中性粒细胞抑制因子的作用及用途

李新平；朱江；张学光

关键词：中性粒细胞抑制因子, β2整合素, 抗炎, 粘附

摘要：中性粒细胞抑制因子(NIF)是整合素LAF-1和Mac-1的配体.作为β2整合素的拮抗剂,与ICAM-1、ICAM-2竞争性地和LAF-1及Mac-1结合,抑制中性粒细胞与内皮细胞的粘附和聚集,阻止白细胞的渗透和浸润.因此,NIF能用于治疗各种出现白细胞浸润和活化的临床疾病及组织损伤,包括休克、中风、急性和慢性同种异体移植排斥反应、血管炎、脓毒症、风湿性关节炎、炎性皮肤病、肠炎、伴随心肌梗塞的局部缺血再灌注损伤和成人呼吸窘迫综合征等.NIF作为一种新的抗炎药,具有广阔的应用前景.

现代免疫学杂志相关文献

不同方式接种DNA疫苗免疫效果的比较

DNA疫苗经基因枪和肌肉注射两种接种方式免疫小鼠,免疫组化检测gD抗原表达情况.全自动图像分析系统分析表达量,ELISA检测抗体滴度,病毒攻击考察保护效应,比较不同方式接种DNA疫苗的免疫效果.重组质粒pVAX-gD经基因枪接种与肌肉接种均能实现gD基因在肌肉细胞的表达,激发免疫动物体内的高滴度抗体,保护免疫动物免于HSV-2感染.研究表明基因枪接种要求的DNA疫苗剂量小,基因枪介导的免疫重复性高、效果好,更适合DNA疫苗接种.

作者：韩双艳；郭勇；杨慧兰；王捷；杨传红刊期： 2004年第03期
淋巴细胞和巨噬细胞去除对人骨髓造血细胞体外扩增效应的影响

为了探讨淋巴细胞和巨噬细胞去除对人骨髓造血细胞体外扩增效应的影响,采用抗CD3、抗CD56和抗CD14单克隆抗体介导的补体细胞毒方法,去除骨髓单个核细胞(MNC)中的T淋巴细胞、NK细胞和巨噬细胞,流式细胞技术(FACS)分析细胞表面标志.将经不同单抗处理的骨髓MNC加入含有多种造血生长因子的培养基中进行体外有核细胞扩增,并观察多向祖细胞集落(CFU-GEMM)的形成能力.结果显示,经抗CD3、抗CD56、抗CD14单抗分别处理和用上述三种单抗共同处理的骨髓MNC中相应的靶细胞与MNC对照组相比均有明显的降低.经多种造血生长因子刺激培养20 d,骨髓MNC对照组有核细胞总数扩增了65倍,T细胞、NK细胞和巨噬细胞去除组分别扩增了90倍、77.2倍和67.4倍,而三种细胞共同去除组仅为2.86倍.骨髓MNC对照组CFU-GEMM产率为161.50±12.54,T细胞去除组CFU-GEMM产率为370.00±58.22,明显高于前者,差异显著(P＜0.005).NK细胞去除组为205.50±30.73,与MNC对照组相比也有显著差异(P＜0.05).巨噬细胞去除组为163.25±18.54,三种细胞共同去除组仅为49.75±9.98.本文结果提示,单纯去除骨髓MNC中的T淋巴细胞或NK细胞可明显促进人骨髓造血细胞的体外扩增效应.

作者：张建华；张彩；张云；孙汭；王郡甫刊期： 2004年第03期
PDGF、TNF-α在人肝细粒棘球蚴囊壁周围组织的分层表达

采用原位杂交方法检测血小板衍生生长因子(PDGF)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)在40例人肝细粒棘球蚴囊肿周围纤维囊壁中表达.结果显示PDGF、TNF-α在肝细粒棘球蚴囊肿周围纤维囊壁中出现特异性分层表达.靠近虫体侧纤维囊壁中,PDGF、TNF-α阳性细胞率分别为(9.36%±2.13%)、(10.52%±2.64%).靠近肝实质侧纤维囊壁中,PDGF、TNF-α阳性细胞率分别为(37.51%±7.45%)、(25.76%±5.05%).PDGF、TNF-α在两层中表达的均有显著性差异(P＜0.01).同时,靠近肝实质侧纤维囊壁中PDGF与TNF-α的表达也有显著性差异(P＜0.05).提示肝细粒棘球蚴囊肿周围人体纤维囊壁分层,PDGF、TNF-α与肝实质侧纤维囊壁的形成有密切关系.

