钱令嘉；Axel Goedecke；Jungen Schrader
目的和方法:构建含人β2肾上腺素能受体(β2-AR)基因的重组腺病毒(rAd)和腺相关病毒(rAAV),并感染体外培养的心肌细胞,检测目的基因在心肌细胞内的表达.结果:RT-PCR检测结果显示感染的心肌细胞均表达人β2-AR mRNA;western印迹杂交显示感染的心肌细胞可表达人β2-AR蛋白;放射性配基检测表明两种重组病毒感染的心肌细胞的β-AR密度无明显差异(P＞0.05),但均高于对照组(P＜0.01).结论:腺相关病毒(AAV)载体与腺病毒载体均可有效的转染心肌细胞并使目的基因表达.
作者：高文谦；李小鹰；吴小兵；裴雪涛；李梁 刊期： 2001年第02期
目的和方法:用常规离体血管灌流方法,观察钠尿肽家族新成员C型钠尿肽(CNP)对家兔腹主静脉及腹主动脉的作用及其作用机制.结果:CNP在10-10～10-6mol/L浓度范围内对家兔静脉及动脉均呈剂量依赖性的舒张效应.其对静脉的作用与硝酸甘油(NTG)相似,且扩血管作用无ANP强,以腹主动脉为对象分别施加阿托品(10-7mol/L),酚妥拉明(20μg)或消炎痛(20μg)等均不影响CNP的舒血管作用,优降糖和心得安可明显降低CNP对腹主动脉的舒张作用.CNP在基础状态下提前加入不抑制NE的缩血管反应.结论:CNP可能是一种静脉系统的扩张剂,同时亦是调节动脉张力的选择性调节肽,CNP舒血管作用机制至少有两途径:一是与K+-ATP通道的开放有关,二是与激活β受体有关.
作者：王跃民；裴建明；朱妙章；臧益民；李明哲；牛国保；施溥涛 刊期： 2001年第02期
随着心血管治疗药物与技术方法的进步,冠心病患者的生活质量有所改善,但是晚期冠心病(endstage coronary heart disease)患者对于常规药物治疗反应较差,而且由于病人年龄偏大或冠状动脉的弥漫性病变等原因而不适于进行传统的心肌血管重建术,如冠状动脉搭桥术(coronary artery bypass graft,CABG)和经皮穿刺冠状动脉腔内血管成型术( Per-cutaneous transluminal coronary agioplasty, PTCA)等,因此如何改善晚期冠心病患者的生活质量已经成为当今医学界的重要课题.
作者：刘秀华；田牛 刊期： 2001年第02期
目的:研究缺血预处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响.方法:往置入腹主动脉的Swan-Ganz导管气囊内注气造成兔腰髓缺血模型.将实验兔分为假手术组、缺血组和预处理组.应用反相高效液相色谱方法(reverse phaseHPLC),对缺血再灌注后不同时间点腰髓组织中磷酸腺苷(ATP、ADP、AMP)的含量进行检测.结果:和假手术组相比,缺血组兔再灌注后各时间点腰髓组织ATP含量有明显下降(P＜0.01).与缺血组相应时间点相比,预处理组兔再灌注后腰髓组织ATP含量有明显提高(P＜0.01).结论:缺血预处理可显著提高缺血再灌注后兔脊髓组织ATP含量,这可能是缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用的机制之一.
作者：蒙革；朱朗标；余翼飞；廖杰；赵玉兰 刊期： 2001年第02期
目的:观察家免心肌缺血/再灌注(I/R)损伤时心肌细胞核膜核苷三磷酸酶(NTPase)动力学及mRNA出核转运的变化.方法:制备家兔离体心脏I/R模型,密度梯度离心法制备心肌细胞核膜,按Tiffany等的方法测定NT-Pase活性及muRNA的转运率.结果:心肌细胞核膜NTPase在以ATP或GTP为底物时,与对照组比较,I/R组大反应速率(Vmax)分别降低26%及22%(P＜0.01).Km值分别升高54%及72%(P＜0.01);而缺血组Vmax及Km值较对照组无明显差异.以ATP或GTP启动反应时I/R组10 min内心肌细胞核mRNA转出率分别较对照组降低27%及32%(P＜0.01);而缺血组与对照组相比并无显著性差异(P＞0.05).结论:心肌缺血/再灌注损伤时,心肌细胞核膜受损,核膜上NTPase活性降低,导致细胞核膜mRNA出核受阻,从而可能影响蛋白质的合成表达.
