学术投稿

胸苷激酶基因对乳腺癌细胞的杀伤性研究

陈道桢;张丽珊;鲁晓萱;王静;李淑锋;苏宁;刘璐;黄鹰;童冠圣

关键词:单纯疱疹病毒胸苷激酶, 旁观者效应, 逆转录病毒载体, 小鼠乳腺癌
摘要:目的探讨逆转录病毒(RV)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因转染小鼠乳腺癌细胞,联合抗病毒药物丙氧鸟苷(GCV)对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102体外杀伤作用及其产生的旁观者效应.方法采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA317、G418筛选抗性克隆,采用PCR方法检测HSV-TK基因整合情况.取滴度高的病毒上清液感染小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102,经G418筛选后,得到带有HSV-TK基因的MA782/5S-8102/TK细胞;将MA782/5S-8102和MA782/5S-8102/TK细胞按不同比例混合培养后,给予10 tg/ml GCV,4天后采用MTT法计算细胞成活率(SR),观察旁观者效应.结果 GINaTK载体成功转入包装细胞PA317,病毒滴度为4.0×104 cfu/ml.用病毒上清液感染MA782/5S-8102,成功得到了表达HSV-TK基因的MA782/5S-8102/TK细胞.混合培养结果显示,当MA782/5S-8102/TK细胞数占混合细胞数10%时,低浓度(10 μg/ml)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死.结论逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,RV-HSV-TK/GCV系统杀伤癌细胞存在旁观者效应.
实用癌症杂志相关文献
  • 端粒酶活性及c-myc、p16表达与胃黏膜癌变的相关性研究

    目的研究端粒酶活性及c-myc、p16在胃黏膜癌变过程中的作用.方法应用PCR-ELISA法检测171例胃癌及相关组织中端粒酶活性;免疫组织化学法检测c-myc、p16蛋白表达状况.并分析它们之间的相关性.结果胃癌组织端粒酶活性和c-myc蛋白的表达率均高,p16蛋白表达率低;慢性浅表性胃炎组织p16蛋白表达率高.慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠化组织中,端粒酶阳性和阴性组c-myc和p16蛋白表达率相互比较均有显著性差异(P<0.05);胃癌组织中,端粒酶阳性和阴性组c-myc蛋白表达率有非常显著性差异(P<0.01);p16的表达率无显著性差异(P>0.05).结论在慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠化组织中端粒酶活性和c-myc的高表达及p16的失活具有协同性,c-myc的激活,p16的失活可能是端粒酶活化的1个必要条件.

    作者:顾艳宏;赵志泉;张国新;张红杰;郝波 刊期: 2003年第02期

  • 鼻腔鼻窦原发非霍奇金淋巴瘤9例报告

    鼻腔鼻窦非霍奇金淋巴瘤临床上少见,因缺乏特征性临床表现,确诊有一定的难度.我院1997年7月~2001年6月共收治9例,现报告如下.

    作者:邬旭;关庆捷;李芳;白文 刊期: 2003年第02期

  • 胃癌组织中MMP-9和CD44V6表达的相互关系及其临床意义

    目的研究胃癌组织中MMP-9和CD44V6表达的相互关系及其临床意义.方法采用免疫组化S-P方法,检测85例胃癌组织中CD44V6和MMP-9的表达情况.结果胃癌组织中CD44V6阳性表达率为47.06%(40/85);MMP-9阳性表达率为43.53%(37/85).胃癌组织中CD44V6表达与MMP-9表达显著相关(P<0.05);CD44V6和MMP-9均阳性表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及脉管浸润均呈显著正相关(P<0.05);CD44V6和MMP-9均阳性表达的胃癌患者术后1、3、5年生存率分别为56.25%、28.13%和28.13%,其他患者术后1、3、5年生存率分别为89.25%、71.19%和59.33%,前者显著低于后者(P均<0.05).结论 CD44V6和MMP-9表达的与胃癌侵袭转移及预后显著相关.

    作者:张成武;裘华森;邹寿椿;赵大建 刊期: 2003年第02期

  • 环氧合酶-2抑制剂Celebrex对胰腺癌PC-3细胞株VEGF和PGE2表达的影响

    目的探讨选择性环氧合酶(CoX)-2抑制剂Celebrex,对胰腺癌PC-3细胞株血管内皮生长因子(VEGF)和前列腺素E2(PGE2)表达的影响.方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)和放射免疫测定(RIA)方法,检测选择性COX-2抑制剂Celebrex与胰腺癌PC-3细胞VEGF和PGE2表达间的时间-效应关系和剂量-效应关系.结果 Celebrex在一定时间和剂量范围内可抑制PC-3细胞株中VEGF和PGE2的表达,且VEGF和PGE2的变化趋势一致.结论 COX-2可能参与了PC-3细胞VEGF的分泌,而PGE2则可能在该过程中起着重要的介导作用.

