费选文；谢若男；曾嫦；韩丽君；林祥伟；杨育芳；陈景武
作者： 刊期： 2005年第04期
目的建立噬菌体生物扩增法快速测定异烟肼(INH)耐药性的方法,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)INH耐药性测定中的应用价值.方法用PhaB法检测167株MTB临床分离株INH耐药性,并与Bactec-960测定结果比较,分析PhaB法的敏感性、特异性和准确性.结果0.2μg/ml INH与菌液37℃作用48 h后,通过噬菌体检测,以噬菌斑减少95%为适判断标准,噬菌斑减少高于95%的判为敏感株,噬菌斑减少低于95%的为耐药株.以Bactec-960测定结果为判断标准,则PhaB的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率分别为96.4%、96.4%、93.1%、98.2%和96.4%.结论PhaB检测INH耐药性具有很高的敏感性和特异性,与Bactec-960的符合率达96.4%,只需3 d时间,且操作简便、不需特殊仪器设备,可作为MTB的INH耐药性快速筛选方法.
作者：崔振玲；胡忠义；王洁；张莹蓉；陈慧萍；张文宏；翁心华 刊期： 2005年第04期
目的研究甲型流感病毒基因变异与生存选择压力的关系,指导保守疫苗靶位点的寻找.方法选择相同血凝素(HA)血清型具有全基因组序列的分化距离较近的多个流感病毒株系,利用Blast2程序计算各株系之间的核酸保守性、蛋白质保守性、变异核苷酸在密码子序位中的频率以及生存选择压力指数,分析与生存选择压力指数的相关性.结果HA基因较其他基因的核酸保守性为显著低;HA抗原蛋白质保守性与NS基因同为较低;HA基因受生存选择压力作用;NS、聚合酶B1(PB1)基因受选择压力较小;NA、核蛋白(NP)基因受选择压力较大;生存选择压力指数与核苷酸第3密码子位点变异频率完全相关.结论流感病毒基因变异受复制机制形成差异和生存选择压力淘汰差异双重作用影响;各基因在流感病毒生物功能中地位不同,NA、NP基因保守性较强,适宜作为疫苗靶位点候选,HA基因相比较具有一定的保守性,有望寻找到保守区段,NS、PB1基因保守性较弱,不宜作为靶位点.
作者：周晓明；赵慧芳；陆嘉良；潘浩；徐眉；赵根明；姜庆五；汪华；俞顺章 刊期： 2005年第04期
目的对1998年1月至2003年12月潮汕地区病毒性脑膜炎(包括脑膜脑炎,不包括乙型脑炎)患者的病毒病原分布情况进行调查.方法用Hep-2细胞做病毒培养,微量塑料板法做血清中和抗体检测.结果从512例患者的583份脑脊髓液、血液、咽拭子和粪便标本中分离出病毒共116株(4种16个型),病毒分离检出率为19.9%;从患者50例双份血清检出病毒抗体阳性24例(其中4例为自身分离到病毒者),阳性率为48.0%.以上512例患者病毒分离阳性和/或血清学阳性共136例,总感染率为26.6%.患者感染的病毒型别分布及构成比分别为:柯萨奇病毒(Cox)89例(0.6544),其中A24型17例,B1型31例,B5型39例和B4、B6型各1例;埃可病毒(ECHO)18例(0.1324),其中7型、15型各5例,14型2例、24型4例,3型、6型各1例:肠道病毒(EV)23例(0.1691),其中70型17例,71型6例:腺病毒(AdV)6例(0.0441),其中2型1例,3型2例和7型3例.不同年龄组患者病毒感染率:儿童组27.9%,成人组25.8%.两组感染率比较差异无统计学意义(x2=0.249,P＞0.05).结论潮汕地区病毒性脑膜炎患者的肠道病毒感染,其中以Cox的感染高,值得引起疾病预防部门、临床医生及科研单位的重视.
