张丛;庆俊梅;刘延淮;李彦博
目的:发掘与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。方法:利用Illumina测序平台对岗梅根进行转录组测序,通过基因注释、同源分析、系统发生分析等生物信息学手段,发掘可能参与合成的单基因簇(Unigenes)。结果:在岗梅根转录组中发现了272条与萜类生物合成相关的Unigenes。这其中包括72条可能参与萜类生物合成上游途径的Unigenes,以及26条可能与三萜合成途径下游母核合成、氧化和糖基化相关的Unigenes。对其中部分Unigenes进行系统发生分析,进一步揭示了这些Unigenes与同源基因间的进化关系。利用酵母表达系统,鉴定了两个香树酯醇合酶IaAS1和IaAS2,其中IaAS1为少数以α-香树脂醇为主要产物的香树酯醇合酶之一。结论:本文从岗梅根转录组数据库中发掘到一系列可能与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。对这些基因的进一步研究,有助于从分子水平揭示岗梅中乌索烷型三萜皂苷的生物合成途径。
作者:郑夏生;罗秀秀;徐晖;詹若挺;陈蔚文 刊期: 2014年第07期
目的:HMGR 和DXR 分别是萜类生物合成途径---MVA和MEP途径的关键酶,本研究探讨阳春砂A vHMGR 和A vDXR 在转基因烟草中的过量表达对不同萜类化合物生物合成的影响。方法:采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)技术分析A vHMGR 和 A vDXR 的表达水平,应用专一底物法测定 HMGR 和DXR 的酶活性,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测不同萜类化合物的变化。结果:A vHMGR 或A vDXR 单独过量表达抑制了HMGR 和DXR 的活性,提高了五针松烯、新植二烯、薄荷烯和甾醇的含量;而A vHMGR 和A vDXR 共同过量表达对不同植株中酶活性的影响有差异,提高了甾醇和植醇的含量,但抑制了新植二烯的积累。结论:A vHMGR 和A vDXR 单独或共同过量表达对烟草中不同萜类化合物的合成调控存在差异,同时也证明了MVA和MEP途径并不完全独立,而是有着相互交流,本研究为利用阳春砂A vHMGR 和A vDXR 进行萜类化合物的代谢调控提供了依据。
作者:王焕;魏洁书;杨锦芬;詹若挺;陈蔚文;叶圆 刊期: 2014年第07期
目的:观察异长春花苷内酰胺大剂量注射给药对麻醉Beagle犬心血管系统的影响,并考察其体外对离子通道的抑制作用。方法:采用生理记录仪观察异长春花苷内酰胺静脉注射前后不同时间点Beagle犬收缩压(Sys),舒张压(Dia),平均动脉压(MBP),心率(HR),心电图PR间期、QRS间期、QT间期、QTcb间期、QTcv间期等指标的变化;应用全细胞膜片钳技术考察不同浓度异长春花苷内酰胺对CHO-hERG细胞上hERG钾离子通道和HEK-293-Nav1.5细胞上Nav1.5钠离子通道的抑制作用。结果:与空白对照组相比,异长春花苷内酰胺60、18 mg·kg-1剂量组、溶媒对照组(含吐温-80)于给药后15 min Sys、Dia、MBP、HR明显降低(P<0.05),给药结束后各项指标可见恢复。与溶媒对照组相比,各给药剂量组在各观测时间点无显著性差异。与空白对照组及自身给药前相比,60、18、6 mg·kg-1剂量组、溶媒对照组于给药后15 min QT、QTcb、QTcv间期明显延长(P<0.05),给药结束后可见一定程度的恢复。与溶媒对照组相比,各给药剂量组QT、QTcb和QTcv间期在各观测时间点无显著性差异。异长春花苷内酰胺对hERG钾离子通道和Nav1.5离子通道抑制作用较弱,IC50为560.8μmol·L-1及>900μmol·L-1,远远大于阳性对照药。结论:异长春花苷内酰胺大剂量单次静脉注射对Beagle犬可能有一定的降低血压、减慢心率及延长QT间期的作用,停药后可恢复。其中血压降低、心率减慢与溶媒中所含吐温-80有关。体外对hERG钾离子通道和Nav1.5离子通道无明显影响,提示异长春花苷内酰胺对动物QT间期的影响可能为其它作用机制所致。
