唐琳琳;韩向阳;韩秀珍
目的 研究比较4种不同来源木聚糖酶的酶学性质,为各酶在不同领域应用提供理论依据.方法 通过摇瓶发酵获得源自4种菌株的木聚糖酶粗酶液,用二硝基水杨酸(DNS)法测定各木聚糖酶的酶活性,并研究酶学性质.结果 嗜热棉毛菌、绿色木霉、泡盛曲霉和橄榄绿链霉菌来源的木聚糖酶的适温度分别为70,60,50和60℃;适pH分别为6,4,4和6.嗜热棉毛菌来源的木聚糖酶耐热性强,高温60℃下,酶活性高于85%,70℃仍保持60%以上的酶活性,且在pH4~11的范围内能保持较高稳定性.另外3种来源的木聚糖酶则有较强的耐酸性.结论 嗜热棉毛菌来源的木聚糖酶有饲料添加剂方面的应用优势.另外3种来源的木聚糖酶可根据不同行业对木聚糖酶的要求,应用于食品、医药、能源、环境等领域.
作者:王绍花;宗工理;刘飞;朱希强;凌沛学 刊期: 2013年第06期
目的 建立黄连提取物高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法.方法 采用HPLC同时测定黄连提取物中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱等生物碱的含量.色谱柱为Kromasil 100-5 C18,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(53:47,v/v),流速为1 mL/min,检测波长为345 nm,进样量为10 μL.结果 盐酸小檗碱在0.1032~2.5800 μg范围内进样量与其峰面积线性关系良好(r=0.9999,n=7),平均回收率为100.19%(RSD=1.77%).测定6批黄连提取物,其中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量分别不少于5.5%,11.5%,9.0%,44.0%,总生物碱含量不少于70.0%.结论 本文建立含量测定方法简便可行,准确、重现性好,可用于黄连提取物的质量控制.
作者:江斌;姚曦;吉国辉;何伟 刊期: 2013年第06期
硫酸软骨素是一类重要的糖胺聚糖,具有软骨保护作用,可作为症状慢作用药物或膳食补充剂应用于骨关节炎的防治.本文介绍硫酸软骨素酶解-超滤法生产工艺及其在骨关节炎中的应用.
作者:陈祥娥;凌沛学;边玲 刊期: 2013年第06期
目的 建立那屈肝素钙中N-NO含量测定方法.方法 采用热能分析仪(TEA)进行分析.运行参数:氮气压力5 psi,氮气流量35 mL/min,冷却液温度0~5℃,液滴回流速率1~2 s/滴,氧气压力2 psi,灵敏度235,进样量50 μL.结果 N-NO含量以N-亚硝基二正丙胺(NDPA)含量计,NDPA浓度在0.03~0.15 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9991;精密度试验(n=6)的相对标准偏差(RSD)为2.27%;定量限(信噪比10:1)和检测限(信噪比3:1)分别为0.03和0.005 μg/mL:此法的平均加样回收率为99.75%,RSD为0.93%.结论 本实验得到的方法精密度好,准确度高,适合那屈肝素钙中N-NO的含量测定.
作者:赵焕荣;马志华;杜旭召;姬胜利 刊期: 2013年第06期
血蓝蛋白是节肢动物和软体动物体内的呼吸蛋白,是结构-功能研究的模型蛋白之一.本文介绍了近年血蓝蛋白提取、纯化及结构表征技术的研究进展,以期为进一步研究血蓝蛋白结构与功能、分子间相互作用机制等提供参考.
作者:金雅芳;张意锋;邓云;岳进;钱炳俊;王丹凤;赵艳云 刊期: 2013年第06期
目的 采用氧瓶燃烧及茜素红法测定硫酸软骨素中硫含量.方法 将硫酸软骨素置氧瓶中燃烧,收集得到硫酸根溶液,加入pH3.7乙醇-醋酸铵缓冲液,以茜素红为指示剂,用高氯酸钡滴定液滴定,根据消耗体积计算出硫含量.结果 硫含量在0.8~8 mg范围内与滴定液消耗体积呈良好的线性关系,平均回收率为100.5%,RSD为1.0%.结论 本法简单、准确、干扰少,滴定终点颜色变化灵敏,可作为硫酸软骨素和其他硫酸多糖硫含量的测定方法.
作者:汤漩;张新房;王淑华;祝美华;董爱梅;曹心珂 刊期: 2013年第06期
目的 研究褥疮康对体表溃疡模型小鼠创面愈合的影响及抗炎作用.方法 制备创伤感染体表溃疡模型小鼠,按创面面积随机分为模型对照组、龙珠软膏6 g/kg组、褥疮康0.5,2,6 g/kg组,共5组,每组10只;另取10只正常小鼠作为正常对照组.将各组药物均匀涂敷于创面,厚度1 mm;模型对照组涂敷乙基纤维素;正常对照组不做处理.隔日给药1次,共5次.于术后1,5,10d测量创口面积;末次给药1h后,测量小鼠的耳廓肿胀度.结果 治疗10d后,褥疮康0.5 g/kg组、2g/kg组,小鼠创面面积显著减小;褥疮康2 g/kg组小鼠耳廓肿胀度显著低于模型组,肿胀抑制率达43.86%.结论 褥疮康具有明显的生肌抗炎作用.
