原淑娟；顾红玉；丁文龙；胡金家；钟梅芳
目的:观察糖尿病大鼠视网膜神经源性一氧化氮合酶(nNOS)蛋白和基因水平的表达以及乙酰胆碱酯酶(AchE)的变化.方法:注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,于注射后12周和16周时将模型组及对照组大鼠的眼球冰冻切片.用原位杂交法、免疫组织化学法和组织化学法分别显示nNOS mRNA、nNOS和AchE阳性神经元或神经纤维,RSIMAGE软件进行图像分析处理.结果:与对照组比较,糖尿病大鼠视网膜nNOS mRNA、nNOS、AchE的光密度值均降低,12、16周都有显著性差异.结论:糖尿病大鼠视网膜nNOS基因转录和表达均下降,AchE含量降低,导致了NO水平下降,成为糖尿病性视网膜病变的主要因素之一.
作者：原淑娟；顾红玉；丁文龙；胡金家；钟梅芳 刊期： 2007年第02期
目的:研究坐骨神经损伤后Roundabout 2(Robo2)在成年大鼠背根节和脊髓的表达变化.方法:健康成年雌性SD大鼠坐骨神经切断后分别存活3～28 d,取其L4～6背根节(DRG)和脊髓;利用RT-PCR和免疫组织化学技术检测Rob02在上述组织中的表达变化.图像分析技术对阳性细胞的灰度值进行测定.结果:正常DRG感觉神经元表达Rob02 mRNA和蛋白质,脊髓前角运动神经元不表达.坐骨神经切断后3 d DRG内Robo2表达增加,7～14 d达高峰,21～28 d恢复到正常水平.结论:坐骨神经切断可导致DRG内Robo2的表达上调,可能与早期的感觉轴突再生有关.
作者：郑林丰；张建伟；易西南；许愿忠；吴贤群；张灵芝；谢乐斯 刊期： 2007年第02期
20世纪50年代,Brody[1]发现老年人大脑皮质的神经元死亡高达49%,以后的研究工作[2]也证实了这一发现.因此,几十年来一直认为老年脑必然存在广泛的大脑皮质神经元死亡.但是,自20世纪80年代以来,以Gundersen[3,4]为首的丹麦科学家在全世界首次创立了在三维空间内对形态结构进行准确定量研究的新方法,即新的体视学方法.Pakkenberg和Gundersen[5]率先在国际上将新的体视学方法运用于人大脑皮质神经元的定量研究,他们的研究工作显示正常老年脑不存在显著性大脑皮质神经元死亡,这一结果向传统观念提出了挑战.
作者：杨姝；汪维伟；唐勇 刊期： 2007年第02期
目的:为乙状窦前入路中安全磨出半规管提供解剖学资料.方法:经10%福尔马林溶液固定的成人尸头标本15个共30侧.磨除Trautman三角的骨质,暴露乙状窦、岩上窦、岩上窦-乙状窦交点、上骨半规管及面神经垂直段、颈静脉球,测量后骨半规管与毗邻结构的距离.结果:后骨半规管与硬化型的乳突对后骨半规管的安全磨出影响较大.鼓室窦存在率100%.后骨半规管的定位:骨质的改变;乙状窦前含乳突小房的松质骨中出现致密的象牙骨质提示接近后骨半规管;颅后窝硬膜皱褶自乙状窦向深层汇集点,提示接近后骨半规管;鼓室窦暴露后,通过外骨半规管定位后骨半规管.结论:鼓室窦可以定位外骨半规管,继而定位后骨半规管;明确毗邻的结构关系可以为安全磨出后骨半规管提供保证.
作者：王君玉；廖建春；党瑞山；施小恬；刘环海；胡国汉；张晖；姚琪 刊期： 2007年第02期
目的:研究高压氧对成年大鼠神经干细胞增殖的影响.方法:采用BrdU免疫组化方法,观察高压氧对成年大鼠神经干细胞增殖的影响,同时通过脑内注射内皮素制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,对这两种诱导神经干细胞增殖的处理加以比较.结果:高压氧暴露10 d,侧脑室前角和外侧壁的BrdU+细胞数量显著增加,BrdU+细胞核计数显著多于正常组,阳性细胞核反应性也显著增强,多为深染的棕黑色细胞核,其效应与MCAO第8天对BrdU+细胞的效应类似;高压氧暴露10 d也引起了海马齿状回颗粒细胞层BrdU+细胞数量显著增加.结论:反复高压氧暴露可能具有调节脑内神经干细胞增殖与分化的作用.