作者:苏真真;李娜;曹亮;孟兆青;刘文君;丁岗;王振中;萧伟 刊期: 2014年第07期
辨证论治是中医诊疗疾病的精髓,“观其脉证、知犯何逆、随证治之”是辨证论治的具体过程。本文通过使用逻辑学的方法对辨证论治的过程进行研究与分析,指出中医诊治疾病的过程是一个信念修正的过程,中医理论体系的根源是隐喻的,隐喻认知的逻辑和信念修正是一种适合中医理论体系研究的逻辑方法。
作者:郭瑨;庄梅云;贾春华 刊期: 2014年第07期
目的:研究茉莉酸甲酯对阳春砂挥发性萜类合成的影响,深入了解挥发性萜类生物合成的分子调控机制。方法:用不同浓度茉莉酸甲酯溶液喷施阳春砂的叶片和果实,用微波法提取果实中的挥发性萜类成分,应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测挥发性萜类成分的变化,通过转录组测序构建cD-NA文库并进行生物信息学分析。结果:果皮和种子团中分别检测到20种和33种挥发性萜类成分,600μmol·L-1 MeJA喷果24 h后果皮和种子团中大部分挥发性萜类成分的积累量明显增加,如乙酸龙脑酯、樟脑和龙脑等;而200μmol·L-1 MeJA喷施叶片或果实对果皮及种子团中不同挥发性萜类含量的影响存在差异,且200μmol·L-1 MeJA喷施果实比喷施叶片更能提高种子团中挥发性萜类成分的积累量。此外,转录组测序共获得68168个Unigene,通过与公共数据库比对,共有48627个Unigene获得注释。对KEGG代谢通路的注释结果进行初步分析,发现挥发性萜类代谢密切相关的Unigene有208个,MYC2类转录因子(JA信号转导的重要调控因子)相关的Unigene有22个。结论:MeJA能有效调控阳春砂中挥发性萜类成分的代谢,转录组测序获得了多个与挥发性萜类合成相关的候选基因,为深入开展阳春砂挥发性萜类生物合成相关功能基因的发掘及调控研究提供了丰富的数据资源。
作者:王焕;杨锦芬;邓可;何雪莹;詹若挺;唐梁 刊期: 2014年第07期
海洋中药用药经验模式,是我国几千年来不同时期的名医名家,应用海洋中药的心得体会和经验的提炼和总结。挖掘这些经验模式对指导海洋中药的临床应用和新药开发都具有重要的意义。但是这些经验多散见于海量古籍文献中,难以直接利用。本文以文献为研究对象,采用古籍文献的整理技术、文本数据挖掘的方法和基于非相关文献知识发现的关联网络构建技术,结合专家评价法,通过挖掘海洋中药几千年发展过程中积累的临床用药经验,构建海洋中药用药经验模式,为海洋中药的临床应用和进一步研发提供数据基础和科学依据。
作者:付先军;王振国;李学博;王长云 刊期: 2014年第07期
目的:观察不同状态下电针心包经原穴大陵对心内压的影响,探索针灸的效应特征。方法:通过右颈总动脉插管至左心室的方法记录左心室内压。以心内压为指标,分别在正常生理、异丙肾上腺素和心得安等状态下观察电针“大陵”对大鼠左心室内压的影响。结果:以针刺的即刻效应来说,对正常大鼠电针大陵可以明显的兴奋心内压;在静脉给予心得安和异丙肾上腺素状态下,电针大陵无明显反应。而从针刺的效应方向上看,正常情况下电针大陵具有兴奋效应;心得安状态下具有抑制效应;异丙肾上腺素状态下效应不定。结论:据腧穴的特异性定向作用,大陵可以兴奋心内压。