    作者:谢传高;王兴鹏;董育玮;杜勤;蔡建庭;钱可大 刊期: 2003年第02期

  • 卵巢癌11例误诊分析

    卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,确诊后5年生存率仅为25%~30%[2],由于其无特异性症状,部位隐蔽,又缺乏早期诊断方法,并且卵巢肿瘤类型很多,其大小、性状各异.当卵巢肿块增大出现扭转、破裂、感染、恶变等并发症时,易误诊为其他疾病,从而延误治疗时机,我院近6年来收治卵巢肿瘤81例,现将11例误诊病例分析如下.

    作者:张引 刊期: 2003年第02期

  • TRAIL与低剂量5-Fu联用高效诱导大肠癌细胞凋亡的研究

    目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与5-Fu联用是否存在协同性杀伤大肠癌细胞的作用,以及这种杀伤作用的可能机制.方法常规培养大肠腺癌细胞株HT29.TRAIL、5-Fu、或2药联用24 h,采用MTT法测试细胞毒作用,应用流式细胞术检测细胞凋亡比例,透射电镜下观察亚细胞形态.结果①HT29细胞对TRAIL不敏感,100 ng/mlTRAIL只能杀伤4.50%±0.26%的细胞,ID 50>1 000 ng/ml.细胞对5-Fu相对敏感,存在剂量依赖性细胞毒效应,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现.②TRAIL与阿霉素联用呈现高效协同作用,表现为亚毒性浓度TRAIL(100 ng/ml)与亚毒性浓度5-Fu(100μg/ml)联用可杀死60.00%±0.45%的HT29细胞.③流式细胞术分析及透射电镜观察证实协同性杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现.结论大肠腺癌细胞株HT29对TRAIL不敏感,但TRAIL与亚毒性浓度5-Fu联用表现出高效的杀灭肿瘤细胞作用,这种细胞毒性作用主要由凋亡介导.

    作者:徐莉红;邓长生;刘诗权 刊期: 2003年第02期

  • 肿瘤相关物质群水平对2性肿瘤复发转移的诊断

    目的探讨肿瘤相关物质群(TSGF)对恶性肿瘤复发转移的诊断价值.方法采用比色法测定292例复发性恶性肿瘤患者及134例健康人的血清TSGF水平.结果各种复发性恶性肿瘤患者血清TSGF水平(x±s)显著高于健康对照组[(70.7±12.6)U/ml V.s(54.5±5.2)U/ml,P<0.01];肿瘤转移患者血清TSGF水平高于局部复发组[(73.1±13.1)U/ml V.s(67.7±9.9)U/ml,P<0.0L],尤其是肺、骨转移癌患者(P<0.01);以64 U/ml为临界值时,TSGF检测复发转移瘤的敏感性为69.5%、特异性为97.0%.结论血清TSGF水平对恶性肿瘤的监测具有高度敏感性、高度特异性和广谱性,是监测其复发转移的重要指标.

    作者:刘陶文;陈煌基 刊期: 2003年第02期

  • 明胶酶B及其组织金属蛋白酶抑制剂与食管癌生物学行为的关系

    目的研究明胶酶B(gelatin B)及其相应的组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在食管癌组织中的表达及其在细胞浸润转移过程中的作用.方法采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法检测50例食管癌组织中明胶酶B及TIMP-1的表达.结果明胶酶B在食管癌组织中的阳性表达率为76.0%,其表达与淋巴结转移呈正相关(Pearson列联系数为0.343,P<0.05),TIMP-1在食管癌组织中的阳性表达率为30.0%,其表达与淋巴结转移呈负相关(Pearson列联系数为0.333,P<0.05).结论明胶酶B促进食管癌转移,TIMP-1对食管癌有独立的抑制作用.通过检测食管癌组织中的明胶酶B及TIMP-1的表达,对预后的评估有一定价值.

    作者:李咏梅;严祥;吴静;祁志 刊期: 2003年第02期

  • 肺癌患者纤支镜取材测定c-erbB-2蛋白的临床意义

    目的探讨肺癌患者经纤支镜取材,检测c-erbB-2蛋白的临床意义.方法对肺部有占位性病变的患者行纤支镜取材,再用免疫组化S-P法检测c-erbB-2蛋白的表达情况,并比较肺癌组、肺良性病变组c-erbB-2蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.结果肺癌组、肺良性病变组c-erbB-2蛋白的阳性表达率分别为35.0%、10.0%,有显著性差异;c-erbB-2蛋白与肺癌组织学类型、分化程度、淋巴结及远处转移有关.结论术前纤支镜取材测定c-erbB-2蛋白的表达情况有助于肺癌的临床诊断、分期及预后的判定.

