学术投稿

CD4+T淋巴细胞差异表达microRNA在ACS患者的筛选和鉴定

张古老;谢东明;阳贻红;严章林;廖祥中

关键词:急性冠脉综合征, 淋巴细胞, 微小核糖核酸, 基因芯片, 实时定量PCR
摘要:目的:通过检测急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者外周血CD4+ T淋巴细胞基因的miRNA,筛选与健康正常人差异表达的miRNA,鉴定对CD4+ T淋巴细胞具有调控作用miRNA,初步阐明miRNA在ACS发病机制中的作用.方法:选取入住我院的确诊为ACS患者20例为ACS组,以疑似ACS而冠脉造影正常的住院患者20例作为正常对照组;首先抽取新鲜外周静脉20 mL,使用密度梯度离心法分离出循环血中的单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),再使用免疫磁珠法(Magnetic cell sorting system,MACS)进一步分离出CD4+ T淋巴细胞;分离的CD4+ T淋巴细胞一部分用于检测纯度,另一部分用于芯片检测.CD4+T淋巴细胞纯度检测采用流式细胞术法(Flow cytometry,FCM)检测,分离所得的CD4+T淋巴细胞纯度,且采用台酚蓝检测活细胞数.CD4+ T淋巴细胞合格后再行下一步实验,即将另一部分CD4+T淋巴细胞采用Trizol法提取其细胞内总RNA后分两部分,一部分提取的RNA采用聚乙二醇(Poly ethylene glycol,PEG)方法分离纯化miRNA,另一部分用于real time PCR备用.用分光光度计测定RNA的浓度,使用凝胶电泳质检RNA的质量,合格后再使用miRNA基因芯片进行杂交,再用Affymetrix GeneChip Scanner 3000基因芯片扫描仪检测CD4+T淋巴细胞差异表达的miRNA.另一部分RNA采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)对部分差异表达的miRNA进行验证.结果:使用MACS法分离出高纯度的人CD4+ T淋巴细胞.Trizol法能够提取其细胞内较完好的总RNA.miRNA芯片杂交检测及数据分析结果显示,ACS患者与正常对照者CD4+ T淋巴细胞中,在ACS患者中表达显著上调的有:miR-16,miR-145,miR-133b和miR-155,在ACS患者中表达显著下调的有:miR-126和miR-211.实时定量结果显示,与对照组比较,ACS组miR-16,miR-145,miR-133b和miR-155的基因表达均显著上调,miR-126和miR-221的基因表达均显著下调(P<0.05),与Affymetrix miRNA基因表达谱芯片检测结果一致.结论:筛选鉴定的ACS患者外周血CD4+T淋巴细胞差异表达的miRNA,可能参与了ACS的发生发展.
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  • 自行设计加班时间登记表在手术绩效管理中的应用

    目的:探讨自行设计的加班时间登记表在手术绩效管理中的应用.方法:将手术室一个月54名工作人员的加班时间用两种方法分别计算:一组为对照组,人工用计算器计算出每个人的加班时间;一组为观察组,在Ex-cel表格中做出公式计算出每个人的加班时间,比较两种方法在人力资源、时间花费、误差率、员工满意度等方面的影响.结果:对照组由3人共花费1 350分钟完成此项工作,误差率为31.59%,员工满意度为70.37%;观察组由1人花费150分钟完成此项工作,误差率为0%,员工满意度为94.44%.结论:自行设计的加班时间登记表应用于手术室绩效管理,能节约时间,节省人力,极为精准,无误差,用Excel表格做好公式后自动将所有工作人员的加班时间都汇总到汇总表格里,所有工作人员每月、每季、每年的加班时间都在汇总表里一览无遗,每月的薪酬分配、年底的评先评优都可从中直接调用数据,非常方便实用.

    作者:郭美云;周瑛光;蔡云霞 刊期: 2015年第05期

  • ESP转型中的地方医学院校大学英语教师发展研究

    大学英语教学目前正处于转型时期,教学重点逐渐由一般用途英语(E GP)转向专门用途英语(ESP).这一转型对大学英语教师的专业发展提出了更高的要求和挑战.基于此,以赣南医学院为例,来探讨ESP教学转型对地方医学院校大学英语教师所提出的要求,进而总结处于转型中的地方医学院校大学英语教师发展的途径.