作者:汪娅莉;余芝;徐斌 刊期: 2014年第07期
芍药药用历史悠久,被广泛运用于制药、食品及化妆品工业。本文对芍药在医药方面的发明专利进行检索,得到18192件专利数据集,在此基础上进行了多角度的统计分析。结果显示,我国药用芍药发明专利申请数量远超其他国家,企业专利权人占主体;我国专利的技术质量不高、国际化保护比例较低;与芍药配伍的传统中药多具有补益保健功能。在治疗功效的开发利用方面,心血管疾病和肝病的治疗是未来研究重点,特别需要加大剂型方面的研究力度。资源综合利用方面,对芍药花和种子的开发利用具有较大的拓展空间。本研究可以帮助科研工作者了解药用芍药当前的研究成果和专利格局,把握未来研究方向。
作者:王秋玲;马运运;孙云波;王晓东;孙志一;刘海波 刊期: 2014年第07期
目前尚缺乏针对传统药物的专利评估方法和体系,鉴于此,本文针对传统药物专利的特点构建了价值评估体系,该体系由10个关键指标构成,并配备原始价值和相对价值的计算方法,专利的相对价值更易于表明专利之间的价值差异。专利的法律价值、技术价值、经济价值之间存在强关联性,本文将这三类价值指标进行有机整合,从整体上进行综合性价值评估。该体系纳入该领域专利所特有的指标的同时,剔除针对性不强及难以取得的指标,且本方法不涉及人工打分,未来可应用于传统药物乃至更多类型的专利价值自动化评估。
作者:张丛;庆俊梅;刘延淮;李彦博 刊期: 2014年第07期
慢性阻塞性肺疾病(COPD)测评工具的研制及应用已成为国内外研究的热点,并出现了大量的量表和问卷。比较不同量表/问卷的特点,选择合适的测评工具是目前亟待解决的问题。本文对国内外常用的测评工具进行了评价,并提出了相关思考,为完善COPD的疗效评价指标体系提供依据。
作者:张晓莉;谢洋;李建生 刊期: 2014年第07期
再生障碍性贫血(AA)是T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。AA的发病机制研究主要集中在免疫功能异常、造血干细胞损伤、造血微环境异常3个方面。近年来,AA免疫机制异常越来越受到中医药血液病研究者的关注。AA发病机制中细胞因子及相关的细胞内信号转导通路尤其复杂,其中T-bet/IFN-γ信号通路在AA发生发展过程中起着重要的作用。本文就T-bet/IFN-γ及其相关信号传导通路在AA中的作用做一综述。
作者:张丰丰;赵宗江;张新雪;田晨;吴志奎 刊期: 2014年第07期
目的:研究雄芍汤抗肝纤维化的药效物质基础,筛选其调节TGF-β/Smad通路的有效部位。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊组(扶正组)、雄芍汤组(雄芍组)、粗多糖组(多糖组)、总苷组、总生物碱组(总碱组),二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型。造模成功后,开始灌胃给药,治疗组分别给予扶正化瘀胶囊(0.105 g·mL-1)、雄芍汤粗多糖提取物(35.420 mg·mL-1)、雄芍汤总苷提取物(25.725 mg·mL-1)、雄芍汤总生物碱提取物(0.196 mg·mL-1),正常组与模型组灌服等量生理盐水,每日1次,疗程4周。4周后处死取材,实时荧光定量PCR检测肝组织TGF-β1 mRNA表达, Western blotting检测肝组织Smad3、Smad7蛋白表达。结果:与模型组比较,各治疗组TGF-β1 mRNA、Smad3蛋白表达均显著降低,Smad7蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01),总苷组Smad7、总碱组与模型组无显著性差异。结论:粗多糖部位和总苷部位为雄芍汤调节TGF-β/Smad通路的有效部位。
