学术投稿

SEN-V非编码区基因的克隆与序列分析

王召钦;周伯平;陈心春;马为民;徐六妹;王火生

关键词:非编码区基因, 输血传播病毒, 庚型肝炎, 非甲, 病因
摘要:自1997年Nishizawa发现输血传播病毒(TTV)后,认为与非甲-庚型肝炎有关,但随着进一步的研究发现TTV与(TLMV)作为肝炎病因,即使存在,也非常有限.
中华传染病杂志相关文献
  • 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因在大肠杆菌中的表达

    自1961年Jevons首次报道了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus, MRSA)以来,MRSA在世界许多国家和地区相继出现,特别是近几年,其所致的感染迅速上升[1].MRSA的耐药机制虽未完全阐明,但已证实与细菌产生的一种新的青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)密切相关.PBP2a是由染色体mecA基因编码,目前已获得了该基因的克隆,其序列也已发表[2].

    作者:祁伟;宋诗铎;官兰;郑东钧;魏殿军;胡文芝 刊期: 2002年第05期

  • 乏力、黄疸、发热、声嘶、呼吸困难

    病史摘要患者,男,28岁,农民.因咽痛、乏力、纳差1个月,巩膜黄染、畏寒、高热伴声嘶12 d,呼吸困难3 d于2001年3月14日21∶30入院,住院16 h后死亡.

    作者:于乐成;顾长海;毛青;王宇明;陈耀凯;邓军;郭乔楠;史景泉;柳凤轩;陈意生 刊期: 2002年第05期

  • 应用16S-23S rRNA基因区间对败血症常见菌的鉴定

    目的建立检测不同菌种细菌的 16S-23S rRNA基因区间的特异图谱.方法应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)、分子克隆及测序技术,对临床常见的代表20个属26个种的标准菌株及相应的临床分离菌株共61株进行PCR扩增,同时对临床标本进行培养并与PCR-RFLP比较,探讨其在临床应用中的价值.结果 26株不同的标准菌株行PCR扩增后,分别出现1条带,2条带,3条带及多条带的不同DNA 图谱,其敏感性为2.5 CFU,与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应.其中14种菌经PCR扩增即可区分,另10种经Hinf I或Alu I 酶切后才能区分.肺炎克雷伯菌与坚韧肠球菌间的差异在第779位碱基上不同,Xma Ⅲ酶能进行区别.临床42例血培养15例阳性,阳性率35.7%;而PCR阳性27例,阳性率达64.3%,其阳性率明显高于血培养(P<0.01).6例脑脊液标本中1例培养为表皮葡萄球菌,其PCR也阳性,2例培养阴性标本,其PCR也阳性,经图谱分析为葡萄球菌,1例培养为新型隐球菌的脑脊液标本PCR检测为阴性.另2例PCR及培养均阴性.结论建立了PCR加RFLP技术快速检测细菌16S-23S rRNA基因区间的方法,进一步为临床细菌感染的病原诊断提供了新的科学依据.

    作者:傅君芬;徐美春;尚世强;洪文澜 刊期: 2002年第05期

  • SEN-V非编码区基因的克隆与序列分析

    自1997年Nishizawa发现输血传播病毒(TTV)后,认为与非甲-庚型肝炎有关,但随着进一步的研究发现TTV与(TLMV)作为肝炎病因,即使存在,也非常有限.

    作者:王召钦;周伯平;陈心春;马为民;徐六妹;王火生 刊期: 2002年第05期

  • 流感病毒离心壳培养及在临床标本检测中的应用

    大流行期间流感病毒在健康人群具有很高的发病率,并引起某些人群一定的病死率,如老年患者、慢性阻塞性肺部疾病和慢性心血管疾病患者,以及免疫缺陷患者如获得性免疫缺陷综合征.流感潜伏期为1~4 d,以发热突然起病,可伴有咽喉痛、咳嗽、头痛、肌肉酸痛、畏寒和全身不适.临床上通常以上述症状作为诊断依据,而实际上这些症状缺乏敏感性和特异性[1].因此,快速可靠的诊断对患者的诊治及流感流行的监控是十分重要的.流感病毒的壳培养(Shell vial culture, SVC)则是这种快速可靠的检测方法.

