学术投稿

用于人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选研究的转基因小鼠模型的建立

盛毅;纪亚忠;赵亚南;张其;傅继梁;李建秀

关键词:人顶体蛋白酶原基因, 转基因小鼠, 核酸杂交
摘要:分别将构建的人顶体蛋白酶原基因(human proacrosin,hACR)5'侧翼序列,第1外显子和编码β-半乳糖苷酶的基因(lacZ)的融合基因(载体1),以及hACR基因5'侧翼序列与报告基因lacZ的融合基因(载体2),通过显微注射受精卵法制备转基因小鼠,结果如下:载体1:注射89只卵,移植入9只母鼠单侧输卵管中,3只怀孕,产仔9只,存活7只,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的阳性小鼠1只,阳性率14.3%;子1代15只,基因组Southern杂交5只阳性.载体2:注射235只卵,移植入14只母鼠单侧输卵管中,4只怀孕,产仔11只,存活10只,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的小鼠1只,阳性率10.0%.子1代小鼠10只,基因组Southern杂交3只阳性.进一步将检测lacZ在转基因小鼠体内的表达.
中国男科学杂志相关文献
  • 维生素E拮抗铬致大鼠睾丸毒性作用的实验研究

    为研究维生素E对铬酸钾(K2CrO3)所致大鼠睾丸毒性的影响,将大鼠分为4组,其中3组口服k2CrO4(10 mg/kg体重),第二组加服维生素E(5 mg/kg),第三组按20mg/kg体重加服生素E,连续服药30天,通过光镜检查,结果发现:单独服用K2CrO4 10 mg/kg组的大鼠睾丸曲细精管不同程度变性,管内生精细胞数目减少、缺如,精子形成少或者无.而用K2CrO4(10 mg/kg)染毒同时加服维生素E(20 mg/kg)组大鼠睾丸组织破坏程度减轻.结果显示:维生素E在一定程度上能拮抗铬的毒性.

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  • 阴茎离断与再植术的几个问题探讨(附2例报告)

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    作者:孔令宇;龙先泽;罗洪;龙飞 刊期: 2000年第02期

  • 家族性Kallmann综合征亚型3例报告

    Kallmann综合征是一种少见的先天性嗅神经-性发育不全征,其突出特点为虽至成年人,但性功能低下.男性无胡须,阴茎、睾丸发育呈幼稚状.女性则呈原发性闭经或月经稀少,阴毛可缺如,乳房发育差,子宫小等.本院1988年发现一家族性此征,一家兄弟三人因患Kallmann综合征,且本组病例嗅觉均未丧失仅是减退表现,故我们称其为亚型.现报告如下,并结合文献进行了讨论.

    作者:南勋义;陈兴发;李永海;党建功;王明珠;邢俊平 刊期: 2000年第02期

  • 前列腺增生组织中bFGF和PCNA区域表达的研究

    为了探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和PCNA在前列腺增生(BPH)组织中区域分布及其作用,应用免疫组化结合计算机图像分析方法检测bFGF和PCNA在24例BPH组织的尿道周围区、中间区和包膜下区中表达.结果显示尿道周围区bFGF和PCNA在BPH组织中存在在区域分布差异,两者在尿道周围区表达增高,提示其与BPH发生发展有密切联系.

    作者:谢庆祥;裴怀光;林福地;汪鸿;缪友仁 刊期: 2000年第02期

  • 雄激素与性分化异常

    雄激素在人类胚胎期性分化中起着十分重要的作用.虽然染色体的组成在受精时已决定了胎儿的性别,但性的分化却是在胚胎第7、8周之后,随着生殖腺及生殖导管的分化而逐渐展开的.我们知道,胚胎期生殖导管有一对中肾导管与中肾旁管,目前研究认为不论性染色体是XX(女性)或XY(男性),他们的生殖器官都将自动发育为女性.因为雄激素的作用,中肾导管发育为附睾、输精管,并且睾丸所分泌的睾酮经5α-还原酶的作用转变为双氢睾酮(DHT)使外生殖器向雄性分化;中肾旁管抑制物质(MIS)使中肾旁管退化消失.反之,若无睾酮则中肾旁管自动向女性分化形成输卵管、子宫及部分阴道.