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  • 原中央苏区振兴背景下高校社团中党员发展工作新探索——以赣南医学院读书社为例

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    作者:谢衍金;樊清华;朱淑英 刊期: 2015年第05期

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    作者:陈雪娇;刘彩霞;蔡德清 刊期: 2015年第05期

  • 论红军长征中伤病员的救治与安置工作

    在红军长征突破国民党军队的围追堵截中,产生了大批的伤病员,红军卫生部门及医务人员克服重重困难,建立健全战场救护机制、完善伤病员救治措施、妥善安置伤病员,成功挽救了红军指战员的生命,保存了战斗力量,确保了长征的胜利.

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  • 腹股沟疝无张力修补术67例临床分析

    目的:探讨无张力疝修补术治疗腹股沟疝的临床疗效.方法:回顾分析我院2008年7月~2014年9月收治并利用花瓣式填充物和成形的补片行无张力疝修补术治疗67例腹股沟疝的临床资料.结果:67例患者均顺利完成手术,手术时间40~110 min,平均50 min;术后6~24 h均下床活动.术后尿潴留1例,留置导尿管1天后缓解;切口下脂肪液化2例,经穿刺2~3次后好转;出现切口局部红肿7例,无化脓表现.术后平均4~7d出院.术后随访6~24个月,无1例复发.结论:相对传统手术来讲,无张力修补术具有手术效果好,术后住院时间短,并发症少等优点.

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  • 情景剧在高职对口护理专业护理综合实训教学中的应用

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  • 新媒介语境下大学生党建平台建设探究

    新媒介的快速发展和普及,对当代大学生的党建工作产生重要影响,因此,高校学生党建要顺应时代发展要求,充分利用媒介,创建党建平台,开展学生党建工作.本文针对新媒介语境下大学生党建平台的建设问题进行分析和探究.

    作者:汪行舟;温金英 刊期: 2015年第05期

  • 蜡疗中监测蜡饼表面及中心温度减少皮肤烫伤

    目的:蜡疗中探讨蜡饼表面及中心温度减少皮肤烫伤.方法:将2013年367例蜡疗患者作为对照组,2014年420例蜡疗患者作为观察组.对照组由理疗师通过徒手触温方法判定蜡饼温度适宜后行蜡疗治疗.观察组运用100°水温计监测蜡饼表面及中心温度并记录于蜡疗温度记录表内,当蜡饼温度达到安全温度后再行治疗.对比两组患者蜡疗烫伤发生率、患者及家属满意度、医务人员接受度.结果:观察组患者发生烫伤比例明显低于对照组(P<0.05),患者及家属满意度、医务人员接受度明显高于对照组(P<0.05).结论:监测蜡饼表面及中心温度掌握蜡饼使用的安全温度范围,规范了蜡疗的操作流程,有效防范和减少了蜡疗烫伤发生.