作者：任萍；季晖；康志敏；刘昀；黄振兴；孙学军 刊期： 2007年第02期
目的:探讨穹隆海马伞横断后巢蛋白在隔-海马通路表达的情况.方法:在立体定位仪上横切SD大鼠大脑皮质、胼胝体和穹隆海马伞,于术后1～30 d处死动物.用免疫组化染色方法,观察损伤后巢蛋白在隔-海马通路的表达.结果:穹隆海马伞损伤后,第1天,隔区和海马未见巢蛋白阳性细胞;第3天巢蛋白阳性细胞开始出现在损伤近侧背外侧核区和海马CA3区及齿状回;第5天巢蛋白阳性细胞范围扩大,数量增加,出现在远离损伤平面嘴侧端的隔区和尾侧端的海马以及损伤对侧.第7天起,巢蛋白阳性细胞在损伤平面区减少而在远离区增加;第15天损伤对侧多于损伤侧;第20天消失.结论:穹隆海马伞横断引起隔-海马通路巢蛋白表达的改变,巢蛋白阳性细胞具有修复中枢神经系统病变的潜能.
作者：童健尔；阮奕文；姚志彬 刊期： 2007年第02期
目的:建立小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型,探讨小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织内淋巴管的生成情况.方法:体外培养B16瘤细胞,接种B16瘤细胞于C57BL/6小鼠右侧背部皮内,构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型;应用H-E染色、淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(1ymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1,LYVE-1)免疫组化染色确认模型和观察肿瘤组织内淋巴管的生成情况.结果:建立了恶性黑色素移植瘤模型;LYVE-1主要着色于正常组织和移植瘤组织中淋巴管内皮细胞的细胞膜上;恶性黑色素瘤组织中淋巴管密度明显高于正常皮肤组织.结论:构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型是获得恶性黑色素瘤组织和进一步研究的有效手段;LYVE-1是特异性较高的淋巴管内皮标记物;小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织中可能存在淋巴管的新生.
作者：李雪梅；马晶；张雅芳；刘宝全；杨树才 刊期： 2007年第02期
目的:研究免疫介导的神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)表达的特征,探讨其损伤机制.方法:建立免疫介导的脊髓前角运动神经元损伤的模型,利用免疫组化方法观察脊髓前角运动神经元CDK5及p35/p25的表达特征.结果:对照组豚鼠脊髓运动神经元CDK5及p35/p25主要在细胞核及细胞膜下表达,胞质着色淡;注射牛脊髓前角匀浆而无肢体瘫痪的豚鼠,脊髓运动神经元CDK5及p35/p25表达在数量上增加,强度上增强;有明显肢体瘫痪的豚鼠CDK5及p35/p25免疫反应阳性神经元数量明显减少,部分胞质内无着色.结论:CDK5及p35/p25在神经元胞质内的易位表达,在免疫介导的神经元损伤过程中具有重要的作用.
作者：刘亚玲；郭艳苏；许蕾；任爱兵；霍会永；李春岩 刊期： 2007年第02期
目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段间的变化.方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7 d组.除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型.采用免疫组化和体视学测量方法,分别测出其T细胞数密度、平均体积和表面积体积比,并比较它们在肠段间的差异.结果:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞数密度均下降,第3天低.无论正常或烫伤后,TCRγδT细胞平均体积均比TCRαβT细胞增大.结论:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞的数量均减少,第3天少,但其平均体积和形状规则程度与烫伤前相比没有显著变化.