    作者:杨槐 刊期: 2000年第02期

  • 西地那非和育亨宾治疗勃起功能障碍疗效比较

    为了对照性研究应用西地那非(Sildenafil,viagraTM)和育亨宾治疗男子阴茎勃起功能障碍(ED)的效果.把234例ED(器质性41%,心理性46%,混合性13%)随机双盲分为两组,西地那非组134例,用西地那非50~100mg,性交前60分钟口服,每天一次,连服2天后,改为2~3天服一次,连用4~12周.育亨宾组100例,用育亨宾(Yohimbine)5.4~10.8 mg,每天服3次,连用4~12周.结果表明西地那非组口服西地那非50~100mg后,有效率为61.19~79.10%,育亨宾组的有效率为40%,两组疗效经统计学处理有显著性差别(P<0.01).本资料显示西地那非治疗各种原因的ED是安全有效的,副作用少而轻,可以长期治疗,相比之下育亨宾的效果较差.

    作者:晏继银;杨伟忠 刊期: 2000年第02期

  • 马沙尼治疗前列腺增生症临床验证(附105例报告)

    1997年9月~11月,受北京第二制药厂委托,由中华医学会上海分会组织本市七家医疗单位(中山、华山、瑞金、仁济、市一、市六和静安区中心医院)对该厂生产的马沙尼片(盐酸特拉唑嗪片)进行良性前列腺增生症治疗的多中心开放式临床验证,重点观察其有效性及安全性,现将有关资料和结果报告如下:

    作者:上海市泌尿外科协作组 刊期: 2000年第02期

  • 性激素缓释硅胶囊对去势狗的激素替代作用

    观察性激素缓释硅胶囊对去势狗的激素替代作用,为男科疾病的动物实验研究创造条件.将自制的性激素缓释硅胶囊埋置于狗的皮下,用RIA方法检测血清中性激素的含量.按照1个T囊/2kg体重,同时1个E囊皮下埋置性激素缓释硅胶囊能使实验狗体内雌二醇的含量升高140%,雌、雄激素的比率升高,近似于老年狗的比率,并且在短期内维持稳定水平.结果表明用此性激素缓释硅胶囊皮下埋置能很好地控制实验狗体内性激素的水平.

    作者:尚平;许宏;高建平;蔡荣星 刊期: 2000年第02期

  • 治疗急性淋菌性尿道炎的药物选择与疗效观察

    淋球菌引起淋病是我国目前流行的性传播疾病中发病率高的病种.由于淋球菌耐药菌株增多,造成多种药物治疗失败.为了提高首诊治愈率,我们采用联合用药或单用阿奇霉素治疗,效果满意,报告如下:

    作者:黄金国 刊期: 2000年第02期

  • 包皮阴茎表皮样囊肿4例报告

    1991年以来,我们收拾包皮阴茎表皮样囊肿4例,现报告如下.临床资料本组4例,年龄4~41岁,病程4~41年,4例均以包皮阴茎肿物逐渐增大来诊.

    作者:陈国祥;江洪涛;权火炬;李建军;高晓东;包建斌 刊期: 2000年第02期

  • 精液体外处理方法的选择

    精液体外处理的目的是要达到符合要求的活动精子的密度和活力,减少或去除精浆内前列腺素、免疫活性细胞、抗精子抗体、细菌和碎片,减少精液的粘稠度,促进精子获能,改善精子受精能力,使能取得丈夫精液人工授精(AIH)的妊娠.但临床报道的受孕率高低不一[1],除了精子本身受精功能障碍或卵子异常外,精子体外处理方法的选择和效果也是重要的原因之一,本文就体外处理方法的选择作一综述.

    作者:江峰 刊期: 2000年第02期

  • 隐睾症恶变14例临床分析

    隐睾症是男性生殖系统常见的先天性畸形之一.我科自1978年以来共收治隐睾症386例,其中14例睾丸恶变,现报告如下.

    作者:韩杰;卓栋;程庆水 刊期: 2000年第02期

  • 原发性附睾肿瘤29例报告

    原发性附睾肿瘤比较少见,近年报道渐多.我院于1983年9月~1999年3月共收治29例,报告如下.

    作者:李兆鉴;李正明;吴显钊 刊期: 2000年第02期

  • 经尿道灌注前列腺素E1和硝酸甘油治疗阴茎勃起障碍

    随着对阴茎勃起机制认识的深入,产生了多种治疗阴茎勃起障碍(ED)的有效方法.有学者证实经尿道注入PGE1可诱发阴茎勃起[1],但所用PGE1剂量多为经海绵体注射PGE1剂量的50倍以上,患者常不能负担昂贵的费用.作者采用经尿道灌注PGE1和硝酸甘油治疗阴茎勃起障碍患者38例,获得满意疗效,且PGE1用量较单独经尿道灌注PGE1为少,现将结果报告如下.

    作者:姜睿;李洪位;刘军祥 刊期: 2000年第02期

  • 肾移植术后男性性功能调查

    性功能状态及生育能力是人类健康状况的标志之一,随着肾移植后长期存活率的不断提高,移植后病人的性功能及生育能力状况已引起人们的广泛注意.本文对我院1991年11月~1997年12月肾移植存活3月~5年的男性患者16例,进行性功能调查,现将结果报告如下.