    作者:倪安平;朱晓春;何海英;滑立伟;洪卫兵;段佩若 刊期: 2002年第05期

  • 产酸克雷伯菌引起的食物中毒临床分析

    2001年8月,发生一起产酸克雷伯菌引起的集体食物中毒,主要临床特征为腹痛、腹泻、发热、恶心、呕吐.现将收治的15例患者临床特点、实验室检查及治疗情况报道如下.

    作者:董捷;于兰;赵郁;樊海军;赵月萍 刊期: 2002年第05期

  • 重型病毒性肝炎患者深部真菌感染及危险因素分析

    重型病毒性肝炎病死率一直居高不下[1].继发感染是其主要死亡原因之一,以往较为重视细菌感染,在各项治疗措施越来越多样化后,真菌逐渐成为继发感染的一个重要病原体,且是导致肝衰竭患者死亡的主要原因之一.现对120例各型重型肝炎的感染现状及原因进行回顾,并提出了预防控制感染的措施,现报道如下.

    作者:李骥;卢明芹;陈永平;王震龙 刊期: 2002年第05期

  • 副伤寒甲247例

    1999年1月至12月,我院共收治副伤寒甲患者247例,明显高于往年.现将该组病例临床特点分析如下.

    作者:赖黎昀 刊期: 2002年第05期

  • 小儿恙虫病24例

    恙虫病是由恙虫病立克次体引起的自然疫源性疾病.其早期表现不典型,易并发多脏器损害,病情复杂多变,易造成误诊,应引起临床医生的重视.现将我科自1992年收治的恙虫病有完整资料者共24例,分析报道如下.

    作者:林志青;柯淑英 刊期: 2002年第05期

  • 乙型肝炎病毒C基因启动子双突变的检测意义

    目的分析乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(BCP)双突变与乙型肝炎临床表现及HBeAg表型的关系.方法针对BCP双突变的特点,设计一条通用捕捉探针、一条野生型和一条双突变显色探针.待测标本DNA经聚合酶链反应(PCR)扩增后分别与野生型和双突变显色探针杂交,然后用酶联免疫吸附试验(ELISA)显示杂交结果,判定BCP突变与否.结果 147例经证实为HBV DNA阳性的急慢性肝炎患者中共有51例双突变,其中42例为单纯双突变,9例为混合突变(双突变和野生型皆为阳性).117例慢性中、重型肝炎中共有36例BCP双突变,8例混合突变.78例HBeAg阳性患者中,有25例BCP双突变,其中7例为混合突变.65例HBeAg阴性患者中,有26例BCP双突变.结论慢性肝炎BCP双突变高于急性肝炎;BCP双突变对HBeAg的表达有一定影响;PCR微板核酸杂交ELISA技术是一种简便、特异的基因突变检测的新方法.

    作者:张少华;王虹;李福元;曾位森 刊期: 2002年第05期

  • 龟分枝杆菌引起菌血症一例

    患者,男,75岁,因胸闷、气急,不能平卧,彻夜未眠于1999年12月15日急诊入院,经用培氟沙星,头孢唑啉以及对症治疗,症状曾一度减轻好转,体温恢复正常.2周后,患者突感畏寒、发热,体温达38.9 ℃,查白细胞12×109/L、中性粒细胞0.76,改用头孢他啶及其他综合性治疗,未见好转,2周后,出现低氧血症,低蛋白血症,多脏器功能衰竭死亡.