作者：彭胜男；朱清仙；曾慧红；绍立健 刊期： 2007年第02期
目的:体外观察低氧对绿色荧光蛋白(GFP)小鼠神经干细胞(NSCs)增殖的影响,并探讨Wnt/β-catenin通路在此过程中的作用.方法:经低氧(3±2)%O2和常氧20%O2培养GFP小鼠海马组织NSCs,通过NSCs克隆形成率检测、BrdU掺入法和四唑盐比色法(MTT)法检测细胞增殖情况;脂质体介导法将NSCs转染β-catenin,通过免疫细胞化学染色、Western印迹法检测β-catenin表达情况,MTT法检测转染β-catenin后低氧对NSCs增殖的影响.结果:低氧组细胞克隆球形成率、BrdU阳性细胞数量、NSCs增殖活性、NSCs内β-catenin表达均显著高于常氧组;转染βcatenin的NSCs经低氧培养后,NSCs增殖活性明显高于未转染组.结论:体外低氧培养能促进NSCs增殖和NSCs内β-catenin表达;增加NSCs中β-catenm表达能促进低氧培养下NSCs的增殖.表明Wnt/β catenin通路具有促进低氧诱导NSCs增殖的作用.
作者：崔晓萍；应大君；陈建梅；余资江；董世武；张伟；糜建红；王廷华 刊期： 2007年第02期
目的:观察电针血清对体外培养的小胶质细胞活性和一氧化氮释放量的影响,探讨电针治疗帕金森病的机制.方法:采用高频电针针刺正常大鼠,2周后制备电针血清;体外培养的小胶质细胞分别加入正常血清(正常组)、正常血清加入LPS(对照组)和电针血清加入LPS(电针组)培养;通过免疫组化、MTT和Griess法分别观测8～48 h不同时间小胶质细胞形态、活性及NO释放量.结果:1 μg/ml LPS可激活小胶质细胞,表现为细胞体积增大,OX-42表达上调,电针组12 h小胶质细胞的活性低于对照组,并且12～48 h NO释放量均显著低于对照组,增加电针血清浓度可显著减少NO的释放量.结论:电针血清可能通过抑制激活的小胶质细胞释放NO,从而保护多巴胺神经元.
作者：陆利；白丽敏；孙红梅；洪庆涛 刊期： 2007年第02期
目的:探讨杏仁复合体内星形胶质细胞在学习记忆过程中的作用,并提供形态学依据.方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、游水组、模型组.应用Morris水迷宫训练大鼠建立空间辨别性学习记忆动物模型,用免疫细胞化学法显示杏仁复合体内神经纤维胶质酸性蛋白(GFAP)免疫阳性的星形胶质细胞.结果:大鼠杏仁复合体内星形胶质细胞数量、大小、突起长度及突起分级呈现出由对照组向游水组再到模型组递增趋势;大鼠杏仁复合体内GFAP免疫阳性产物灰度值由对照组向游水组到模型组呈逐渐减少的趋势.模型组中14 d的GFAP免疫阳性产物灰度值低于7 d和21 d的.结论:大鼠杏仁复合体内星形胶质细胞参与空间辨别性学习记忆过程,在形态和GFAP表达上均呈时间和空间变化.
作者：郝木峰；宿宝贵 刊期： 2007年第02期
目的:探讨脑缺血再灌注后大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)和生长抑素(SS)的基因表达及其意义.方法:取Wistar大鼠,缺血再灌注分6、24和72 h组.测试大脑皮质一氧化氮合酶和生长抑素蛋白表达水平.结果:NOS缺血再灌注6、24 h组和对照组相比阳性神经元数明显升高;缺血再灌注72 h与6、24 h组相比阳性神经元数明显下降;SS缺血再灌注6、24、72 h组与对照组相比阳性神经元数明显下降;缺血再灌注72 h组比缺血再灌注6 h组下降更低.结论:NOS和SS通过多种途径参与了脑缺血再灌注后细胞损伤的发生.
作者：隋月林；李积胜；胡庆；李吉勇；朱建中；孟晨阳 刊期： 2007年第02期
以往使用的血管平滑肌细胞(VSMC)模型是直接用正常血管贴壁培养传代细胞,并认为传至第5代以后即为分泌型[1].但我们通过检测特异性表型表达基因SM22α发现,按以往传代培养的VSMC仍有表达.