作者:吴晓文;王爱洁;李晓晶;戴雪梅;刘瑾;崔兵兵;段小菊;隋在云;程丽芳 刊期: 2013年第06期
目的 建立测定米力农注射液中乳酸含量的HPLC方法.方法 采用Agilent SB-Aq (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲酸-二环己铵-水(0.1:0.1:100)为流动相,流速:1mL/min,检测波长210nm,柱温:25℃,进样量:20μL.结果 乳酸在0.5~5.0mg/mL的浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.7%(RSD=0.37%,n=6).结论 此法准确、简便、快速,适用于米力农注射液中乳酸的含量测定.
作者:刘永久;姚作进;徐玉文 刊期: 2013年第06期
本文概述了食品中合成色素的安全性,并对其检测方法作了跟踪总结.
作者:宋宁宁 刊期: 2013年第06期
自从转基因技术进入中国市场,各种转基因大豆及豆制品逐渐进入人们的餐桌,其安全性成为人们关注的焦点.本文综述了大豆中转入的外源基因种类,并进一步探讨了转基因大豆食品的安全性.
作者:许晓丹;刘畅;史永翠;王存芳 刊期: 2013年第06期
目的 研究白杨素(chrysin,ChR)及其衍生物6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素(dFMAChR)在人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型的转运规律.方法 建立精确灵敏、重复性好的ChR及dFMAChR的高效液相色谱(HPLC)检测方法;MTT(四甲基偶氮唑盐)法测定ChR和dFMAChR对Caco-2细胞的毒性作用.体外培养Caco-2细胞,用Transwell建立单层细胞模型;确定ChR和dFMAChR转运的佳pH条件.评价时间、浓度对dFMAChR和ChR的双向转运的影响,计算转运速率及表观渗透系数(Papp),并与阳性对照药普萘洛尔进行比较.结果 ChR和dFMAChR的转运佳介质pH分别为6.0和6.5,两者的转运无论是Apical侧(A侧)到Basolateral侧(B侧)还是B侧到A侧,均具有时间依赖性和浓度依赖性.ChR和dFMAChR的平均Papp (A-B)分别是(1.60±0.15)×10-6 cm/s和(10.63±0.35)×10-6 cm/s,平均Papp (B-A)分别是(1.22±0.17)×10-6 cm/s和(10.43±0.28)×10-6 cm/s,两者Papp (A-B) >Papp (B-A),且Papp (A-B) /Papp(B-A) <2.结论 在Caco-2模型中,dFMAChR和ChR均由被动扩散方式转运,dFMAChR的转运速率明显高于ChR,吸收接近普萘洛尔,属于吸收良好的化合物.
作者:陈锋;张燕琴;董琳;曹建国 刊期: 2013年第06期
本文主要从教师自身素质培养、系统教学方法应用、多媒体辅助教学和药理实验的改革等方面介绍了药理教学的体会和心得.
作者:唐琳琳;韩向阳;韩秀珍 刊期: 2013年第06期
目的 研究猪血红蛋白的酶解工艺.方法 用组合酶Ⅰ(蛋白酶F与蛋白酶P)和组合酶Ⅱ(蛋白酶F与蛋白酶N)同步酶解猪血红蛋白.结果 确定佳工艺参数,组合酶Ⅰ的佳酶解条件为:酶添加量0.2%,温度50℃,料水比1∶1.25,pH 7.5,水解时间20 h;组合酶Ⅱ的佳酶解条件为:酶添加量0.24%,温度50℃,料水比1:1.75,pH 8.0,酶解时间20h.此工艺条件下,组合酶Ⅰ和组合酶Ⅱ三氯乙酸可溶性氮含量(TCA-SN指数)分别为71.72%和87.82%,两种组合酶的蛋白质回收率均达90%.结论 组合酶Ⅱ较适于工业生产.
作者:时亚文;陈石良;蔡红燕;姜无边 刊期: 2013年第06期
目的 探讨一种催乳中药组方的催乳效果,研究其作用机制.方法 取产仔时间前后相差不超过24 h的50只母鼠,按母鼠体重随机分为正常组、模型组、催乳药物高、低剂量组和阳性对照组,每组10只母鼠.自分娩第2日起每天上午腹腔注射左旋多巴2 mg/kg,连续注射7d.于造模当日开始,每日下午给药,正常组蒸馏水灌胃,每日1次,连续给药14d.从给药第2日开始,每日测定母鼠泌乳量,并于给药14d后,处死动物,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测血清泌乳素(PRL)和下丘脑5-羟色胺(5-HT)水平,同时取乳腺福尔马林固定,并进行病理形态学观察.结果 造模后正常组单次泌乳量和总泌乳量均显著高于模型组,表明产后缺乳大鼠造模成功.催乳药高、低剂量组的单次泌乳量、总泌乳量和血清PRL含量均显著高于模型组.催乳药高剂量组下丘脑5-HT含量高于模型组.结论 该催乳中药组方具有促进哺乳大鼠泌乳的作用,催乳机制可能是通过提高产后缺乳模型大鼠的血清PRL及下丘脑5-HT水平,使乳腺组织呈高度泌乳状态,从而促进乳汁分泌.