    作者:钟步云;宋捷;裘霞文;徐卫益;朱建国 刊期: 2002年第05期

  • 伤寒患者血白细胞计数临床价值的探讨

    外周血白细胞减少为伤寒病的特点之一,常作为较重要的诊断依据,但是我们发现有些伤寒患者白细胞计数正常,有的不仅不下降,反而升高.为进一步探讨血白细胞计数在伤寒诊断中的实际价值,我们12年来对326例确诊为伤寒患者的血白细胞进行了深入观察,并作了部分伤寒患者出院后的白细胞随访对比及白细胞检测的重复试验,现报道如下.

    作者:王照品;李桂芳;吴伟军;厉惠莉;林高塔;黄凤辉;黄欣言;刘美清;温作增 刊期: 2002年第05期

  • 乙型肝炎病毒核心蛋白突变体干扰HBV包装的实验研究

    目的构建乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白突变体基因的真核表达载体,转染HepG2细胞,观察其表达及干扰HBV颗粒包装的显性负调节作用.方法采用PCR从质粒pHBVadr1-A1中扩增HBV C 基因和S基因,分别克隆到pGEM-T载体上,构建成pGEM-T-C和pGEM-T-S.进而构建成pGEM-T-CS载体,用HindⅢ切出克隆基因片段与pcDNA3.1+连接,经PCR鉴定后构建成真核表达载体pcDNA3.1+-CS.DNA测序显示基因融合正确.表达载体转染HepG2细胞,经G418筛选得到高拷贝转化子,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测重组蛋白体外表达.用HBV阳性血清感染HepG2细胞,72 h后抽提细胞内HBV DNA,斑点杂交法分析各组DNA.结果核心蛋白突变体在HepG2细胞内得到表达,且表达了该重组蛋白的HepG2细胞内HBV DNA量不同程度地低于对照组.表明重组蛋白具有抗HBV包装的DN突变体作用.结论 HBV核心蛋白与表面蛋白融合基因的真核表达载体pcDNA3.1+-CS能够体外表达出核心蛋白突变体,该突变体具有干扰HBV颗粒包装的显性负调节作用.

    作者:武文斌;潘卫;温新宇;曹广文;吴晓兰;潘欣;陈秋莉;戚中田 刊期: 2002年第05期

  • 应用DNA探针直接检测结核分枝杆菌DNA

    由于DNA探针杂交反应特异性高,国内外研究者已采用DNA探针杂交技术检测结核分枝杆菌.但该检测方法敏感性较低,通常采用与聚合酶链反应(PCR)扩增相结合的方法.但这样增加了实验的费用和交叉污染的机会.

    作者:张灵霞;庄玉辉;杨华卫;雷红;夏湘萱 刊期: 2002年第05期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CD3+ T细胞的研究

    目的研究慢性乙型肝炎患者外周血中可作用于病毒感染靶细胞的特异性CD3+ T细胞比率.方法筛选HLA-A2患者:将MHC:Ig双体融合蛋白试剂,加入HBV核心蛋白(C)、聚合酶蛋白(P)及表面抗原蛋白(S)中HLA-A2限制性合成肽,与患者CD3+ 细胞作用,采用双重荧光抗体染色,用FACS检测各患者的特异性T细胞比率,同时设立各种对照管.结果 23/54例(42.6 %)患者为HLA-A2.其中15例经用HBV C、P、S肽染色后,5例患者的特异性CD3+阳性细胞比率高于对照管,4例患者有结合S肽的特异性CD3+ 细胞,其中1例同时可结合P肽,1例仅与P肽结合.结论慢性乙型肝炎患者外周血中与特异性肽结合的CD3+ T细胞比率较少.MHC:Ig双体融合蛋白技术使用方便,但非特异性染色率偏高.本技术可用于随访治疗中的慢性乙型肝炎患者免疫状态的变化.