作者：焦磊；杨芹；王彩英；杨刚；杨亚安；王旻晨；吴开云 刊期： 2007年第02期
目的:探讨突触后密度蛋白95(PSD-95)在脊髓损伤(SCI)后的表达变化以及定位情况.方法:使用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓损伤模型.采用实时定量PCR和Western印迹法测定损伤后各时间段PSD-95mRNA及其蛋白水平在脊髓中的表达变化.采用免疫荧光双标方法显示PSD-95在正常脊髓中的分布以及损伤后的定位改变.结果:PSD-95 mRNA及其蛋白水平在SCI后呈现逐渐下降的趋势,mRNA在5 d降到低水平,蛋白水平在7 d低.PSD-95与神经型一氧化氮合酶(nNOS)在SCI后8 h存在着共定位关系,但在SCI后7 d,PSD-95除与nNOS部分共定位之外,还高表达于损伤局部活化中性粒细胞和巨噬细胞.结论:SCI后PSD-95在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,并且损伤后高表达在活化的炎症细胞,提示PSD-95参与了脊髓继发性损伤过程.
作者：沈爱国；高尚锋；程纯；赵剑；陈梦玲；牛淑琼；李欣；郭志琴 刊期： 2007年第02期
目的:筛选高温致金黄地鼠神经管畸形的上调表达基因,探讨其分子生物学机制.方法:通过抑制性消减杂交技术获得消减产物,转化大肠杆菌DH5α,构建高温致金黄地鼠胚胎神经管畸形的消减cDNA文库;联合蓝白斑和菌落PCR方法筛选含插入片段的阳性克隆,进行测序和同源性分析,并经Northern杂交技术检测基因的表达.结果:成功构建高温致金黄地鼠胚胎神经管畸形的消减cDNA文库,其中2个克隆插入片段的基因序列与小鼠磷酸甘油酸酯激酶(Pgk-1)同源.Northern杂交证实该基因在高温致畸胚胎神经管的表达较其在同龄正常胚胎神经管明显升高.结论:Pgk-1的上调表达可能与高温致神经管畸形密切相关.
作者：杨青；高英茂；李少玲 刊期： 2007年第02期
石蜡切片因操作简单,易保存等优点而成为现代组织学、胚胎学、病理学等医学科学研究领域常使用的一种方法.石蜡切片制作包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡等许多环节,每一环节都直接影响石蜡切片制作结果.目前动物标本[1]及成人组织[2]石蜡切片技术报道较多.
作者：张泳；刘学红；徐文娟；赵仲生 刊期： 2007年第02期
带骨、关节的动脉铸型标本对于医学生学习、临床医生术前复习均有重要的意义.但是在此类铸型标本制作过程中,经酸或碱腐蚀后的标本,软组织被腐蚀掉,仅剩下骨和铸型血管,难以原位显示血管走行与骨关节的正常位置关系.
作者：谢拥军；刘卫华；宋兴勃；马大军；羊惠君；汪莉；刘兴国 刊期： 2007年第02期
无论是石蜡切片,还是冰冻切片,在进行常规H-E染色、组织化学染色、原位杂交、免疫组织化学染色时,都存在着掉片现象.特别是在需要连续冰冻切片时,如果在免疫组化染色的过程中,掉片就带来重复取材、切片、染色,因而影响整个实验的进度并造成人,财、物的浪费.人们为了防止冰冻切片在免疫组化染色过程中的脱片,采用购置商品化的防脱载玻片,但费用较高,尤其针对于小额资助的科研项目及缺乏足够经费支持的研究生科研,选择自已动手制备防脱玻片是切实可行的手段.
作者：沈逸萍 刊期： 2007年第02期
脑震荡是轻型闭合性脑损伤,占颅脑外伤患者的75.5%～78.2%[1].脑震荡后主要表现为立即出现短暂性昏迷与记忆障碍,其中学习记忆能力的损害是持久和对患者影响重的症状之一[2～4].国内外对开放性脑损伤的认知行为机制方面进行了研究,发现存在有与损伤程度相关的乙酰胆碱受体的变化,但其机制至今还未阐明.本研究用免疫组织化学方法,探讨脑震荡鼠中枢乙酰胆碱M1受体(M1-R)蛋白表达的变化,以进一步探索脑震荡的神经生物学机制.
作者：李坪；于建云；赵小林；郭泽云；许冰莹；吴春云；兰光明；赵旭东 刊期： 2007年第02期
解剖学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国解剖学会