作者：费选文；谢若男；曾嫦；韩丽君；林祥伟；杨育芳；陈景武 刊期： 2005年第04期
目的研究B、C基因型乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)功能差异.方法B、C基因型乙型肝炎病毒X基因真核表达载体(分别为pcDNA 3.1-XB及pcDNA3.1-XC)及空白载体pcDNA3.1/Hygro(-)以脂质体2000分别转染Chang细胞,转染细胞2 d后以流式细胞仪检测凋亡率;转染细胞以潮霉素筛选,14 d后形成的抗性细胞集落以冷甲醇固定、Gimsa染色并计数;各载体与指示载体pCMVβ共转染细胞,转染2 d后裂解细胞并检测胞内β-半乳糖苷酶的活性.所有数据均以配对t检验进行分析.结果各载体转染Chang细胞后细胞的凋亡率为pcDNA3.1-XC＞pcDNA3.1-XB＞pcDNA3.1/Hygro(-),形成的抗潮霉素细胞集落数为pcDNA3.1/Hygro(-)＞pcDNA3.1-XB＞pcDNA3.1-XC,细胞内β-半乳糖苷酶活性为pcDNA3.1-XB+pCMVβ＞pcDNA3.1-XC+pCMVβ＞pcDNA3.1/Hygro(-)+pCMVβ.结论B基因型HBx反式激活能力高于C基因型HBx,而抗细胞增殖及致细胞凋亡能力都低于C基因型HBx,HBx这些功能差异可能与B、C基因型乙型肝炎病毒致病性差异有关.
作者：林旭；徐晓；黄清玲；郑大利；陈婉南；林建银 刊期： 2005年第04期
目的探讨大肠埃希菌O157:H7脂肪酸组分及DNA指纹图谱特征.方法用气相色谱(Gas chromatography,GC)及随机扩增多态性DNA(Randomly amplified polymorphyic DNA,RAPD)对2株大肠埃希菌O157:H7和其他6株大肠埃希菌全细胞脂肪酸组分及DNA指纹图谱特征进行分析.结果大肠埃希菌O157:H7不仅含有15:0和17:0脂肪酸组分,不含或仅含微量14:0 2OH和19:0ω8c脂肪酸,而且sum4和sum7脂肪酸峰值也明显高于其他菌株,DNA指纹谱也显示了其独有特征.结论大肠埃希菌O157:H7脂肪酸组分及相对含量和DNA指纹图谱特征与O26:H11及其他大肠埃希菌显著不同,与大肠埃希菌O26:H11等在遗传进化关系上存在一定距离.
作者：王军；李跃旗；王红旗；赵蕊；石建时 刊期： 2005年第04期
乙型肝炎病毒(HBV)DNA在肝细胞内复制引起肝细胞病理损伤是肝纤维化形成的启动因素,拉米夫定通过抑制HBV DNA复制而间接阻断肝纤维化形成[1],苦参素(氧化苦参碱)有抗肝纤维化作用[2,3].我们对139例HBV复制的不同肝病患者采用联合治疗(拉米夫定联合苦参素)/单一拉米夫定治疗6个月后血清肝纤维化指标的含量变化,并初步探讨其抗肝纤维化的临床疗效.
作者：覃后继；周耀南；唐任光；方文珠 刊期： 2005年第04期
目的探讨不同肝纤维化(LF)分级患者外周血单个核细胞Bcl-2蛋白表达及其临床意义.方法47例LF患者(男17例,女30例)与35例(男24例,女11例)同期住院治疗的慢性乙型肝炎无LF及41例(男29例,女12例)正常对照进行比较研究.以流式细胞仪双标记免疫荧光方法测定外周血T、B淋巴细胞Bcl-2蛋白表达和CD3+T细胞Bcl-2蛋白表达的平均荧光强度(MFI).结果1. LF组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群和CD19+细胞Bcl-2蛋白表达明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).外周血CD3+T细胞蛋白表达Bcl-2的MFI为0.61±0.17亦明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组0.32±0.11和对照组的0.19±0.15(P＜0.01).2.Spearman相关分析显示CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群及CD19+细胞的Bcl-2蛋白表达与肝纤维化患者年龄、病程无明显相关,而与肝纤维化分期密切相关.3.抗病毒治疗连续1年,LF患者临床症状改善,且其淋巴细胞亚群Bcl-2蛋白表达亦较治疗前有明显下降(P＜0.01),CD3+T细胞蛋白表达的MFI从0.61±0.17减少到0.43±0.14(P＜0.01).结论外周血淋巴细胞Bcl-2蛋白异常表达对LF发病及临床症状有重要作用.
