦神经重要,其代偿能力也显著优于窦神经.
作者:刘卫;赵晓民;赵志春;殷明;苏定冯 刊期: 2001年第02期
目的:提供一种比较简易的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型制备方法.方法:对Zea Longa线栓法进行改进,并与Zea Longa法从rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等三个方面进行对比研究.结果:我们改进的线栓法与Zea Longa法相比,在rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等方面,两者之间无显著性差异(t检验,P>0.05).结论:改进线栓法建立的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型也同样可靠、稳定,且较Zea Longa法易操作.
作者:曹勇军;程彦斌 刊期: 2001年第02期
目的:了解睫状神经营养因子(CNTF)对去神经引起的肌肉萎缩的治疗作用.方法:离断SD大鼠一侧坐骨神经,连续给予CNTF 20 d,观察肌肉湿重、蛋白含量、肌纤维横截面积、收缩性能和肢残程度.结果:①给予0.2 mg/kg的CNTF,可使损伤侧肌纤维横截面积增加35%,肌肉湿重增加38%,胫前肌总蛋白含量增加24%,腓长肌强直收缩强度提高40%,显著改善肢残程度;②0.2 mg/kg的CNTF作用明显强于0.05 mg/kg的CNTF;③比目鱼肌(慢肌)比伸趾长肌(快肌)对CNTF更敏感.结论:CNTF能显著改善成年大鼠坐骨神经离断后骨路肌的萎缩和功能丧失,该效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关.
作者:邓小华;侍坚;罗嗣琼;何成;王成海;路长林 刊期: 2001年第02期
目的:阳离子脂质体介导hFL真核表达载体pIRESlneo/hFL转染人骨髓基质细胞系HFCL细胞,观察hFL在HFCL细胞中的表达.方法:以阳离子脂质体介导法将重组真核表达载体pIRESlneo/hFL导入人骨髓基质细胞系HFCL细胞,G418筛选获得的阳性细胞以Southem blot和Northern blot分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录,Western blot检测其蛋白表达,ELISA及人脐血CD34+细胞增殖实验检测其蛋白表达量和活性.结果:hFL基因己整合到靶细胞HFCL基因组DNA中,在mRNA和蛋白质水平上均可检测到其表达,ELISA法测得hFL的表达量为(60.3±0.3)ng.106Cell-1@d-1,分泌量在细胞传代30次后仍保持稳定,并且表达的hFL具有良好的生物学活性.结论:阳离子脂质体介导的hFL真核表达载体在人骨髓基质细胞系HFCL中获得持续稳定表达,并具有良好的生物学活性.为转基因骨髓基质细胞移植促进造血重建的体内动物实验研究奠定了基础.
作者:马俐君;王冠军;李梁;洪欣;裴雪涛 刊期: 2001年第02期
目的:为探索性构建全新型重组人B7-PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N-末端分别缺失34和16个氨基酸的人B7-1和B7-2基因胞外区,并构建含此基因的重组质粒.方法:根据B7-1和B7-2基因序列设计合成可扩增B7-1和B7-2 cDNA的特异性引物,用RT-PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7-1和B7-2 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析.结果和结论:从Raji细胞中扩增出预期的624和675bp的B7-1和B7-2 cDNA,将其克隆至pGEM-T载体中,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证,为进一步构建人B7-PE40外毒素融合蛋白奠定了基础.
作者:张惠丽;奚永志;孔繁华;陈汝光;屠敏;刘楠 刊期: 2001年第02期
近年来,肝移植的开展及肝门阻断术的临床应用越来越广泛,但在肝移植或肝门阻断再开放过程中始终存在着缺血/再灌注损伤,而且是导致术后肝功能不全的一个重要因素.以往实验证实,氧自由基(oxygen free radicals, OFR )在肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia/reperfusion injury, HIRI)中起重要的介导作用.而一氧化氮(nitric oxide, NO)在HIRI中起何作用,目前国外尚无一致的意见:国内未见详细报道.
作者:王万铁;徐正行;林丽娜;王卫;李东;王宗敏 刊期: 2001年第02期
目的和方法:构建含人β2肾上腺素能受体(β2-AR)基因的重组腺病毒(rAd)和腺相关病毒(rAAV),并感染体外培养的心肌细胞,检测目的基因在心肌细胞内的表达.结果:RT-PCR检测结果显示感染的心肌细胞均表达人β2-AR mRNA;western印迹杂交显示感染的心肌细胞可表达人β2-AR蛋白;放射性配基检测表明两种重组病毒感染的心肌细胞的β-AR密度无明显差异(P>0.05),但均高于对照组(P<0.01).结论:腺相关病毒(AAV)载体与腺病毒载体均可有效的转染心肌细胞并使目的基因表达.
作者:高文谦;李小鹰;吴小兵;裴雪涛;李梁 刊期: 2001年第02期
高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化尚未见报道.本文观察CBS基因在不同组织中的表达活性及其在As时的变化规律.
作者:郑斌;韩梅;温进坤 刊期: 2001年第02期
目的:研究缺血预处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响.方法:往置入腹主动脉的Swan-Ganz导管气囊内注气造成兔腰髓缺血模型.将实验兔分为假手术组、缺血组和预处理组.应用反相高效液相色谱方法(reverse phaseHPLC),对缺血再灌注后不同时间点腰髓组织中磷酸腺苷(ATP、ADP、AMP)的含量进行检测.结果:和假手术组相比,缺血组兔再灌注后各时间点腰髓组织ATP含量有明显下降(P<0.01).与缺血组相应时间点相比,预处理组兔再灌注后腰髓组织ATP含量有明显提高(P<0.01).结论:缺血预处理可显著提高缺血再灌注后兔脊髓组织ATP含量,这可能是缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用的机制之一.
作者:蒙革;朱朗标;余翼飞;廖杰;赵玉兰 刊期: 2001年第02期
青龙藤(Biondia henriyi,BH)为萝科青龙藤属植物,具有活血舒筋,理气祛风的功能:主治跌打损伤、下肢冷痛、风湿手足麻木、牙痛.在其它实验中我们发现青龙藤提取物可以刺激胰岛β细胞单位放电增加,促进胰岛素分泌,使糖尿病模型大鼠血浆中的胰岛素水平由(18.8±2.3)mu/L升高到(43.2±3.5)mu/L.已知当血糖浓度升高,胰岛β细胞膜上KATP通道关闭,引起胰岛素分泌.为探讨作用机制,用记录小白鼠胰岛β细胞膜上的KATP通道电流为指标,观察对KATP通道的影响.
作者:杨蔚;黄民;车笛;王绍;欧阳明 刊期: 2001年第02期