学术投稿

多种细胞因子诱导大鼠间充质干细胞向多巴胺能神经元分化

陈丹丹;付文玉;庄文欣;吕娥;郭健;李锋杰

关键词:间充质干细胞, 神经元, 细胞分化, 细胞因子, 大鼠
摘要:目的:探索音速波状蛋白(SHH)、成纤维细胞生长因子-8(FGF8)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、全反式维甲酸(ATRA)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)多种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向多巴胺(DA)能神经元分化的可行性及分化后细胞功能的改变.方法:体外分离、扩增和鉴定大鼠BMSCs;分别采用bFGF+ ATRA+ GDNF和bFGF+SHH+FGF8细胞因子组合进行诱导,免疫细胞化学显色方法鉴定2组神经元样细胞,计数和比较2组阳性细胞阳性率;荧光分析法测定诱导后细胞培养上清液中儿茶酚胺含量.结果:经过诱导大鼠BMSCs能够分化为神经元样细胞.免疫细胞化学显色呈神经巢蛋白、微管相关蛋白-Ⅱ、酪氨酸羟化酶(TH)阳性;且bFGF+ SHH+FGF8组诱导的神经元样细胞阳性率高于bFGF+ ATRA+ GDNF组.2组细胞上清液中儿茶酚胺类物质含量分别为(2.731±0.81)μg/L和(2.977±0.16)μg/L.结论:bFGF+SHH+FGF8组合能够更有效地诱导大鼠BMSCs分化为DA能神经元样细胞.
解剖学杂志相关文献
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    作者:柏树令;范军;潘锋;田晓红;王军;闻德亮 刊期: 2011年第05期

  • 多种细胞因子诱导大鼠间充质干细胞向多巴胺能神经元分化

    目的:探索音速波状蛋白(SHH)、成纤维细胞生长因子-8(FGF8)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、全反式维甲酸(ATRA)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)多种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向多巴胺(DA)能神经元分化的可行性及分化后细胞功能的改变.方法:体外分离、扩增和鉴定大鼠BMSCs;分别采用bFGF+ ATRA+ GDNF和bFGF+SHH+FGF8细胞因子组合进行诱导,免疫细胞化学显色方法鉴定2组神经元样细胞,计数和比较2组阳性细胞阳性率;荧光分析法测定诱导后细胞培养上清液中儿茶酚胺含量.结果:经过诱导大鼠BMSCs能够分化为神经元样细胞.免疫细胞化学显色呈神经巢蛋白、微管相关蛋白-Ⅱ、酪氨酸羟化酶(TH)阳性;且bFGF+ SHH+FGF8组诱导的神经元样细胞阳性率高于bFGF+ ATRA+ GDNF组.2组细胞上清液中儿茶酚胺类物质含量分别为(2.731±0.81)μg/L和(2.977±0.16)μg/L.结论:bFGF+SHH+FGF8组合能够更有效地诱导大鼠BMSCs分化为DA能神经元样细胞.

    作者:陈丹丹;付文玉;庄文欣;吕娥;郭健;李锋杰 刊期: 2011年第05期

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  • 慢性砷中毒对大鼠行为能力及中脑黑质多巴胺含量与结构的影响

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    作者:朱俊德;王玉林;余资江;余彦;孙宝飞;龚明 刊期: 2011年第05期

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    目的:探讨单核细胞在体外转分化为淋巴管内皮细胞的可能性.方法:取成人新鲜外周血,分离单核细胞,分别在层粘连蛋白(FN)铺板或血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、白介素-3(IL-3)、白介素-7(IL-7)刺激下诱导培养24 h,通过形态学分析、RT-PCR和免疫荧光细胞化学分析方法检测单核细胞中淋巴管内皮特异性标志物LYVE-1、podoplanin、Proxl及内皮细胞共同抗原vWF、eNOS的表达.在此基础上,进一步用内皮细胞培养基-2(EGM-2)、VEGF-C和FN铺板联合诱导单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化.结果:单核细胞经FN、VEGF-C、IL-3、IL-7短暂诱导即能表达LYVE-1、podopla-nin、Proxl,而不表达vWF、eNOS.结论:单核细胞在炎症或者内皮细胞生长环境中可以表达淋巴管内皮细胞标志物,但尚不能证实转化为真正的淋巴管内皮细胞.