作者：夏春芳；刘乃奎；扬军；庞永正；霍勇；唐朝枢 刊期： 2001年第02期
目的:探讨淀粉样β蛋白(Aβ1-40)和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体(GluR)功能的影响.方法:采用Promega试剂盒提取3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA,并将50 nl(50ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞.注射后的卵母细胞在(19±1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达.这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录.超氧阴离子自由基(SAFRs)和Aβ1-40于记录前12 h、24 h、96 h分别加入孵育液.结果:爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和5-羟色胺受体.Aβ-40对表达的GluR有抑制效应,其程度依作用时间和浓度而异.20 nmol/LAβ1-40作用24 h对表达的GluR功能无影响.与SAFRs共同孵育时,20 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR功能有明显影响,60 nmol/LAβ1-40作用12 h即对表达的GluR有明显抑制效应(降低21%,P＜0.05),而60 nmol/LAβ-40作用24 h下降达52%.维生素E对这些效应有拮抗作用.结论:自由基和Aβ对GluR具有抑制效应,该效应能被维生素E拮抗.Aβ可能通过抑制受体功能在AD病理生理学中起作用.
作者：黄福南；张炳烈；李文彬；崔旭；韩志涛；房征宁 刊期： 2001年第02期
目的:了解乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对人垂体腺瘤细胞增殖的影响.方法:将Ach作用于体外培养的人垂体腺瘤细胞,测定MTT反应A值和3H-TdR参入量及用流式细胞仪测定细胞周期.结果:10-7～10-5mol/L Ach可剂量依赖性地使MTT反应A值和3H-TdR参入量降低,使垂体腺瘤G1期细胞比例增加(P＜0.01),并可被阿托品阻断.结论:Ach在体外能明显抑制培养的人垂体腺瘤细胞的增殖,这种作用是通过Ach受体来实现的.
作者：迟素敏；朱运龙；顾建文；杜亮；王复周 刊期： 2001年第02期
目的:探讨N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的可能作用.方法:以改良的Kreb's液灌流新生SD大鼠离体延髓脑片,记录与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动(respi-ratory rhythmical discharge activity, RRDA),在灌流中给予兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂,观察其对RRDA的影响.结果:使用非NMDA受体激动剂海人酸(KA)后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长,NMDA受体激动剂NMDA对呼吸活动则没有明显影响;相应的拮抗剂6-氰基-7-硝基喹恶啉土卫四(DNQX)和2-氨基磷酸戊酸(AP5)均可使放电频率和积分幅值明显降低,吸气时间显著缩短,但DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短.结论:在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用.
作者：潘秉兴；吴中海；张少华 刊期： 2001年第02期
目的:研究葛根素(Pue)对缺氧缺糖(OGD)、谷氨酸钠(Glu)或反式-氨基-环戊基-1,3-二羧酸(trans-ACPD)引起的体外培养大鼠星形胶质细胞损伤的保护作用.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞LDH漏出,用3-氧-甲基[1-3H]-D-葡萄糖摄取法测定细胞体积.结果:缺氧缺糖5 h、Glu 0.5 mmol/L或trans-ACPD 1 mmol/L作用星形胶质细胞1 h,细胞体积及LDH漏出明显增加;当细胞在缺氧缺糖、Glu或trans-ACPD损伤的同时,加Pue 0.1mmol/L,能明显减少细胞的体积及LDH的漏出.结论:Pue对OGD、谷氨酸或trans-ACPD致大鼠星形胶质细胞损伤有保护作用.
作者：董丽萍；韩明；袁芳；徐立新；王天佑 刊期： 2001年第02期
金属硫蛋白(MT)是普遍存在各种生物体内、富含硫基的小分子蛋白,在缺血/再灌注(I/R)损伤中通过清除自由基减轻心肌细胞损伤,同时MT参与预缺血保护(IPC).目前对MT在IPC中的保护作用机制及功效仍无明确研究,本实验以培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模拟缺血/再灌注损伤,检测心肌细胞在IPC处理后24 hMT的含量、脂质过氧化程度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力变化,锌诱导产生的MT作用,并比较MT与抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)的保护作用,初步探讨MT的心肌保护作用机制及应用价值.
