小鼠去信号肽AFP/DC疫苗体外抗肝癌免疫活性的检测

朱跃红；曾斌；胡炳强；卢放根；廖爱军；石巍

关键词：甲胎蛋白, 信号肽, 树突状细胞, 真核基因表达, H22细胞凋亡

摘要：目的构建Balb/c小鼠具有分泌性信号肽的AFP1cDNA和去掉信号肽的AFP2cDNA真核表达载体,分别在小鼠树突状细胞(DCs)中表达,观察其抗肝癌的免疫活性.方法构建AFP1cDNA和AFP2cDNA,真核表达载体,体外转染DC,制备AFP1-DC和AFP2-DC疫苗,以ELISA、MTT方法等检测其免疫活性.TUNEL法检测肝癌细胞凋亡情况.结果所构建的真核表达质粒PcDNA3.1(+)/AFP1和PCDNA3.1(+)/AFP2在小鼠树突状细胞中获得稳定高效表达,其中PcDNA3.1(+)/AFP2明显刺激T细胞增殖,刺激指数(SI)明显高于空质粒组,AFP2/DC疫苗诱导出肿瘤特异性杀伤肝癌细胞活性明显高于空质粒组.结论成功地构建了真核表达载体PcDNA3.1(+)/AFP1和PcDNA3.1(+)/AFP2,AFP2/DCS能够诱导较强的特异性抗肝癌免疫效应,其机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关.

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树突状细胞对肿瘤浸润淋巴细胞抗小鼠肝癌活性影响的研究

目的探讨H22细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL体外抗小鼠肝癌活性,并将H22-DC-TIL过继免疫荷瘤小鼠,研究其对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用.方法从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对H22细胞、Hepal-6细胞和B16细胞的杀伤活性;检测应用H22-DC-TIL后荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的NK、LAK、CTL活性、血清TNF活性、抑瘤作用以及瘤体病理改变,并与对照组相比较.结果①H22-DC-TIL具有很强的对H22细胞杀伤活性[杀伤率为(71.31±3.11)%],明显高于其对Hepal-6和B16细胞的杀伤活性[杀伤率分别为(50.11±3.03)%,(30.31±2.89)%],也明显高于未经DC激活的TIL、H22-DC-脾淋巴细胞和未经DC激活的脾淋巴细胞对H22细胞杀伤活性[杀伤率分别为(49.80±3.21)%,(48.76±3.60)%和(19.23±2.71)%]和对Hepal-6细胞杀伤活性[杀伤率分别为(39.40±3.21)%,(38.62±2.87)%和(18.73±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤率分别为(26.38±2.51)%,(25.82±2.70)%和(18.34±3.01)%],同时B16-DC-TIL(TIL来源于H22瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性.②H22-DC-TIL可明显诱导提高荷瘤脾淋巴细胞NK、LAK和CTL活性[活性为(30.43±1.35)%、(31.40±1.80)%、(35.30±1.20)%],并可检测到血清TNF水平明显上升 [血清TNF为(40.41±1.85) U/ml],它们均达正常对照组水平,与未经DC激活的TIL组、H22-DC-脾淋巴细胞组、未经DC激活的脾淋巴细胞组、生理盐水组分别对应比较,差异均有显著性(P＜0.01).该组瘤体内淋巴细胞浸润程度也高于对照组,其瘤体生长明显受到抑制.结论①H22-DC-TIL可产生很强的体外针对H22细胞的特异性杀伤活性.②H22-DC-TIL具有很强的特异性抗小鼠肝癌作用.

作者：刘剑勇；张志明；赵荫农；张力图；张春燕；唐凯；吴飞翔刊期： 2006年第03期
口虾蛄提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的抑制作用

目的研究口虾蛄乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的抑制作用及可能机制.方法于细胞培养镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线;采用3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响,采用MTT比色法检测给药后鼻咽癌细胞的增殖抑制情况.结果口虾蛄乙酸乙酯提取物作用后,癌细胞生长延缓并萎缩,胞质粗糙,有大量颗粒状物堆积,而且药物浓度越大,形态学改变越明显;生长曲线测定、3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示,口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞的增殖和生长有显著抑制作用,并呈明显的时间-剂量依赖关系,当提取物浓度为400 μg/mL以上时,其对CNE-2Z细胞的掺入抑制率和增殖抑制率均高于阳性对照药5-Fu组.结论口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞具有细胞毒作用,其机制可能通过干扰细胞代谢,改变细胞外衣的性质抑制CNE-2Z细胞增殖.