作者：陈雪玲；吴向未；彭心宇；张示杰；牛建华；孙红刊期： 2004年第03期
SARS患者血清IL-2、IL-10和IL-12的检测

为了探讨细胞因子与SARS患者感染的关系,用ELISA的方法对急性期、恢复期SARS患者、慢性乙肝患者和正常人血清进行了IL-2、IL-10和IL-12水平检测,并对14例急性期和恢复期SARS患者的白介素水平变化进行了配对分析.结果显示:急性期SARS患者的IL-2、IL-10、IL-12水平显著高于恢复期患者及慢性乙肝患者和健康人的水平(P＜0.05).提示:细胞因子在SARS感染中可能起重要作用.

作者：郝娃；李卓；郭新会；张可；郭雁宾刊期： 2004年第03期
不同免疫重建时间对免疫缺陷小鼠排斥仓鼠移植心脏的影响

为探讨非特异性损伤因素对排斥反应所造成的影响,建立仓鼠对裸小鼠心脏移植模型,分别在手术当天,术后100 d及270 d重建受者免疫系统,观察仓鼠移植心的存活及移植心组织内热休克蛋白70的表达水平.发现随术后免疫重建时间的推移,移植心组织内热休克蛋白70的表达则逐渐降低,而受体排斥移植心所需时间逐渐延长.提示包括非特异性损伤(手术、缺血、感染等)在内的各种因素能在相当长的时间内参与诱发移植排斥反应.

作者：朱彤；张雷；沈世乾；郭晖；夏穗生；陈忠华刊期： 2004年第03期
重症肌无力患者外周血CD5+B细胞和CD4-CD8-T细胞的变化

研究重症肌无力(MG)患者外周血CD5+B细胞和CD4 CD8 T细胞的变化,以探讨这两种细胞与MG的关系.采用流式细胞仪分析MG患者和对照组外周血中CD5+B细胞和CD4 CD8 T细胞的频率,同时以ELISA方法检测这些患者的血清AchR、PsmR抗体水平.结果:28例MG患者的CD5+B细胞为19.75%±10.8%,高于对照组的15.4%±9.67%(P＜0.01);胸腺未切除MG患者的CD5+B细胞为22.31%±7.47%,显著高于对照组(P＜0.001);两种抗体阳性MG患者的CD5+B细胞为24.96%±13.1%,显著高于对照组(P＜0.001);以上各组MG患者的CD4 CD8 T细胞与对照组均无显著区别;两种抗体阴性组的CD5+B细胞和CD4 CD8 T细胞亦与对照组均无显著区别;两种抗体阴性组的CD5+B细胞和CD4 CD8 T细胞亦与对照组无明显差异.本研究提示MG患者外周血的CD5+B细胞频率增高,与胸腺切除与否以及突触前后膜抗体的阳性程度密切相关,而CD4 CD8 T细胞是否与MG有关还需进一步研究证实.

作者：赵重波；吕良；朱雯华；吕传真刊期： 2004年第03期
抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定

运用B淋巴细胞杂交瘤技术,以人内皮细胞特异性分子-1 (ESM-1)蛋白为抗原,经PEG融合,有限稀释法筛选,获得了7株稳定分泌抗人ESM-1的杂交瘤细胞株,其中3A7细胞株特异性尤为显著,效价高达1∶6 000.所分泌抗体亚型为IgG2b,Western blot结果表明对内皮细胞中的ESM-1蛋白及细胞培养上清中的ESM-1均可特异性识别.并观察到ESM-1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中.在肾组织中,ESM-1定位于血管内皮细胞,且肾癌标本中ESM-1阳性表达显著高于正常肾组织.免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性.

作者：熊江霞；张素梅；王雪；胡向阳；桂淑玉；周青；汪渊刊期： 2004年第03期
脂质体介导的VEGF165基因转染对内皮细胞生长的作用

构建血管内皮细胞生长因子基因VEGF165真核表达载体pcDNA3-VEGF165,以阳离子脂质体介导的基因转染技术,将基因转入原代培养的人脐静脉内皮细胞中.结果表明,基因转染1 h后细胞内就有VEGF DNA存在,VEGF mRNA水平显著上升;基因转染2 d后培养液上清VEGF蛋白表达显著上升(1 355.12±62.34) pg/ml和(19.27±2.96) pg/ml,P＜0.01.转染VEGF165基因2 d的内皮细胞再经程序降温冷冻保存复苏后,其存活率显著高于对照组(pcDNA3组)(90.13%±2.84%和81.52%±2.15%,P＜0.05),凋亡率显著低于对照组(7.15%±0.42%和17.61%±1.56%,P＜0.05).MTT法显示转染VEGF165基因能促进内皮细胞VEGF蛋白的表达,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡.在治疗心脏及下肢动脉缺血性疾病中,VEGF165基因治疗可能具有重要的意义.