作者：金慧英；郁兴明；李法卿；房德兴；李素芹；谭维国；陈华标 刊期： 2001年第02期
目的:研究肺循环对慢性缺氧的适应机理.方法:在4 300m的高度捕捉到高原适应动物鼠兔,带到2 260 m的高度并和10只Wistar大鼠在模拟4 300m和5000 m高度的低压仓内进行了肺动脉压的测定,观察肺组织学和组织免疫化学的改变.结果:在2 260 m,鼠兔的Ppa明显低于Wistar大鼠,二者分别为(1.5±0@07)kPa和(2.9±1.1)kPa(P＜0.01).随着海拔高度的增加,鼠兔的Ppa上升不明显,而Wistar大鼠增加显著.左右心室比重鼠兔为0.22,而Wistar大鼠为0.45.鼠兔的Hb,Hct和2.3-DPG均低于大鼠.大鼠肺小血管周围可见肥大细胞(7.1±0.33)mm2,免疫组化染色mast cell typtase颗粒呈阳性,鼠兔未发现肥大细胞及此种免疫反应.肺小动脉中层较鼠兔厚,分别为27.21%和9.22%,壁的厚度和Ppa有很好的(r=0.763).结论:鼠兔无低氧性肺血管收缩,是一种遗传性适应.大鼠肥大细胞通过激活某些生长因子,在肺血管的再建过程中可能起一定作用.
作者：陈秋红 刊期： 2001年第02期
目的:为探索性构建全新型重组人B7-PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N-末端分别缺失34和16个氨基酸的人B7-1和B7-2基因胞外区,并构建含此基因的重组质粒.方法:根据B7-1和B7-2基因序列设计合成可扩增B7-1和B7-2 cDNA的特异性引物,用RT-PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7-1和B7-2 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析.结果和结论:从Raji细胞中扩增出预期的624和675bp的B7-1和B7-2 cDNA,将其克隆至pGEM-T载体中,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证,为进一步构建人B7-PE40外毒素融合蛋白奠定了基础.
作者：张惠丽；奚永志；孔繁华；陈汝光；屠敏；刘楠 刊期： 2001年第02期
目的:研究非等渗压浓度对血管内皮细胞NO合成酶活性的影响,并探索其发生机制.方法:使血管内皮细胞暴露于低渗(205 mOsm)或高渗透压(410 mOsm)培养液,用Griess法测定NO合成酶(NOS)活性,以Northem blotting观测细胞iNOS和eNOS基因表达的变化.结果:非等渗压浓度可使血管内皮细胞中NOS活性显著升高.细胞NOS活性变化具有明显的时间效应规律,低渗透压浓度效应产生的效应早于高渗透压浓度,且低渗透压浓度的影响较高渗透压浓度更为明显.Dexamethasone对这种非等渗透压诱导的NOS活性没有明显作用,给予cycloheximide,不影响非等渗压诱导的这种差异.Nothern blot分析表明:非等渗压浓度不诱导iNOS基因表达,而使eNOSmRNA表达增加.结论:非等渗透压浓度诱导血管内皮细胞NOS活性升高,eNOS基因表达增强是其主要机制之一.
作者：钱令嘉；Axel Goedecke；Jungen Schrader 刊期： 2001年第02期
目的:研究黄芪对糖尿病性肾病大鼠心肌脂质过氧化作用及NO水平的影响.方法:雄性Wistar大鼠分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病性肾病组、糖尿病性肾病伴急性肾功能损害组、黄芪治疗组.分别测定各组心肌组织内SOD、GSH-Px、NOS活性及MDA、NO含量.结果:各实验组心肌组织内GSH-Px、SOD活性下降,NOS活性及MDA、NO含量增高,其中以糖尿病性肾病伴急性肾功能损害组明显,黄芪对之有纠正作用.结论:黄芪能抑制糖尿病性肾病心肌脂质过氧作用并降低NO水平,从而对心肌产生保护作用.