作者：李明勇；黄培春刊期： 2006年第03期
卵巢癌裸鼠模型及其在实验研究中的应用

1969年丹麦学者Rygaard等[1]首次报道将人结肠癌肿瘤移植于裸鼠获得成功,70年代初Giovanella 等相继将体外培养的人癌细胞系成功地移植于裸鼠,随着不同种类的人肿瘤组织及细胞株相继移植成功,裸小鼠已成为研究人肿瘤的理想动物模型和进行各项实验研究的重要工具.本文综述近年来卵巢癌裸鼠模型建立的影响因素及其在实验研究中的应用进展.

作者：刘丽丹；高国兰刊期： 2006年第03期
经腹根治性宫颈切除术治疗早期宫颈癌5例暨妊娠分娩1例报告

目的探讨经腹根治性子宫颈切除术治疗有生育欲望的早期浸润性子宫颈癌患者的可行性与安全性.方法 2004年4月～2005年3月,对3例Ⅰa期和2例Ⅰb期子宫颈癌患者行经腹根治性子宫颈切除术.结果 5例患者均成功施术,其中1例因术中冷冻切片检查发现癌灶距宫颈切缘仅2 mm,且已切除全部宫颈,遂补行子宫体切除术;1例术后病理检查发现脉管内癌栓而术后辅助行TP方案化疗2个周期.平均手术时间为202 min(180～230 min),术中平均出血量为325 ml(150～650 ml),术中、术后无并发症.随访12～22月,无肿瘤复发,4例患者月经正常,1例妊娠36+5周者经剖宫产术娩出一健康女婴,现母婴均健康.结论只要严格掌握适应证,经腹根治性子宫颈切除术治疗有生育欲望的早期浸润性子宫颈癌患者是安全、可行的.

作者：舒宽勇；李隆玉；熊树华；王晨；李汉萍；于小红；李诚信刊期： 2006年第03期
来源隐匿转移癌的诊治探讨

来源隐匿的转移癌(metastasis of unknown origin ,MUO)是指经病理或细胞学检查证实,而常规检查未能确定原发灶的转移癌[1].本病在临床上并不少见,约占所有癌症患者的0.5%～9.0%[2].现通过对本院23例MUO的报道,探讨MUO的诊治方法.

作者：林奔；邓燕明刊期： 2006年第03期
乳腺癌危险性因素和保护性因素

乳腺癌在许多国家和地区已居女性恶性肿瘤发病的首位.其发病率呈现世界范围的增高,严重威胁着妇女的生命和健康.在大量乳腺癌病因学研究的基础上,本文试对它的危险因素和保护性因素作一下系统地分析.

作者：杜灵彬；汪祥辉刊期： 2006年第03期
放射治疗癌性骨转移疼痛166例分析

骨是癌症转移的常见部位,疼痛是骨转移的常见痛苦的症状之一.我科自1999年2月至2005年2月收治166例转移性骨癌伴疼痛的患者,现分析如下.

作者：王牧民；娄云峰；黄静刊期： 2006年第03期
DNA倍体分析在恶性腹腔积液诊断中的价值

目的探讨DNA异倍体对于恶性腹腔积液的诊断价值.方法抽取64例中等量以上腹腔积液患者的腹水,分离其中的细胞,制备单细胞悬液,应用流式细胞仪分析DNA异倍体.结果 DNA异倍体在肿瘤细胞中出现率(82.7%)显著高于非肿瘤细胞(0),统计学检验表明两者有显著性差异.结论流式细胞术分析腹水细胞的DNA异倍体,对于恶性肿瘤的细胞学诊断有较大的意义,可在临床推广应用.

作者：卜照香；陈文学刊期： 2006年第03期
新辅助化疗对乳腺癌bcl-2、bax基因表达影响的研究

目的探讨新辅助化疗对乳腺癌组织中相关癌基因bcl-2、bax表达的影响.方法采用免疫组化LSAB法进行化疗前后肿瘤组织bcl-2、bax基因蛋白表达的检测,并与临床研究对照.结果 4种不同化疗方案临床效果不同,CMF方案有效率为66.7%,CEF方案有效率为87.5%,CAF方案有效率为82.4%, NA方案有效率为100%.4种不同化疗方案均使bax与bcl-2蛋白化疗后表达增水平高.结论新辅助化疗使癌基因bcl-2、bax表达增强.