作者：顾松；刘长建；孙雪梅；张乐；陈蕾蕾刊期： 2004年第03期
不同小鼠品系对天花粉蛋白诱导免疫抑制易感性的差异

为了解不同品系小鼠对天花粉蛋白(Tk)诱导的免疫抑制应答能力的差异,应用OVA特异性T细胞体外增殖抑制试验,发现8种近交系小鼠对Tk相关免疫抑制的敏感性不同.根据抑制幅度,C57BL/6 (H-2b)被判为高易感品系(HS, high susceptible),同属H-2k的C3H/He和AKR为低易感品系(LS, low susceptible).Tk浓度为50 ng/ml时的T细胞增值抑制百分率对HS为47.8%±3.4%;对两个LS分别为15.9%±3.0%和18.9%±3.5%,两组间差异显著(P＜0.001).这一差异可持续出现在50～200 ng/ml的Tk剂量范围内.其余5个品系(BALB/c、615、 T739、A、DBA/2)的抑制幅度介于HS和LS之间.这一结果有助于研究相应免疫抑制的基因调控.

作者：王保龙；周芸；江阳；辛利军；张汉明；周光炎刊期： 2004年第03期
PD-L与不同受体结合介导不同的生物学效应

PD-L1和PD-L2作为新发现的B7超家族成员,它们的受体之一是CD28超家族成员PD-1,近研究证实它们还存在第二受体.本文将就其与不同受体结合所起的生物学作用及其与B7家族其他成员之间的关系作一综述.

作者：徐宽枫；王泳；张学光刊期： 2004年第03期
再生障碍性贫血细胞免疫功能及可溶性肿瘤坏死因子受体的研究

目前认为细胞免疫异常在再生障碍性贫血(再障,AA)的发病中起重要作用[1,2].本研究应用流式细胞术(FCM)分析测定了32例初治AA患者外周血T淋巴细胞亚群分布,以及用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测了骨髓和血清可溶性肿瘤坏死因子受体1和2(sTNF-R1和sTNF-R2)的水平,以探讨细胞免疫及可溶性免疫分子的异常在AA的免疫发病机制中的作用和意义.

作者：申蓉；徐从高；李丽珍；闫树昕；王应玞刊期： 2004年第03期
2型糖尿病患者外周血Th1/Th2淋巴细胞的检测及临床意义

Th1细胞和Th2细胞是CD4+T辅助细胞的两个不同亚群，Th1、Th2细胞的失衡与疾病的发生、发展、预后密切相关［1］。本研究运用三色流式细胞术测定不同糖尿病患者及正常人外周血Th1、Th2细胞数，以探讨其可能的临床价值。

作者：吴晓燕；高林；汤旭磊；李茂欣刊期： 2004年第03期
中性粒细胞抑制因子的作用及用途

中性粒细胞抑制因子(NIF)是整合素LAF-1和Mac-1的配体.作为β2整合素的拮抗剂,与ICAM-1、ICAM-2竞争性地和LAF-1及Mac-1结合,抑制中性粒细胞与内皮细胞的粘附和聚集,阻止白细胞的渗透和浸润.因此,NIF能用于治疗各种出现白细胞浸润和活化的临床疾病及组织损伤,包括休克、中风、急性和慢性同种异体移植排斥反应、血管炎、脓毒症、风湿性关节炎、炎性皮肤病、肠炎、伴随心肌梗塞的局部缺血再灌注损伤和成人呼吸窘迫综合征等.NIF作为一种新的抗炎药,具有广阔的应用前景.

作者：李新平；朱江；张学光刊期： 2004年第03期
单链抗体的生物学特性及其在肿瘤和艾滋病诊断治疗中的应用

单链抗体是一种基因工程小分子抗体,其基本结构为VH-Linker-VL或VL-Linke-VH.单链抗体由于具有免疫原性低、在血液中清除快、肿瘤穿透力强和特异性强等优点,而在疾病的诊断、治疗和预防及其研究方面有着十分重要的应用价值,本文就单链抗体的生物学特性及其在肿瘤和艾滋病诊断治疗中的应用作一综述.

作者：李富祥；罗家琴；张以芳刊期： 2004年第03期
雄激素对淋巴细胞的调节

自身免疫性疾病存在着明显的性别差异,其确切机制不十分清楚.目前许多人认为雄激素的保护作用造成了这种性别差异.雄激素通过直接作用于胸腺或者淋巴细胞,对细胞免疫和体液免疫都有明显的抑制作用,从而改变机体的免疫系统.