作者:曹晶;王根辈;颜璐璐;周桂荣;刘剑勇;周王谊;莫红梅;万梅绪;马晓慧 刊期: 2013年第06期
目的 建立了一种同时测定调味品中合成着色剂(诱惑红、胭脂红、日落黄)和糖精钠的高效液相色谱(HPLC)分析方法.方法 采用C18色谱柱,以甲醇和0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,光电二极管阵列(PDA)检测器检测,采用外标法定量分析.结果 4种成分的线性范围为0.5~20.0 μg/mL (r>0.999),回收率为94.3%~101.6%,RSD为0.42%~2.44%(n=6).结论 此法准确、灵敏,前处理简单,适用于调味品中诱惑红、胭脂红、日落黄和糖精钠的定性、定量分析.
作者:咸瑞卿;李启艳;吴晓云;刁飞燕 刊期: 2013年第06期
目的 构建含重组人凝血酶基因的重组真核表达载体,并转染哺乳动物细胞CHO,建立稳定表达重组人凝血酶的细胞株.方法 利用限制性内切酶EcoR I和XbaI将凝血酶基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建含人凝血酶基因的重组质粒pcDNA3.1 (+)/thrombin,利用双酶切和测序法鉴定.采用阳离子脂质体介导方法,将构建的表达载体转染到CHO细胞中,通过G418加压筛选出阳性细胞克隆,建立稳定表达人凝血酶的细胞株,并扩大培养.采用RT-PCR和SDS-PAGE法检测其mRNA和蛋白质的表达,并对其生物活性进行鉴定.结果 重组质粒pcDNA3.1 (+)/thrombin经双酶切和测序鉴定证实插入序列准确无误;经RT-PCR和SDS-PAGE法鉴定,转染的CHO细胞可表达、分泌人凝血酶,得到的重组人凝血酶表观相对分子质量(Mr)为43000左右,与预测一致,且具有降解并凝固牛纤维蛋白原的活性,其比活为234.1 U/mg.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1 (+)/thrombin,并成功地在CHO细胞中表达了具有生物活性的重组人凝血酶,该体系的建立为进一步规模化生产重组人凝血酶奠定了基础.
作者:刘霞;刘飞;刘少英;朱希强;凌沛学 刊期: 2013年第06期
目的 采用大孔树脂柱色谱分离甘草总黄酮.方法 通过吸附率和解吸率的测定,在9种不同型号的大孔树脂中,选择适于分离甘草总黄酮的大孔树脂,并优化了洗脱液的浓度.结果 AB-8型大孔树脂的吸附和解吸性能均较好,对甘草总黄酮的吸附率为68.0%,解吸率为83.5%,适用于甘草黄酮的分离.结论 AB-8型大孔树脂是一种较好的分离甘草总黄酮的树脂材料.
作者:杨绯;李淑红 刊期: 2013年第06期
目的 测定对比不同来源龙齿药材炮制前后的钙盐含量.方法 采用EDTA(乙二胺四乙酸)容量法,选用钙黄绿素做指示剂,测定钙盐的含量.结果 龙齿煅制品钙盐含量高于龙齿生品的钙盐含量.结论 此法简便、快速、准确,能有效的评价龙齿炮制前后的质量.
作者:朱立俏 刊期: 2013年第06期
目的 研究1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇对映异构体分离测定的方法.方法 采用CHIRALPAK AD-3 (0.46cm×15 cm,5μm)色谱柱,以正己烷-异丙醇(200:1)为流动相,流速0.5 mL/min,柱温25℃.结果 采用本方法能完全分离对映异构体,灵敏方便,检出限为0.2011 μg/mL,约为供试品溶液浓度的0.04%,供试品溶液在12h内稳定.结论 本方法简单,专属性强,可有效控制1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇中对映异构体含量.
作者:纪红英;赵国敏;杨琪;邢玉仁 刊期: 2013年第06期
杜仲为我国名贵滋补药材,具补肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效.杜仲中包括木脂素类、环烯醚萜类、苯丙素类、多糖类、杜仲胶等多种化学成分,在降压、调血脂、降血糖、抗衰老、增强免疫、抗肿瘤、抗病毒等方面发挥作用,因此具有广阔的开发前景.
作者:马山;卢少海;田景振 刊期: 2013年第06期