作者：李骥；郑宇；陈永平；王帮松；潘发奋 刊期： 2005年第04期
严重急性呼吸综合征(SARS)患者肺泡弥散功能障碍,通气/血流比例严重失调,以至于无论是自主呼吸或是经气道给氧,吸入肺泡腔的氧分子均不能有效地透过肺泡壁进入血流,导致患者发生Ⅰ型呼吸衰竭的低氧血症,而且常规气道输氧疗法难以纠正[1].
作者：蒋小玲；何清；许诚；王松；崔建军；段刚；叶涛生；杨大国；周伯平；赵连三 刊期： 2005年第04期
作者： 刊期： 2005年第04期
目的干扰素调节因子(IRF)3是病毒感染后调节干扰素基因转录重要的转录因子,寻找IRF-3新的剪接异构体,研究其结构及功能.方法抽提人类细胞RNA,用IRF-3已发表序列设计引物,作cDNA末端快速放大(RACE)及逆转录聚合酶链反应,生物信息学方法比较新序列,亚克隆IRF-3c至pcDNA3.1-flag,转染人胚胎肾上皮293细胞,用抗flag抗体作Western blot分析,用萤虫素酶功能分析的方法观测IRF-3c对病毒诱导的干扰素β启动子萤虫素酶活性的影响.结果发现了一种新的IRF3剪接异构体IRF-3c,IRF-3c用了紧接第六外显子后的180个第六内含子的碱基,新引入的初第2、3、4个新碱基为一终止密码子,导致IRF-3c蛋白多肽终止于第327位.Western blot出现预期的相对分子质量为44 000的IRF-3c的蛋白强阳性条带.新的引用外显子序列可在小鼠的ETS表达库中找到同源序列,提示这种新的剪接体在生物演进中有其保守功能,IRF-3c萤虫素酶功能分析显示,该剪接体能抑制病毒诱导的干扰素β启动子活性至对照组的40%～50%.结论新的剪接体的发现为IRF-3这一重要分子的功能调节提供了新的线索,它是病毒感染通路中干扰素的显负性抑制剂,提示其功能为干扰素产生的精细调节成分,可防止干扰素的过度产生,其特异性序列可用于分析它们在人类疾病中的病理意义.
作者：周国平；陈吉庆；吴升华；陈晓禹；陈辉 刊期： 2005年第04期
目的建立快速分子指纹图谱分析法,应用于都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析.方法以野生株噬菌体M13微卫星特异核心序列为单一引物,分别进行都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的聚合酶链反应(PCR)扩增,并将产生的分子指纹图谱分别应用琼脂糖凝胶电泳和微流DNA芯片分析.结果17株都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,见都柏林念珠菌和白念珠菌各有5条固定阳性条带出现,两者之间阳性条带大小差异有统计学意义.微流DNA芯片显示都柏林念珠菌固定出现阳性条带大小依次为960、1177、1297、1495、1797 bp;白念珠菌固定出现阳性条带大小依次为653、1323、1531、2021、2875 bp.结论都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱存在显著差别,可应用于两者的快速鉴别,尤其是微流DNA芯片法简便、快速、重复性好,更适合于大规模分子流行病学监测.
作者：朱利平；章强强；龚华斐；李莉；翁心华；王家俊；张永信 刊期： 2005年第04期
作者： 刊期： 2005年第04期
慢性乙型病毒性肝炎(CHB)在我国发病率较高,危害较大,CHB患者体内病毒复制状况以及肝纤维化进程在临床倍受重视.目前认为,转化生长因子β1(TGF-β1)对细胞的增殖和发育、转化和分化有一定的调节作用,同时也是重要的肝纤维化递质,在肝硬化的形成中占有重要地位,细胞外基质(ECM)的合成和降解主要由TGF-β1调控[1].