作者：梁军；侯亚义刊期： 2004年第03期
趋化性细胞因子对人Tc1和Tc2细胞内Ca2+浓度变化的影响

为了探讨趋化性细胞因子在体外对人Tc1和Tc2亚群细胞内Ca2+浓度变化的影响,从PBMC中分离纯化CD8+T细胞,在特定细胞因子及细胞因子抗体作用下,体外定向诱导出能长期培养的Tc1和Tc2细胞系,用免疫荧光染色结合流式细胞术分析对其进行鉴定后,通过流式细胞术检测在趋化性细胞因子刺激前后,细胞内Ca2+浓度的变化.发现受SDF-1作用后,Tc1及Tc2细胞内Ca2+浓度变化均不明显,而IP-10刺激后,Tc1及Tc2细胞内Ca2+水平在短时间内明显上调,且在Tc1胞内的上升幅度远高于Tc2细胞,在MIP-1β刺激后,也观察到类似趋势;受Eotaxin刺激后,Tc1及Tc2细胞内Ca2+水平均有微小上升,在Tc2细胞内的上升幅度略高于Tc1细胞.说明Tc1和Tc2细胞受趋化性细胞因子作用后,细胞内Ca2+浓度有不同程度的变化,且与趋化性细胞因子受体的表达呈现一定的相关性.

作者：韩卫宁；曹云新；刘雪松；张赟；庄然；金伯泉刊期： 2004年第03期
EB病毒LMP2A特异性CTL的体外诱导及分析

用EBV-LMP2A重组痘苗病毒(rVV-LMP2A)转染人树突状细胞(DC),转染后的DC分别在第1、7、14天刺激相同MHC背景的T细胞,在IL-2作用下诱导LMP2A特异性CTL.用LDH释放法检测CTL杀伤活性;流式细胞术(FACS)检测CTL诱导分化过程中CD3+、CD4+、CD8+、CD56+等细胞的分群变化;RT-PCR检测细胞分化过程中FasL mRNA表达;生物活性法检测功能性细胞因子IFN-γ的分泌.结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性,第2次和第3次DC刺激后杀伤活性有所上升;在CTL诱导分化的第7、14、21天细胞分群以CD4+、CD8+细胞为主;RT-PCR证实所诱导的细胞内有FasL mRNA的表达;随细胞培养天数的增加IFN-γ分泌增加,在第14天达到较高水平.研究表明重组痘苗病毒载体rVV-LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV-LMP2A特异性CTL.

作者：姚堃；许继军；丁传林；周锋；谢芳艺刊期： 2004年第03期
银屑病患者红细胞CD35、CD59与红细胞趋化因子受体的实验研究

银屑病的发病机制目前尚不清楚，大多与炎症及免疫异常有关，而天然免疫在基中所起的作用，越来越受到人们的关注，红细胞作为血细胞天然免疫单位体积数量多的一种成分，表面上含有多种天然免疫分子，如D35、CR3、CD44、CD59、ECKR等。

作者：花美仙；钱宝华；罗庆峰；牛芳；刘辉；顾军；郭峰刊期： 2004年第03期
饲鸽者血清中细胞因子及基因多态性的检测

揭示饲鸽者肺(PBL)的细胞因子谱及其基因多态性在该病的发病机制中的作用.采取149个饲鸽者的血样,根据临床症状以及沉淀抗体出现与否分为四组:A组/B组(抗体阳性、有症状/无症状)、C组/D组(抗体阴性、有症状/无症状).应用ELISA法检测各组血清细胞因子浓度.应用PCR扩增技术测定TNF-α-308和IL-10-1082的基因多态性.与C组/D组相比,A组中Th1细胞因子(IL-2)、Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-6、IL-10)和GM-CSF浓度有显著的升高.B组中仅Th1细胞因子(IL-2)和Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)浓度有显著的升高.除个别细胞因子外,A组与B组、C组与D组之间细胞因子的表达无显著性差异.各临床组间TNF-α-308、IL-10-1082基因型的分布以及不同的基因型间血清TNF-α和IL-10的浓度无显著性差异.PBL血浆中IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和GM-CSF的量显著增加,细胞因子与抗体相关,尤以Th2细胞因子更为显著.在TNF-α和IL-10的基因多态性与PBL易感性之间未发现统计学上的关联.

作者：成建华；胡娟刊期： 2004年第03期
两种rHuIL-6/GM-CSF融合蛋白对化疗药物所致小鼠白细胞减少的恢复作用

以BALB/c系小鼠作为实验动物,探讨两种rHuIL-6/GM-CSF融合蛋白[包括IL-6 (1-184)GM-CSF (9-127)(简称IG1),IL-6 (24-184)-GM-CSF (9-127)(简称IG2)]在小鼠体内的生物学活性,观察它们对环磷酰胺所致BALB/c系小鼠白细胞减少及造血功能的影响.注射环磷酰胺建立化疗模型,分别同时注射融合蛋白7 d,于13 d摘除眼球采血,并进行外周血白细胞记数,骨髓有核细胞,单个核细胞记数及CFU-GM的测定.实验结果表明两种rHuIL-6/GM-CSF融合蛋白对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少及造血功能的损伤具有不同程度的修复作用.

作者：孙强明；孙茂盛；谢天宏；张光明；孙雯佳；戴长柏；徐维明刊期： 2004年第03期