作者：陈国荣；刘毅；毛孙忠；李剑敏；郑尘飞 刊期： 2001年第02期
目的:了解睫状神经营养因子(CNTF)对去神经引起的肌肉萎缩的治疗作用.方法:离断SD大鼠一侧坐骨神经,连续给予CNTF 20 d,观察肌肉湿重、蛋白含量、肌纤维横截面积、收缩性能和肢残程度.结果:①给予0.2 mg/kg的CNTF,可使损伤侧肌纤维横截面积增加35%,肌肉湿重增加38%,胫前肌总蛋白含量增加24%,腓长肌强直收缩强度提高40%,显著改善肢残程度;②0.2 mg/kg的CNTF作用明显强于0.05 mg/kg的CNTF;③比目鱼肌(慢肌)比伸趾长肌(快肌)对CNTF更敏感.结论:CNTF能显著改善成年大鼠坐骨神经离断后骨路肌的萎缩和功能丧失,该效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关.
作者：邓小华；侍坚；罗嗣琼；何成；王成海；路长林 刊期： 2001年第02期
既往研究表明,神经细胞死亡容易坏死而较少发生凋亡,1994年,Ratan等培养神经细胞发现有大量神经元发生凋亡,但其凋亡机制尚不清楚.本实验采用氧化应激方法作用于原代培养的新生大鼠大脑皮质神经元,并进行凋亡指标的检测,以对其凋亡机制进行探讨.
作者：于如同；高立达；官鹏；毛伯镛；姜曙；孙兵 刊期： 2001年第02期
目的和方法:在大鼠不均匀牵张膈肌标本(INSMP)上,用传统的微电极胞内记录方法.研究MTX对大鼠膈肌膈神经突触传递的影响.结果:①浴槽给予MTX(10μg/L),18.0 min后,串刺激神经突然不能产生串终板电位(EPP).随后,突触后膜开始逐渐去极化,大去极化27.0 mV.62.7 min后小终板电位(mEPP)频率逐渐增高,到70.3 min达到高频率,比给药前增加了32倍.这种高频的MEPP可以持续20～30 min;②提前20 min浴槽给予20μmol/L的L-型Ca2+通道阻断剂异搏定(Veranpamil),然后给于MTX(10 μg/L,78.5 min后串刺激神经不能产生串EPP,与单给MTX相比时间明显延长(P＜0.001).而突触后膜大去极化幅度、mEPP频率增高时间及高频率与单给MTX相比没有明显区别.结论:MTX对神经肌接头突触传递的阻断作用首先表现在神经纤维不能兴奋,这种作用可以部分被L-型Ca2+通道阻断剂Verapamil所对抗.随后出现突触后膜去极化、mEPP频率显著增高,Verapamil对此没有明显对抗作用.
作者：李立君；刘传缋 刊期： 2001年第02期
目的:建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素(GH)和催乳素(PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定(RIA)法;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用.方法:用氯胺-T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定.结果:用该方法测定急性低氧(0.5 h)时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高(P＜0.05),血浆则相反:7 km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量(P＜0.01);而5 km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异.结论:本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌.
作者：张颖沙；杜继曾；许宁一；吴雁 刊期： 2001年第02期
机体对低氧的应激反应与适应主要是通过对有关低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRG)的调控实现的,HRG参与低氧的感受、低氧信号的传导及生理反应等.近年来对低氧反应基因的研究主要是关于己知基因的调控序列、调控环节及生物学功能的研究,尚未有新的、有明确生物学意义的低氧反应候选基因被发现.因此,我们采用DD-PCR技术,观察低氧大鼠脑皮层细胞在低氧时基因的差异表达,以期了解中枢神经系统在低氧过程中可能参与的相关基因.
作者：马子敏；谢印芝；杨谊；范明；尹昭云 刊期： 2001年第02期
目的和方法:用直流电损毁大鼠双侧蓝斑,观察膀胱及各内脏组织的出血性变化.结果:完全损毁双侧蓝斑可恒定地引起严重的膀胱出血,并伴有其它脏器不规律性发生的充血或轻微出血.部分损毁双侧蓝斑亦可引起多脏器轻微的充血和出血,但膀胱出血不再恒定发生.切除肾上腺减轻应激反应,或应用组织胺H2受体拮抗剂,对完全损毁双侧蓝斑引起的膀胱出血或其它脏器的组织学出血性变化无明显影响.结论:损毁大鼠双侧蓝斑引起的多脏器出血并非由手术应激引起;也与组织胺H2受体无关,其机制有待进一步研究.
作者：王继江；袁文俊；杭建良；王伟忠；陈宜张 刊期： 2001年第02期
中国应用生理学杂志
主管:
主办：中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