    作者:尹小川;肖正清;刘耕云;陆桂君;付红梅 刊期: 2003年第02期

  • 部分脾栓塞术治疗肝癌伴脾功能亢进10例分析

    自1998年8月以来,我们对32例中晚期肝癌患者行肝动脉栓塞术(transcatheter arterial embolization,TAE)或肝动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemotherapy and embolization,TACE),其中10例合并脾功能亢进,行部分脾栓塞术,取得了满意的效果,现报告如下.

    作者:张小华;罗伟炎;罗雄辉;陈育文 刊期: 2003年第02期

  • 新的免疫增强剂-草分枝杆菌的实验和临床研究

    目的探讨草分枝杆菌制剂(乌体林斯)体外对肿瘤细胞的影响和对机体免疫功能的调理作用.方法体外实验采用Lovo结肠癌细胞株按不同的浓度加入草分枝杆菌制剂,应用流式细胞仪对癌细胞周期动力学进行检测,同时观察草分枝杆菌制剂对大肠癌细胞株凋亡和增殖的影响.在临床应用中,分实验组和对照组观察肿瘤患者化疗期间应用草分枝杆菌制剂对细胞和体液免疫功能的影响.结果药物处理后各组S期细胞数率与对照组比较均显著下降(P<0.01).实验组与对照组比较,细胞增殖指数显著降低(P<0.01);加入草分枝杆菌制剂各实验组与对照组比较细胞凋亡率明显增高,有非常显著性差异(P<0.01).在临床对比研究中发现肿瘤患者化疗期间应用乌体林斯能够增强细胞免疫功能.结论草分枝杆菌制剂不仅能直接抑制癌细胞增殖,而且能通过调控癌细胞的细胞周期而促进其凋亡.乌体林斯与化疗联合应用可显著减轻化疗对机体免疫功能的抑制,增强机体对化疗的耐受性,有利于提高肿瘤的综合治疗效果.

    作者:刘福坤;祁晓平;陈彻 刊期: 2003年第02期

  • G-CSF与GM-CSF序贯联合治疗化疗后骨髓抑制的研究

    目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)序贯联合治疗化疗后骨髓抑制的疗效.方法采用随机单盲的方法,将化疗致骨髓抑制的87例患者,分为G-CSF→GM-CSF组、GM-CSF→G-CSF组给药治疗.于用药后第3、6、9、12、16、20天进行外周血白细胞、中性粒细胞、血小板计数.结果用药后第3天,白细胞计数>8.0×109/L者,共有18例被退出,69例进入随后的研究.用药后第6天,G-CSF→GM-CSF组的白细胞及中性粒细胞计数高于GM-CSF→G-CSF组,有显著性差异(P<0.05);第9、12天无显著性差异(P>0.05);第16、20天,有显著性差异(P<0.05).用药后2组血小板计数均增高,但无显著性差异(P>0.05).结论 G-CSF→GM-CSF序贯用药治疗肿瘤患者化疗后骨髓抑制的疗效优于GM-CSF→G-CSF,而不良反应不加重.

    作者:陈琳;罗树春;吴琦;张明;贺盛光;谢可;叶乃瑶 刊期: 2003年第02期

  • 基于树突状细胞的卵巢癌免疫治疗策略

    卵巢癌患者早期很少有明显症状,60%~70%的卵巢癌患者确诊时已属晚期.经典的治疗方法是根治性手术配合术后多疗程化疗,尽管多数患者初对联合治疗有一定的反应,但常因复发不治而死亡,其5年生存率仅为20%~30%[1].

    作者:赵清平;高国兰;彭芝兰 刊期: 2003年第02期

  • 食管、贲门癌患者手术中意外的处理

    目的探讨食管、贲门癌患者术中意外情况发生的处理方法.方法回顾性分析近21年来5 165例食管、贲门癌患者手术中意外的发生情况及处理措施.结果术中发生胸主动脉出血39例(0.76%),奇静脉损伤45例(0.87%),气管、支气管损伤23例(0.45%),胸导管损伤55例(1.06%),脾脏出血30例(0.58%),胃左血管出血19例(0.37%),食管胃吻合口出血18例(0.35%),颈内静脉出血1例.术中意外情况总发生率为4.45%(230/5 165).结论术前检查完善、准备充分、准确评估肿瘤外侵程度和范围及术中沉着冷静和扎实的基本功,是防治术中发生各种意外情况的关键.