作者:李霞;门九章;李孝波 刊期: 2014年第07期
目的:观察薯蓣皂苷片对类风湿性关节炎细胞模型核转录因子NF-资Bp65及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法:用白介素-17(IL-17)+TNF-α共同孵育大鼠RSC-364细胞,以不同浓度薯蓣皂苷片进行干预,MTT法检测不同药物浓度对细胞存活率影响,采用Western blot检测各组NF-资Bp65及其抑制蛋白(I资B-α)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液上清中VEGF、MMP-9、TNF-α蛋白水平的变化。结果:薯蓣皂苷片可促进资B抑制蛋白的表达量,降低NF-资B蛋白水平的高表达,并降低细胞分泌VEGF、MMP-9、TNF-α水平。结论:薯蓣皂苷片对RSC-364细胞核因子资B有负向调节作用,提升I资B-α的表达并能降低炎性因子和血管新生因子分泌,提示其在类风湿发病中可能起到潜在的调节作用。
作者:段一娜;王明娟;孔素红;高玉峰;赵秀荣;宋鸿儒 刊期: 2014年第07期
高脂血症是血管及脏器疾病的主要基础病变之一,中医药在防治高脂血症方面具有毒副作用小,疗效明显的优势,建立高脂血症诊断辅助平台有助于提高诊疗效率,并为高脂血症辨证分型标准化研究提供数据采集、存储与分析的平台。首先建立高脂血症四诊信息临床采集平台及数据库,记录患者就诊不同时期的望诊图像及其余三诊的文字信息,方便医师更准确地掌握治疗过程中患者的临床表现,从而总结治疗经验,提高治疗效果;在此基础上利用可调整相似度阈值的自适应聚类算法对已采集的897个病例四诊信息进行分类,终得到5类,将得到的每个类别中所对应样本的病症特征与所属中医的证候类别联系起来,后用相似性算法判断新采集病例属于的哪一类,为中医辨证分型诊断提供建议。
作者:涂泳秋;陈国华;朴胜华;郭姣 刊期: 2014年第07期
目的:塞络通(SLT)是由人参、银杏叶、西红花组方,主治血管性痴呆的现代复方中药。为探讨SLT药效物质基础,并为给药方案提供依据,该文对治疗剂量SLT给与大鼠后,银杏内酯成分的血药浓度、药代特征、以及脑分布进行了研究。方法:实验建立了同时检测生物样品中4种银杏内酯的高灵敏度LC-MS/MS分析方法,经过对线性、专属性、回收率、准确度、精密度的考察,所建立的分析方法符合临床前药代动力学研究要求。结果:灌胃SLT 60 mg·kg-1后,4种目标成分均在大鼠血浆中检出,各成分曲线下面积(AUC0~t)从大到小顺序依次为白果内酯(BB)、银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)和银杏内酯(GC)。银杏内酯的血浆消除半衰期(t1/2)较短,在1.61~2.82 h之间,其中BB半衰期短。所有银杏内酯成分均能够快速进入在脑组织,GA和BB仍是脑组织中的主要成分。各银杏内酯在0.25、2、7 h的脑组织浓度均较同时间点血浆中药物成分低得多,且各成分在脑组织中浓度随时间下降较快。结论:研究结果表明,银杏内酯能够快速吸收进入体循环并进入脑组织,GA、BB和GB是其中主要的体内成分,它们能够共同作用于外周和脑组织,通过各自的药理活性机制达到塞络通对缺血性痴呆的疗效。
作者:张颖;林力;任常英;林成仁;刘建勋;Dennis Chang;Alan Bensoussan 刊期: 2014年第07期
本研究界定了中医药信息标准的研究范畴,提出了由业务域维、信息化要素维以及特异度维构建而成的中医药信息标准的三维框架,并以中医临床领域信息标准的开发为例,示范了在某一业务主题域中应用信息标准框架的方法。