    作者:王长明;田铧;张立平;扈燕来;徐蕴;邰浩清;丁海玲;王雪颖 刊期: 2011年第05期

  • 脂联素基因单核苷酸多态性在广西百色地区壮族人群中的分布

    目的:研究脂联素基因4个单核苷酸多态性( SNPs)各等位基因及基因型在广西百色地区壮族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异.方法:采用单碱基延伸的单核苷酸多态性(SNPs)分型技术对广西百色地区624例壮族个体的脂联素染色体基因组上4个位点(rs1063539 C/G、rs12495941 G/T、rs266729 C/G和rs3774261 A/G)进行基因分型,结合Hapmap计划第2期公布的4个人群的SNPs分型数据,分析这5个人群的遗传结构.结果:在广西百色地区壮族人群中存在脂联素这4种位点的基因多态性,脂联素基因rs1063539 C/G、rs12495941 G/T和rs3774261 A/G多态性的分布频率与欧洲、非洲、日本东京人群比较均存在差异;而与北京汉族人比较差异无统计学意义.结论:在广西百色地区壮族人群中存在脂联素基因多态性.与北京汉族人比较无差异,但与祖先来自欧洲、非洲和日本东京人有差异的遗传成分存在.这种差异对于人类学的研究可能起重要的作用.

    作者:韦叶生;黄秀峰;周庆辉;王金花;林朝文;杨园园;黄昌盛;吴联滔;吴玉梅;何兰凤 刊期: 2011年第05期

  • 数码显微镜投影指导法在组织学实验教学中的应用与评价

    组织学实验是学习组织学的一个重要环节,它不单纯是验证所学的理论,而且对培养学生的科学态度及思维方式起着重要作用.但是近年来随着医学教育的改革,组织学的学时数缩减已成为不争的事实.除理论课的课时数减少,实验课更是受到压缩,课时少与内容多的矛盾日益突出,如何在学时少内容多的情况下,有效提高教学效果,是教学中必须面对的一个重要问题[1].经查阅大量文献,美国的明尼苏达大学医学院在组织学近10年没有使用光学显微镜和载玻片讲授的情况下,却取得非常好的教学效果[2].受此启发,本研究通过学生不用显微镜,而是将切片用数码显微镜投放到屏幕上由老师统一指导,节省学生调试显微镜及找视野的时间,用于穿插病理切片,以增加对比性;同时应用PBL(problem-based learning)教学方法,以启发学生思考,从而探讨单位时间内实验教学效果.

    作者:郑金娥;傅珏;章志红;杨晓莉;陶茂珑 刊期: 2011年第05期

  • 人大脑动脉环的解剖基础与影像解剖的进展

    大脑动脉环,又称Willis环,是由大脑前动脉(anterior cerebral artery,ACA)第1段(A1段)、前交通动脉(anterior communicating artery,ACoA)、大脑中动脉(Middle cerebral artery,MCA)第1段(M1段)、大脑后交通动脉(posterior communicating artery,PCoA)和大脑后动脉(posterior cerebral artery,PCA)第1段(P1段)组成的1个环形结构,位于脑底下方、蝶鞍上方,环绕视交叉、灰结节及乳头体周围.此环使两侧颈内动脉系与椎-基底动脉系相交通.当某处发生血流阻断时,可通过Willis环使血液重新分配和代偿,以维持大脑的血液供应.目前,其形态学和影像学研究尚不完善,特别是胎儿Willis环解剖学特点报道较少.要深入进行Willis环动脉发育的影像学研究,特别是变异研究,将有助于研究脑血管病的发病机制.现对Willis环的解剖与影像的变异情况综述如下.

    作者:陈光平;陈吴兴 刊期: 2011年第05期

  • 主导一主体教学模式在系统解剖学理论教学中的应用

    目前我国众多医学院校的系统解剖学理论教学手段依然延续着教师主宰教学的“满堂灌”方式,学生的认知主体作用得不到充分发挥,导致学习主动性和创造性受到制约,对教师的依赖加重,不利于自主学习能力的培养和人才成长.为了提高人才培养的质量,进行教学改革,探索适合学生发展的教学方式势在必行.何克抗教授详细分析了以教师为中心和以学生为中心的2种教学模式,并依据它们的优势互补提出主导—主体教学模式(简称“双主”模式)[1],该教学模式可充分体现教师的主导作用和学生的认知主体作用,构建教与学的合理关系.国内部分医学院校已开展人体解剖学实验课“双主”教学,但理论课依然以教师讲授为主[2-3].