    作者:刘志红;肖莉;吴桂华 刊期: 2015年第05期

  • CD4+T淋巴细胞差异表达microRNA在ACS患者的筛选和鉴定

    目的:通过检测急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者外周血CD4+ T淋巴细胞基因的miRNA,筛选与健康正常人差异表达的miRNA,鉴定对CD4+ T淋巴细胞具有调控作用miRNA,初步阐明miRNA在ACS发病机制中的作用.方法:选取入住我院的确诊为ACS患者20例为ACS组,以疑似ACS而冠脉造影正常的住院患者20例作为正常对照组;首先抽取新鲜外周静脉20 mL,使用密度梯度离心法分离出循环血中的单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),再使用免疫磁珠法(Magnetic cell sorting system,MACS)进一步分离出CD4+ T淋巴细胞;分离的CD4+ T淋巴细胞一部分用于检测纯度,另一部分用于芯片检测.CD4+T淋巴细胞纯度检测采用流式细胞术法(Flow cytometry,FCM)检测,分离所得的CD4+T淋巴细胞纯度,且采用台酚蓝检测活细胞数.CD4+ T淋巴细胞合格后再行下一步实验,即将另一部分CD4+T淋巴细胞采用Trizol法提取其细胞内总RNA后分两部分,一部分提取的RNA采用聚乙二醇(Poly ethylene glycol,PEG)方法分离纯化miRNA,另一部分用于real time PCR备用.用分光光度计测定RNA的浓度,使用凝胶电泳质检RNA的质量,合格后再使用miRNA基因芯片进行杂交,再用Affymetrix GeneChip Scanner 3000基因芯片扫描仪检测CD4+T淋巴细胞差异表达的miRNA.另一部分RNA采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)对部分差异表达的miRNA进行验证.结果:使用MACS法分离出高纯度的人CD4+ T淋巴细胞.Trizol法能够提取其细胞内较完好的总RNA.miRNA芯片杂交检测及数据分析结果显示,ACS患者与正常对照者CD4+ T淋巴细胞中,在ACS患者中表达显著上调的有:miR-16,miR-145,miR-133b和miR-155,在ACS患者中表达显著下调的有:miR-126和miR-211.实时定量结果显示,与对照组比较,ACS组miR-16,miR-145,miR-133b和miR-155的基因表达均显著上调,miR-126和miR-221的基因表达均显著下调(P<0.05),与Affymetrix miRNA基因表达谱芯片检测结果一致.结论:筛选鉴定的ACS患者外周血CD4+T淋巴细胞差异表达的miRNA,可能参与了ACS的发生发展.

    作者:张古老;谢东明;阳贻红;严章林;廖祥中 刊期: 2015年第05期

  • PDCA循环管理方案在提高输血申请单合格率中的效果研究

    目的:探讨PDCA循环在提高输血申请单合格率管理中的应用.方法:对我院2013年1~6月临床开具输血申请单1000例作为对照组,并选择2013年7 ~12月运用PDCA管理方案临床开具输血申请单1 000例作为实验组.比较两组输血申请单合格率的变化.结果:运用PDCA管理方案后临床开具输血申请单平均合格率由62.3%上升至92.3%,后两个月输血申请单合格率已经达到100%,达到目标值.结论:运用PDCA循环管理方案可有效提高输血申请单填写质量,规范临床用血行为,使得临床输血管理内容更丰富、体系更完善、制度更健全,真正提高临床用血安全,避免因输血产生的医疗纠纷.

    作者:徐静;林燕;张春燕;曾春云;温茹春 刊期: 2015年第05期

  • 赣南苏区大学生自我概念调查研究

    目的:研究赣南苏区大学生自我概念的发展状况.方法:采用田纳西自我概念量表(TSCS)测量了200名大学生外显自我概念状况,同时采用内隐联想测验(IAT)测量了50名大学生的内隐自我概念状况.结果:大学生整体外显自我概念得分显著高于全国平均分(t=14.98,P<0.001).女性大学生外显自我概念整体得分显著高于男性大学生(t=-0.26,P<0.05),城市大学生外显自我概念得分显著高于农村大学生(t=-0.89,P<0.05).另外,不同专业学生在心理自我(PER)、自我批评(SC)、自我满意(SA)、自我行动上存在显著差异.IAT结果表明,大学生的内隐自我概念比较积极,且内隐效应显著(t=-11.85,P<0.05).结论:赣南苏区大学生外显自我概念和内隐自我概念普遍积极,且城市大学生外显自我概念高于农村大学生,不同专业学生在自我概念各维度得分上存在差异.

    作者:甘小荣;杨林;张莉 刊期: 2015年第05期

  • 浅析中央苏区卫生法制建设的特点

    中央苏区时期,中国共产党和苏维埃政府为了保障医疗卫生事业的稳定发展,制定和颁布了一系列卫生法规条例,不仅为苏区医疗卫生管理体制的完善奠定了基础,而且对苏区医疗卫生事业的蓬勃发展起到了指导和保障作用.本文拟从阶级属性、立法理念、保障对象、实践基础等方面梳理和总结中央苏区卫生法制建设的特点,为日后研究我国当前卫生法制建设提供一定的理论基础.

    作者:张莉芳;李媛;钟继润 刊期: 2015年第05期

  • 新医改背景下欠发达地区新农合可持续发展的路径研究——以赣南地区为例

    在国家新医改相关政策支持下,欠发达地区新农合的实施取得了可喜的成效,但也还存在一些急需解决的问题和需要进一步完善的地方,制约并影响着欠发达地区新农合的可持续发展.笔者选取赣南地区农村为调查点,在深入调查农民对于新农合的掌握情况与评价的基础上,提出保障新农合制度有效运行的改进建议,为进一步推进新医改背景下欠发达地区新农合的全面实施与可持续发展.