作者:李海燕;于彤;崔蒙 刊期: 2014年第07期
目的:研究psbA-trnH序列在近缘贯众基原物种鉴定中的有效性。方法:对常见鳞毛蕨属贯众基原物种psbA-trnH序列进行PCR扩增及测序,原始峰图通过CodonCodeAligner软件查看、拼接和校对,并根据GenBank注释截取标准条形码数据。利用TaxonGap方法在实验物种范围(9物种19样品)和扩大范围(17物种44样品)内评估该序列的鉴定效率。结果:物种鉴定范围扩大后psbA-trnH序列鉴定成功率由100%(9/9)降至82.4%(14/17),种内异质性数值高于种间可分离性的比例,由11.1%(1/9)上升为52.9%(9/17)。结论:psbA-trnH序列可作为整体贯众同名异物品种鉴定的推荐条形码,实际应用中需注意种内采样代表性的问题。
作者:刘锋;蒋研风羊;詹若挺;马新业;陈蔚文 刊期: 2014年第07期
糖尿病胃轻瘫(DGP)是近年来糖尿病常见的并发症之一,为针灸治疗的优势病种。笔者通过研究近10年来关于针灸治疗DGP的文献,对文献中应用的穴位进行统计分析,寻找其中针灸治疗DGP常用的穴位及组合,探究其用穴规律,并进行总结,从而更好的服务于临床。
作者:牟建蛟;王琼;曾绍凡;冯庆奎;任正强 刊期: 2014年第07期
目的:建立高效毛细管电泳法测定保和丸中橙皮苷与连翘苷含量的方法。方法:采用区带毛细管电泳法,电泳条件为:未涂层石英毛细管柱(75 cm×50μm),运行缓冲液30 mmol·L-1硼砂溶液(含8%乙腈,pH9.64),压力进样50 kPa×20 s ,电压20 kV ,柱温20℃,检测波长254 nm。两次进样间用0.1 mol·L-1氢氧化钠和缓冲液分别冲洗10 min。结果:样品中橙皮苷与连翘苷均得到了很好的分离,其中橙皮苷与连翘苷分别在0.10~2.40 mg·mL-1(r=0.9994),0.07~0.84 mg·mL-1(r=0.9992)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.85%,99.16%,RSD 分别为2.34%,2.78%。结论:该方法简便、灵敏,在一定程度上弥补了传统方法的不足,适用于保和丸中橙皮苷与连翘苷的含量测定。
作者:张超云;郝鹏飞;席先蓉 刊期: 2014年第07期
目的:研究鹿茸不同部位水提液体外对细胞促增殖作用的差异。方法:以大鼠肾成纤维细胞NRK-49F作为模型,以MTT法检测鲜鹿茸上、中、下三部分水提液的促细胞增殖率,以BCA法检测样品蛋白浓度,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法分析样品蛋白组成的差异。结果:上、中、下部鹿茸样品可溶性蛋白含量分别为17.89、16.04和6.89 mg·mL-1,从顶端到基部,鹿茸可溶性蛋白的含量依次降低。加样24 h时,鹿茸上部和中部样品分别在蛋白浓度800μg·mL-1和600μg·mL-1时达到大促增殖率,分别为66.76%和64.36%,下部样品在1000μg·mL-1时达到大促增殖率,为58.87%。作用48 h后,鹿茸上部和中部样品均在蛋白浓度800μg·mL-1时达到大促增殖率,分别为219.56%和215.86%,下部样品在蛋白浓度1000μg·mL-1时达到大促增殖率,为169.20%。鹿茸样品对细胞的增殖促进作用远大于10%胎牛血清。3个部位样品蛋白组成的SDS-PAGE图谱差异不大。结论:所有样品对细胞增殖均有促进作用,且呈现浓度依赖效应。不同部位样品主要蛋白组成差异不大。
作者:吴帆;董玲;王春梅;丁倩男;刘建亭;赓迪;戴俊东 刊期: 2014年第07期