    作者:周庆辉;黄秀峰;黄昌盛 刊期: 2011年第05期

  • 人体解剖学成绩与性别差异

    影响学习成绩的因素有很多,性别差异便是其中之一.笔者教学中发现,女学生的人体解剖学成绩比男学生好,而男、女学生在学习人体解剖学上各有优势.但具体情况如何,对学习成绩的影响有多大,通过对人体解剖学成绩的分析来探讨性别差异在学习人体解剖学中的优劣势,试图找出有利于解剖学教学的规律.

    作者:陈学洪;李启华;李剑 刊期: 2011年第05期

  • 环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞黏附分子和微管相关蛋白doublecortin的表达变化

    目的:在环磷酰胺致大鼠神经管畸形(NTD)模型基础上,研究NCAM和DCX在大鼠胚胎神经上皮细胞中的表达变化,进一步探讨其致畸作用的分子机制,为预防人类神经管畸形的发生提供理论依据.方法:将孕鼠随机分实验组和对照组,应用免疫荧光技术检测NCAM和DCX在NTD发生中的表达变化.结果:给药后4、8h,实验组NCAM和DCX阳性率与对照组相比,差异无统计学意义;给药后12、24、48h,实验组NCAM和DCX阳性细胞增多,NCAM和DCX阳性率与对照组相比,差异均有统计学意义.结论:环磷酰胺使NCAM、DCX表达增加,干扰了神经元前体细胞向神经元方向的分化成熟,与环磷酰胺致大鼠NTD有关.

    作者:陈燕春;管英俊;刘焕彩;赵春艳;杜红梅;高海玲 刊期: 2011年第05期

  • 太行山猕猴掌骨的形态学判别分析

    目的:进一步了解太行山猕猴掌骨形态学特征.方法:测量30例成年太行山猕猴掌骨标本10个形态学变量.数据用SPSS13.5统计软件分析处理,建立掌骨的多元判别函数模型.结果:第1根和第5根掌骨正确判别率是100.0%,中间3根正确判别率范围是92.2%~95.6%,回代检验和交互检验结果相似,说明判别函数稳定有效.结论:太行山猕猴5根掌骨的形态差异显著.采用多元判别函数可以有效地将未知掌骨标本进行判别.

    作者:赵晓进;党晓云;苏亚;王凤产 刊期: 2011年第05期

  • 层黏连蛋白和纤维连接蛋白在肾发育中的表达

    目的:观察层黏连蛋白(LN)和纤维连接蛋白(FN)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法:采用免疫组织化学技术,结合免疫印迹法,检测不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织LN和FN的表达及其含量变化.结果:LN在输尿管芽、各期肾小体、肾小管及集合管的基底膜处均有表达,并随肾的发育其表达量逐渐增加;FN在除逗号小体以外的各期肾小体、肾小管和集合管的基底膜处均有表达,随肾的发育其表达量逐渐增加.结论:LN和FN可能对小鼠肾发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用.

    作者:张萍;宋小峰;郭敏 刊期: 2011年第05期

  • 《神经传导通路》单元说课的研究与实践

    说课是教学改革中的新生事物,是教师口头表述或汇报教学的设想、意图及理论依据,与同行或教研人员互相磋商,共同提高理论素养和驾驭教材能力的一种教学研究或师资培训活动,是一种教学和教研改革的手段.说课的内容有:说教材、说学生、说目标、说方法和说过程;表述的内涵是:教什么、怎样教、为什么这样教;说课的时间:20 min内;说课与评说课结合,相互交流,集思广益.说课融备中说、说中评、评中研于一体,帮助教师更好地吃透教材,弥补备课疏漏,优化课堂教学,有利个性特点和创新意识的发挥,犹如运筹帷幄.

    作者:林乃祥 刊期: 2011年第05期

  • 广西巴马20~110岁世居人群的体型特征

    目的:探索世界第5长寿之乡广西巴马县世居人群的体型特征.方法:用Heath-Carter体型法,对992名(男463,女529)20~110岁巴马世居人群的体型进行评价.结果:随年龄增长,男、女内因子值上升至40~岁组达高,而外因子值降至低,50岁后男、女内因子值逐渐下降,女性明显于男性,而外因子值逐步回升.中因子值男30~、女40~岁组升至高,后下降;男性体型(3.4-3.6-2.5)以偏内胚层的中胚层体型占优势,女性(5.0-2.9-2.1)以偏中胚层的内胚层体型多见;与其他群体比较,巴马世居人群男、女内因子值较大,中因子值小,外因子居中.结论:巴马世居人群皮下脂肪较厚,骨骼细小,肌肉系统发育差、肌量少,体型以小巧匀称为特征.