    作者:邓小英;梁君思;伍学滨 刊期: 2015年第05期

  • 医学生自我意识与逆境商的关系研究

    目的:探讨医学生自我意识和逆境商的基本特点及其两者之间的相关性,促进大学生逆境商的培养.方法:采用自我意识量表(SCS)、路西逆商测评量表随机抽200名医学生进行调查.结果:(1)逆商总和、面对逆境的反应与内在自我存在高相关,逆境行为模式、信念和信仰、欲望和才能、智力性格与内在自我存在低相关;逆商总和、逆境行为模式、信念和信仰、面对逆境的反应,欲望和才能、智力性格与公共自我存在低相关;(2)医学生的自我意识与逆商水平显著低于全国常模,但在性别上无显著性差异.结论:(1)加强医学生自我意识与逆境商的培养;(2)从医学生自我意识与逆境商之间关系出发,制定科学的培养方案,逐步地提高医学生应对逆境的能力.

    作者:刘小珍;谢云天;孙郭 刊期: 2015年第05期

  • 儿科本科护生临床带教模式探讨

    目的:探讨适合目前护理本科实习生的临床带教模式.方法:将2013 ~2014年我科接收的护理本科实习生进行临床教学改革,将传统一对一教学法、临床路径法、PBL教学法、PDCA循环法融入到临床实习带教中,并对每一批实习护士进行评估、分析、总结、持续改进教学方法.结果:持续16个月后,从师生两方面进行评价,带教老师的带教能力得到提高;实习同学的实习任务完成较好.结论:多种教学方法结合运用于儿科护生带教中,可以有效提高临床教学质量.

    作者:龙琳;林华;陈珺 刊期: 2015年第05期

  • 高校辅导员队伍的选拔与管理——以江西省高校为例

    通过对江西省25所高校300名辅导员进行问卷调查,发现目前高校辅导员队伍学历水平和综合素质高,但工作基础薄弱;队伍数量增长快,但流动性大;选拔和培养机制有一定改善,但专业化和职业化培训还不够;本校家属比例偏高,给管理带来一定困难.针对以上问题,认为要从健全科学合理的选拔机制,完善培养管理机制及畅通保障发展机制三方面完善高校辅导员队伍的选拔与管理.

    作者:陈新 刊期: 2015年第05期

  • 静脉输液安全隐患根本原因分析与对策

    根本原因分析(RCA)是一种回溯失误分析工具,从中找出系统和流程中的风险和缺陷并加以改正,避免类似事件再发生[1].回顾我科2012年来发生的静脉输液不良事件及其安全隐患进行根因分析,查找存在的风险因素,探讨防范对策.

    作者:肖美萍;田青 刊期: 2015年第05期

  • 人体解剖学和组织胚胎学联合开展PBL教学探讨

    分析在人体解剖学和组织胚胎学教学中联合开展以问题为基础的学习(PBL)教学法的重要性和必要性,探讨两个学科联合开展PBL教学的效果.

    作者:林乐迎;符信清;仝宇;林雅毅 刊期: 2015年第05期

  • 康复新液在疣状胃炎射频治疗术后的疗效观察

    目的:探讨康复新液在疣状胃炎射频治疗术后的疗效.方法:选择我院经胃镜检查诊断为疣状胃炎的患者100例,根据治疗方法不同分为治疗组和对照组各50例,对照组患者射频治疗后仅常规使用抑酸剂(雷贝啦唑20 mg,1次·d-1)、抗HP治疗,治疗组在对照组用药基础上加用康复新液10 mL,3次·d-1.结果:治疗组与对照组患者在临床症状的缓解和创面愈合时间上有明显差异,差异有统计学意义(P<0.05).结论:疣状胃炎射频治疗术后采取常规抑酸剂(雷贝啦唑20 mg,1次·d-1)、抗HP基础上加用康复新液治疗可以加快临床症状的缓解及创面愈合的速度.

    作者:邓伟;邹有香 刊期: 2015年第05期

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