    作者:张兴国;李道堂;罗景玉;刘希斌;李辉 刊期: 2003年第02期

  • 胸苷激酶基因对乳腺癌细胞的杀伤性研究

    目的探讨逆转录病毒(RV)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因转染小鼠乳腺癌细胞,联合抗病毒药物丙氧鸟苷(GCV)对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102体外杀伤作用及其产生的旁观者效应.方法采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA317、G418筛选抗性克隆,采用PCR方法检测HSV-TK基因整合情况.取滴度高的病毒上清液感染小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102,经G418筛选后,得到带有HSV-TK基因的MA782/5S-8102/TK细胞;将MA782/5S-8102和MA782/5S-8102/TK细胞按不同比例混合培养后,给予10 tg/ml GCV,4天后采用MTT法计算细胞成活率(SR),观察旁观者效应.结果 GINaTK载体成功转入包装细胞PA317,病毒滴度为4.0×104 cfu/ml.用病毒上清液感染MA782/5S-8102,成功得到了表达HSV-TK基因的MA782/5S-8102/TK细胞.混合培养结果显示,当MA782/5S-8102/TK细胞数占混合细胞数10%时,低浓度(10 μg/ml)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死.结论逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,RV-HSV-TK/GCV系统杀伤癌细胞存在旁观者效应.

    作者:陈道桢;张丽珊;鲁晓萱;王静;李淑锋;苏宁;刘璐;黄鹰;童冠圣 刊期: 2003年第02期

  • 人端粒酶hTRT在癌旁黏膜上皮和食管鳞癌组织中的表达及其意义

    目的研究食管黏膜鳞状上皮和食管鳞癌组织中端粒酶hTRT的表达,并探讨其与食管癌发生、发展的关系.方法 应用免疫组化S-P法,观察10例正常食管黏膜、35例癌旁食管黏膜上皮,120例食管癌组织微阵列中端粒酶hTRT的表达情况.结果正常食管黏膜鳞状上皮细胞未见端粒酶hTRT阳性表达,癌旁黏膜上皮和癌组织端粒酶hTRT阳性表达率分别为94.3%和81.7%.癌组织hTRT的表达与癌组织的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关(P>0 05).结论端粒酶hTRT的激活表达与食管黏膜上皮的恶性转化密切相关,端粒酶hTRT的重新激活可能在食管癌的组织发生中起关键性作用.

    作者:吴名耀;吴贤英;庄楚香 刊期: 2003年第02期

  • 食管癌贲门癌患者术后心律失常187例临床分析

    目的探讨食管癌贲门癌患者术后心律失常的发生原因及预防措施.方法对625例食管癌贲门癌患者的临床资料进行回顾性分析.结果术后共发生心律失常187例.<60岁者术后心律失常的发生率为24.6%,≥60岁者为36.6%;术前合并心血管疾病者术后心律失常发生率为87.2%;食管癌患者术后心律失常发生率为37.7%,贲门癌为22.1%;颈部吻合者术后心律失常发生率为33.0%,弓下吻合者为22.3%;各组间均有显著性差异.结论年龄、术前合并心血管疾病、吻合部位与术后心律失常的发生密切相关.充分的术前准备,加强术后监护,纠正缺氧可以预防或减少心律失常的发生.

    作者:李华;杨捷生;陈于平;陈玉泉;杨卫平 刊期: 2003年第02期

  • 胃癌患者术后NDV-ATV治疗对机体免疫功能的影响

    目的探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗(NDV-ATV)治疗胃癌术后患者机体免疫功能的影响.方法采用流式细胞术分析36例胃癌术后(术后2、3、4、5周)NDV-ATV治疗患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况,并以15例术后未接受NDV-ATV治疗的胃癌患者作对照.结果对照组术后CD+3、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8逐渐升高,以术后3周内升高为明显.NDV-ATV治疗组,术后CD+3、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8上升速度更快,持续时间更长.治疗结束后与治疗前比较,有非常显著性差异(P<0.01);且明显高于未接受NDV-ATV治疗的对照组患者(P<0.05).第1次治疗后和治疗结束后相比较有显著性差异(P<0.05).结论 NDV-ATV可同时视为1种免疫调节剂,能明显改善胃癌患者术后机体的免疫功能,提高机体抗肿瘤能力.

    作者:吴淼;余佩武;曾冬竹;雷晓;周立新;饶云 刊期: 2003年第02期

  • 凋亡抑制基因Survivin的研究进展

    细胞凋亡的抑制与恶性肿瘤的发生发展以及对化疗、放疗不敏感有密切关系.和bcl-2家族一样,凋亡抑制蛋白(in-hibitor of apoptosis,IAP)也是抑制细胞凋亡的重要成分.

    作者:杨建辉;许辉东;李国华 刊期: 2003年第02期

  • 微阵列技术在卵巢癌研究中的应用

    由于卵巢癌缺乏早期症状,约有70%患者诊断时已属晚期.早期卵巢癌5年生存率可达90%,而晚期仅为20%~30%[1].所以,寻找有效的筛查及早期诊断的方法是1项非常重要和紧迫的工作.

    作者:罗军;谢兰;彭芝兰 刊期: 2003年第02期

实用癌症杂志

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主管:江西省卫生厅

主办:江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所