    作者:李坤;黄广琳;刘鹏;蒋葵;梁明康;苏曲之;杨瑞;徐世富 刊期: 2011年第05期

  • 组织学实验考核改革的实践与探讨

    组织学是研究机体微细结构及其相关功能的科学,其研究对象抽象,需借助显微镜获得直观的感性认识.因此,实验教学在教学过程中的地位举足轻重,是理论教学的必要补充和深化.而实验考核是检验实验教学效果和反映学生对知识掌握程度的重要手段.所以实验考核历来是教师们深入探讨的教学改革热门课题之一.现将本校组织学实验考核改革措施及其效果总结如下.

    作者:张玉英;伍思琪;贾琴;吴爽;吴燕明;李艳萍 刊期: 2011年第05期

  • 成纤维细胞生长因子2基因单核苷酸多态性在广西百色地区壮族人群中的分布

    目的:研究成纤维细胞生长因子2 (FGF2)基因5个单核苷酸多态性(SNPs)各等位基因及基因型在广西百色地区壮族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异.方法:采用Multiplex SNaPshot SNP分型技术对百色地区624例壮族个体的FGF2染色体基因组上5个位点(rs308379、rs12644427、rs3789138、rs308442和rs3747676)进行基因分型,结合HapMap计划4个人群(HapMap-CEU、HapMap-YRI、HapMap-JPT和HapMap-HCB)的SNPs分型数据,分析这5个人群的遗传结构.结果:壮族人群FGF2的基因型频率分布为:rs308378(AA 19.6%、AT 47.0%和TT 33.4%)、rs12644427(AA26.4%、AG 48.4%和GG 25.2%)、rs3789138(AA 29.6%、AG 49.2%和GG 21.2%)、rs308442(AA 6.6%、AT 36.0%和TT57.4%)和rs3747676(CC22.6%、CT48.1%和TT29.3%),其中rs308379A/T多态性的分布频率在壮族男性与女性之间差异具有统计学意义.FGF2基因SNPs在壮族人群的分布频率与HapMap-CEU、Hap-Map-JPT和HapMap-HCB的相比差异具有统计学意义.结论:广西百色地区壮族人群中存在FGF2基因多态性,且与HapMap-CEU、HapMap-YRI、HapMap-JPT和HapMap- HCB人群之间有差异的遗传成分存在.这种差异对人类学研究可能起重要的作用.

    作者:黄秀峰;周庆辉;王金花;林朝文;杨园园;韦叶生;吴联滔;吴玉梅 刊期: 2011年第05期

  • 大脑皮质发育和细胞周期

    虽然神经元由大脑深处脑室壁的神经祖细胞发生,新生神经元还是往往能够从它们的出生地长途跋涉迁移到达终目的地,这是大脑发育特点.在皮质发育过程中尤其明显,新生神经元必须迁移到皮质外表面.大脑皮质的神经发生涉及增殖和分化,就细胞周期而言,这意味着重新进入和退出细胞周期.人类大脑发育中有很多与不正常增殖有关的疾病,例如,DyrklA可能是唐氏综合症的1个致病因子,Six3突变的结果导致前脑无裂畸形,Emx2和TSC2在皮质的缺陷导致脑裂畸形和协调发育不良(增厚和组织的无序)[1-2].

    作者:臧建峰;徐晓波;牛艳丽;邓锦波 刊期: 2011年第05期

  • 自体血栓并股动脉结扎建立有效的大鼠后肢缺血模型

    动物后肢缺血模型广泛应用于血管新生机制及缺血性疾病治疗等方面的研究.1987年,Couffinhal等[1]通过结扎小鼠股动脉及各分支成功建立了后肢缺血模型.随后,基于这一模型的实验方法,研究者又将实验对象扩展到Wistar大鼠、SD大鼠、Lewis大鼠等其他鼠类动物[2-4].在建立这些后肢缺血模型时,研究者多以激光多普勒成像系统(laser doppler perfusion imaging system,LDPI)显示的血流灌注量作为肢体缺血判断指标,而后肢组织的病理改变等状况多被忽视或回避.有研究指出,结扎Wistar大鼠股动脉及其分支并不能有效地引起后肢缺血[5-6].为克服单纯结扎大鼠股动脉及各分支建模的不足,本实验采用自体血栓合并结扎股动脉建立了有效的大鼠后肢缺血模型.该模型为研究急、慢性缺血性疾病的发病机制和促血管新生治疗的评估等提供了有效的平台.

    作者:邹知耕;田铧;赵世刚;吕顺增;王俊涛;李超;尹群生 刊期: 2011年第05期

解剖学杂志

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