作者：李永清；王永胜；刘延冰；赵桐；李济宇；陈鹏刊期： 2006年第03期
脊索瘤样脑膜瘤1例报告

1 病例介绍患者男性,52岁.头痛伴左侧肢体活动不便6个月,于1998年3月17日来我院就诊.头部CT检查显示:肿物呈球形,其基底部位于右侧大脑顶叶硬脑膜上,诊断为右顶叶脑膜瘤.当日收入院.体检:意识清,左侧肢体活动不便,肌力Ⅳ级,肌张力稍高.术中见:肿瘤位于右顶叶,与硬膜联系紧密,并侵蚀颅骨,大小约为5.5 cm×4.0 cm×3.5 cm,包膜比较完整,颜色暗红,质脆.

作者：邢春艳；曹树文刊期： 2006年第03期
足底恶性黑色素瘤15例临床疗效分析

足底恶性黑色素瘤以往多行手术切除或截肢,并辅以化疗,其弊端是复发率和转移率高.1998年6月～2002年12月我院对15例恶性黑色素瘤患者行扩大切除、皮瓣移植修复创面术,术前术后辅以白介素-2治疗.取得了较满意的疗效.现报告如下.

作者：桂添瑞刊期： 2006年第03期
左心房部分切除的T4期肺癌3例报告

原发性支气管肺癌当癌肿侵及纵隔、心脏、大血管、气管、食管、椎体、隆凸或有恶性胸水或心包积液时称T4期,属中晚期,行外科手术切除原发癌灶有相当的难度.2000年以来我们共开展左心房部分切除的肺癌手术3例,现报告如下.

作者：林志勇；曾颖鸥；匡裕康刊期： 2006年第03期
肺癌脑膜转移17例诊断治疗

目的研究肺癌脑膜转移的临床诊断、治疗方法以及预后.方法对17例肺癌脑膜转移的临床资料回顾性分析.结果有明确影象诊断者17例,CSF细胞学诊断6例,17例分别接受鞘内化疗、放疗和全身化疗等治疗,总生存期为5周～18个月,中位生存期为7个月.结论肺癌脑膜转移是癌症的1个严重的并发症之一,预后差,诊断主要依靠CSF细胞学和MRI,治疗手段有鞘内化疗,局部放疗和全身化疗等.

作者：席光明；申随军；王岩；徐军；陈增谦；陶荣杰刊期： 2006年第03期
CPT-11联合5-Fu/FA治疗晚期大肠癌

目的研究CPT-11(伊立替康)联合5-Fu(5-氟脲嘧啶)/FA治疗晚期大肠癌的疗效及其不良反应,及拓扑异构酶-1 (TopoⅠ)阳性对CPT-11的疗效是否有预测作用.方法 28例晚期大肠癌患者接受治疗CPT-11 180 mg/m2,静脉滴注,第 1天;FA 200 mg/m2,静脉滴注,第 l～2天;5-Fu 400 mg/m2静脉推注, 5-Fu 600 mg/m2静脉滴注22 h,第1～2 天,每2周重复1次(l个周期)的方案治疗,4个周期后评价疗效.结果在27例可评价疗效的患者中,CR 1例,PR 7例,SD 8例,PD 11例,有效率29.62%.经卡方检验,TopoⅠ阳性组及阴性组有效率、疾病控制率及中位TTP比较,均无显著性差异.Ⅲ～Ⅳ度毒性反应以骨髓毒性及延迟性腹泻为著.结论 CPT-11联合5-Fu治疗晚期大肠癌有一定疗效,且毒性可以耐受.TopoⅠ阳性组及阴性组治疗反应相仿.

作者：陈曦；欧阳学农；陈樟树；李捷刊期： 2006年第03期
原发性腹膜后巨大恶性肿瘤26例诊治分析

目的总结原发性腹膜后巨大恶性肿瘤的外科诊治经验.方法回顾1995年1月～2005年12月收治的26例腹膜后巨大恶性肿瘤的临床资料.结果 25例首次手术完整切除,1例恶性非嗜铬性副神经节瘤未能切除,术后死于休克.完整切除的25例中,18例未见复发,7例有复发,其中4例在3～5年内行5次手术后死亡,2例行3次手术,1例2次手术后仍生存.结论腹膜后恶性肿瘤除恶性淋巴瘤外一般对化疗放疗无效,一经确诊应尽早手术治疗,术后复发如身体条件允许可多次手术.

作者：范峻；潘晓峰；陈涛；姚昌宏刊期： 2006年第03期
部分脾栓塞术对恶性肿瘤合并脾功能亢进患者的临床疗效

目的探讨部分脾栓塞术对恶性肿瘤合并脾功能亢进患者的临床疗效.方法对16例确诊脾功能亢进的肿瘤患者进行部分性脾栓塞治疗,检测治疗后白细胞和血小板计数水平.结果治疗后16例患者白细胞和血小板水平均上升,可以继续行放化疗.不良反应:发热50%(8/16),腹痛75%(12/16),经对症处理后不影响放化疗正常.结论部分脾栓塞术能提高肿瘤合并脾功能亢进患者的血细胞水平,为进一步的放化疗提供治疗条件.