    作者:王荣江;黄丰田 刊期: 2000年第02期

  • 用于人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选研究的转基因小鼠模型的建立

    分别将构建的人顶体蛋白酶原基因(human proacrosin,hACR)5'侧翼序列,第1外显子和编码β-半乳糖苷酶的基因(lacZ)的融合基因(载体1),以及hACR基因5'侧翼序列与报告基因lacZ的融合基因(载体2),通过显微注射受精卵法制备转基因小鼠,结果如下:载体1:注射89只卵,移植入9只母鼠单侧输卵管中,3只怀孕,产仔9只,存活7只,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的阳性小鼠1只,阳性率14.3%;子1代15只,基因组Southern杂交5只阳性.载体2:注射235只卵,移植入14只母鼠单侧输卵管中,4只怀孕,产仔11只,存活10只,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的小鼠1只,阳性率10.0%.子1代小鼠10只,基因组Southern杂交3只阳性.进一步将检测lacZ在转基因小鼠体内的表达.

    作者:盛毅;纪亚忠;赵亚南;张其;傅继梁;李建秀 刊期: 2000年第02期

  • 环状Y染色体异常引起的无精子症1例

    患者,男,36岁.结婚2年多未育,性生活正常有规律,平均每周1~2次,勃起功能正常,能射精,未采取任何避孕措施.经检查排除女方不孕可能.体检第二性征发育正常,双侧睾丸约8 ml左右.精液常规:精液量为2 ml、pH 7.0、镜检无精子;血浆FSH14.6,LH 5.6,PRL205,E25.0,T5.4;精浆果糖为123 mg/dl、B超显示前列腺为28 mm×32 mm×24 mm、精囊腺左侧为28 mm×11 mm、右侧为25mm×10 mm;睾丸活检:睾丸曲细精管大部分闭锁,被间质所取代,小部分可分析的曲细精管内无成熟生精细胞,只有Sertoli细胞和少量不定形的生精上皮.外周血染色体组型分析显示:46,X r(Y).

    作者:杨建华 刊期: 2000年第02期

  • 微波辐射家兔阴囊对血睾屏障的影响

    为研究不同剂量的微波急性辐射家兔睾丸对血睾屏障的影响.作者用频率为2450MHz,大输出功率为25W的微波,对家兔阴囊进行辐射,使家兔阴囊皮肤温度分别升到40℃、42℃、44℃,维持20分钟.于停止辐射后60分钟处死动物,分别取左右睾丸组织各约1m3,制备电镜标本,在透射电镜下进行观察.对照组动物除不被辐射外,其他处理同实验组.结果对照组可见硝酸镧在精原细胞外形成镧沉淀线.40℃组电镜下所见与对照组基本相同.42℃组可见镧沉淀线包绕生精上皮第一层细胞,并向管腔面延伸一短段距离,未越过紧密连接.44℃组可见到镧颗粒进入支持细胞,并沿胞浆向管腔部延伸.结论为微波加热家兔睾丸升温到40℃~42℃时,微波对血睾屏障基本没有影响.睾丸温度为44℃时,支持细胞膜受到损伤,这可能对血睾屏障构成威胁.

    作者:赵雅君;付红梅;李全凤;孙金圣 刊期: 2000年第02期

  • 全身性非特异性免疫反应对大鼠睾丸几种酶活性的影响

    为确定全身性非特异性免疫反应对大鼠睾丸功能的影响而进行此项研究.动物经10天的碳粒注射,睾丸内LDH总活性、LDHx活性比,以及琥珀酸脱氢酶、酸性磷酸酶、非特异性酯酶、酸性酯酶等酶的活性,经酶组织化学染色、生物化学检测,以及凝胶电泳分析等显示,它们在活性强度、活性分布以及同工酶谱等方面均发生了明显改变.动物血皮质酮水平无明显变化.实验结果提示:一个单纯性的全身性非特异性免疫反应可对睾丸的功能造成明显损害,这种损害可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴的作用无关.

    作者:肖长义 刊期: 2000年第02期

  • 经尿道电气化治疗高危前列腺增生症35例体会

    我院1997年9月~2000年3月采用经尿道前列腺电气化术(TUVP)治疗前列腺增生症(BPH)35例,疗效满意,现报告如下.

    作者:晏继银;许汉标;杨伟忠 刊期: 2000年第02期

中国男科学杂志

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主管:中华人民共和国国家计划生育委员会

主办:上海交通大学医学院,国家人口和计划生育委员会科学技术研究所