作者：刘勇钢；卢建华；王欣欣；郎振为；杨建林；孟忻；张立洁；孙琳；张世杰；李俊强；宋晨朝 刊期： 2005年第04期
自20世纪90年代以来梅毒死灰复燃,如长江三角洲成为较高发病地区[1],预防控制梅毒传播已成为我国一项重要的公共卫生任务.分析并掌握正常人群--无偿献血人群中的梅毒流行特征,不但可为血站选择低危献血人群提供理论依据,而且还可以为防治该性病提供参考.我们对2000年1月1日至2003年7月31日宁波市无偿献血者的梅毒感染特征进行了分析,现报道如下.
作者：张奕琴；戴梦玲；洪奕 刊期： 2005年第04期
由中华医学会感染病学分会和肝病学分会联合召开的第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议于2005年5月13至16日在北京召开.来自全国各省市自治区及香港和台湾地区代表共960人参加了会议.13位病毒性肝炎及肝病领域的专家做了专题报告.
作者：王贵强；魏来；翁心华；庄辉 刊期： 2005年第04期
作者： 刊期： 2005年第04期
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是院内感染的重要病原菌之一,而重症监护病房(ICU)是MRSA感染的高发区[1].MRSA除对甲氧西林耐药以外,还对临床上普遍使用的多种抗菌药物耐药,所致感染呈散发或暴发流行,治疗困难,病死率较高.因此,对高发区重症监护病房(ICU)的院内MRSA感染及相关因素进行研究,探索有效的控制措施,是医务工作者的一项重要任务.
作者：赖晓全；涂敏 刊期： 2005年第04期
目的构建人源单克隆抗-HBs Fab片段-IFN-α表达载体,对原核表达该融合蛋白的可行性及其效果进行实验研究.方法用聚合酶链反应(PCR)体外扩增目的基因IFN-α,单酶点插入已含人源抗-HBs Fab基因的载体,插入点位于轻链基因3'末端,利用酶切、PCR鉴定,测序筛选正确插入的阳性克隆,转化大肠埃希菌Top10,挑选单克隆表达、纯化目的蛋白,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测融合蛋白的抗原性,用Dot-blot和WISH细胞检测其生物学活性.结果利用插入了人源抗-HBs Fab段基因及IFN-α基因的pBAD/gⅢA原核表达系统,成功表达了具生物活性的轻链与IFN-α的融合蛋白,其与HBsAg的亲合力与抗-HBs-Fab相近,而且具有干扰素的活性.融合蛋白对HepG2.2.15细胞初步实验结果亦显示出其具有良好的靶向性及致凋亡作用.结论轻链与干扰素IFN-α融合蛋白的成功表达表明,应用原核系统能够同时表达特异抗体和其介导的某些生物活性因子,不失为一种经济、有效的方法,为特异抗体及其介导融合蛋白的制备和临床应用提供了实验依据.
作者：陆慧琦；韩焕兴；安峰；叶伟民；曾万杰；薛菖 刊期： 2005年第04期
目的探讨霉酚酸的体外抗乙型肝炎病毒作用.方法以HepG2.2.15为细胞模型,加入不同剂量的霉酚酸或拉米夫定,或霉酚酸加拉米夫定共培养,于第3、6、9天收集培养上清液行HBsAg定量检测;收集细胞提取总RNA,行逆转录聚合酶链反应(R-PCR)及荧光实时定量PCR测细胞内HBV mRNA水平.结果霉酚酸单独应用时,浓度2～250μg/ml无明显抗乙型肝炎病毒作用,当浓度达1250μg/ml时,可使病毒mRNA水平下降1～2 log,上清液中HBsAg滴度也有相应降低;拉米夫定5μg/ml可使病毒mRNA水平下降3～4 log,上清液中HBsAg滴度也有相应降低;霉酚酸和拉米夫定合用时,可显著增强后者的抗乙型肝炎病毒作用,其中浓度10μg/m1时效果明显.结论霉酚酸有体外抗乙型肝炎病毒作用,并可增强拉米夫定的体外抗乙型肝炎病毒作用.
作者：杨永峰；谭德明；谢玉桃；侯周华 刊期： 2005年第04期
中华传染病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