作者：丁罡；赵琪德；邵怿；刘合代；梁宏享；黄骞；陈卓慧刊期： 2006年第03期
蛋白质组学在胃癌中的研究进展

胃癌属常见恶性肿瘤之一,在我国其发病率及病死率高居各类恶性肿瘤之首,严重威胁着人们的健康和生命.

作者：谢笑娟；朱梁；罗治文刊期： 2006年第03期
HA14-1对白血病细胞的作用

目的探讨HA14-1对白血病细胞的作用及其与Bcl-2、Bcl-xL和Bax的关系.方法不同浓度HA14-1( 25,50,75,100 μmol/L)作用于U937、BALL-1和Jurkat clone E6-1细胞4 h,在流式细胞仪上检测作用前后Bcl-2、Bax 、Bcl-xL的平均荧光指数(MFI)及作用后细胞凋亡情况.结果①随HA14-1剂量的增加,存活细胞逐渐减少,U937从(93.7±1.5)%降至(14.8±1.9)%; Jurkat clone E6-1从(94.7±1.5)%降至(12.4±1.3)%;BALL-1从(94.7±0.8)%降至(0.9±0.6)%.同一HA14-1剂量时,不同细胞的存活率与Bcl-2表达高低呈负相关,有非常显著性差异(P＜0.01).②随剂量的增加细胞凋亡率逐渐增加,如Jurkat clone E6-1凋亡率从(0.5±0.1)%上升至(60.1±2.6)%;在较高剂量时(100 μmol/L),细胞大幅度坏死,坏死率从＜(3.3±0.6)%增至(26.8±1.6)%.③HA14-1作用引起3种细胞中Bcl-2表达下降,而HA14-1作用前后Bcl-xL和Bax在3种细胞中均无显著改变.结论 HA14-1可以诱导不同Bcl-2表达水平的白血病细胞凋亡,并且细胞对HA14-1的敏感与细胞中Bcl-2表达水平呈相反关系,这为临床逆转Bcl-2高表达造成的化疗耐药提供了理论基础.

作者：薛红漫；李文益；夏焱刊期： 2006年第03期
表皮生长因子及其受体在大肠癌中的表达及其意义

目的通过检测表皮生长因子及其受体在大肠癌中的表达,探讨其在大肠癌中的意义.方法应用SP法免疫组化方法检测10例正常大肠黏膜、64例大肠癌组织中表皮生长因子及其受体的表达.结果正常大肠黏膜中表皮生长因子及其受体均为阴性表达,而其在大肠癌中的表达分别为51%和66%, 与正常组比较有非常显著性差异(P＜0.01);在大肠癌中表皮生长因子与其受体存在显著正相关性(P＜0.01).结论表皮生长因子及其受体在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用.

作者：郑朝晖；黄应桂；林虹刊期： 2006年第03期
宫颈癌集中筛查与机会性筛查中HPV检测的对比分析

目的探讨不同人群中HPV检测在宫颈癌防治中的地位.方法 2004年1月～12月江西省妇幼保健院肿瘤科采用第2代杂交捕获试验(HC-Ⅱ) 对3175例妇女进行13种高危型HPV脱氧核糖核酸(DNA)检测,其中1879例为江西修水县进行宫颈癌普查者和另1296例为该科门诊妇科疾病患者.结果宫颈癌普查与妇科门诊随机筛查中HPV的阳性率随宫颈病变程度的增加而增加(P＜0.01),宫颈癌普查中HPV检测CINⅡ以上的灵敏度和特异度分别是0.974,0.548;妇科门诊筛查中HPV检测CINⅡ以上的灵敏度和特异度分别是0.907,0.567,宫颈癌普查和妇科门诊筛查中HPV检测CINⅡ以上的灵敏度和特异度均无显著性差异(P＞0.01);阴性预计值分别是0.886和0.984,两者无显著差异(P＞0.01).结论 HPV检测适用于宫颈癌的初筛查,但HPV的检测成本较高,尤其在经济欠发达地区,还不能完全用于大面积的宫颈癌集中筛查时,我们可选择性地在重点人群中(高风险人群) 进行高危HPV的机会性筛查.

作者：张燕玲刊期： 2006年第03期