    作者:张继明;姚忻;孙淑惠;何丽芳;翁心华;闻玉梅 刊期: 2002年第05期

  • HCV核心区多肽对细胞毒T细胞作用的初步观察

    目的探讨HCV感染者体内细胞毒T细胞(CTL)功能缺陷的原因,为深入研究HCV感染的发病机制和指导疫苗研制提供理论和实验依据.方法采用多肽固相合成法选择性合成HCV核心区多肽,并将其皮下注射免疫Balb/c小鼠,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测小鼠脾细胞(CTL)活性.结果经单因素方差分析显示,HCV核心区多肽CPA9(39~74位氨基酸)、CPB7(67~76位氨基酸)、CPB8(71~80位氨基酸)对小鼠CTL有抑制作用,CPA10(5~23位氨基酸)、CPB6(63~72位氨基酸)和CPB2(131~140位氨基酸)对小鼠CTL有增强作用.结论经初步观察,HCV核心区多肽对CTL有抑制作用及增强作用.

    作者:马巧玉;王宇明;郝飞 刊期: 2002年第05期

  • 咽峡炎链球菌脑膜炎一例

    患者女,60岁,于2 d前无明显诱因出现头痛全身不适去当地诊所,给予卡那霉素、复方丹参注射液治疗,症状有缓解,8 h后突然出现头部胀痛,呈持续性伴恶心、呕吐,呕吐物为胃内容物,同时伴剑突下疼痛,急来我院就诊.

    作者:赵建平;周秀岚;孙丽萍;杨国香 刊期: 2002年第05期

  • 乙型肝炎病毒YMDD联合前C变异及其临床意义

    目的研究拉米夫定治疗过程中乙型肝炎病毒(HBV)前C区、P区YMDD基序变异及其对疗效的影响.方法对5例拉米夫定(100 mg/d)治疗过程中HBeAg血清转换而HBV DNA仍阳性的慢性乙型肝炎患者,采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序方法分析HBV前C、P区的基因序列.结果 5例患者前C区均发现有G1896A变异,其中3例HBeAg血清转换前未发现此变异,2例已有此变异;同时5例患者在拉米夫定治疗后检测出YMDD变异,变异类型均为M552I,其中有1例在出现M552I变异40周后变为M552V变异,有2例M552I联合L528M变异;5例患者中有1例治疗无反应,另4例在治疗过程中HBV DNA突发.结论拉米夫定治疗过程中YMDD变异的出现可导致HBV DNA突发,而前C区G1896A变异可致HBeAg阴转,因此在治疗过程中出现HBeAg血清转换后需结合HBV DNA检测,排除前C区变异的可能.

    作者:刘传苗;张欣欣;陆志檬 刊期: 2002年第05期

  • 慢性丙型肝炎患者病毒因素及宿主细胞免疫对干扰素治疗应答的影响

    目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)因素及机体细胞免疫因素对干扰素疗效的影响.方法对40例慢性丙型肝炎患者进行干扰素治疗,分析HCV基因型、准种多样性、血清HCV RNA水平及肝组织HCV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性与干扰素应答的关系.结果经过6个月的干扰素治疗,21例获得治疗终点应答,其中10例呈持续应答,19例无应答.HCV1型患者应答率(43.3%)明显低于非1型患者(80%,P<0.05);应答患者中治疗前血清HCV准种数目及HCV RNA水平明显低于无应答患者(P<0.05, P<0.01),而其肝组织HCV特异性CTL活性阳性率则显著高于无应答者(P<0.05).结论病毒因素和宿主因素均是影响慢性丙型肝炎干扰素治疗效果的重要因素,非1型感染、低准种数目、低病毒血症水平及肝组织HCV特异性CTL活性阳性者预示对干扰素应答良好.

    作者:唐小平;钱可平;许毅玲;袁小珍 刊期: 2002年第05期

  • PGA指数在诊断慢性乙型肝炎肝纤维化中的价值

    肝组织病理检查是确诊肝纤维化的重要方法,但难以推广与重复.近十余年来,已有不少血清学指标用于临床辅助诊断肝纤维化,如透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)与Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)等,与病理检查结果有很好的相关性[1-3].

    作者:胡守廉;胡耀仁;唐锡尔 刊期: 2002年第05期

中华传染病杂志

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